日常分析的注意點(diǎn),1：液相系統(tǒng)維護(hù)流程圖,吸濾頭,單向閥,柱塞密封圈,線路過濾器,手動(dòng)進(jìn)樣器,檢測(cè)器,日常維護(hù),材料：不銹鋼燒結(jié)，孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用520的稀硝酸，超聲波清洗，再用蒸餾水清洗注意點(diǎn)：吸濾頭拆下時(shí)不必將塑料管剪斷,吸濾頭,日常維護(hù),單向閥,LC-10ATvp泵：串聯(lián)式往復(fù)泵,LC-10ADvp泵：并聯(lián)式往復(fù)泵,日常維護(hù),單向閥結(jié)構(gòu),流動(dòng)相,單向閥原理,日常維護(hù),故障1：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生負(fù)壓，使寶石球與墊片分開2）拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗,單向閥,日常維護(hù),故障2：寶石球或塑料墊片受污導(dǎo)致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大措施：拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗,單向閥,日常維護(hù),故障：密封圈磨損而導(dǎo)致密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或漏夜措施：更換密封圈注意點(diǎn)：更換密封圈拆卸泵頭前，柱塞桿復(fù)位（PSET）,柱塞密封圈,日常維護(hù),故障：堵塞現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或壓力偏高措施：5稀硝酸，超聲波清洗判斷依據(jù)：關(guān)閉排液閥，斷開出口管路，設(shè)定流速1mL/min，如壓力3kgf/cm2，則可能堵塞。,線路過濾器,排液閥,壓力傳感器,線路過濾器,流動(dòng)相,日常維護(hù),紫外檢測(cè)器,參比池,樣品池,光線,光電倍增管,日常維護(hù),故障：樣品池受污表現(xiàn)：樣品池和參比池能量相差較大檢查方法：設(shè)定250nm波長(zhǎng)，通甲醇或水，查看SMPLEN和REFEN，如兩者相差較大，則樣品池受污。措施：用針筒注入異丙醇，清洗樣品池；如污染嚴(yán)重，拆開樣品池，將透鏡等放入異丙醇中超聲波清洗。,紫外檢測(cè)器,日常維護(hù),更換氘燈（紫外檢測(cè)器）,判斷氘燈能量：設(shè)定220nm波長(zhǎng)，檢查參比池能量，如能量低于800，需更換氘燈。操作注意點(diǎn)：不要用手直接接觸氘燈表面,2：手動(dòng)進(jìn)樣器的樣品注入,日常維護(hù),操作注意點(diǎn)：1）插針應(yīng)插到底2）進(jìn)樣應(yīng)使用液相色譜專用平頭進(jìn)樣針3）清洗應(yīng)使用專用針口清洗器,手動(dòng)進(jìn)樣器,定子,轉(zhuǎn)子,塑料箍,彈簧,不銹鋼套,3：有機(jī)溶劑的優(yōu)與劣,什么時(shí)候需要“HPLC”級(jí)有機(jī)溶劑,1.等濃度洗脫法的微量分析用光譜進(jìn)行判斷2.梯度洗脫法分析,3.1等濃度洗脫法的微量分析,優(yōu)級(jí),噪聲,噪聲,目的成分,目的成分,HPLC級(jí),優(yōu)級(jí),HPLC級(jí),測(cè)試波長(zhǎng)上的噪聲水平與流動(dòng)相的吸光度成正比,乙腈,3.2梯度洗脫法分析,需要“HPLC”級(jí)有機(jī)溶劑理由：即使沒有注入被測(cè)樣品，因流動(dòng)相的不純物質(zhì)，造成出峰。,梯度洗脫法的注意點(diǎn),1.流動(dòng)相使用HPLC級(jí)有機(jī)溶劑。2.查看空白實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)。3.遵守分析周期。（最初的分析數(shù)據(jù)不采用）,4:談?wù)劸彌_液,4:談?wù)劸彌_液,選擇緩沖液的步驟1.確定最佳分離狀態(tài)時(shí)的流動(dòng)相pH2.選擇具有與流動(dòng)相的pH相近的pKa的緩沖液（即使?jié)舛认∫簿哂休^強(qiáng)能力的緩沖液）3.確認(rèn)檢測(cè)波長(zhǎng)下緩沖液是否有大的吸收（在波長(zhǎng)210nm附近進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，不能用醋酸和檸檬酸的緩沖液）,代表性弱酸的pKa,pK1pK2pK3醋酸4.87檸檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.32,5:關(guān)于脫氣,脫氣的目的,1.防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障2.防止由溶解（在液體中的）氣體量的變動(dòng)引起的檢測(cè)不穩(wěn)定程度1）示差折射率檢測(cè)器*使折射率變化2）UV檢測(cè)器（200nm以下）*溶解氧氣有吸收3）熒光檢測(cè)器*溶解氧氣有消光作用,脫氣的方法,1.吸氣器法*可以抑制制做流動(dòng)相時(shí)產(chǎn)生的氣泡*只是暫時(shí)的脫氣法*不能解決因溶解氣體造成的問題2.He清除法3.使用氟樹脂膜的減壓脫氣法,He清除法,調(diào)壓閥,排氣閥,往送液泵,流動(dòng)相,過濾器,使用氟樹脂膜的減壓脫氣法,氟樹脂膜,真空室,往送液泵,真空泵,控制器,流動(dòng)相,6:予處理柱和防護(hù)柱,予處理柱和防護(hù)柱的位置,予處理柱,防護(hù)柱,泵,進(jìn)樣器,分析柱,予處理柱的作用,用于免除流動(dòng)相的影響例如1.在離子色譜分析中，免除多價(jià)離子的不良影響。2.在梯度洗脫分析中，使鬼峰后移，不影響目的成分的分析。3.防止硅膠載體的溶解。（使用堿性或含有胺的流動(dòng)相時(shí)）,防護(hù)柱的作用,代替分析柱捕集樣品中的雜質(zhì)，容易更換，降低成本。,7:關(guān)于ODS柱補(bǔ)修,峰的變形,根部變寬,有肩或分叉,峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因,1.柱子劣化（進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙