1、新生兒遺傳性耳聾基因篩查項(xiàng)目Contents目錄目錄項(xiàng)目背景及意義項(xiàng)目背景及意義實(shí)驗(yàn)流程及質(zhì)控實(shí)驗(yàn)流程及質(zhì)控血片采集、遞送與保存血片采集、遞送與保存耳聾遺傳咨詢(xún)耳聾遺傳咨詢(xún)臨床案例臨床案例目目 錄錄項(xiàng)目背景及意義項(xiàng)目背景及意義part 1Contents 我國(guó)殘疾人群：我國(guó)殘疾人群：8502萬(wàn)萬(wàn) 聽(tīng)力殘疾人群：聽(tīng)力殘疾人群：2054萬(wàn)萬(wàn)數(shù)據(jù)來(lái)自：數(shù)據(jù)來(lái)自：關(guān)于使用關(guān)于使用2010年末全國(guó)殘疾人總數(shù)及各類(lèi)、不同殘疾等級(jí)人數(shù)的通知年末全國(guó)殘疾人總數(shù)及各類(lèi)、不同殘疾等級(jí)人數(shù)的通知，2010年末各類(lèi)殘疾人比例年末各類(lèi)殘疾人比例聽(tīng)力殘疾比例高聽(tīng)力殘疾比例高41.中國(guó)出生缺陷防治報(bào)告（2012）2.中國(guó)聽(tīng)

2、力論壇（2013）80%的聾兒出生在聽(tīng)力正常的家庭的聾兒出生在聽(tīng)力正常的家庭每年新增每年新增3.5萬(wàn)萬(wàn)先天性聾兒先天性聾兒【1】每年新增每年新增3-4萬(wàn)萬(wàn)遲發(fā)性聾兒遲發(fā)性聾兒【2】我國(guó)耳聾出生缺陷現(xiàn)狀我國(guó)耳聾出生缺陷現(xiàn)狀5耳耳 聾聾Journal of Audiology and Speech Pathology. 2011,19(1):73-77遺傳是耳聾最大病因遺傳是耳聾最大病因6流調(diào)單位：流調(diào)單位：301醫(yī)院聾病分子診斷中心醫(yī)院聾病分子診斷中心流調(diào)范圍：全國(guó)流調(diào)范圍：全國(guó) 28 個(gè)省市個(gè)省市樣品規(guī)模：樣品規(guī)模：10880 例例正常人群中攜帶耳聾基因突變比正常人群中攜帶耳聾基因突變比例約為

3、例約為基因基因病征病征正常人攜帶比例正常人攜帶比例聾人中攜帶比例聾人中攜帶比例GJB2先天聾3%21%SLC26A4遲發(fā)聾2%14.5%12S rRNA藥物聾0.3%4.4%GJB3高頻聾我國(guó)本土上克隆的第一個(gè)遺傳疾病基因四大致聾基因四大致聾基因7GJB2基因：基因：先天性重度以上感音神經(jīng)性耳聾；當(dāng)先天性重度以上感音神經(jīng)性耳聾；當(dāng)GJB2基因發(fā)生純合突變時(shí)，患者出生即表基因發(fā)生純合突變時(shí)，患者出生即表現(xiàn)出耳聾癥狀；進(jìn)行人工耳蝸移植效果良好現(xiàn)出耳聾癥狀；進(jìn)行人工耳蝸移植效果良好SLC26A4基因（基因（PDS基因）：基因）：大前庭水管綜合征（大前庭水管綜合征（EVAS），當(dāng)患者患感冒、頭部受打擊

4、時(shí)，聽(tīng)力急劇下降；），當(dāng)患者患感冒、頭部受打擊時(shí)，聽(tīng)力急劇下降；避免顱壓增大，使用改善微循環(huán)藥物和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)藥治療避免顱壓增大，使用改善微循環(huán)藥物和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)藥治療線(xiàn)粒體基因突變：線(xiàn)粒體基因突變：氨基糖甙類(lèi)藥物敏感性耳聾；患者使用氨基糖甙類(lèi)藥物會(huì)導(dǎo)致重度耳聾的發(fā)生；母氨基糖甙類(lèi)藥物敏感性耳聾；患者使用氨基糖甙類(lèi)藥物會(huì)導(dǎo)致重度耳聾的發(fā)生；母系家族成員應(yīng)杜絕使用氨基糖甙類(lèi)抗生素藥物系家族成員應(yīng)杜絕使用氨基糖甙類(lèi)抗生素藥物GJB3基因：基因：后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；表現(xiàn)為后天突發(fā)性耳聾；進(jìn)行人工耳蝸移植效果良好后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；表現(xiàn)為后天突發(fā)性耳聾；進(jìn)行人工耳蝸移植效果良好基因型與致病關(guān)系基因型與

5、致病關(guān)系8新生兒篩查耳聾基因意義新生兒篩查耳聾基因意義及早確診先天性耳聾，避免由聾致啞及早確診先天性耳聾，避免由聾致啞及早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，通過(guò)生活指導(dǎo)，避免或及早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，通過(guò)生活指導(dǎo)，避免或延緩耳聾發(fā)生延緩耳聾發(fā)生及早發(fā)現(xiàn)藥物性耳聾，終身禁用耳毒性藥物，及早發(fā)現(xiàn)藥物性耳聾，終身禁用耳毒性藥物，并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾遺傳咨詢(xún)遺傳咨詢(xún)9先天性聾兒先天性聾兒及早安裝助聽(tīng)器或人工耳蝸植入及早安裝助聽(tīng)器或人工耳蝸植入避免孩子由聾致啞避免孩子由聾致啞遲發(fā)性聾兒遲發(fā)性聾兒通過(guò)生活指導(dǎo)通過(guò)生活指導(dǎo)避免或延緩耳聾發(fā)生避免或延緩耳聾發(fā)生終身禁用耳毒性藥物終身禁用耳毒性藥物

6、并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾藥物性聾兒藥物性聾兒10高危新生兒的干預(yù)措施高危新生兒的干預(yù)措施目前，新篩項(xiàng)目已經(jīng)在北京、成都、長(zhǎng)治、南通、固始、鄭州等地方開(kāi)展目前，新篩項(xiàng)目已經(jīng)在北京、成都、長(zhǎng)治、南通、固始、鄭州等地方開(kāi)展開(kāi)展地區(qū)開(kāi)展地區(qū)2014.1南通新篩項(xiàng)目培訓(xùn)南通新篩項(xiàng)目培訓(xùn)2014.8河南固始新篩項(xiàng)目培訓(xùn)河南固始新篩項(xiàng)目培訓(xùn)2013.6長(zhǎng)治新篩項(xiàng)目長(zhǎng)治新篩項(xiàng)目2012.4北京新篩項(xiàng)目北京新篩項(xiàng)目2012.10成都新篩項(xiàng)目成都新篩項(xiàng)目2014.10鄭州新篩項(xiàng)目鄭州新篩項(xiàng)目全國(guó)新篩項(xiàng)目開(kāi)展情況全國(guó)新篩項(xiàng)目開(kāi)展情況11全國(guó)受益新生兒達(dá)到全國(guó)受益新生兒達(dá)到100萬(wàn)例！

7、萬(wàn)例！全國(guó)新篩項(xiàng)目開(kāi)展情況全國(guó)新篩項(xiàng)目開(kāi)展情況12目目 錄錄實(shí)驗(yàn)流程及質(zhì)控實(shí)驗(yàn)流程及質(zhì)控part 2Contents晶芯晶芯九項(xiàng)遺傳性耳聾基因檢測(cè)試劑盒九項(xiàng)遺傳性耳聾基因檢測(cè)試劑盒四個(gè)基因的四個(gè)基因的9個(gè)突變位點(diǎn)：個(gè)突變位點(diǎn)：GJB2 35 del G、176 del 16、235 del C和299 del AT； SLC26A4 IVS7-2 AG、2168 AG；線(xiàn)粒體12s rRNA 1555 AG、1494 CT，GJB3 538 CT針對(duì)中國(guó)人設(shè)計(jì)，指標(biāo)覆蓋了國(guó)人中98%GJB2, 50%PDS, 90%藥物性耳聾患者?？?速：8小時(shí)靈 敏：2-20 ng/L 高通量：同時(shí)檢9個(gè)位

8、點(diǎn)準(zhǔn) 確：與測(cè)序驗(yàn)證相符率100%芯片雜交儀芯片雜交儀芯片洗干儀芯片洗干儀芯片掃描儀芯片掃描儀14檢測(cè)流程檢測(cè)流程15血片接收及血斑提取血片接收及血斑提取2.5 h核酸擴(kuò)增核酸擴(kuò)增3.5 h芯片雜交及清洗芯片雜交及清洗 2h芯片掃描及結(jié)果判讀芯片掃描及結(jié)果判讀5 min芯片芯片及質(zhì)控及質(zhì)控IVS7-2MIVS7-2MIVS7-2M4321QC：表面化學(xué)質(zhì)控探針 BC：空白對(duì)照探針PC：雜交陽(yáng)性對(duì)照探針 MC：磁珠質(zhì)控探針I(yè)C：基因擴(kuò)增內(nèi)對(duì)照探針 NC：陰性對(duì)照探針野生型探針突變型探針16質(zhì)量控制質(zhì)量控制17通過(guò)芯片內(nèi)質(zhì)控與室內(nèi)、室間質(zhì)量控制，完全能夠滿(mǎn)足臨床對(duì)準(zhǔn)確性、一致性的需求！檢測(cè)結(jié)果展示

9、檢測(cè)結(jié)果展示18先天性聾先天性聾235 純合純合1555均質(zhì)均質(zhì)299 雜合雜合攜帶者攜帶者藥物聾敏感藥物聾敏感2168/IVS7-2復(fù)合雜合復(fù)合雜合先天性聾先天性聾結(jié)果發(fā)放結(jié)果發(fā)放19結(jié)果上傳結(jié)果上傳短信發(fā)送短信發(fā)送上網(wǎng)查結(jié)果上網(wǎng)查結(jié)果醫(yī)院就診醫(yī)院就診報(bào)告打印報(bào)告打印醫(yī)院就診醫(yī)院就診電話(huà)回訪(fǎng)電話(huà)回訪(fǎng)北京北京鄭州鄭州目目 錄錄血片采集、遞送與血片采集、遞送與保存保存Part 3Contents采血所需物品采血所需物品21物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備采血針采血針濾紙片濾紙片知情同知情同意書(shū)意書(shū)血片架血片架打印紙打印紙自封袋自封袋同代謝病篩查采集血片要求！采血流程采血流程22分娩機(jī)構(gòu)信息登記采血晾干標(biāo)本血片遞

10、送市婦幼保健院簽署知情同意書(shū)采血實(shí)施采血實(shí)施23（一）簽署知情同意書(shū) 采血前將本次篩查的項(xiàng)目、條件、方式、費(fèi)用等情況如實(shí)告知新生兒的監(jiān)護(hù)人、遵循知情選擇的原則。 采血實(shí)施采血實(shí)施24（二）信息登記 同代謝性疾病篩查： 認(rèn)真填寫(xiě)采血卡片，做到字跡清楚、登記完整。并注意在填寫(xiě)過(guò)程中不要污染濾紙片。卡片內(nèi)容包括：公/自費(fèi)、采血單位、母親姓名、住院號(hào)、新生兒性別、出生日期、采血日期、居住地址、聯(lián)系 和采血人等信息。采血實(shí)施采血實(shí)施25（三）規(guī)范采血采血時(shí)間：與代謝性疾病同時(shí)采血方式：同代謝性疾病合格要求：不少于2個(gè)血斑 直徑大于8mm 血斑自然滲透，濾紙正反面血斑一致血斑無(wú)污染不合格血片展示不合格血片

11、展示26酒精污染的血斑，出現(xiàn)滲血環(huán)組織液污染樣本過(guò)少，滲透不良樣本過(guò)多采血實(shí)施采血實(shí)施27（四）血片遞送與保存1、采血單位 采血完成后制成干血片，完成初級(jí)質(zhì)控，集中放入自封袋，封好封口，以防霉變，放入專(zhuān)用運(yùn)輸包，與代謝性疾病篩查血片同時(shí)送區(qū)縣婦幼，并做好交接登記。2、市婦幼保健院 完成血片二級(jí)質(zhì)控后，干燥密封保存，放入專(zhuān)用運(yùn)輸包，遞送到篩查單位，并做好交接登記。3、篩查單位 完成交接，對(duì)血片進(jìn)行三級(jí)質(zhì)控后，進(jìn)行檢測(cè)并長(zhǎng)期保存血片（2-8）。 因特殊情況未按期采血或不合格標(biāo)本退回需要重新采血者，應(yīng)當(dāng)及時(shí)預(yù)約或追蹤采集血片。目目 錄錄耳聾遺傳咨詢(xún)耳聾遺傳咨詢(xún)part 4Contents耳聾遺傳咨詢(xún)

12、意義耳聾遺傳咨詢(xún)意義29減輕患者身體和精神上的痛苦；減輕患者及其親屬的心理壓力；幫助他們正確對(duì)待遺傳性耳聾、了解發(fā)病概率；采取正確的預(yù)防、治療措施，從而最終降低人群遺傳性耳聾的發(fā)病率；意義：耳聾遺傳咨詢(xún)對(duì)象耳聾遺傳咨詢(xún)對(duì)象301. 已生育聾兒的正常夫婦詢(xún)問(wèn)再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)者；2. 有耳聾家族史的正常夫婦，擔(dān)心后代會(huì)遺傳此病者；3. 未婚或已婚的男女雙方均為聾啞人或其中一人為聾啞人，需要給予婚前婚配指導(dǎo)或婚后生育指導(dǎo)者；4. 新生兒耳聾患者，指導(dǎo)用藥及生活指導(dǎo)； 此外，由于耳聾基因在正常人群中也有一定的攜帶率，因此有婚配或生育要求但無(wú)耳聾家族遺傳史的正常人也在耳聾遺傳咨詢(xún)服務(wù)對(duì)象范圍內(nèi)。遺傳咨詢(xún)工作流程

13、遺傳咨詢(xún)工作流程 u 第一步：樣本芯片檢測(cè)結(jié)果報(bào)告發(fā)送第一步：樣本芯片檢測(cè)結(jié)果報(bào)告發(fā)送u郵寄或者短信發(fā)送郵寄或者短信發(fā)送u 第二步：整理需要第二步：整理需要 追訪(fǎng)的名單追訪(fǎng)的名單u新生兒耳聾基因?qū)嶒?yàn)室檢測(cè)及報(bào)告發(fā)送完成后，整理并打印新生兒耳聾基因?qū)嶒?yàn)室檢測(cè)及報(bào)告發(fā)送完成后，整理并打印GJB2、SLC26A4、12S rRNA、GJB3基因突變攜帶者列表清單基因突變攜帶者列表清單u 第三步：第三步： 追訪(fǎng)并記錄追訪(fǎng)結(jié)果追訪(fǎng)并記錄追訪(fǎng)結(jié)果u確認(rèn)新生兒家長(zhǎng)收到報(bào)告并告知查看篩查結(jié)果確認(rèn)新生兒家長(zhǎng)收到報(bào)告并告知查看篩查結(jié)果u對(duì)于需要和希望進(jìn)行門(mén)診復(fù)診的新生兒及家長(zhǎng)，追訪(fǎng)中告知其來(lái)診的對(duì)于需要和希望進(jìn)行

14、門(mén)診復(fù)診的新生兒及家長(zhǎng)，追訪(fǎng)中告知其來(lái)診的預(yù)約方式及就診時(shí)間、流程等預(yù)約方式及就診時(shí)間、流程等u初次追訪(fǎng)失敗的，記錄追訪(fǎng)時(shí)間及失敗原因，需進(jìn)行隨后的第二次初次追訪(fǎng)失敗的，記錄追訪(fǎng)時(shí)間及失敗原因，需進(jìn)行隨后的第二次 追訪(fǎng)，若第三追訪(fǎng)，若第三次追訪(fǎng)失敗，送約定部門(mén)次追訪(fǎng)失敗，送約定部門(mén)31遺傳咨詢(xún)工作流程遺傳咨詢(xún)工作流程 u 第四步： 遺傳咨詢(xún)工作u身份確認(rèn)：篩查編號(hào)、母親姓名、出生醫(yī)院u聽(tīng)力檢測(cè)是否通過(guò)？是否有耳聾家族史？u聽(tīng)力未通過(guò)者來(lái)門(mén)診復(fù)診u聽(tīng)力通過(guò)者定期（每3月-半年）測(cè)查聽(tīng)力至3歲或到門(mén)診進(jìn)行聽(tīng)力復(fù)診和遺傳咨詢(xún)u繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家族譜，記錄家族中已有聽(tīng)障者的發(fā)病年齡、原因

15、、聽(tīng)力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等32遺傳咨詢(xún)工作流程遺傳咨詢(xún)工作流程 u 第五步：門(mén)診復(fù)診新生兒遺傳咨詢(xún)工作 登記復(fù)診新生兒耳聾基因篩查結(jié)果、編號(hào)、聽(tīng)力篩查是否通過(guò)，詢(xún)問(wèn)有無(wú)聽(tīng)力障礙家族史 有家族史者繪制家系圖；繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家系圖，記錄家族中已有聽(tīng)障者的發(fā)病年齡、原因、聽(tīng)力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等 OAE聽(tīng)力測(cè)試 聽(tīng)力檢測(cè)結(jié)果及基因篩查結(jié)果聯(lián)合分析 定期復(fù)查聽(tīng)力、診斷性聽(tīng)力學(xué)檢查或分子診斷 分子診斷程序：GJB2、SLC26A4全基因測(cè)序檢測(cè)33遺傳咨詢(xún)工作流程遺傳咨詢(xún)工作流程小結(jié)小結(jié) u 門(mén)診復(fù)診新生兒遺傳咨詢(xún)工作結(jié)合聽(tīng)篩結(jié)果提供聽(tīng)力及遺傳綜合資訊聽(tīng)篩通過(guò)聽(tīng)篩

16、未通過(guò)基篩通過(guò)基篩未通過(guò)基篩通過(guò)基篩未通過(guò)隨診程序分子診斷程序聽(tīng)力/分子診斷程序聽(tīng)力/分子診斷程序提供聽(tīng)力及遺傳服務(wù)及康復(fù)指導(dǎo)，并長(zhǎng)期隨訪(fǎng)觀察34目目 錄錄臨床案例臨床案例part 5Contents耳聾檢測(cè)應(yīng)用案例耳聾檢測(cè)應(yīng)用案例1野生型（正常）235delC純合（耳聾）235delC純合（耳聾） 235delC雜合（正常） 235delC雜合（耳聾）爺爺奶奶母親父親姑姑未知（過(guò)世） 在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院聽(tīng)力篩查中心，孩子進(jìn)行聽(tīng)力篩查但未通過(guò)，抽血檢查耳聾基因，結(jié)果孩子是235純合突變，父親是235純合突變，母親是235雜合突變，爺爺和姑姑分別是235雜合突變和野生型，奶奶不在了，因父母均是聾啞