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微生物學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)題名詞解釋:凝固酶:金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生游離凝固酶和結(jié)合凝固酶兩種,前者分泌至菌體外,被血漿中的協(xié)同因子激活為凝血酶,使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白,導(dǎo)致血漿凝固。后者結(jié)合于菌體表面不釋放,能與纖維蛋白原結(jié)合,使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白而引起細(xì)菌凝聚,故又稱為凝聚因子。Vi抗原:傷寒、希氏沙門菌的表面抗原,是覆蓋在LPS外的莢膜多糖抗原。抗吞噬、抗體、補(bǔ)體,與毒力有關(guān)。能阻止O抗原與相應(yīng)抗體凝集,可進(jìn)行噬菌體分型。肥達(dá)試驗(yàn):用已知傷寒、副傷寒沙門菌的O、H抗原,檢測(cè)受檢血清中有無相應(yīng)的抗體的半定量凝集試驗(yàn),稱為肥大反應(yīng)。衛(wèi)星現(xiàn)象:當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌一起培養(yǎng)時(shí),可見到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血桿菌菌落較大,而遠(yuǎn)離葡萄球菌的流感嗜血桿菌菌落較小,這種現(xiàn)象稱為衛(wèi)星現(xiàn)象??筄試驗(yàn):抗鏈球菌溶素O抗體檢測(cè),是一種體外毒素抗毒素中和試驗(yàn)??谷苎豋抗體ASO可中和溶血素O的活性,常用于風(fēng)濕熱的輔助診斷,活動(dòng)性風(fēng)濕熱患者抗體效價(jià)一般超過400個(gè)單位。MRSA:1ug苯唑西林紙片的抑菌圈直徑4ug/ml的金黃色片葡萄球菌稱為MRSA. 對(duì)1ug的苯唑西林抑菌圈0.5ug/ml的凝固酶陰性葡萄球菌稱MRCNS. 統(tǒng)稱為耐甲氧西林葡萄球菌MRS.HLARE:氨基糖苷類高水平耐藥,D試驗(yàn):克林霉素誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn),外-裴反應(yīng):變形桿菌屬中的某些特殊菌株如X19、X2、XK、的菌體抗原與某些立克次體有共同抗原,能出現(xiàn)交叉凝集,臨床上用這些變形桿菌代替立克次體與患者血清做凝集反應(yīng),可作為立克次體病的輔助診斷試驗(yàn),稱為外-裴反應(yīng)(Weil-Felix reaction)。遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象:奇異變形桿菌和普通變形桿菌的大多數(shù)菌株在普通瓊脂平板上可蔓延成菌接種部位為中心的厚薄交替的波紋狀薄膜布滿整個(gè)培養(yǎng)基表面的現(xiàn)象,稱為遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象神奈川試驗(yàn):副溶血性弧菌在普通血平板(含羊、兔或馬等血液)上不溶血或只產(chǎn)生-溶血;但在在特定條件下,副溶血性弧菌中某些菌株在含高鹽(70g/LNacl)的人O型血或兔血及以D-甘露醇為炭源的我妻(Wagatsuma)血瓊脂平板上可產(chǎn)生溶血,該現(xiàn)象作為鑒定致病性與非致病性菌株的一項(xiàng)重要指標(biāo).結(jié)核菌素試驗(yàn):結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分,有兩種,舊結(jié)核菌素(OT)和純蛋白衍生物(PPD),取5U(0.1ug)PPD或OT 0.1mL注射于前臂掌側(cè)皮下,注射后4872小時(shí)后觀察,以是否出現(xiàn)紅腫、硬結(jié),以及其大小判斷結(jié)果??ń槊纾河卸玖Φ呐P徒Y(jié)核分支桿菌在含甘油、馬鈴薯和膽汁的培養(yǎng)基中經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒變異株??顾釛U菌:分支桿菌屬中大多數(shù)細(xì)菌,菌體內(nèi)含有分支菌酸,具有抗酸性,一般不易著色,能抵抗3%鹽酸酒精的脫色作用,這類細(xì)菌又稱為抗酸桿菌有菌免疫:是指細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體后對(duì)細(xì)菌再次入侵有免疫力,而當(dāng)細(xì)菌或其成分從體內(nèi)徹底消失后機(jī)體的免疫力也隨之消失。細(xì)菌外膜:革蘭陰性菌的特有成分,有脂質(zhì)雙層、脂蛋白、脂多糖三部分組成,作為保護(hù)屏障可阻止或減緩膽汁鹽、抗體及其他可能殺死或損害細(xì)菌的有毒物質(zhì)的進(jìn)入,也可阻止周質(zhì)酶等一些細(xì)胞成分的損失。脂多糖:由脂質(zhì)雙層向細(xì)胞外表伸出的是脂多糖,包括磷脂A、核心多糖和O-側(cè)鏈三個(gè)組成部分。R質(zhì)粒:又稱耐藥質(zhì)粒,具有編碼能夠破壞或修飾抗生素的酶基因。毒性噬菌體:能在宿主菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生許多子代噬菌體,并最終裂解細(xì)菌,稱為毒性噬菌體。溫和噬菌體:又稱溶原性噬菌體,噬菌體基因與宿主菌染色體整合,不產(chǎn)生子代噬菌體,但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳代。接合:細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質(zhì)(質(zhì)粒)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。溶原性轉(zhuǎn)換:是侵入細(xì)菌的噬菌體在溶原期以前噬菌體形式在細(xì)菌內(nèi)與細(xì)菌的染色體發(fā)生重組,導(dǎo)致細(xì)菌的基因型發(fā)生改變,溶原性細(xì)菌可以獲得新的性狀。轉(zhuǎn)導(dǎo):以溫和噬菌體為載體,將供體菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌中,使后者獲得新的性狀。Hfr:高頻重組株,F(xiàn)質(zhì)?;蚪?jīng)接合傳遞后,與染色體重組,整合后的細(xì)菌能以高效率轉(zhuǎn)移染色體上的基因,這種染色體被整合進(jìn)F質(zhì)?;虻氖荏w菌稱Hfr。毒血癥:致病菌進(jìn)入機(jī)體后,只能在機(jī)體局部生長(zhǎng)繁殖不進(jìn)入血循環(huán),但其產(chǎn)生的外毒素入血。內(nèi)素毒:是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖,當(dāng)菌體死亡崩解后游離出來。耐熱,有毒性作用(發(fā)熱、白細(xì)胞反應(yīng)、內(nèi)毒素血癥、DIC),抗原性弱,不可脫毒為類毒素。外毒素:是多數(shù)革蘭陽(yáng)性菌和少數(shù)革蘭陰性菌在生長(zhǎng)繁殖過程中,釋放到菌體外的蛋白質(zhì)。不耐熱,毒性強(qiáng),對(duì)組織有選擇性作用,抗原性強(qiáng),可脫毒為類毒素。中度敏感:常規(guī)用藥時(shí),達(dá)到平均血藥濃度,一般相當(dāng)于或略高于某種細(xì)菌的MIC。對(duì)細(xì)菌引起的感染僅在應(yīng)用高劑量該藥物時(shí)有效,或細(xì)菌處于體內(nèi)抗菌藥物濃集的部位或體液(尿、膽汁、腸腔)中時(shí)才被抑制。對(duì)毒性較小藥物,可適當(dāng)加大劑量仍可獲得臨床療效。中介:不是敏感習(xí)性的度量,作為“緩沖堿”,以防止因微小技術(shù)因素失控導(dǎo)致的結(jié)果偏差,臨床意義不確定。MIC:最低抑菌濃度(g/ml),指在體外實(shí)驗(yàn)中抗菌藥物抑制培養(yǎng)基中某種細(xì)菌的生長(zhǎng)的最低藥物濃度,是藥物抗菌活性的指標(biāo),提示藥物的抑菌能力。洶涌發(fā)酵現(xiàn)象:在牛乳培養(yǎng)基中能分解乳糖產(chǎn)酸,使酪蛋白胨凝固,同時(shí)產(chǎn)生大量氣體,將凝固的酪蛋白胨沖成蜂窩狀,并將液面上的凡士林層向上推擠,甚至沖開管口棉塞,氣勢(shì)兇猛,稱為“洶涌發(fā)酵“ ,是產(chǎn)氣莢膜梭菌的特征。無芽胞厭氧菌:是指一大群咋愛有氧條件下不能生長(zhǎng),必須在無氧條件下才能生長(zhǎng)的無芽孢的革蘭陽(yáng)性及革蘭陰性的球菌與桿菌。二相性真菌:有些真菌可因環(huán)境條件(如營(yíng)養(yǎng)、溫度。氧氣等)改變,可由一種形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N形態(tài),此真菌稱為二相性真菌。假菌絲:又稱無隔菌絲,是指酵母菌進(jìn)行出芽生殖時(shí),子母細(xì)胞不立即分離而以狹小的面積相連,則稱這種藕節(jié)狀的細(xì)胞串為假菌絲。病毒:是由一個(gè)核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)構(gòu)成的非細(xì)胞形態(tài)的營(yíng)寄生生活的生命體。病毒體:完整的成熟病毒顆粒,由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成,其核心只有一種核酸(DNA或RNA),外被蛋白質(zhì)衣殼構(gòu)成核衣殼,有些病毒的核衣殼外還被有包膜。病毒衣殼:包圍在病毒核酸外的一層蛋白質(zhì),由一定數(shù)量殼粒聚合而成。病毒衣殼的排列呈3種對(duì)稱型(20面立體對(duì)稱、螺旋對(duì)稱、復(fù)合對(duì)稱)可作為病毒鑒定和分類的依據(jù)。包膜:是病毒以出芽方式從細(xì)胞內(nèi)釋放時(shí)穿過核膜、胞質(zhì)膜、空泡膜等,在核衣殼外獲得了宿主細(xì)胞的膜成分。血凝素:又稱紅細(xì)胞凝集素,為包膜上的柱狀突起糖蛋白,與病毒吸附和穿入宿主細(xì)胞有關(guān),能與人、雞、豚鼠等多種紅細(xì)胞表面的N-乙酰神經(jīng)氨酸受體結(jié)合引起紅細(xì)胞凝集。反轉(zhuǎn)錄病毒:反轉(zhuǎn)錄病毒是帶有反轉(zhuǎn)錄酶(依賴RNA的DNA聚合酶)的RNA病毒,此病毒在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下以病毒RNA為模板轉(zhuǎn)錄出互補(bǔ)DNA鏈,單鏈DNA進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)互補(bǔ)另一條DNA,形成雙鏈DNA并以前病毒的形式整合于宿主DNA中。問答題:1、試述微生物的種類及主要特點(diǎn)1 試述微生物的種類及主要特點(diǎn)答:微生物的種類有:非細(xì)胞型微生物,原核細(xì)胞型微生物,真核細(xì)胞型微生物。主要特點(diǎn)非細(xì)胞型微生物:無細(xì)胞結(jié)構(gòu),無產(chǎn)生能量酶,一種核酸,專性胞內(nèi)寄生原核細(xì)胞型微生物:擬核,無核仁、核膜,只有核糖體,兼性寄生真核細(xì)胞型微生物:細(xì)胞核,有核仁、核膜,細(xì)胞器完整,腐生為主種類:非細(xì)胞型微生物、原核細(xì)胞型微生物、真核細(xì)胞型微生物特點(diǎn):1個(gè)體小(um/nm) 2結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單:?jiǎn)渭?xì)胞或簡(jiǎn)單多細(xì)胞結(jié)構(gòu),無分化。3代謝能力強(qiáng)、繁殖迅速4容易變異、種類多、分布廣泛2、簡(jiǎn)述正常菌群及生理功能正常菌群:正常人體的體表及與外界相通的腔道中,都存在著不同種類和數(shù)量的微生物。在正常情況下,這些微生物對(duì)人類無害,成為正常菌群。生理作用* 拮抗作用:正常菌群在生物體的特定部位生長(zhǎng)后,對(duì)其他的菌群有生物拮抗的作用。產(chǎn)生這種生物屏障的往往是一些厭氧菌。正常菌群通過緊密與黏膜上皮細(xì)胞結(jié)出來占領(lǐng)位置,由于在這些部位數(shù)量很大,在營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)中處于優(yōu)勢(shì),并通過自身代謝來改變環(huán)境的pH值或釋放抗生素,來抑制外來菌的生長(zhǎng)。 * 營(yíng)養(yǎng)作用:正常菌群的存在影響著生物體的物質(zhì)代謝與轉(zhuǎn)化。如蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪及維生素的合成,膽汁的代謝、膽固醇的代謝及激素轉(zhuǎn)化都有正常菌群的參與。 * 免疫作用:正常菌群的抗源刺激可以使宿主產(chǎn)生免疫,從而減少了本身的危害。已有實(shí)驗(yàn)表明,某些誘發(fā)的自身免疫過程具有抑癌作用。* 抗衰老作用:3、簡(jiǎn)述條件致病菌及致病條件條件致病菌:在正常情況下不致病,在特殊情況下能引起疾病的細(xì)菌。致病條件:1.機(jī)體免疫功能低下;2.寄居部位改變;3.菌群失調(diào)。4、比較革蘭陽(yáng)性菌與革蘭陰性菌細(xì)胞壁細(xì)胞壁 革蘭陽(yáng)性菌革蘭陰性菌強(qiáng)度較堅(jiān)韌較疏松厚度20-80nm10-15nm肽聚糖層數(shù)可多達(dá)50層1-2層肽聚糖含量占細(xì)胞壁干重50%-80%占細(xì)胞壁干重5%-20%磷壁酸+外膜+脂蛋白+脂多糖+5、革蘭染色的步驟及影響因素(1)步驟:革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟,具體操作方法是:1)制片:涂片、干燥、固定。2)初染:草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘。用細(xì)流水水沖洗,甩去積水。3)媒染:加盧戈碘液覆蓋涂面染1分鐘。用細(xì)流水水沖洗,甩去積水。4)脫色:加95%酒精數(shù)滴,并輕輕搖動(dòng)進(jìn)行脫色,數(shù)秒后水洗,然后斜持玻片,再加酒精,直到流下的酒精無色為止(約30秒),用細(xì)流水水沖洗,甩去積水。5)復(fù)染:加稀釋石炭酸復(fù)紅染30秒。用細(xì)流水水沖洗,甩去積水。 標(biāo)本干后,置油鏡下鏡檢。(2)影響因素操作因素:涂圖片太厚或太薄,固定時(shí)菌體過分受熱以及脫色時(shí)間長(zhǎng)短,均會(huì)影響結(jié)果染液因素:所有染液應(yīng)防止染液蒸發(fā)而改變濃度,特別是盧戈碘液久存或受光作用后易失去媒染作用;涂片積水過多會(huì)改變?nèi)疽簼舛?,影響染色效果。?xì)菌因素:細(xì)菌菌齡不同,革蘭染色結(jié)果也有差異,一般以1824小時(shí)的培養(yǎng)物染色效果最好,菌齡過長(zhǎng)影響細(xì)菌染色性。6、抗酸染色步驟、結(jié)果步驟1)用接種環(huán)挑取約0.01ml膿性或呈干酪樣部分痰液做成25mm20mm大小的均勻薄涂片,待自然干燥后用酒精燈火焰固定。2)初染 用玻片夾夾持涂片標(biāo)本,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火焰高處徐徐加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液,以免干涸,加熱3-5分鐘,待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。 3)脫色3%鹽酸酒精脫色至無紅色染液脫下為止,用水沖洗。 4)復(fù)染 用堿性美蘭溶液復(fù)染1分鐘,用水沖洗后用吸水紙吸干。用油鏡檢查并記錄結(jié)果。結(jié)果:油鏡觀察涂片,在淡藍(lán)色背景下可見染成紅色細(xì)長(zhǎng)或略帶彎曲的桿菌,并有分枝生長(zhǎng)趨向,此為抗酸染色陽(yáng)性菌。其他細(xì)菌或者細(xì)胞染成藍(lán)色。-:仔細(xì)觀察至少300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸菌。:100到300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-2條抗酸菌(全部涂膜鏡檢3遍);+:100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)3-9條抗酸菌(全部涂膜鏡檢1遍);+:10個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-9條抗酸菌;+:每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-9個(gè)抗酸菌;+:每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌。7、細(xì)菌常用生化試驗(yàn)的培養(yǎng)基、底物、指示劑、結(jié)果判斷A 碳水化合物代謝試驗(yàn)一 . 糖(醇.苷)類發(fā)酵試驗(yàn)底物:糖醇苷 產(chǎn)物:酸酸和氣()指示劑:溴甲酚紫(黃紫)培養(yǎng)基:肉膏湯h.(含相應(yīng)糖醇苷) 結(jié)果:紫黃(+) 紫(-) 二.葡萄糖的氧化發(fā)酵試驗(yàn)底物:葡萄糖 產(chǎn)物:有機(jī)酸指示劑:溴色香草酚藍(lán)(黃綠藍(lán))培養(yǎng)基:葡萄糖培養(yǎng)管(開放 封閉) 結(jié)果: 氧化管(開 ) 發(fā)酵管(封) 綠黃 綠黃 發(fā)酵型(F) 綠黃 綠 氧化型(O) 綠/綠藍(lán) 綠 不利用/產(chǎn)堿型(-)三 -半乳糖苷酶試驗(yàn) 底物:鄰硝基酚-半乳糖苷(ONPG)產(chǎn)物:鄰硝基酚(黃色) 培養(yǎng)基:ONPG培養(yǎng)基結(jié)果:黃(+) 不變(-)四 七葉甘水解試驗(yàn)底物:七葉甘 產(chǎn)物:七葉素 指示劑:Fe2+ 培養(yǎng)基:七葉甘培養(yǎng)基結(jié)果:黑色(+) 不變(-)五甲基紅試驗(yàn)(試驗(yàn))底物:葡萄糖產(chǎn)物:酸 指示劑:甲基紅(紅h.黃h.)培養(yǎng)基:葡萄糖蛋白胨水結(jié)果: 無色紅(+) 不變(-)六 VP試驗(yàn)底物:葡萄糖 產(chǎn)物:乙酰甲基甲醇指示劑:10%KoH -萘酚(VP甲乙液)培養(yǎng)基:葡萄糖蛋白胨水 結(jié)果:紅色(+) 不變(-)B蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)一吲哚試驗(yàn)(靛基質(zhì)試驗(yàn))底物:色氨酸 產(chǎn)物:吲哚 指示劑:對(duì)二氨基苯甲醛(靛基質(zhì)試劑)培養(yǎng)基:蛋白胨水 結(jié)果:玫瑰色(+) 不變(-)二.硫化氫試驗(yàn)(H2S)底物:含硫氨基酸 產(chǎn)物:硫化氫指示劑:醋酸鉛硫酸亞鐵(Fe2+)培養(yǎng)基:含鐵瓊脂結(jié)果:黑色(+) 不變(-)三尿素酶試驗(yàn)底物:尿素 產(chǎn)物:氨 指示劑:酚紅(黃紅)培養(yǎng)基:尿素肉湯尿素瓊脂培養(yǎng)基 結(jié)果:黃紅(+)黃 (-)四苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)底物:苯丙氨酸 產(chǎn)物:苯丙酮酸 指示劑:10%三氯化鐵培養(yǎng)基:苯丙氨酸瓊脂斜面 結(jié)果:綠色化合物(+)不變 (-)五 氨基酸脫羧酶試驗(yàn)底物:氨基酸 產(chǎn)物:胺和二氧化碳指示劑:溴甲酚紫(黃紫)培養(yǎng)基:oeller脫羧培養(yǎng)基(含葡萄糖和氨基酸)結(jié)果: 對(duì)照管 不變 試驗(yàn)管 黃紫(+)黃 (-) 此試驗(yàn)需做對(duì)照(不含氨基酸的培養(yǎng)基)C 碳源利用試驗(yàn)一 枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)底物:枸櫞酸鹽 產(chǎn)物:碳酸鹽指示劑:溴色香草酚藍(lán)(綠藍(lán))培養(yǎng)基:枸櫞酸鹽培養(yǎng)基結(jié)果:綠藍(lán)(+)綠 (-)D 呼吸酶試驗(yàn) 1 細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)(OX試驗(yàn)) OX原理:細(xì)胞色素C 氧化型細(xì)胞色素C+苯二胺醌類化合物(紅色)指示劑:1%鹽酸四甲基對(duì)苯二胺/鹽酸二甲基對(duì)苯二胺產(chǎn)物:醌類化合物(紅色)結(jié)果:10s內(nèi)紅色(+) 不變(-)二 過氧化氫酶試驗(yàn)/觸媒(H2O2試驗(yàn))原理: 觸媒 H2O2 H2O+O2 指示劑:3% H2O2 底物: 3% H2O2 產(chǎn)物:O2結(jié)果:大量氣泡O2產(chǎn)生(+) 無(-)注意:做對(duì)照 血細(xì)胞中有H2O2 ,可產(chǎn)生假陽(yáng)性三 硝酸鹽還原試驗(yàn)原理: 酶系硝酸鹽亞硝酸鹽+ -萘胺+對(duì)氨基苯磺酸N -萘胺偶氮苯磺酸(紅色)底物:硝酸鹽產(chǎn)物:亞硝酸鹽指示劑:對(duì)氨基苯磺酸/ -萘胺(甲液/乙液)培養(yǎng)基:硝酸鹽培養(yǎng)基結(jié)果:紅色(+) 不變(-)注意:不變色,加入鋅粉紅色 真陰性 不變 假陰性E 其他生化試驗(yàn)一 凝固酶試驗(yàn)原理:方法;結(jié)合型血漿凝固酶 玻片法 凝集(+)/不凝集(-) 游離型血漿凝固酶 試管法 凝固(+)/不凝固(-)結(jié)果:金黃色葡萄球菌(+) 其他(-)注意:做對(duì)照試驗(yàn)二 卵磷脂酶試驗(yàn)原理: 酶+Ca2+ 卵磷脂 甘油脂(混濁)底物:卵磷脂 產(chǎn)物:甘油脂培養(yǎng)基:卵黃瓊脂平板 結(jié)果:混濁(+) 不變(-)三 DNA酶試驗(yàn)原理: DNA酶 長(zhǎng)鏈DNA 寡核苷酸鏈 (被酸沉淀) (溶于酸)底物:長(zhǎng)鏈DNA 產(chǎn)物;寡核苷酸鏈培養(yǎng)基:DNA瓊脂平板 結(jié)果:菌落周圍透明環(huán)(+) 無透明環(huán)(-)四 膽汁溶菌試驗(yàn)原理:膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌,而其他細(xì)菌則能耐受。指示劑:10%去氧膽酸鈉結(jié)果:加膽鹽的培養(yǎng)基變透明,而對(duì)照管仍混濁(+) 加膽鹽的培養(yǎng)基仍混濁,而對(duì)照管仍混濁(-)五 CAMP試驗(yàn)原理:膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌,而其他細(xì)菌則能耐受。指示劑:10%去氧膽酸鈉結(jié)果:加膽鹽的培養(yǎng)基變透明,而對(duì)照管仍混濁(+) 加膽鹽的培養(yǎng)基仍混濁,而對(duì)照管仍混濁(-)F復(fù)合生化試驗(yàn)一 克氏雙糖鐵瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)(KIA試驗(yàn))培養(yǎng)基:克氏雙糖鐵瓊脂培養(yǎng)基 底物:乳糖和葡萄糖指示劑:酚紅 產(chǎn)物:酸結(jié)果:乳糖 葡萄糖 產(chǎn)氣 硫化氫二 動(dòng)力-靛基質(zhì)-尿素酶試驗(yàn)(MIU試驗(yàn))培養(yǎng)基:培養(yǎng)基為含尿素、蛋白胨成分的半固體培養(yǎng)基指示劑:酚紅 底物:蛋白胨中的色氨酸、尿素結(jié)果:動(dòng)力 吲哚 尿素8、何為細(xì)菌的質(zhì)粒,質(zhì)粒的主要特點(diǎn)及種類質(zhì)粒:質(zhì)粒為細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì),環(huán)狀雙股DNA。質(zhì)粒攜帶有遺傳信息,控制某些特定的遺傳性狀,可獨(dú)立復(fù)制,與細(xì)菌的遺傳變異有關(guān)。特點(diǎn):1)自我復(fù)制2)獨(dú)立控制特定的性狀(F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒、Vi質(zhì)粒)3)可在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移、可丟失、一個(gè)細(xì)菌體內(nèi)可帶有多個(gè)質(zhì)粒種類:致育質(zhì)粒(F質(zhì)粒)、耐藥質(zhì)粒(R質(zhì)粒)、細(xì)菌素質(zhì)粒(Col質(zhì)粒)、毒力質(zhì)粒 (Vi質(zhì)粒)、代謝質(zhì)粒9、構(gòu)成細(xì)菌侵襲力的物質(zhì)基礎(chǔ)有哪些?(1)菌體表面結(jié)構(gòu):主要包括莢膜及其他表面物質(zhì)。如微莢膜、Vi抗原、K抗原等,都具有抗吞噬、抵抗抗體和補(bǔ)體的作用。 (2)菌毛:通過與宿主細(xì)胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合而粘附定居在黏膜表面,有助于細(xì)菌侵入。 (3)侵襲性酶:是某些細(xì)菌代謝過程中產(chǎn)生的與致病性有關(guān)的胞外酶,分泌到菌體周圍,協(xié)助細(xì)菌抗吞噬或有利于細(xì)菌在體內(nèi)擴(kuò)散。主要的侵襲性酶有: 1)血漿凝固酶:使血漿發(fā)生凝固。凝固物沉積在菌體表面或病灶周圍,保護(hù)細(xì)菌不被吞噬細(xì)胞吞噬和殺滅。 2)透明質(zhì)酸酶:又稱擴(kuò)散因子,因而有利于細(xì)菌及其毒素向周圍及深層擴(kuò)散。 3)鏈激酶:使細(xì)菌易于擴(kuò)散。 4)膠原酶:促使細(xì)菌在組織間擴(kuò)散。 5)脫氧核糖核酸酶:有利于細(xì)菌擴(kuò)散。 6)其他可溶性物質(zhì):殺白細(xì)胞素,溶血素。 (4)芽孢 增強(qiáng)細(xì)菌的侵襲力10、高壓滅菌的溫度、時(shí)間、適用范圍,如何對(duì)高壓滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)答:134,1320min,適用于耐高溫耐濕的物品,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌。 監(jiān)測(cè):高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè):有以下三種方法。 第一種是物理監(jiān)測(cè)。根據(jù)安裝在滅菌器上的量器(B-D試驗(yàn),排氣、抽真空,反應(yīng)壓力、溫度,時(shí)間)、圖表、指示針、報(bào)警器等,指示滅菌設(shè)備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障,但不能確定待滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測(cè)方法,每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行.。 第二種是化學(xué)指示監(jiān)測(cè)?;瘜W(xué)指示卡或化學(xué)指示膠帶100%變色來指示滅菌效果。利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間條件下受熱變色或變形的特點(diǎn),以判斷是否達(dá)到滅菌所需參數(shù)。第三種是生物指示劑監(jiān)測(cè)。嗜熱脂肪芽孢菌菌片,12119分鐘-溴甲酚紫葡糖蛋白胨培養(yǎng)基-7天培養(yǎng)-顯紫色無嗜熱脂肪芽孢菌生長(zhǎng),滅菌合格。11、簡(jiǎn)述醫(yī)院感染及其病原學(xué)特征。,簡(jiǎn)述醫(yī)院感染及其病原學(xué)特征。醫(yī)院感染:指住院病人在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染,包括在住院期間發(fā)生的感染和在醫(yī)院內(nèi)獲得出院后發(fā)生的感染,但不包括入院前已開始或者入院時(shí)已處于潛伏期的感染。醫(yī)院工作人員在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染也屬醫(yī)院感染。病原學(xué)特征:流行基本環(huán)節(jié)包括三個(gè)基本要素,感染源,感染途徑,感染者分外源性醫(yī)院感染,內(nèi)源性醫(yī)院感染傳播途徑:接觸傳播;空氣傳播;共同媒介傳播(水,食物,醫(yī)源性(血液)診療器械和設(shè)備,一次性用品);生物媒介傳播。流行形式:散發(fā)性,爆發(fā)性。易感人群:機(jī)體免疫功能嚴(yán)重受損者;嬰幼兒及老年患者;營(yíng)養(yǎng)不良者;接受各種免疫抑制劑治療者;接受各種侵入性操作者;長(zhǎng)期應(yīng)用光譜抗菌藥物者;住院時(shí)間長(zhǎng)著;手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)者。以革陰為主,也有革陽(yáng)和真菌感染。12、L型菌及特點(diǎn)概念:某些藥物作用于細(xì)菌,可抑制的肽聚糖的合成或破壞細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu),在高滲環(huán)境下,細(xì)菌仍可存活,成為細(xì)胞壁缺陷型L型細(xì)菌的生物學(xué)特性:1、細(xì)菌L型的形態(tài)和染色性:細(xì)菌L型呈高度多形性,大小不一。著色不勻,無論其原為革蘭陽(yáng)性或陰性菌,形成L型大多染成革蘭陰性。2、細(xì)菌L型生長(zhǎng)緩慢,營(yíng)養(yǎng)要求高,對(duì)滲透壓敏感,普通營(yíng)養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),培養(yǎng)時(shí)必須用高滲的含血清的培養(yǎng)基。(3-5%Nacl,10-20%蔗糖,10-20%人或馬血清),細(xì)菌L型在高滲的含血清的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)后形成三種類型的菌落。3、L型細(xì)菌的其他特征:生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)不典型,無法進(jìn)行常規(guī)的菌種鑒定;人工傳代后可回復(fù)為野生型;常引起慢性及反復(fù)發(fā)作的感染,對(duì)作用于細(xì)胞壁的常規(guī)藥物不敏感。 13、K-B法藥敏試驗(yàn)的影響因素及質(zhì)量控制1.藥敏紙片的藥量和pH值。2.紙片的規(guī)格 藥敏紙片的厚度要求在1mm左右,這樣適合藥物的擴(kuò)散速度和細(xì)菌的生長(zhǎng)。藥敏紙片的直徑為6.006.35mm。如果紙片的厚度過厚或過薄,藥敏紙片直徑過大或過小將影響藥敏試驗(yàn)的結(jié)果。3.含藥紙片保存和含藥紙片片間差。4.藥敏紙片應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)菌株定期監(jiān)測(cè)是否失效。5試驗(yàn)操作過程中的影響因素6細(xì)菌的純度7 菌液濃度8 菌液在培養(yǎng)基上的分布9 貼藥敏紙片時(shí),每取一種藥敏紙片必須燒一下鑷子口,避免藥敏紙片之間相互混淆,以提高藥敏的準(zhǔn)確性。10培養(yǎng)基種類,在大多數(shù)情況下,采用WHO組織統(tǒng)一要求的M-H培養(yǎng)基進(jìn)行的藥敏試驗(yàn)效果較好11孵育的溫度和時(shí)間 14、液體稀釋法的原理答:原理:以水解酪蛋白(M-H)液體培養(yǎng)基將抗生素作不同濃度的稀釋,然后種入待檢菌,定量測(cè)定抗菌藥物對(duì)該菌的MIC 。以外觀清晰,肉眼看無細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度(最高抗生素稀釋度)作為MIC 。15、聯(lián)合抑菌試驗(yàn)可能出現(xiàn)的結(jié)果、及判斷標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)合抑菌試驗(yàn)可能出現(xiàn)的結(jié)果、及判斷標(biāo)準(zhǔn)可能出現(xiàn)的結(jié)果有:1,拮抗作用,2,無關(guān)作用 3累加作用 4 協(xié)同作用 FIC指數(shù)=A藥聯(lián)合時(shí)的MIC/A藥單測(cè)MIC+B藥聯(lián)合時(shí)的MIC/B藥單測(cè)MIC.判斷標(biāo)準(zhǔn):FIC指數(shù)2為拮抗作用。16、細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的生化機(jī)制答:1、產(chǎn)生一種或多種水解酶,鈍化酶和修飾酶; 2、抗生素作用的靶位改變,包括青霉素結(jié)合蛋白位點(diǎn)和DNA解旋酶的改變; 3、細(xì)菌膜的通透性下降,包括細(xì)菌生物被摸的形成和通道蛋白丟失; 4、細(xì)菌主動(dòng)外排系統(tǒng)的過度表達(dá)。 17、-內(nèi)酰胺酶的種類及目前臨床最常用的檢測(cè)方法,常規(guī)需做直接-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)的細(xì)菌有哪些?答:B-內(nèi)酰胺酶的種類:按結(jié)構(gòu)(功能)分為絲氨酸(A、C、D)和 金屬酶(B);按分子生物學(xué)分類(Bush分類):1(C)、2a(A)、2b(A)、2bc(A)、2br(A)、2c(A)、2d(D)、2c(A)、2f(A)、3(B)、4.(其它)。臨床檢測(cè)方法:1、紙片法(頭孢硝噻吩紙片),10分內(nèi)觀察結(jié)果紙片由黃變紅為陽(yáng)性,表示有B-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生。2、碘淀粉法,10分后藍(lán)色消失為陽(yáng)性。常規(guī)需進(jìn)行B-內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)的細(xì)菌有:肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌、嗜血桿菌屬、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌葡萄球菌、腸球菌、大腸埃希菌、奇異變形桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌等。18、何為ESBL,臨床意義及CLSI推薦的檢測(cè)方法,哪些細(xì)菌應(yīng)常規(guī)檢測(cè)ESBL? ESBL為超廣譜內(nèi)酰胺酶 臨床意義:臨床上以革蘭陰性桿菌產(chǎn)生的超廣譜內(nèi)酰胺酶(ESBLs)最受重視,一旦ESBLs陽(yáng)性,不管體外藥敏如何,均應(yīng)視為對(duì)青霉素和所有頭孢菌素類耐藥,應(yīng)改用其它抗菌藥物。產(chǎn)ESBLs菌在體外對(duì)多種抗生素敏感而在感染者體內(nèi)卻表達(dá)臨床意義耐藥。檢出ESBL菌株可對(duì)癥下藥,縮短病人住院時(shí)間,減少病人痛苦,還可以大大減少院內(nèi)感染且為患者節(jié)省開支。CLSI推薦的檢測(cè)方法:雙紙片協(xié)同法。哪些細(xì)菌應(yīng)常規(guī)檢測(cè)ESBL:肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希菌、奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌等革蘭陰性桿菌。19、何為MRSA?臨床意義及檢測(cè)方法 MRSA是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的縮寫,是金黃色葡萄球菌家族中的一種 檢測(cè)方法 1、紙片擴(kuò)散法(K-B法)2、肉湯稀釋法3、瓊脂稀釋法4、瓊脂篩選法5、濃度梯度法6、自動(dòng)化藥敏檢測(cè)7、DNA探針雜交8、PCR技術(shù)20、淋病的確診應(yīng)如何進(jìn)行微生物學(xué)檢查答:先培養(yǎng):即疑為淋病奈瑟菌感染的標(biāo)本接種于選擇培養(yǎng)基如NYC、MTM、ML,立即置于5CO2氣體條件下3537孵育,培養(yǎng)基需觀察72小時(shí)后無菌生長(zhǎng)可報(bào)告為陰性,每隔24小時(shí)觀察,淋病奈瑟菌的菌落呈灰褐色、光滑、半透明呈露滴狀凸起的菌落。然后進(jìn)行革蘭染色鏡檢:將菌落涂片,革蘭染色后顯微鏡下見革蘭陰性雙球菌,再進(jìn)行氧化酶和觸酶試驗(yàn),葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性,其他糖類試驗(yàn)陰性于是可確診為淋病奈瑟菌。21、鏈球菌是如何分類和鑒定的?鏈球菌的分類:根據(jù)溶血現(xiàn)象分類:甲型溶血性鏈球菌、乙型、不出現(xiàn)溶血的丙型。 根據(jù)Lancefield抗血清分型將分為ABCD.等20個(gè)群。對(duì)人類治病主要是A群。鑒定:羊血脂平板識(shí)別溶血特性,涂片格蘭染色,鏡檢,如果為G+,進(jìn)一步做觸酶試驗(yàn),6.5%的NaCL不生長(zhǎng)著,可確定為鏈球菌細(xì)菌。22、肺炎鏈球菌致病因素及鑒定要點(diǎn),如何區(qū)分肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌?肺炎鏈球菌的致病因素:肺炎鏈球菌的莢膜在細(xì)菌的侵襲力上起著重要作用;肺炎鏈球菌的溶血素、神經(jīng)氨酸酶也是其主要致病物質(zhì)鑒定要點(diǎn):發(fā)酵葡萄糖和多種糖,不產(chǎn)氣,乳酸為代謝終末產(chǎn)物,觸酶陰性,膽汁溶菌試驗(yàn)和Optochin陽(yáng)性。a溶血性鏈球菌。莢膜多糖使菌落呈粘液狀;可產(chǎn)生自溶酶,培養(yǎng)48h后出現(xiàn)“臍窩狀”菌落。對(duì)青霉素耐藥甚至多重耐藥。如何區(qū)分肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌:肺炎鏈球菌:Optochin為S,膽汁溶菌試驗(yàn)陽(yáng)性。草綠色鏈球菌:Optochin為R,膽汁溶菌試驗(yàn)陰性。23、腸桿菌科細(xì)菌有哪些共同的生物學(xué)特性?如何區(qū)分腸桿菌科細(xì)菌與其他革蘭陰性桿菌?答:共同的生物學(xué)特性:1. 形態(tài)與染色:G 桿菌,多數(shù)有周鞭毛、有莢膜或微莢膜,致病菌株多數(shù)有菌毛,均無芽胞,多數(shù)有動(dòng)力。2、培養(yǎng):需氧或兼性厭氧,營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普特培養(yǎng)基上和MAC上生長(zhǎng)良好。3、生化反應(yīng):氧化酶;發(fā)酵葡萄糖(產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣);觸酶;硝酸鹽還原試驗(yàn)發(fā)酵多種糖類,多數(shù)能發(fā)酵乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣利用乳糖發(fā)酵試驗(yàn)初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌:腸道致病菌多數(shù)不發(fā)酵乳糖 腸道非致病菌多數(shù)發(fā)酵乳糖4、抗原構(gòu)造復(fù)雜:鞭毛抗原(H)、K或Vi抗原、菌體抗原(O)5、抵抗力不強(qiáng),加熱6030min即被殺死,不耐干燥,對(duì)一般化學(xué)消毒劑如漂白粉、酚、甲醛等均敏感。對(duì)低溫有耐受力,能耐膽鹽,并在一定程度上能抵抗染料的抑菌作用。6、易變異:通過接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶源性轉(zhuǎn)換引起耐藥性變異、毒力性變異、生化反應(yīng)性變異7、臨床意義:致病物質(zhì):菌毛、表面抗原、內(nèi)毒素、腸毒素傳染途徑:腸道傳染、腸道外傳染所致疾病:腸道致病菌引起腸道傳染?。?xì)菌性痢疾、傷寒等)條件致病菌:是醫(yī)院感染的主要病原菌腸桿菌科細(xì)菌與其他革蘭陰性桿菌區(qū)分腸桿菌科細(xì)菌與其它G-b鑒定要點(diǎn): 腸桿菌科 弧菌科 非發(fā)酵菌O/F(葡萄糖) F F O/- 氧化酶 - + +形態(tài) 桿狀 弧形 桿狀鞭毛 周毛或無 單毛 單、叢、周或無24、哪些是主要引起人類腸道感染的腸桿菌科細(xì)菌?埃希菌屬,志賀菌屬,沙門菌屬,耶爾森菌屬。25、如何進(jìn)行腸桿菌科細(xì)菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)?答:尿液標(biāo)本1 首先是直接圖片染色,給出初步報(bào)告2 接種在BAP和MAC上,35培育箱中培育1824小時(shí)3 培育好后,做涂片染色,和氧化酶實(shí)驗(yàn).然后轉(zhuǎn)種到KIA和MIU上以及O/F,37培育1824小時(shí).4 然后觀察結(jié)果,全面生化鑒定和血清學(xué)分型5 藥敏試驗(yàn)注:1 血清和腦脊液標(biāo)本需要先增菌,然后做14步 2 糞便嘔吐物的分離培養(yǎng)是在(SS/HE/XLD和MAC/EMB/中國(guó)藍(lán))上邊進(jìn)行,然后同尿標(biāo)本以上實(shí)驗(yàn)步驟為腸桿科菌屬的檢驗(yàn)程序報(bào)告依據(jù): 革蘭陰性無芽孢桿菌 O/F為發(fā)酵型 吲哚/甲基紅/V-P/枸櫞酸鹽(IMVC) MAC上面的菌落 KIA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果腸桿菌的定科主要依靠O/F實(shí)驗(yàn)和氧化酶實(shí)驗(yàn),以及菌的形態(tài)和有無鞭毛(有鞭毛的細(xì)菌才具有致病性)來定。 屬種的鑒定可以用自動(dòng)儀和商品鑒定盒來定。手工操作結(jié)果判定各種屬特點(diǎn):大腸埃希氏菌:在選擇性平板上課發(fā)酵如糖,形成有色菌落:EMB上市粉紅色有金屬光澤;MAC上粉紅或紅色;HE上中度抑制,菌落呈橙紅色或橘紅色;SS上受抑制,菌落呈粉紅色或者中間粉紅色,周圍無色;XLD上市不透明的黃色。KIA上為AA+-,(上下產(chǎn)酸產(chǎn)氣,H2S陰性)MIU(動(dòng)力/吲哚/尿素)+-. IMVC+-沙門菌屬:KIA結(jié)果可能為葡萄糖分解陽(yáng)性,乳糖分解陰性,有的產(chǎn)氣,有點(diǎn)不產(chǎn)氣,有的H2S陽(yáng)性 有的陰性。MIU+-;IMVC:-+-或者-+-+。沙門菌屬的血清學(xué)鑒定中,H血清分型如果第二相不凝,可能是位相誘導(dǎo).志賀菌屬:無鞭毛,在增菌培養(yǎng)是在GN肉湯上,37培養(yǎng)4到6小時(shí)即可。KIA上,產(chǎn)堿/產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣、H2S陰性;MIU-(+/-)-,IMVC上(+/-)+-。血清定型原則是先多價(jià),后單價(jià),需對(duì)照。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌:糞便標(biāo)本在增菌時(shí)采用冷增菌培養(yǎng),45培養(yǎng)2到3周。25動(dòng)力陽(yáng)性,37動(dòng)力陰性。尿素陽(yáng)性克雷伯菌屬:對(duì)氨芐西林天然耐藥,對(duì)頭孢容易耐藥。腸桿菌屬:IMVC結(jié)果與大腸埃希氏菌屬相反,為-+,動(dòng)力和鳥氨酸均陰性。變形桿菌屬:周身鞭毛,H2S陽(yáng)性,同種間的鑒定,普通變形桿吲哚陽(yáng)性,普通變形桿與豪氏主要依靠七葉苷和水楊苷實(shí)驗(yàn),前者兩項(xiàng)為陽(yáng)性,后者為陰性,奇異變形桿的特點(diǎn)是鳥氨酸陽(yáng)性,產(chǎn)黏變形桿是木糖發(fā)酵陰性,潘氏變形桿是氯霉素耐藥。26、變形桿菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌鑒定要點(diǎn)變形桿菌1、G- 桿菌2、普瓊:有遷徙現(xiàn)象。SS:中心呈黑色3、氧化酶-4、尿酶+5、KIA:KA+小腸結(jié)腸炎耶爾森菌1、G-桿菌2、CIN:菌落為粉紅色,偶有一圈膽鹽沉淀3、氧化酶:-4、尿酶+5、KIA:KA-6、TSIA:AA7、血清定型27、不發(fā)酵革蘭陰性桿菌的共同特點(diǎn)是什么?臨床常見菌屬有哪些?答: 1 培養(yǎng) 在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,包括血平板,巧克力平板。 2 革蘭染色 革蘭陰性桿菌。 3 氧化酶實(shí)驗(yàn)大多為陽(yáng)性。 4 O/F 為O型,不利用或產(chǎn)堿(N/F)。 5 KIA斜面穿刺生長(zhǎng)不良,底層穿刺上可生長(zhǎng) ,斜面及底層均呈堿性生長(zhǎng)。 6 動(dòng)力實(shí)驗(yàn)在半固體中僅在穿刺的4mm左右生長(zhǎng),4-6h初步觀察,時(shí)間久了動(dòng)力消失。 臨床常見菌屬有假單胞菌屬,不動(dòng)桿菌屬,產(chǎn)堿桿菌屬,黃桿菌屬,莫拉菌屬,軍團(tuán)菌屬。28、產(chǎn)堿桿菌、不動(dòng)桿菌屬鑒定要點(diǎn) 產(chǎn)堿桿菌屬:在MAC 、SS平板上可形成無色透明的菌落,在血平板上行成灰色,扁平,邊緣薄的較大菌落。 生化鑒定:氧化酶及觸酶(+)、O/F產(chǎn)堿性、脲酶()、動(dòng)力()不液化明膠、不分解任何糖類不動(dòng)桿菌屬:在普通培養(yǎng)基和麥康克平板上生長(zhǎng)良好,最是溫度為35度,有些菌株可在42度生長(zhǎng),在SS瓊脂平板上有部分菌落生長(zhǎng), 生化鑒定:氧化酶()、動(dòng)力()、硝酸鹽實(shí)驗(yàn)()29、銅綠假單胞菌的主要生物學(xué)特性1)、形態(tài)特征:為格蘭陰性菌,長(zhǎng)短不一,球狀或長(zhǎng)絲狀,成雙或成鍛煉排列。一端有鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑,無芽孢。可產(chǎn)生多種色素,如綠膿素與帶熒光的水溶性熒光素。2)、培養(yǎng)特性:專性需氧菌,部分菌株能在兼性厭氧條件下生長(zhǎng),營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,可生長(zhǎng)的溫度范圍為2542攝氏度,最適生長(zhǎng)唯獨(dú)為2530攝氏度,4攝氏度不生長(zhǎng)。氧化酶陽(yáng)性,氧化分解葡萄糖、木糖、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,液化明膠,還原硝酸鹽并產(chǎn)生氮?dú)?,吲哚陰性,利用枸櫞酸鹽,精氨酸雙水解酶陽(yáng)性。3)、有O抗原和H抗原,其中O抗原包含外膜蛋白,脂多糖兩種成分。外膜蛋白是保護(hù)性抗原,脂多糖具有特異性,應(yīng)用抗原成分可對(duì)銅綠假單胞菌進(jìn)行血清學(xué)分型,目前可分為20個(gè)血清型。30、革蘭陰性桿菌鑒定步驟見書31、革蘭陽(yáng)性球菌鑒定步驟見書32、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室應(yīng)如何檢驗(yàn)疑為霍亂的糞便標(biāo)本? 糞便標(biāo)本:(1)a涂片b動(dòng)力制動(dòng)試驗(yàn)=快速檢測(cè)初步報(bào)告(2)接種堿性胨水-(25 6-8小時(shí))轉(zhuǎn)鐘aTCBS或4號(hào)瓊脂35 12-18小時(shí)觀察可疑菌落。(3)生化鑒定:a涂片 染色(菌體短小 彎曲成弧形或直桿狀的革蘭陰性細(xì)菌)b氧化酶試驗(yàn)(+)c粘絲試驗(yàn)(+)dO/129敏感試驗(yàn) (s)eO1群,O139群血清凝集實(shí)驗(yàn)(+)(4)分純:轉(zhuǎn)鐘KIA生化鑒定:a耐鹽性試驗(yàn)NAcL【0%(+) 1%(+) 3%(+) 6%(+) 8%(-) 10%(-) 】 ;b 血清型鑒定;c生物型鑒定33、簡(jiǎn)述結(jié)核分枝桿菌的形態(tài)及培養(yǎng)特性(培養(yǎng)基)答:形態(tài):細(xì)長(zhǎng)略彎曲的桿菌,有時(shí)可見啊分枝狀,無芽胞和鞭毛,因衰老和抗結(jié)核藥物的作用可出現(xiàn)多種形態(tài),如球狀、串珠狀或絲狀。 培養(yǎng)特性:在固體培養(yǎng)基上,菌落為粗糙型,表面干燥呈顆粒狀,不透明,乳白色或淡黃色,如菜花樣。在液體培養(yǎng)基中,生成菌膜。如在培養(yǎng)液中加入吐溫-80可是細(xì)菌分散,均勻生長(zhǎng),有毒株的在液體培養(yǎng)基中呈索狀生長(zhǎng)。34、如何進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)?1、 形態(tài)觀察(1)、涂片:直接涂片和厚涂片;火焰固定后用于染色(2)、染色:抗酸染色 報(bào)告抗酸桿菌 熒光染色 報(bào)告分枝桿菌2、 分離培養(yǎng)(1)、標(biāo)本處理:腦脊液等無雜菌污染的標(biāo)本可直接或離心后取沉渣接種;痰和尿液有雜菌污染的標(biāo)本接種之前應(yīng)作適當(dāng)?shù)奶幚?。酸處理,待接種;堿處理,待接種;胰酶新潔爾滅法,待接種(2)、接種與培養(yǎng)1)固體培養(yǎng)基:抗酸性染色 鑒定試驗(yàn) 鑒定報(bào)告群別或種別 耐藥試驗(yàn)2)液體培養(yǎng)基: 鑒定報(bào)告群別或種別3、生化反應(yīng) 糖發(fā)酵 觸酶 熱觸酶 中性紅 碲鹽還原 + + 4、基因診斷:DNA探針 PCR雜交梳 鑒定報(bào)告群別或種別 16rRNA基因測(cè)序5、免疫學(xué)診斷:結(jié)核菌素試驗(yàn) 輔助手段 檢測(cè)抗PPD IgG 診斷活動(dòng)性結(jié)核 全血INF-測(cè)定 報(bào)告群被或種別35、厭氧芽胞梭菌屬共同特征,主要種類?共同特征:厭氧或微需氧的粗大芽孢桿菌。革蘭陽(yáng)性,芽孢呈圓形或卵圓形,直徑大于菌體,位于菌體中央,極端或次極端,使菌體膨大呈梭狀。多數(shù)為腐生菌,少數(shù)致病菌,能分泌外毒素,和侵襲酶類,引起人和動(dòng)物致病。種類:臨床上有致病性的梭狀芽孢桿菌主要是某些厭氧芽孢桿菌,如破傷風(fēng)梭菌,產(chǎn)氣莢膜梭菌,肉毒梭菌與艱難梭菌等。36、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌的形態(tài)特征、致病物質(zhì)及所致疾病破傷風(fēng)攆梭菌的(形態(tài)特征):革蘭氏陽(yáng)性菌、細(xì)長(zhǎng)、周身鞭毛、能運(yùn)動(dòng)、無莢膜。芽孢正圓形,比菌體大,位于菌體頂端,使細(xì)菌呈鼓槌狀。專性厭氧菌,在血平板上呈薄膜狀生長(zhǎng),菌落半透明、灰白色、邊緣疏松呈羽毛狀,伴溶血。在皰肉培養(yǎng)基中,肉渣部分消化,微變黑,有少量氣體,有腐敗性惡臭。(致病物質(zhì)):外毒素。(所致疾?。焊腥竞笠饳C(jī)體強(qiáng)直性痙攣、抽搐,稱為破傷風(fēng)。肉毒梭菌的(形態(tài)特征):革蘭陽(yáng)性粗短桿菌、單獨(dú)或成雙排列、有時(shí)可見短鏈狀。有周身鞭毛、無莢膜。嚴(yán)格厭氧菌,普通瓊脂平板上形成直徑35毫米不規(guī)則菌落,能產(chǎn)生脂酶。血平板上有溶血。卵黃平板上,菌落周圍出現(xiàn)渾濁圈,有腐敗惡臭氣味。(致病物質(zhì)):外毒素。(所致疾病):引起人和動(dòng)物嚴(yán)重的中毒性疾病即肉毒癥、食物中毒。37、厭氧菌感染的條件和特征?條件:1、組織缺氧或氧化還原電勢(shì)降低可造成厭氧菌生長(zhǎng)繁殖的適宜環(huán)境,易于遭受厭氧菌感染 2、機(jī)體免疫功能下降,如接受免疫抑制劑、抗代謝藥物、放射治療、化學(xué)藥物治療的患者,易并發(fā)厭氧菌感染。 3、長(zhǎng)期應(yīng)用氨基糖苷類抗生素,或長(zhǎng)期應(yīng)用頭孢菌素、四環(huán)素等無效的患者,均可誘發(fā)厭氧菌感染特征:1、感染組織局部產(chǎn)生大量氣體。 2、感染部位多發(fā)生在粘膜附近。3、深部外傷如槍傷后,人或動(dòng)物咬傷后的繼發(fā)感染,均可能是厭氧菌感染。4、分泌物有惡臭,或?yàn)榘笛t色,并在紫外光下發(fā)出紅色熒光,均可能是厭氧菌感染。發(fā)紅色熒光的分泌物,可能有產(chǎn)黑色素普魯沃菌和不解糖紫單胞菌;分泌物或濃汁中有硫磺顆粒,為放線菌感染5、長(zhǎng)期應(yīng)用氨基糖苷類抗生素治療無效的病例、新近流產(chǎn)史者,以及胃腸手術(shù)后發(fā)生的感染,均有可能是厭氧菌感染。6、分泌物涂片經(jīng)革蘭染色,鏡檢發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌,而常規(guī)培養(yǎng)陰性者;或在液體或半固體培養(yǎng)基深部生長(zhǎng)的細(xì)菌,均可能是厭氧菌感染 38、什么是真菌,病原性真菌的培養(yǎng)特性?答:真菌培養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上能生長(zhǎng),常用沙氏培養(yǎng)基培養(yǎng),適宜溫度2228,深部真菌為37.真菌培養(yǎng)后可形成兩種菌落。1.酵母菌型菌落:?jiǎn)渭?xì)胞真菌的菌落,形態(tài)與一般菌落相似,但較大,菌落表面光滑,濕潤(rùn),柔軟,邊緣整齊,如新生隱球菌。部分單細(xì)胞真菌可在培養(yǎng)基中形成假菌絲,伸入培養(yǎng)基中,此菌落為類酵母菌。2.霉菌型菌落 :是多細(xì)胞真菌的菌落,菌落呈棉絮狀,絨毛狀,粉末狀,并產(chǎn)生不同的色素,如皮膚廯菌。39、白色假絲酵母菌、新生隱球菌的主要特征白色假絲酵母菌的主要特征:呈圓形或卵圓形,革蘭陽(yáng)性,著色不均。出芽方式繁殖,在組織內(nèi)可見孢子、假菌絲。新生隱球菌的主要特征:在組織中呈圓形或卵圓形,外周有寬厚莢膜,莢膜較菌體大13倍,折光性強(qiáng),一般染色法不易著色,常采用墨汁負(fù)染色法,在黑色背景下可鏡檢到透亮菌體和寬厚莢膜。菌落呈粘液狀。40、何為呼吸道病毒?主要包括哪些種類?普通感冒最常見病原體有哪些?呼吸道病毒是指能侵犯呼吸道并導(dǎo)致呼吸道病變或以呼吸道途徑感染而主要引起呼吸道以外組織器官病變的病毒。主要包括:甲乙丙型流感病毒,甲型禽流感病毒,副流感病毒,麻疹病毒,腮腺炎病毒,呼吸道合胞病毒,人鼻病毒,人冠狀病毒,人腺病毒2型,風(fēng)疹病毒,輪狀病毒。普通感冒最常見的病原體有:副流感病毒,人鼻病毒,人冠狀病毒,41、簡(jiǎn)述流感病毒的結(jié)構(gòu)、抗原與分型1流感病毒的結(jié)構(gòu):核心:分節(jié)段的(-) SSRNA 核蛋白(NP) RNA多聚酶基質(zhì)蛋白(M蛋白):M1,M2 具型特異性包膜:刺突:血凝素HA 神經(jīng)氨酸酶NA 抗原及分型 內(nèi)部抗原 表面抗原組成 NP、MP HA、 NA特異性 型特異 亞型特異分型情況 甲、乙、丙 A0、A1、A2、A3 42、乙型肝炎病毒(HBV)的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及基因組的組成人類乙型肝炎病毒在電鏡下觀察有3種病毒顆粒,即小球形顆粒、管狀顆粒和大球狀顆?;蚍QDane顆粒。Dane顆粒為
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