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羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂蠆羈肂薁蚈螁裊蕆蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羈蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂螞膅膁螁襖羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈節(jié)羋蒞袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肅莈蒃螅羋芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羈膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蟻螇肄芆蝕衿艿膂 生物化學重點 第一章緒論一、生物化學的的概念：生物化學（biochemistry)是利用化學的原理與方法去探討生命的一門科學，它是介于化學、生物學及物理學之間的一門邊緣學科。 二、生物化學的發(fā)展：1敘述生物化學階段：是生物化學發(fā)展的萌芽階段，其主要的工作是分析和研究生物體的組成成分以及生物體的分泌物和排泄物。2動態(tài)生物化學階段：是生物化學蓬勃發(fā)展的時期。就在這一時期，人們基本上弄清了生物體12二級結(jié)構(gòu)：指多肽鏈主鏈骨架盤繞折疊而形成的構(gòu)象，借氫鍵維系。主要有以下幾種類型：-螺旋：其結(jié)構(gòu)特征為：主鏈骨架圍繞中心軸盤繞形成右手螺旋；螺旋每上升一圈是3.6個氨基酸殘基，螺距為0.54nm；相鄰螺旋圈之間形成許多氫鍵；側(cè)鏈基團位于螺旋的外側(cè)。影響-螺旋形成的因素主要是：存在側(cè)鏈基團較大的氨基酸殘基；連續(xù)存在帶相同電荷的氨基酸殘基；存在脯氨酸殘基。-折疊：其結(jié)構(gòu)特征為：若干條肽鏈或肽段平行或反平行排列成片；所有肽鍵的c=o和nh形成鏈間氫鍵；側(cè)鏈基團分別交替位于片層的上、下方。-轉(zhuǎn)角：多肽鏈180回折部分，通常由四個氨基酸殘基構(gòu)成，借1、4殘基之間形成氫鍵維系。無規(guī)卷曲：主鏈骨架無規(guī)律盤繞的部分。3三級結(jié)構(gòu)：指多肽鏈所有原子的空間排布。其維系鍵主要是非共價鍵（次級鍵）：氫鍵、疏水鍵、范德華力、離子鍵等，也可涉及二硫鍵。4四級結(jié)構(gòu)：指亞基之間的立體排布、接觸部位的布局等，其維系鍵為非共價鍵。亞基是指參與構(gòu)成蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的而又具有獨立三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈。 五、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)：1兩性解離與等電點：蛋白質(zhì)分子中仍然存在游離的氨基和游離的羧基，因此蛋白質(zhì)與氨基酸一樣具有兩性解離的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子所帶正、負電荷相等時溶液的ph值稱為蛋白質(zhì)的等電點。2蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)：蛋白質(zhì)具有親水溶膠的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和表面電荷是穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水溶膠的兩個重要因素。3蛋白質(zhì)的紫外吸收：蛋白質(zhì)分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸殘基對紫外光有吸收，以色氨酸吸收最強，最大吸收峰為280nm。4蛋白質(zhì)的變性：蛋白質(zhì)在某些理化因素的作用下，其特定的空間結(jié)構(gòu)被破壞而導致其理化性質(zhì)改變及生物活性喪失，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性。引起蛋白質(zhì)變性的因素有：高溫、高壓、電離輻射、超聲波、紫外線及有機溶劑、重金屬鹽、強酸強堿等。絕大多數(shù)蛋白質(zhì)分子的變性是不可逆的。 六、蛋白質(zhì)的分離與純化：1鹽析與有機溶劑沉淀：在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)，使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出，稱為鹽析。常用的中性鹽有：硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等。鹽析時，溶液的ph在蛋白質(zhì)的等電點處效果最好。凡能與水以任意比例混合的有機溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白質(zhì)沉淀。2電泳：蛋白質(zhì)分子在高于或低于其pi的溶液中帶凈的負或正電荷，因此在電場中可以移動。電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質(zhì)分子所帶電荷量以及分子大小。3透析：利用透析袋膜的超濾性質(zhì)，可將大分子物質(zhì)與小分子物質(zhì)分離開。4層析：利用混合物中各組分理化性質(zhì)的差異，在相互接觸的兩相（固定相與流動相）之間的分布不同而進行分離。主要有離子交換層析，凝膠層析，吸附層析及親和層析等，其中凝膠層析可用于測定蛋白質(zhì)的分子量。5超速離心：利用物質(zhì)密度的不同，經(jīng)超速離心后，分布于不同的液層而分離。超速離心也可用來測定蛋白質(zhì)的分子量，蛋白質(zhì)的分子量與其沉降系數(shù)s成正比。 七、氨基酸順序分析：蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸順序分析，即蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定，主要有以下幾個步驟：1. 分離純化蛋白質(zhì)，得到一定量的蛋白質(zhì)純品；2. 取一定量的樣品進行完全水解，再測定蛋白質(zhì)的氨基酸組成；3. 分析蛋白質(zhì)的n-端和c-端氨基酸；4. 采用特異性的酶（如胰凝乳蛋白酶）或化學試劑（如溴化氰）將蛋白質(zhì)處理為若干條肽段；5. 分離純化單一肽段；26. 測定各條肽段的氨基酸順序。一般采用edman降解法，用異硫氰酸苯酯進行反應，將氨基酸降解后，逐一進行測定；7. 至少用兩種不同的方法處理蛋白質(zhì)，分別得到其肽段的氨基酸順序；8. 將兩套不同肽段的氨基酸順序進行比較，以獲得完整的蛋白質(zhì)分子的氨基酸順序。 第三章核酸的結(jié)構(gòu)與功能一、核酸的化學組成：1含氮堿：參與核酸和核苷酸構(gòu)成的含氮堿主要分為嘌呤堿和嘧啶堿兩大類。組成核苷酸的嘧啶堿主要有三種尿嘧啶（u）、胞嘧啶（c）和胸腺嘧啶（t），它們都是嘧啶的衍生物。組成核苷酸的嘌呤堿主要有兩種腺嘌呤（a）和鳥嘌呤（g），它們都是嘌呤的衍生物。2戊糖：核苷酸中的戊糖主要有兩種，即-d-核糖與-d-2-脫氧核糖，由此構(gòu)成的核苷酸也分為核糖核苷酸與脫氧核糖核酸兩大類。3核苷：核苷是由戊糖與含氮堿基經(jīng)脫水縮合而生成的化合物。通常是由核糖或脫氧核糖的c1 -羥基與嘧啶堿n1或嘌呤堿n9進行縮合，故生成的化學鍵稱為，n糖苷鍵。其中由d-核糖生成者稱為核糖核苷，而由脫氧核糖生成者則稱為脫氧核糖核苷。由“稀有堿基”所生成的核苷稱為“稀有核苷”。假尿苷（）就是由d-核糖的c1與尿嘧啶的c5相連而生成的核苷。 二、核苷酸的結(jié)構(gòu)與命名：核苷酸是由核苷與磷酸經(jīng)脫水縮合后生成的磷酸酯類化合物，包括核糖核苷酸和脫氧核糖核酸兩大類。最常見的核苷酸為5-核苷酸（5常被省略）。5-核苷酸又可按其在5位縮合的磷酸基的多少，分為一磷酸核苷（核苷酸）、二磷酸核苷和三磷酸核苷。此外，生物體內(nèi)還存在一些特殊的環(huán)核苷酸，常見的為環(huán)一磷酸腺苷（camp）和環(huán)一磷酸鳥苷（cgmp），它們通常是作為激素作用的第二信使。核苷酸通常使用縮寫符號進行命名。第一位符號用小寫字母d代表脫氧，第二位用大寫字母代表堿基，第三位用大寫字母代表磷酸基的數(shù)目，第四位用大寫字母p代表磷酸。 三、核酸的一級結(jié)構(gòu)：核苷酸通過3,5-磷酸二酯鍵連接起來形成的不含側(cè)鏈的多核苷酸長鏈化合物就稱為核酸。核酸具有方向性，5-位上具有自由磷酸基的末端稱為5-端，3-位上具有自由羥基的末端稱為3-端。dna由damp、dgmp、dcmp和dtmp四種脫氧核糖核苷酸所組成。dna的一級結(jié)構(gòu)就是指dna分子中脫氧核糖核苷酸的種類、數(shù)目、排列順序及連接方式。rna由amp，gmp，cmp，ump四種核糖核苷酸組成。rna的一級結(jié)構(gòu)就是指rna分子中核糖核苷酸的種類、數(shù)目、排列順序及連接方式。 四、dna的二級結(jié)構(gòu)：dna雙螺旋結(jié)構(gòu)是dna二級結(jié)構(gòu)的一種重要形式，它是watson和crick兩位科學家于1953年提出來的一種結(jié)構(gòu)模型，其主要實驗依據(jù)是chargaff研究小組對dna的化學組成進行的分析研究，即dna分子中四種堿基的摩爾百分比為a=t、g=c、a+g=t+c（chargaff原則），以及由wilkins研究小組完成的dna晶體x線衍射圖譜分析。天然dna的二級結(jié)構(gòu)以b型為主，其結(jié)構(gòu)特征為：為右手雙螺旋，兩條鏈以反平行方式排列；主鏈位于螺旋外側(cè)，堿基位于內(nèi)側(cè)；兩條鏈間存在堿基互補，通過氫鍵連系，且a-t、g-c（堿基互補原則）；螺旋的穩(wěn)定因素為氫鍵和堿基堆砌力；螺旋的螺距為3.4nm，直徑為2nm。 五、dna的超螺旋結(jié)構(gòu)：雙螺旋的dna分子進一步盤旋形成的超螺旋結(jié)構(gòu)稱為dna的三級結(jié)構(gòu)。3絕大多數(shù)原核生物的dna都是共價封閉的環(huán)狀雙螺旋，其三級結(jié)構(gòu)呈麻花狀。在真核生物中，雙螺旋的dna分子圍繞一蛋白質(zhì)八聚體進行盤繞，從而形成特殊的串珠狀結(jié)構(gòu)，稱為核小體。核小體結(jié)構(gòu)屬于dna的三級結(jié)構(gòu)。 六、dna的功能：dna的基本功能是作為遺傳信息的載體，為生物遺傳信息復制以及基因信息的轉(zhuǎn)錄提供模板。dna分子中具有特定生物學功能的片段稱為基因（gene）。一個生物體的全部dna序列稱為基因組（genome）?；蚪M的大小與生物的復雜性有關(guān)。 七、rna的空間結(jié)構(gòu)與功能：rna分子的種類較多，分子大小變化較大，功能多樣化。rna通常以單鏈存在，但也可形成局部的雙螺旋結(jié)構(gòu)。1mrna的結(jié)構(gòu)與功能：mrna是單鏈核酸，其在真核生物中的初級產(chǎn)物稱為hnrna。大多數(shù)真核成熟的mrna分子具有典型的5-端的7-甲基鳥苷三磷酸（m7gtp）帽子結(jié)構(gòu)和3-端的多聚腺苷酸(polya)尾巴結(jié)構(gòu)。mrna的功能是為蛋白質(zhì)的合成提供模板，分子中帶有遺傳密碼。mrna分子中每三個相鄰的核苷酸組成一組，在蛋白質(zhì)翻譯合成時代表一個特定的氨基酸，這種核苷酸三聯(lián)體稱為遺傳密碼（coden）。2trna的結(jié)構(gòu)與功能：trna是分子最小，但含有稀有堿基最多的rna。trna的二級結(jié)構(gòu)由于局部雙螺旋的形成而表現(xiàn)為“三葉草”形，故稱為“三葉草”結(jié)構(gòu)，可分為五個部分：氨基酸臂：由trna的5-端和3-端構(gòu)成的局部雙螺旋，3-端都帶有-cca-oh順序，可與氨基酸結(jié)合而攜帶氨基酸。dhu臂：含有二氫尿嘧啶核苷，與氨基酰trna合成酶的結(jié)合有關(guān)。反密碼臂：其反密碼環(huán)中部的三個核苷酸組成三聯(lián)體，在蛋白質(zhì)生物合成中，可以用來識別mrna上相應的密碼，故稱為反密碼（anticoden）。 tc臂：含保守的tc順序，可以識別核蛋白體上的rrna，促使trna與核蛋白體結(jié)合。可變臂：位于tc臂和反密碼臂之間，功能不詳。3rrna的結(jié)構(gòu)與功能：rrna是細胞中含量最多的rna，可與蛋白質(zhì)一起構(gòu)成核蛋白體，作為蛋白質(zhì)生物合成的場所。原核生物中的rrna有三種：5s，16s，23s。真核生物中的rrna有四種：5s，5.8s，18s，28s。八、核酶：具有自身催化作用的rna稱為核酶（ribozyme），核酶通常具有特殊的分子結(jié)構(gòu)，如錘頭結(jié)構(gòu)。 九、核酸的一般理化性質(zhì)：核酸具有酸性；粘度大；能吸收紫外光，最大吸收峰為260nm。 十、dna的變性：在理化因素作用下，dna雙螺旋的兩條互補鏈松散而分開成為單鏈，從而導致dna的理化性質(zhì)及生物學性質(zhì)發(fā)生改變，這種現(xiàn)象稱為dna的變性。引起dna變性的因素主要有：高溫，強酸強堿，有機溶劑等。dna變性后的性質(zhì)改變：增色效應：指dna變性后對260nm紫外光的光吸收度增加的現(xiàn)象；旋光性下降；粘度降低；生物功能喪失或改變。 加熱dna溶液，使其對260nm紫外光的吸收度突然增加，達到其最大值一半時的溫度，就是dna的變性溫度（融解溫度，tm）。tm的高低與dna分子中g(shù)+c的含量有關(guān)，g+c的含量越高，則tm越高。十一、dna的復性與分子雜交：將變性dna經(jīng)退火處理，使其重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程，稱為dna的復性。兩條來源不同的單鏈核酸（dna或rna），只要它們有大致相同的互補堿基順序，以退火處理即可復性，形成新的雜種雙螺旋，這一現(xiàn)象稱為核酸的分子雜交。核酸雜交可以是dna-dna，也可以是dna-rna雜交。不同來源的，具有大致相同互補堿基順序的核酸片段稱為同源順序。4常用的核酸分子雜交技術(shù)有：原位雜交、斑點雜交、southern雜交及northern雜交等。在核酸雜交分析過程中，常將已知順序的核酸片段用放射性同位素或生物素進行標記，這種帶有一定標記的已知順序的核酸片段稱為探針。 十二、核酸酶：凡是能水解核酸的酶都稱為核酸酶。凡能從多核苷酸鏈的末端開始水解核酸的酶稱為核酸外切酶，凡能從多核苷酸鏈中間開始水解核酸的酶稱為核酸內(nèi)切酶。能識別特定的核苷酸順序，并從特定位點水解核酸的內(nèi)切酶稱為限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） 第四章酶一、酶的概念：酶（enzyme）是由活細胞產(chǎn)生的生物催化劑，這種催化劑具有極高的催化效率和高度的底物特異性，其化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)。酶按照其分子結(jié)構(gòu)可分為單體酶、寡聚酶和多酶體系（多酶復合體和多功能酶）三大類。二、酶的分子組成：酶分子可根據(jù)其化學組成的不同，可分為單純酶和結(jié)合酶（全酶）兩類。結(jié)合酶則是由酶蛋白和輔助因子兩部分構(gòu)成，酶蛋白部分主要與酶的底物特異性有關(guān)，輔助因子則與酶的催化活性有關(guān)。與酶蛋白疏松結(jié)合并與酶的催化活性有關(guān)的耐熱低分子有機化合物稱為輔酶。與酶蛋白牢固結(jié)合并與酶的催化活性有關(guān)的耐熱低分子有機化合物稱為輔基。 三、輔酶與輔基的來源及其生理功用：輔酶與輔基的生理功用主要是：運載氫原子或電子，參與氧化還原反應。運載反應基團，如?；被?、烷基、羧基及一碳單位等，參與基團轉(zhuǎn)移。大部分的輔酶與輔基衍生于維生素。維生素（vitamin)是指一類維持細胞正常功能所必需的，但在許多生物體內(nèi)不能自身合成而必須由食物供給的小分子有機化合物。維生素可按其溶解性的不同分為脂溶性維生素和水溶性維生素兩大類。脂溶性維生素有vita、vitd、vite和vitk四種；水溶性維生素有vitb1，vitb2，vitpp，vitb6，vitb12，vitc，泛酸，生物素，葉酸等。1.tpp：即焦磷酸硫胺素，由硫胺素（vit b1）焦磷酸化而生成，是脫羧酶的輔酶，在體內(nèi)參與糖代謝過程中-酮酸的氧化脫羧反應。2.fmn和fad：即黃素單核苷酸（fmn）和黃素腺嘌呤二核苷酸（fad），是核黃素（vitb2）的衍生物。fmn或fad通常作為脫氫酶的輔基，在酶促反應中作為遞氫體（雙遞氫體）。3.nad+和nadp+：即尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（nad+，輔酶）和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nadp+，輔酶），是vit pp的衍生物。nad+和nadp+主要作為脫氫酶的輔酶，在酶促反應中起遞氫體的作用，為單遞氫體。4.磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺：是vit b6的衍生物。磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺可作為氨基轉(zhuǎn)移酶，氨基酸脫羧酶，半胱氨酸脫硫酶等的輔酶。5.coa：泛酸（遍多酸）在體內(nèi)參與構(gòu)成輔酶a（coa）。coa中的巰基可與羧基以高能硫酯鍵結(jié)合，在糖、脂、蛋白質(zhì)代謝中起傳遞?；淖饔?，是?；傅妮o酶。6.生物素：是羧化酶的輔基，在體內(nèi)參與co2的固定和羧化反應。7. fh4：由葉酸衍生而來。四氫葉酸是體內(nèi)一碳單位基團轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)中的輔酶。8. vit b12衍生物：vit b12分子中含金屬元素鈷，故又稱為鈷胺素。vit b12在體內(nèi)有多種活性形式，如5-脫氧腺苷鈷胺素、甲基鈷胺素等。其中，5-脫氧腺苷鈷胺素參與構(gòu)成變位酶的輔酶，甲基鈷胺素則是甲基轉(zhuǎn)移酶的輔酶。 5四、金屬離子的作用：1. 穩(wěn)定構(gòu)象：穩(wěn)定酶蛋白催化活性所必需的分子構(gòu)象；2. 構(gòu)成酶的活性中心：作為酶的活性中心的組成成分，參與構(gòu)成酶的活性中心；3. 連接作用：作為橋梁，將底物分子與酶蛋白螯合起來。 五、酶的活性中心：酶分子上具有一定空間構(gòu)象的部位，該部位化學基團集中，直接參與將底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的反應過程，這一部位就稱為酶的活性中心。參與構(gòu)成酶的活性中心的化學基團，有些是與底物相結(jié)合的，稱為結(jié)合基團，有些是催化底物反應轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物的，稱為催化基團，這兩類基團統(tǒng)稱為活性中心內(nèi)必需基團。在酶的活性中心以外，也存在一些化學基團，主要與維系酶的空間構(gòu)象有關(guān)，稱為酶活性中心外必需基團。 六、酶促反應的特點：1具有極高的催化效率：酶的催化效率可比一般催化劑高1061020倍。酶能與底物形成es中間復合物，從而改變化學反應的進程，使反應所需活化能閾大大降低，活化分子的數(shù)目大大增加，從而加速反應進行。2具有高度的底物特異性：一種酶只作用于一種或一類化合物，以促進一定的化學變化，生成一定的產(chǎn)物，這種現(xiàn)象稱為酶作用的特異性。絕對特異性：一種酶只能作用于一種化合物，以催化一種化學反應，稱為絕對特異性，如琥珀酸脫氫酶。 相對特異性：一種酶只能作用于一類化合物或一種化學鍵，催化一類化學反應，稱為相對特異性，如脂肪酶。 立體異構(gòu)特異性：一種酶只能作用于一種立體異構(gòu)體，或只能生成一種立體異構(gòu)體，稱為立體異構(gòu)特異性，如l-精氨酸酶。3酶的催化活性是可以調(diào)節(jié)的：如代謝物可調(diào)節(jié)酶的催化活性，對酶分子的共價修飾可改變酶的催化活性，也可通過改變酶蛋白的合成來改變其催化活性。 七、酶促反應的機制：1中間復合物學說與誘導契合學說：酶催化時，酶活性中心首先與底物結(jié)合生成一種酶-底物復合物（es），此復合物再分解釋放出酶，并生成產(chǎn)物，即為中間復合物學說。當?shù)孜锱c酶接近時，底物分子可以誘導酶活性中心的構(gòu)象以生改變，使之成為能與底物分子密切結(jié)合的構(gòu)象，這就是誘導契合學說。2與酶的高效率催化有關(guān)的因素：趨近效應與定向作用；張力作用；酸堿催化作用；共價催化作用；酶活性中心的低介電區(qū)（表面效應）。 八、酶促反應動力學：酶反應動力學主要研究酶催化的反應速度以及影響反應速度的各種因素。在探討各種因素對酶促反應速度的影響時，通常測定其初始速度來代表酶促反應速度，即底物轉(zhuǎn)化量<5%時的反應速度。1底物濃度對反應速度的影響：底物對酶促反應的飽和現(xiàn)象：由實驗觀察到，在酶濃度不變時，不同的底物濃度與反應速度的關(guān)系為一矩形雙曲線，即當?shù)孜餄舛容^低時，反應速度的增加與底物濃度的增加成正比（一級反應）；此后，隨底物濃度的增加，反應速度的增加量逐漸減少（混合級反應）；最后，當?shù)孜餄舛仍黾拥揭欢繒r，反應速度達到一最大值，不再隨底物濃度的增加而增加（零級反應）。米氏方程及米氏常數(shù)：根據(jù)上述實驗結(jié)果，michaelis & menten 于1913年推導出了上述矩形雙曲線的數(shù)學表達式，即米氏方程： = vmaxs/(km+s)。其中，vmax為最大反應速度，km為米氏常數(shù)。 km和vmax的意義：當=vmax/2時，km=s。因此，km等于酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。當k-1>>k+2