1、第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿莨菪烷類抗膽堿藥物的分析藥物的分析一、典型藥物一、典型藥物 由莨菪烷衍生氨基醇和不同有機(jī)酸縮合成酯類生物堿,常見(jiàn)顛茄生物堿類和古柯生物堿第一節(jié)第一節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)NOCH3OHOHHOCH3ON,H2SO4,H2O2OHO,HBr,3H2O 硫酸阿托品硫酸阿托品 氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿（atropine sulfate） ( copolamine hydrobromide）-（羥甲基）苯乙酸（羥甲基）苯乙酸8-甲基甲基-8-氮雜雙環(huán)氮雜雙環(huán)3，2，1-3-辛酯辛酯硫酸硫酸鹽鹽9-甲基甲基-3-氧雜氧雜-9-氮雜三環(huán)氮雜三

2、環(huán)3.3.1.02,4壬烷壬烷-7-醇醇 (-)-alpha-(羥甲基羥甲基)苯乙酸酯苯乙酸酯NHOOHOHH3C2 H2SO4 硫酸莨菪堿硫酸莨菪堿 NOHHOOHOHH3C HBr 氫溴酸山莨菪堿氫溴酸山莨菪堿 1.1.水解性水解性 結(jié)構(gòu)中具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。結(jié)構(gòu)中具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。 阿托品，水解生成莨菪醇阿托品，水解生成莨菪醇()()和莨菪酸和莨菪酸()()。NCH3OCOCHCH2OH阿托品 NCH3OHHCOCHCH2OH+OH莨菪醇莨菪醇() 莨菪酸莨菪酸()二、主要理化性質(zhì)二、主要理化性質(zhì)2. 2. 堿性堿性 阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有叔阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)

3、中，五元脂環(huán)上含有叔胺氮原子胺氮原子, ,具有較強(qiáng)的堿性具有較強(qiáng)的堿性, ,易與酸成鹽。如阿托品易與酸成鹽。如阿托品的的pKpKb1b1為為4.354.35。 東莨菪堿三元氧環(huán)的存在，東莨菪堿三元氧環(huán)的存在，N N上孤電子產(chǎn)生顯著上孤電子產(chǎn)生顯著立體效應(yīng)（增強(qiáng)了空間位阻），使立體效應(yīng)（增強(qiáng)了空間位阻），使N N原子不易給出電原子不易給出電子，堿性較弱（與莨菪堿比）。子，堿性較弱（與莨菪堿比）。 3. 3. 旋光性旋光性 氫溴酸東莨菪堿結(jié)構(gòu)中含有不對(duì)稱碳原子，呈左旋體，氫溴酸東莨菪堿結(jié)構(gòu)中含有不對(duì)稱碳原子，呈左旋體，比旋度為比旋度為-24-24至至-27-27，而阿托品結(jié)構(gòu)中雖然也含有不對(duì)稱，而

4、阿托品結(jié)構(gòu)中雖然也含有不對(duì)稱碳碳原子，但因外消旋化而為消旋體，無(wú)旋光性。利用此性質(zhì)可原子，但因外消旋化而為消旋體，無(wú)旋光性。利用此性質(zhì)可區(qū)別阿托品與東莨菪堿。區(qū)別阿托品與東莨菪堿。 NOCH3OHOHHOCH3ON,H2SO4,H2O2OHO,HBr,3H2O硫酸阿托品硫酸阿托品 氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿 第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)生物堿生物堿水解水解莨菪酸莨菪酸發(fā)煙硝酸發(fā)煙硝酸 三硝基衍生物三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體固體KOHKOH有色的醌型產(chǎn)物有色的醌型產(chǎn)物莨菪酸用發(fā)煙硝酸加熱處理，發(fā)生硝基化反應(yīng)，莨菪酸用發(fā)煙硝酸加熱處理，發(fā)生硝基化反應(yīng)，生成三硝基衍生物；再加氫氧化鉀

5、醇液和一小粒生成三硝基衍生物；再加氫氧化鉀醇液和一小粒固體氫氧化鉀，顯固體氫氧化鉀，顯深紫色深紫色，此反應(yīng)稱為，此反應(yīng)稱為VitailiVitaili反反應(yīng)應(yīng). . 為莨菪酸的特征反應(yīng)。為莨菪酸的特征反應(yīng)。 OHHOOC3 HNO3NO2NO2HOOCO2NOHKOHC2H5OHHOOCOHO2NNO2NOOKKOHOHO2NNO2HNOOK二、與硫酸二、與硫酸-重鉻酸鉀的反應(yīng)重鉻酸鉀的反應(yīng) 本類藥物水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重本類藥物水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。

6、其反應(yīng)式為：而逸出類似苦杏仁的臭味。其反應(yīng)式為：HOOCOHHOOC-H2O(H2SO4)CH2CHO2O2+ 2CO2 + H2O三、與生物堿顯色劑或沉淀劑反應(yīng)三、與生物堿顯色劑或沉淀劑反應(yīng) 本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉淀。生物堿類酸性水溶液中，?？膳c重金屬鹽類淀。生物堿類酸性水溶液中，?？膳c重金屬鹽類（碘化鉍鉀、碘化汞鉀、碘（碘化鉍鉀、碘化汞鉀、碘- -碘化鉀、二氯化汞等）碘化鉀、二氯化汞等）和大分子的酸類（磷鉬酸、硅鎢酸等）沉淀劑反應(yīng)和大分子的酸類（磷鉬酸、硅鎢酸等）沉淀劑反應(yīng)生成難溶鹽或、不溶性鹽、復(fù)鹽或配位化合物沉生成難溶鹽或、不溶

7、性鹽、復(fù)鹽或配位化合物沉淀，而可作鑒別。淀，而可作鑒別。生物堿沉淀試劑反應(yīng)條件及結(jié)果碘化鉍鉀試液橙紅或棕紅色沉淀碘化鉀碘試液棕色或棕褐色沉淀碘化汞鉀試液在酸性或堿性溶劑中生成白色或淡黃色沉淀三硝基苯酚試液結(jié)晶性沉淀并有特定熔點(diǎn)硅鎢酸試液白色、淡黃色或黃棕色沉淀磷鎢酸試液酸性或中性溶液中，淡黃色沉淀【氫溴酸東莨菪堿鑒別】【氫溴酸東莨菪堿鑒別】 取本品約取本品約10mg10mg，加水，加水1ml 1ml 溶解后，置分液漏斗溶解后，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性后，加氯仿中，加氨試液使成堿性后，加氯仿5ml,5ml,振搖，分取振搖，分取氯仿液，置水浴上蒸干，殘?jiān)屑佣然囊掖悸确乱?，置水浴上蒸?/p>

8、，殘?jiān)屑佣然囊掖既芤海ㄈ《然芤海ㄈ《然?g2g，加，加6060乙醇使成乙醇使成100ml 100ml ）1.5ml,1.5ml,即生成白色沉淀（與阿托品及后馬托品的區(qū)即生成白色沉淀（與阿托品及后馬托品的區(qū)別）。別）。 四、光譜鑒別四、光譜鑒別1.1.紫外光譜法：紫外光譜法：一般通過(guò)比較藥物的一般通過(guò)比較藥物的 或吸收光或吸收光譜的一致性來(lái)進(jìn)行鑒別以及吸光系數(shù)。譜的一致性來(lái)進(jìn)行鑒別以及吸光系數(shù)。2.2.紅外光譜法：紅外光譜法：CHPCHP收載的原料藥一般都采用紅外收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進(jìn)行鑒別。光譜法進(jìn)行鑒別。五、色譜法五、色譜法 一般用于已知生物堿的鑒別，主要有一般

9、用于已知生物堿的鑒別，主要有TLCTLC、HPLCHPLC、GCGC、PCPC等等六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)藥物大都以硫酸鹽或藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在溴化物的形式存在通過(guò)加沉淀試劑如硝酸銀通過(guò)加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色烷而顯色一、氫溴酸東莨菪堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查洋金花粗粉洋金花粗粉乙醇乙醇/ /滲漉滲漉滲漉液滲漉液減壓蒸餾減壓蒸餾浸膏浸膏H H2 2SOSO4 4/ /提取提取酸性提取液酸性提取液NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /提取提取總生物堿總

10、生物堿NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /分離分離東莨菪堿東莨菪堿HBr/HBr/成鹽成鹽氫溴酸東莨菪堿（粗品）氫溴酸東莨菪堿（粗品）75% C75% C2 2H H5 5OH/OH/精制精制成品成品根據(jù)其制備工藝，根據(jù)其制備工藝，本品可通過(guò)酸度、本品可通過(guò)酸度、其它生物堿、和其它生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查易氧化物質(zhì)檢查進(jìn)行控制進(jìn)行控制第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查1.酸度酸度東莨菪堿堿性很弱，對(duì)石蕊試東莨菪堿堿性很弱，對(duì)石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。如氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿如氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿鹽、通過(guò)其鹽、通過(guò)其5%的水溶液的水溶液p

11、H為為4.05.5，可控制酸性雜質(zhì)，可控制酸性雜質(zhì)2.易氧化物易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色可使高錳酸鉀溶液褪色NH3CHOOCH2(雜質(zhì))NH3CHOOOCH2(雜質(zhì))示例13-6氫溴酸東莨菪堿易氧化物檢查易氧化物易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色可使高錳酸鉀溶液褪色3.其它生物堿其它

12、生物堿本品水溶液加入氨水試液不得本品水溶液加入氨水試液不得發(fā)生混濁。當(dāng)有其它生物堿存發(fā)生混濁。當(dāng)有其它生物堿存在時(shí)，則易產(chǎn)生混濁。在時(shí)，則易產(chǎn)生混濁。本品水溶液檢查方法：其他生物堿還常用TLC和HPLC法檢查ab二、硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)的檢查硫酸阿托品為硫酸阿托品為消旋體消旋體，無(wú)旋光性，無(wú)旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查光性對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查CHP用用HPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過(guò)峰面積的比值及保留時(shí)間來(lái)通過(guò)峰面積的比值及保留時(shí)間來(lái)控制雜質(zhì)限度控制雜質(zhì)限度第四節(jié)第四節(jié) 含量測(cè)定含量測(cè)定莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較

13、莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強(qiáng)、臨床使用劑量較少，因此測(cè)強(qiáng)、臨床使用劑量較少，因此測(cè)定方法要專屬、靈敏定方法要專屬、靈敏: 酸性染料酸性染料比色法比色法非水溶液非水溶液滴定法滴定法高效液相高效液相色譜法色譜法有機(jī)相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+UV 一、酸性染一、酸性染料比色法料比色法在一定的在一定的pH條件下，某些生物堿藥物可條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進(jìn)而可用與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進(jìn)而可用分光光度法進(jìn)行測(cè)量分光光度法進(jìn)行測(cè)量（一）原理（一）原理酸性染料酸性染料磺酸酞類指示劑等，如溴磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝

14、香草酚藍(lán)、甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對(duì)，且可以被有機(jī)溶劑明顯紅移的有色離子對(duì)，且可以被有機(jī)溶劑定量萃取，通過(guò)測(cè)定有機(jī)相中有色離子對(duì)的定量萃取，通過(guò)測(cè)定有機(jī)相中有色離子對(duì)的特征波長(zhǎng)處的吸光度，即可進(jìn)行含量測(cè)定特征波長(zhǎng)處的吸光度，即可進(jìn)行含量測(cè)定（二）影響因素（二）影響因素1.水相最佳pH值的選擇：使得BH+和In-最多水相最佳pH 2.酸性染料及其濃度：定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過(guò)量一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要量足夠大一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以。

15、但濃度過(guò)高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化就可以。但濃度過(guò)高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，往往影響測(cè)定結(jié)果。層，且不易于除去，往往影響測(cè)定結(jié)果?；撬崽愔甘緞┗撬崽愔甘緞?溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán)(BTB) brom thymol blue pH 6.07.6（黃（黃藍(lán)藍(lán)）CH3CCH3BrBrHO(CH3)2HCSO3HCH(CH3)2OCBrBrBrBrHOCH3CH3SO3HO溴甲酚綠(BCG)brom cresol greenpH 3.65.2（黃藍(lán)）3.3.有機(jī)溶劑的選擇：提取效率高，氯仿最理想一般應(yīng)選擇對(duì)有機(jī)堿藥物與酸性染料形成離子一般應(yīng)選擇對(duì)有機(jī)堿藥物與酸性染料形成離子對(duì)萃取效

16、率高、能與離子對(duì)形成氫鍵、不與或?qū)腿⌒矢摺⒛芘c離子對(duì)形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑。極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑。4.水分的影響：5.酸性染料里面的有色雜質(zhì)影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級(jí)解離，生成SO42-，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為HSO4-即只供給一個(gè)H+，所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。二、非水溶液滴定法二、非水溶液滴定法（BH+） A-+HClO4BH+ ClO4+HA游離堿類鹽游離堿類鹽被置換出的弱酸被置換出的弱酸硫酸阿托品測(cè)定：阿托品

17、為堿性較強(qiáng)的一元堿藥物，因而硫酸阿托品的化學(xué)結(jié)構(gòu)式可以簡(jiǎn)寫為（BH+)2SO42 -，用高氯酸直接滴定時(shí)的反應(yīng)式為：(BH(BH+ +) )2 2SOSO4 42-2- + HClO + HClO4 4 (BH (BH+ +)ClO)ClO4 4- - + (BH + (BH+ +)HSO)HSO4 4- -可根據(jù)可根據(jù)1mol1mol的硫酸阿托品消耗的硫酸阿托品消耗1mol1mol高氯酸的高氯酸的關(guān)系計(jì)算其含量關(guān)系計(jì)算其含量。 習(xí)題 硫酸阿托品片（規(guī)格：0. 3mg/片）的含量測(cè)定對(duì)照品溶液的制備：精密稱取在120干燥至恒重的硫酸阿托品對(duì)照品25. 2mg，置25ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置l00ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液的制備：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精