1、艾滋病梅毒丙肝實驗室檢測及艾滋病梅毒丙肝實驗室檢測及影響結果因素分析影響結果因素分析1講課材料內(nèi)容提要：內(nèi)容提要：1.1.艾滋病檢測程序、方法應用和注意事項。艾滋病檢測程序、方法應用和注意事項。2.2.梅毒檢測程序、方法應用和注意事項。梅毒檢測程序、方法應用和注意事項。3.3.丙肝檢測程序、方法應用和注意事項。丙肝檢測程序、方法應用和注意事項。4.4.影響實驗室檢測結果的因素分析影響實驗室檢測結果的因素分析2講課材料艾滋病檢測方法艾滋病檢測方法常用常用hivhiv病原學檢測方法病原學檢測方法: : 1.1. 核酸檢測核酸檢測（ pcrpcr、病毒載量、病毒載量） 2. 2. 病毒培養(yǎng)分離病毒培

2、養(yǎng)分離 3.3. p24p24抗原檢測抗原檢測常用常用hivhiv抗體檢測方法抗體檢測方法: : 初篩：初篩：1.1.酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法 elisaelisa：第三代、第四代第三代、第四代 2.2.快速檢測快速檢測 rtrt：金標、硒標金標、硒標 3.3.簡單法簡單法 pa: pa: 明膠顆粒凝集明膠顆粒凝集 確證：免疫印跡法確證：免疫印跡法 wb:wb:（western blotwestern blot）、ribariba其他相關檢測方法其他相關檢測方法: : 免疫功能測定：免疫功能測定：cd4/cd8cd4/cd8檢測檢測3講課材料hivhiv抗體檢測目的抗體檢測目的 1 hiv

3、1 hiv抗體檢測可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測等?？贵w檢測可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測等。 2 2 以診斷為目的的檢測是為了確定個體以診斷為目的的檢測是為了確定個體hivhiv感染狀況，感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進行的包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進行的體檢等。體檢等。 3 3 以血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播以血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播hivhiv，包括獻血員篩查和原料血漿篩查。包括獻血員篩查和原料血漿篩查。 4 4 以監(jiān)測為目的的檢測是為了解不同人群以監(jiān)測為目的的檢測是為了解不同人群hivhiv感染率感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重

4、點人群和一般及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點人群和一般人群。人群。4講課材料 1 1 根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。 2 2 嚴格遵守實驗室嚴格遵守實驗室sopsop。 3 3 篩查試驗陽性，須作確證試驗。篩查試驗陽性，須作確證試驗。 4 4 篩查試驗陰性，篩查試驗陰性， 不應做確證試驗。不應做確證試驗。 5 5 篩查及確證試驗陽性均應做好咨詢工篩查及確證試驗陽性均應做好咨詢工作。作。hivhiv抗體檢測的要點抗體檢測的要點 5講課材料樣品樣品初篩試驗初篩試驗篩查試劑篩查試劑陽性反應陽性反應陰性反應陰性反應復檢試驗復檢試驗原有試劑原有試劑 + +另一不同原

5、理另一不同原理（或廠家或廠家 ）試劑或另外兩種試劑或另外兩種不同原理不同原理 （或廠家或廠家 ）試劑試劑均陽性反應均陽性反應一陰一陽一陰一陽均陰性反應均陰性反應確證試驗確證試驗報告陰性報告陰性圖圖1 1 hivhiv抗體篩查檢測流程抗體篩查檢測流程hivhiv抗體篩查檢測流程抗體篩查檢測流程6講課材料初篩試驗初篩試驗 1 1、hivhiv抗體檢測分為篩查試驗（包括初篩和復抗體檢測分為篩查試驗（包括初篩和復檢）和確證試驗。檢）和確證試驗。 2 2、根據(jù)檢測目的選用符合要求的篩查試劑對、根據(jù)檢測目的選用符合要求的篩查試劑對樣品進行初篩檢測，對呈陰性反應的樣品，可樣品進行初篩檢測，對呈陰性反應的樣品

6、，可出具出具hivhiv抗體陰性（抗體陰性（- -）報告；對呈陽性反應的）報告；對呈陽性反應的樣品，需要進一步做復檢試驗和確證試驗。樣品，需要進一步做復檢試驗和確證試驗。 7講課材料復檢試驗復檢試驗 對初篩呈陽性反應的樣品，應使用原有試劑和另外一對初篩呈陽性反應的樣品，應使用原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進行復檢試驗。同廠家的試劑進行復檢試驗。 如果初篩檢測使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復檢必須包如果初篩檢測使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復檢必須包括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。 如兩種試劑復

7、檢均呈陰性反應，則報告如兩種試劑復檢均呈陰性反應，則報告hivhiv抗體陰性抗體陰性（- -）；如均呈陽性反應，或一陰一陽，需送艾滋病確證）；如均呈陽性反應，或一陰一陽，需送艾滋病確證實驗室進行確證試驗。實驗室進行確證試驗。 如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測呈陽性反應，而抗體試劑如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測呈陽性反應，而抗體試劑檢測為陰性反應，則應考慮進行檢測為陰性反應，則應考慮進行hiv-1 p24hiv-1 p24抗原或核酸檢抗原或核酸檢測，必要時進行隨訪。測，必要時進行隨訪。8講課材料確證試驗確證試驗 1 1 確證試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊確證試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準、

8、在有效期內(nèi)的試劑。批準、在有效期內(nèi)的試劑。 2 2 確證樣品可采用血清、血漿、濾紙干血斑樣品。確證樣品可采用血清、血漿、濾紙干血斑樣品。 3 3 確證方法包括免疫印跡試驗（確證方法包括免疫印跡試驗（wbwb）、條帶免疫）、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗（試驗、放射免疫沉淀試驗（riparipa）及免疫熒光試）及免疫熒光試驗（驗（ifaifa）等。）等。9講課材料hivhiv抗體不確定（抗體不確定（） 結合流行病學資料，可以在結合流行病學資料，可以在4 4周后隨訪檢測，如帶周后隨訪檢測，如帶型沒有進展或呈陰性反應，則報告陰性；如隨訪期間型沒有進展或呈陰性反應，則報告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應，

9、則報告陽性；如隨訪期間帶型有進展，出現(xiàn)陽性反應，則報告陽性；如隨訪期間帶型有進展，但不滿足陽性標準，應繼續(xù)隨訪到但不滿足陽性標準，應繼續(xù)隨訪到8 8周。如帶型沒有進周。如帶型沒有進展或呈陰性反應則報告陰性；滿足展或呈陰性反應則報告陰性；滿足hivhiv抗體陽性診斷標抗體陽性診斷標準則報告陽性，不滿足陽性判斷標準可視情況決定是準則報告陽性，不滿足陽性判斷標準可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。否繼續(xù)隨訪。 隨訪期間可根據(jù)需要，檢測病毒核酸或隨訪期間可根據(jù)需要，檢測病毒核酸或p24p24抗原作抗原作為輔助診斷。如果出現(xiàn)為輔助診斷。如果出現(xiàn)hiv-2hiv-2型的特異性指示條帶，根型的特異性指示條帶，根據(jù)實際

10、情況需用據(jù)實際情況需用hiv-2hiv-2型免疫印跡試劑再做型免疫印跡試劑再做hiv-2hiv-2的抗的抗體確證試驗或體確證試驗或hiv-2hiv-2核酸檢測，以進一步明確核酸檢測，以進一步明確hiv-2hiv-2感感染狀態(tài)，疑難樣品送國家艾滋病參比實驗室進一步分染狀態(tài)，疑難樣品送國家艾滋病參比實驗室進一步分析。析。 10講課材料hiv-2hiv-2抗體陽性抗體陽性 出現(xiàn)出現(xiàn)hiv-2hiv-2型特異性指示帶的樣品：如果同時型特異性指示帶的樣品：如果同時呈呈hiv-1hiv-1抗體陽性反應，報告抗體陽性反應，報告hiv-1hiv-1抗體陽性，抗體陽性，不推薦進一步做不推薦進一步做hiv-2hi

11、v-2抗體確證試驗；如果同抗體確證試驗；如果同時呈時呈hiv-1hiv-1抗體不確定或陰性反應，需用抗體不確定或陰性反應，需用hiv-hiv-2 2型確證試劑再做型確證試劑再做hiv-2hiv-2的抗體確證試驗。的抗體確證試驗。 同時符合以下二條標準，即出現(xiàn)至少同時符合以下二條標準，即出現(xiàn)至少2 2條條envenv帶帶（gp36gp36和和gp140/ gp105gp140/ gp105），和試劑盒提供），和試劑盒提供的陽性判定標準，可判為的陽性判定標準，可判為hiv-2hiv-2抗體陽性?？贵w陽性。11講課材料艾滋病病毒感染產(chǎn)婦所生兒童12個月進行hiv抗體篩查試驗用另一種不同原理或不同廠家

12、生產(chǎn)的篩查試劑再次檢測18個月時再進行hiv抗體篩查試驗用另一種不同原理或不同廠家生產(chǎn)的篩查試劑再次檢測確證試驗報告hiv抗體檢測結果陽性提供咨詢，繼續(xù)隨訪，4周后再次進行確證試驗陰性陽性陰性陰性陰性陽性陽性陽性陽性陰性報告hiv抗體檢測結果陰性不確定圖圖4 艾艾滋滋病病感感染染產(chǎn)產(chǎn)婦婦所所生生兒兒童童hiv抗抗體體檢檢測測流流程程孕產(chǎn)婦新生兒檢測孕產(chǎn)婦新生兒檢測12講課材料艾滋病快速檢測試驗（艾滋病快速檢測試驗（rtrt） 是在是在elisaelisa基礎上發(fā)展起來的一種檢測技術，基礎上發(fā)展起來的一種檢測技術，它用膠體金或硒標記抗原、抗體后以層析方法它用膠體金或硒標記抗原、抗體后以層析方法進

13、行檢測。進行檢測。 突出優(yōu)點為快速、試劑便于保存、檢測不需要突出優(yōu)點為快速、試劑便于保存、檢測不需要特殊設備并可以單份檢測特殊設備并可以單份檢測 ，比較適用于基層，比較適用于基層醫(yī)療單位和標本初篩。醫(yī)療單位和標本初篩。 挑戰(zhàn)：進一步提高檢測靈敏度和特異性，實現(xiàn)挑戰(zhàn)：進一步提高檢測靈敏度和特異性，實現(xiàn)檢測多元化，進行定量和半定量檢測膠體金紙檢測多元化，進行定量和半定量檢測膠體金紙條將會更加廣泛地應用于各個領域。條將會更加廣泛地應用于各個領域。13講課材料 快速試劑使用中存在的問題快速試劑使用中存在的問題 快速檢測只是初篩檢測，存在較高的假陽性率和假陰快速檢測只是初篩檢測，存在較高的假陽性率和假陰

14、性率；性率； 技術上屬于主觀判讀，不具備標準化條件；技術上屬于主觀判讀，不具備標準化條件； 快速檢測的質(zhì)量控制問題目前沒有有效方法；快速檢測的質(zhì)量控制問題目前沒有有效方法； 價格是常規(guī)技術的價格是常規(guī)技術的5 5倍。行政經(jīng)費政策不支持，個人支倍。行政經(jīng)費政策不支持，個人支付價位高；付價位高； 存在較大的批間誤差，加上不屬于政策規(guī)定項目，風存在較大的批間誤差，加上不屬于政策規(guī)定項目，風險較大，基層醫(yī)療衛(wèi)生單位不愿意承擔責任。險較大，基層醫(yī)療衛(wèi)生單位不愿意承擔責任。 擔心敏感性不夠高，不敢出陰性報告；擔心敏感性不夠高，不敢出陰性報告；14講課材料hiv-1hiv-1抗原檢測的抗原檢測的用途：用途：

15、 1 hiv-11 hiv-1感染窗口期、感染窗口期、hivhiv抗體不確定或抗體不確定或hiv-hiv-1 1陽性母親所生嬰兒的鑒別診斷。陽性母親所生嬰兒的鑒別診斷。 2 2 第四代第四代hivhiv檢測試劑的陽性結果的輔助診斷。檢測試劑的陽性結果的輔助診斷。 3 3 監(jiān)測病程進展或抗病毒治療效果。監(jiān)測病程進展或抗病毒治療效果。 4 hiv4 hiv分離培養(yǎng)，病毒復制狀況的監(jiān)測。分離培養(yǎng)，病毒復制狀況的監(jiān)測。 15講課材料hiv-1hiv-1抗原檢測方法和結果報告抗原檢測方法和結果報告 方法：方法：elisaelisa，有定量檢測。，有定量檢測。 結果報告和解釋：結果報告和解釋： hiv-1

16、 p24hiv-1 p24抗原篩選試驗有反應的標本必須經(jīng)過中和抗原篩選試驗有反應的標本必須經(jīng)過中和試驗確證以后才能判斷陽性或陰性。試驗確證以后才能判斷陽性或陰性。 hiv-1 p24hiv-1 p24抗原陽性僅作為抗原陽性僅作為hivhiv感染的輔助診斷依據(jù)，感染的輔助診斷依據(jù)，不能據(jù)此確診。不能據(jù)此確診。 hiv-1 p24hiv-1 p24抗原陰性結果不能排除抗原陰性結果不能排除hivhiv感染。感染。 監(jiān)測病程進展或抗病毒治療效果應進行監(jiān)測病程進展或抗病毒治療效果應進行hiv-1 p24hiv-1 p24抗抗原的定量檢測。原的定量檢測。16講課材料hivhiv核酸檢測核酸檢測的意義的意義

17、 1 1 早期診斷：嬰幼兒或成人有急性早期診斷：嬰幼兒或成人有急性hivhiv感染綜合癥或流行感染綜合癥或流行病學史，且不同時間的兩次病學史，且不同時間的兩次hivhiv核酸檢測結果均為陽性，核酸檢測結果均為陽性，即可診斷。使用多樣品集合的方法，即可診斷。使用多樣品集合的方法，hivhiv抗體陰性的高?？贵w陰性的高危人群樣品進行集合核酸檢測，及時發(fā)現(xiàn)窗口期感染。人群樣品進行集合核酸檢測，及時發(fā)現(xiàn)窗口期感染。 2 2 疑難樣本的輔助診斷：幫助提供疑難樣本的輔助診斷：幫助提供hivhiv感染早期或終末期感染早期或終末期的證據(jù)。的證據(jù)。 3 3 遺傳變異監(jiān)測：用于遺傳變異監(jiān)測：用于hiv-1hiv-

18、1和和hiv-2hiv-2感染的鑒別診斷、感染的鑒別診斷、hivhiv感染傳播鏈的分析、感染傳播鏈的分析、hivhiv基因亞型和重組病毒的鑒定基因亞型和重組病毒的鑒定和分析以及人群和分析以及人群hivhiv遺傳變異趨勢的監(jiān)測。遺傳變異趨勢的監(jiān)測。 4 4 耐藥性監(jiān)測：了解耐藥性病毒株流行的態(tài)勢和指導臨耐藥性監(jiān)測：了解耐藥性病毒株流行的態(tài)勢和指導臨床醫(yī)生判斷抗病毒治療效果和修改抗病毒治療方案。床醫(yī)生判斷抗病毒治療效果和修改抗病毒治療方案。 5 5 病程監(jiān)控及預測：有助于確定疾病發(fā)展的階段，以確病程監(jiān)控及預測：有助于確定疾病發(fā)展的階段，以確定相應的治療方案。定相應的治療方案。 6 6 指導抗病毒治

19、療及療效判定指導抗病毒治療及療效判定17講課材料艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童hivhiv感染早期診斷檢測流程感染早期診斷檢測流程 hiv感染產(chǎn)婦所生嬰兒盡快采集第二份血樣本，送檢出生后6周采集第一份血樣本（可制備成濾紙片干血斑（dbs），或edta抗凝全血），送檢繼續(xù)隨訪報告陽性嬰兒滿3個月，再次采集血樣本，送檢盡快再次采集血樣本，送檢報告陰性呈陽性反應呈陰性反應呈陽性反應呈陰性反應呈陽性反應呈陽性反應呈陰性反應呈陰性反應18講課材料hiv-1hiv-1耐藥檢測耐藥檢測 1 1 耐藥監(jiān)測耐藥監(jiān)測 用于用于hiv-1hiv-1感染人群和抗病毒治療人群。用于新近感感染人群和抗病毒治

20、療人群。用于新近感染人群的耐藥性監(jiān)測，了解耐藥毒株流行的情況；用染人群的耐藥性監(jiān)測，了解耐藥毒株流行的情況；用于治療前人群的監(jiān)測，指導制定一線抗病毒治療方案；于治療前人群的監(jiān)測，指導制定一線抗病毒治療方案；用于抗病毒治療人群的耐藥性監(jiān)測，進行用于抗病毒治療人群的耐藥性監(jiān)測，進行hiv-1hiv-1耐藥耐藥發(fā)生、發(fā)展趨勢以及影響因素的分析，指導和完善大發(fā)生、發(fā)展趨勢以及影響因素的分析，指導和完善大規(guī)模公共衛(wèi)生模式抗病毒治療的程序，以及制定二線規(guī)模公共衛(wèi)生模式抗病毒治療的程序，以及制定二線治療方案。治療方案。.2 .2 耐藥檢測耐藥檢測 用于個體患者的耐藥檢測。在抗病毒治療前進行耐藥用于個體患者的

21、耐藥檢測。在抗病毒治療前進行耐藥檢測，可指導臨床醫(yī)生制定抗病毒治療方案，保證抗檢測，可指導臨床醫(yī)生制定抗病毒治療方案，保證抗病毒治療的效果；在抗病毒治療過程中進行耐藥檢測，病毒治療的效果；在抗病毒治療過程中進行耐藥檢測，可指導臨床醫(yī)生分析治療失敗的原因，并制定補救治可指導臨床醫(yī)生分析治療失敗的原因，并制定補救治療方案。療方案。19講課材料梅毒實驗室檢測梅毒實驗室檢測病原體檢測病原體檢測 暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡檢查 鍍銀染色鍍銀染色 熒光抗梅毒螺旋體單克隆抗體法熒光抗梅毒螺旋體單克隆抗體法血清學檢測血清學檢測 非梅毒螺旋體抗原血清試驗（非特異性試驗）非梅毒螺旋體抗原血清試驗（非特異性試驗）

22、 梅毒螺旋體抗原血清試驗（特異性試驗）梅毒螺旋體抗原血清試驗（特異性試驗）20講課材料病原體檢測病原體檢測暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡檢查 螺旋狀，纖細、白色、螺旋狀，纖細、白色、有折光的。有折光的。 長約為兩個紅細胞，有長約為兩個紅細胞，有6-126-12個螺旋。個螺旋。 具有旋轉(zhuǎn)、蛇行及伸縮具有旋轉(zhuǎn)、蛇行及伸縮等等3 3種特征性的運動方種特征性的運動方式。式。 21講課材料病原體檢測病原體檢測鍍銀染色檢查鍍銀染色檢查方法方法: : 涂片干燥涂片干燥 固定固定 洗滌洗滌 媒染媒染 銀染銀染 鏡檢鏡檢 可見到染成棕褐色的梅毒螺旋體。可見到染成棕褐色的梅毒螺旋體。22講課材料病原體檢測病原體檢測

23、直接熒光法直接熒光法 fitcfitc熒光素標記的抗梅毒螺旋體單克隆抗體與樣本中的熒光素標記的抗梅毒螺旋體單克隆抗體與樣本中的梅毒螺旋體結合，在熒光顯微鏡下，可見到發(fā)黃綠色熒光梅毒螺旋體結合，在熒光顯微鏡下，可見到發(fā)黃綠色熒光的梅毒螺旋體。的梅毒螺旋體。23講課材料病原體檢測病原體檢測 具有快速、方便、易操作的特點。具有快速、方便、易操作的特點。 是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最好方法。是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最好方法。 未見到梅毒螺旋體，不能排除罹患梅毒，可讓患者復查及未見到梅毒螺旋體，不能排除罹患梅毒，可讓患者復查及進行血清學檢查。進行血清學檢查。24講課材料血清學檢測血清學檢測 非梅毒螺旋體抗原血清試

24、驗非梅毒螺旋體抗原血清試驗 性病研究實驗室試驗（性病研究實驗室試驗（vdrlvdrl） 不加熱血清反應素試驗（不加熱血清反應素試驗（usrusr） 快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（rprrpr、trusttrust） 梅毒螺旋體抗原血清試驗梅毒螺旋體抗原血清試驗 熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（fta-absfta-abs） 梅毒螺旋體血球凝集試驗（梅毒螺旋體血球凝集試驗（tphatpha） 梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（tppatppa） 梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫試驗（梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫試驗（tp-elisatp-e

25、lisa） 梅毒螺旋體快速診斷試驗（梅毒螺旋體快速診斷試驗（tp-rttp-rt）25講課材料非梅毒螺旋體抗原血清試驗非梅毒螺旋體抗原血清試驗 以心磷脂、卵磷脂、膽固醇為抗原以心磷脂、卵磷脂、膽固醇為抗原, ,檢測抗類脂質(zhì)抗體（反檢測抗類脂質(zhì)抗體（反應素），主要是應素），主要是igmigm和和iggigg混合體?；旌象w。 方法簡單、快速、價格低廉、敏感性和特異性較好，適用方法簡單、快速、價格低廉、敏感性和特異性較好，適用于大量人群的篩查。于大量人群的篩查。 治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)為陰性，可作為療效觀察、判治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)為陰性，可作為療效觀察、判愈、復發(fā)或再感染指征。愈、復發(fā)或再感染

26、指征。 梅毒治療后部份病人存在血清固定現(xiàn)象。梅毒治療后部份病人存在血清固定現(xiàn)象。 用于鑒別先天梅毒與被動反應素血癥。用于鑒別先天梅毒與被動反應素血癥。 vdrlvdrl試驗主要用于神經(jīng)梅毒的腦脊液檢查。試驗主要用于神經(jīng)梅毒的腦脊液檢查。 艾滋病人合并感染梅毒，血清試驗呈陰性。艾滋病人合并感染梅毒，血清試驗呈陰性。 存在一定的假陽性。存在一定的假陽性。 不同試驗的結果沒有可比性。不同試驗的結果沒有可比性。26講課材料前帶現(xiàn)象前帶現(xiàn)象 指非梅毒螺旋體抗原血清試驗中，有時血清中存在高濃指非梅毒螺旋體抗原血清試驗中，有時血清中存在高濃度的抗體時出現(xiàn)的弱陽性或陰性反應的結果，而臨床上度的抗體時出現(xiàn)的弱陽

27、性或陰性反應的結果，而臨床上又象二期梅毒。又象二期梅毒。 將血清稀釋后再進行試驗，出現(xiàn)陽性的結果。將血清稀釋后再進行試驗，出現(xiàn)陽性的結果。 有前帶現(xiàn)象的病人在臨床治療中應注意有前帶現(xiàn)象的病人在臨床治療中應注意“賈赫氏反應賈赫氏反應”。27講課材料血清固定（耐血清性）血清固定（耐血清性） 指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗在一定指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗在一定時期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)，而保持低滴度陽性（時期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)，而保持低滴度陽性（1 1：4 4以內(nèi)）的反應。以內(nèi)）的反應。 早期的血清固定常與治療量不足或不規(guī)則治療、復發(fā)、早期的血清固定常與治療量不足或不規(guī)則治療、復發(fā)、再感染或有神

28、經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關。再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關。 晚期血清固定與梅毒的類型及開始治療的時間早晚有關。晚期血清固定與梅毒的類型及開始治療的時間早晚有關。對于這種病人，在經(jīng)過詳細的檢查，特別是在除外神經(jīng)、對于這種病人，在經(jīng)過詳細的檢查，特別是在除外神經(jīng)、心臟與其他內(nèi)臟梅毒后，應停止治療，作定期隨訪。心臟與其他內(nèi)臟梅毒后，應停止治療，作定期隨訪。28講課材料梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法方法原理原理優(yōu)點優(yōu)點缺點缺點fta-fta-abs abs 完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為抗原抗原, ,吸收過的梅毒患者血吸收過的梅毒患者血清清熒光素標記的抗人熒光素標

29、記的抗人igig。陽性。陽性可見蘋果綠色熒光的螺旋體可見蘋果綠色熒光的螺旋體 最敏感最敏感特異性高特異性高“金標準金標準操作繁瑣操作繁瑣技術要求高技術要求高tpha tpha 超聲裂解的梅毒螺旋體致敏超聲裂解的梅毒螺旋體致敏紅細胞，產(chǎn)生肉眼可見的凝紅細胞，產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應集反應 敏感性好敏感性好操作簡單操作簡單紅細胞易產(chǎn)紅細胞易產(chǎn)生非特異性生非特異性凝集凝集tppatppa原理與原理與tphatpha相同，以人工合相同，以人工合成的惰性明膠作為載體成的惰性明膠作為載體試劑穩(wěn)定試劑穩(wěn)定結果清晰結果清晰 早期梅毒敏早期梅毒敏感性低于感性低于fta-abs fta-abs tp-tp-elis

30、aelisa超聲裂解或重組的梅毒螺旋超聲裂解或重組的梅毒螺旋體抗原，雙抗原夾心法體抗原，雙抗原夾心法 價格較低價格較低大樣本，大樣本，自動化自動化 廠家間敏感廠家間敏感性和特異性性和特異性差異較大差異較大 tp-rttp-rt雙抗原夾心法，膠體金標記雙抗原夾心法，膠體金標記免疫層析或免疫滲濾試驗免疫層析或免疫滲濾試驗 簡便快速簡便快速無需儀器無需儀器敏感性特異敏感性特異性有待評估性有待評估 29講課材料梅毒血清學試驗的假陽性反應梅毒血清學試驗的假陽性反應非梅毒螺旋體抗原血清學試驗非梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗感染因素感染因素肺結核肺結核病毒性肝炎病毒

31、性肝炎肺炎球菌性肺炎肺炎球菌性肺炎亞急性細菌性心內(nèi)膜炎亞急性細菌性心內(nèi)膜炎傳染性單核細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥水痘、麻疹、鉤端螺旋體病水痘、麻疹、鉤端螺旋體病麻風麻風傳染性單核細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥麻風麻風萊姆病萊姆病瘧疾瘧疾非感染因素非感染因素自身免疫性疾?。ㄏ到y(tǒng)性紅斑自身免疫性疾?。ㄏ到y(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎、干燥狼瘡、類風濕性關節(jié)炎、干燥綜合征等）綜合征等）毒品成癮者毒品成癮者肝硬化肝硬化衰老衰老甲狀腺炎甲狀腺炎系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡30講課材料梅毒血清學試驗假陽性反應的對策梅毒血清學試驗假陽性反應的對策 技術性假陽性反應技術性假陽性反應 由于標本的保存不當（如細菌

32、污染或由于標本的保存不當（如細菌污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒炇也僮麇e誤所造成，溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒炇也僮麇e誤所造成，可通過重復試驗來排除?？赏ㄟ^重復試驗來排除。 生物學假陽性反應生物學假陽性反應 是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗出現(xiàn)陽性。非梅毒螺旋體抗原的生變化，使梅毒血清試驗出現(xiàn)陽性。非梅毒螺旋體抗原的血清學試驗可做血清學試驗可做fta-absfta-abs、tphatpha（tppatppa）等確證試驗進行）等確證試驗進行排除。梅毒螺旋體抗原的血清學試驗時應對病人進行全面排除。梅毒螺旋體抗原的血清學試驗時應對病人進

33、行全面檢查、密切隨訪。檢查、密切隨訪。31講課材料梅毒血清學試驗結果梅毒血清學試驗結果usrusrrprrprvdrlvdrltphatphatppatppafta-absfta-abs 意意 義義 - - - -排除梅毒排除梅毒一期梅毒的早期一期梅毒的早期艾滋病患者合并梅毒艾滋病患者合并梅毒 + + + +現(xiàn)癥梅毒（梅毒孕婦所生嬰兒除外）現(xiàn)癥梅毒（梅毒孕婦所生嬰兒除外） + + - -生物學假陽性生物學假陽性 - - + +早期梅毒經(jīng)治療后早期梅毒經(jīng)治療后32講課材料梅毒血清學試驗結果梅毒血清學試驗結果 非梅毒螺旋體抗原血清試驗非梅毒螺旋體抗原血清試驗 ( (確證是否為現(xiàn)癥病人確證是否為現(xiàn)癥

34、病人) ) 互為確證互為確證 梅毒螺旋體抗原血清試驗梅毒螺旋體抗原血清試驗 ( (確證是否為感染者確證是否為感染者) )33講課材料胎傳梅毒的實驗診斷方法胎傳梅毒的實驗診斷方法 早期先天梅毒早期先天梅毒 暗視野檢查：胎盤、臍帶、鼻分泌物、皮膚黏膜。暗視野檢查：胎盤、臍帶、鼻分泌物、皮膚黏膜。 血清學檢查血清學檢查 晚期先天梅毒晚期先天梅毒 血清學檢查血清學檢查34講課材料胎傳梅毒的實驗診斷胎傳梅毒的實驗診斷 暗視野檢查梅毒螺旋體陽性。暗視野檢查梅毒螺旋體陽性。 患兒非梅毒螺旋體血清抗體滴度持續(xù)上升?；純悍敲范韭菪w血清抗體滴度持續(xù)上升。 患兒非梅毒螺旋體血清學定量試驗結果比母親高患兒非梅毒螺旋

35、體血清學定量試驗結果比母親高4 4倍。倍。 患兒檢出患兒檢出19s-igm19s-igm抗體?？贵w。35講課材料神經(jīng)梅毒的實驗室診斷神經(jīng)梅毒的實驗室診斷 梅毒血清學檢查陽性。梅毒血清學檢查陽性。 腦脊液細胞計數(shù)蛋白質(zhì)測定結果異常。腦脊液細胞計數(shù)蛋白質(zhì)測定結果異常。 腦脊液腦脊液vdrlvdrl試驗陽性。試驗陽性。 腦脊液檢測到腦脊液檢測到igmigm抗體?？贵w。36講課材料丙肝實驗室檢測丙肝實驗室檢測 抗-hcv檢測 hcv 抗原檢測 定量hcv rna檢測 hcv基因型和亞型檢測37講課材料hcv-rnahcv-rna檢測檢測1.hcv rnahcv rna測定定性套式測定定性套式pcr.p

36、cr.2.hcv rna2.hcv rna定量方法包括定量方法包括dnadna探針技術、競爭探針技術、競爭pcrpcr法、熒光定量法等，法、熒光定量法等， 3.3.定量測定有助于了解病毒復制程度、抗病毒治定量測定有助于了解病毒復制程度、抗病毒治療的選擇及療效評估等。療的選擇及療效評估等。4.4.對對hcv rnahcv rna尚可進行基因分型，方法包括序列尚可進行基因分型，方法包括序列測定、測定、pcrpcr、酶切、探針雜交等。、酶切、探針雜交等。 38講課材料4 4影響實驗室檢測的因素分析影響實驗室檢測的因素分析每一個生物學實驗都有可能得出假陽性或假陰每一個生物學實驗都有可能得出假陽性或假陰

37、性的結果性的結果生物學實驗的準確性用以下三種參數(shù)來描述生物學實驗的準確性用以下三種參數(shù)來描述: : 敏感性敏感性 特異性特異性 （陰、陽性）預示值（陰、陽性）預示值 應考慮人群感染率應考慮人群感染率39講課材料4.14.1檢測結果準確性的計算檢測結果準確性的計算檢測結果檢測結果真實的狀態(tài)真實的狀態(tài)合計合計感染感染未感染未感染陽性陽性a ab ba+ba+b陰性陰性c cd dc+dc+d合計合計a+ca+cb+db+da+b+c+da+b+c+da= a= 感染，檢測陽性結果感染，檢測陽性結果( (真陽性真陽性) )b= b= 未感染，檢測陽性結果未感染，檢測陽性結果( (假陽性假陽性) )c= c= 感染，檢測陰性結果感染，檢測陰性結果( (假陰性假陰性) )d= d= 未感染，檢測陰性結果未感染，檢測陰性結果( (真陰性真陰性) )a+c = a