1、緒 論教學(xué)時(shí)間： 教學(xué)目的與要求：掌握藥物分析的性質(zhì)和任務(wù)，全面控制藥品質(zhì)量的意義。熟悉藥品質(zhì)量管理規(guī)范體系。教學(xué)重點(diǎn)： 藥物分析的性質(zhì)和任務(wù)，國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)教學(xué)難點(diǎn)：藥品質(zhì)量管理規(guī)范體系教學(xué)方法：多媒體教學(xué)教學(xué)手段：多媒體教學(xué)教學(xué)過(guò)程與教學(xué)內(nèi)容：本章主要閱讀文獻(xiàn)資料：1 23一、藥物分析的性質(zhì)和任務(wù)藥物分析是一門(mén)研究和發(fā)展藥品全面質(zhì)量控制的方法科學(xué)。它主要運(yùn)用化學(xué)、物理化學(xué)或生物化學(xué)的方法和技術(shù)，研究化學(xué)結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確的合成藥物或天然藥物及其制劑的質(zhì)量控制方法，也研究中藥制劑和生化藥物及其制劑有代表性的質(zhì)量控制方法。二、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn) 中華人民共和國(guó)藥典和藥品標(biāo)準(zhǔn)是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)。 中華人民共和國(guó)藥

2、典（Chinese Pharmacopoeia，Ch.P）2000版第一、二部。 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是藥品現(xiàn)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要組成部分。是藥品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用和行政、技術(shù)監(jiān)督管理各部門(mén)應(yīng)共同遵守的法定技術(shù)依據(jù)，也是藥品生產(chǎn)和臨床用藥水平的重要標(biāo)志 國(guó)外藥典主要有 美國(guó)藥典（The Unitied States Pharmacopoeia，USP）2000年為24版。美國(guó)國(guó)家處方集（The Natinal Formulary,NF）2000年為19版。 英國(guó)藥典（British Pharmacopoeia，BP）2000版。日本藥局方 JP（14）。 歐洲藥典（European Pharmaco

3、poeia，Ph.Eup）第三版，2000年增補(bǔ)本。 國(guó)際藥典（The internatinal Pharmacopoeia，Ph.Int）第三版。三、藥品質(zhì)量管理規(guī)范 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（Good Manufacture Practice,GMP） 藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（Good Laboratory Practice,GLP） 藥品臨床試驗(yàn)管理規(guī)范（Good Clinical Practice,GCP） 藥品經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理規(guī)范（Good Supply Practice,GSP）四、藥物分析課程的學(xué)習(xí)要求第一章 藥典概況教學(xué)時(shí)間： 教學(xué)目的與要求：掌握中國(guó)藥典的基本內(nèi)容；熟悉中國(guó)藥典的

4、常用術(shù)語(yǔ)、使用方法；藥物分析工作的基本程序；了解國(guó)外主要藥典及內(nèi)容。教學(xué)重點(diǎn)： 中國(guó)藥典的組成、內(nèi)容，藥物分析工作的基本程序。教學(xué)難點(diǎn)：教學(xué)方法：多媒體教學(xué)教學(xué)手段：多媒體教學(xué)教學(xué)過(guò)程與教學(xué)內(nèi)容：本章主要閱讀文獻(xiàn)資料：1 23一、中國(guó)藥典的內(nèi)容與進(jìn)展 Ch.P 2000的內(nèi)容分為凡例、正文、附錄和索引四部分。 (一) 凡例“凡例”是解釋和使用中國(guó)藥典正確進(jìn)行質(zhì)量檢定的基本原則，“凡例”中的有關(guān)規(guī)定具有法定的約束力。 “凡例”中的分類(lèi)項(xiàng)目有：名稱(chēng)及編排、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定、生物制品、檢驗(yàn)方法和限度、殘留溶劑、標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、計(jì)量、精確度、試藥、試液、指示劑、動(dòng)物試驗(yàn)和包裝、標(biāo)簽等，共二十八條款。 (二)正

5、文正文部分為收載藥品或制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 (三) 附錄附錄包括制劑通則、通用檢測(cè)方法和指導(dǎo)原則，共十九類(lèi)：制劑通則、生物制品通則、一般鑒別試驗(yàn)、分光光度法、色譜法、理化常數(shù)、有關(guān)滴定法和測(cè)定法、一般雜質(zhì)檢查、制劑檢查法、抗生素效價(jià)法和檢查法、升壓物質(zhì)生物檢定法、放射性檢定法、生物檢定統(tǒng)計(jì)法、 試藥與滴定液等、制藥用水、滅菌法和原子量表。(四) 索引(五) 2000版中國(guó)藥典進(jìn)展1.藥典凡例和正文部分的增修訂；2.藥典附錄的增修訂；3.配套叢書(shū)。 二、國(guó)外主要藥典簡(jiǎn)介 (一) 美國(guó)藥典USP(24)-NF(19)的主要組成: 凡例,共分為十九項(xiàng)；正文；附錄，共分為六類(lèi)。 (二) 英國(guó)藥典 BP（2

6、000）的組成為兩卷。 第一卷正文品種主要為原料藥，第二卷正文品種則為藥物制劑、血液制品、免疫制品、放射性藥物制劑和糖類(lèi)物質(zhì)，并收載歐洲藥典品種。 凡例,共分為三個(gè)部分；正文；附錄，共分為24類(lèi)。 （三） 日本藥局方 JP（14）分為兩部。 第一部包括凡例、制劑總則、一般試驗(yàn)法和各醫(yī)藥品，第二部包括通則、生藥總則、制劑總則、一般試驗(yàn)法和各醫(yī)藥品、附錄和索引。 三、藥品檢驗(yàn)工作的機(jī)構(gòu)和基本程序 中華人民共和國(guó)藥品管理法規(guī)定“藥品監(jiān)督管理部門(mén)設(shè)置或確定的藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，承擔(dān)依法實(shí)施藥品審批和藥品質(zhì)量監(jiān)督檢查所需的藥品檢驗(yàn)工作”。 藥品檢驗(yàn)工作的基本程序一般為取樣、鑒別、檢查、含量測(cè)定、寫(xiě)出檢驗(yàn)報(bào)告。

7、 取樣 分析任何藥品首先是取樣，要從大量的樣品中取出少量的樣品進(jìn)行分析，應(yīng)考慮取樣的科學(xué)性、真實(shí)性與代表性，不然就失去了檢驗(yàn)的意義。據(jù)此，取樣的基本原則就是均勻、合理。取樣量也要因數(shù)量的多少而有所不同；如一般取樣量是按包裝件數(shù)來(lái)進(jìn)行確定的，假如樣品總件數(shù)為x，當(dāng)x3時(shí)，每件取樣；當(dāng)x300時(shí)，按x+1的取樣量來(lái)進(jìn)行隨機(jī)取樣；當(dāng)x300時(shí)，按x/2+1的取樣量隨機(jī)取樣。 藥物的鑒別 鑒別就是依據(jù)藥物的的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行某些化學(xué)反應(yīng)，測(cè)定某些理化常數(shù)或光譜特征，來(lái)判斷藥物及其制劑的真?zhèn)巍Ｍǔ?，某?xiàng)鑒別試驗(yàn)，如官能團(tuán)反應(yīng)、焰色反應(yīng)等，只能表示藥物的某一特征，絕不能將其作為判斷的唯一依據(jù)。因此，

8、藥物的鑒別不只由一項(xiàng)試驗(yàn)就能完成，而是采用一組(兩個(gè)或幾個(gè))試驗(yàn)項(xiàng)目全面評(píng)價(jià)一個(gè)藥物，力求使結(jié)論正確無(wú)誤。 藥物的檢查 藥物在不影響療效及人體健康的原則下，是可以允許微量的雜質(zhì)存在的；但其量必須在藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定之內(nèi)。通常按照藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的項(xiàng)目進(jìn)行“限度檢查”，判斷藥物的純度是否符合標(biāo)準(zhǔn)的限量規(guī)定要求，所以也可稱(chēng)為純度檢查。藥物的含量測(cè)定 含量測(cè)定就是測(cè)定藥物中主要有效成分的含量。一般采用化學(xué)分析或理化分析方法來(lái)測(cè)定，以確定藥物的含量是否符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定要求?？偟膩?lái)說(shuō)，鑒別是用來(lái)判斷藥物的真?zhèn)危鴻z查和含量測(cè)定則用來(lái)判定判斷一個(gè)藥物的質(zhì)量是否符合要求，必須全面考慮鑒別、檢查與含量測(cè)定三者的檢

9、驗(yàn)結(jié)果。 寫(xiě)出檢驗(yàn)報(bào)告 原始記錄要求完整；內(nèi)容必須真實(shí)、簡(jiǎn)明、具體；一般不得涂改(若有寫(xiě)錯(cuò)時(shí)，劃上單線或雙線，而后在旁邊改正重寫(xiě)，并簽名或蓋章)。記錄的內(nèi)容應(yīng)包括供試品的名稱(chēng)、批號(hào)、規(guī)格、數(shù)量、供試品來(lái)源(取樣或送樣部門(mén)或單位)、取樣方法、外觀性狀、包裝情況、檢驗(yàn)?zāi)康?、檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法與依據(jù)、取樣日期或收到日期、報(bào)告日期。檢驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象、檢驗(yàn)數(shù)據(jù)(有計(jì)算式)、結(jié)果、結(jié)論及處理意見(jiàn)、檢驗(yàn)者簽名或蓋章、復(fù)核者簽名或蓋章等。檢驗(yàn)記錄完成后，應(yīng)由第二人對(duì)記錄內(nèi)容、計(jì)算結(jié)果進(jìn)行復(fù)核。復(fù)核后的記錄，屬內(nèi)容和計(jì)算錯(cuò)誤的，復(fù)核人要負(fù)責(zé)；屬檢驗(yàn)錯(cuò)誤復(fù)核人無(wú)責(zé)任。報(bào)告要求完整，報(bào)告般包括的內(nèi)容和順序如下：供

10、試品名稱(chēng)、批號(hào)、規(guī)格、數(shù)量、來(lái)源、外觀性狀、包裝情況、檢驗(yàn)?zāi)康摹z驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)依據(jù)、取樣日期或收到日期、報(bào)告日期、檢驗(yàn)結(jié)果(書(shū)寫(xiě)順序?yàn)殍b別、檢查、含量測(cè)定)、結(jié)論(或判定)。如結(jié)果符合規(guī)定，提出符合規(guī)定的結(jié)論(如本品符合中國(guó)藥典規(guī)定等)，否則應(yīng)提出不符合規(guī)定的項(xiàng)目及不符合規(guī)定的程度，同時(shí)應(yīng)根據(jù)具體情況，提出處理該藥品的合理辦法。最后由檢驗(yàn)人員、復(fù)核人員及有關(guān)負(fù)責(zé)人簽名或蓋章，必要時(shí)由檢驗(yàn)單位蓋章(對(duì)外單位)。 檢驗(yàn)報(bào)告是對(duì)藥品質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果的證明書(shū)，結(jié)論必須明確、肯定、有依據(jù)。檢驗(yàn)報(bào)告必須有檢驗(yàn)者、復(fù)核者及部門(mén)負(fù)責(zé)人簽名或蓋章，簽名或蓋章應(yīng)寫(xiě)全名，否則該報(bào)告書(shū)無(wú)效。第二章 藥物的鑒別試驗(yàn)教學(xué)時(shí)間

11、： 教學(xué)目的與要求：掌握藥物鑒別方法與原理；熟悉藥物鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目。教學(xué)重點(diǎn)： 藥物鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目。教學(xué)難點(diǎn)：藥物鑒別方法與原理。教學(xué)方法：多媒體教學(xué)教學(xué)手段：多媒體教學(xué)教學(xué)過(guò)程與教學(xué)內(nèi)容：本章主要閱讀文獻(xiàn)資料：1 23一、 概述藥物鑒別試驗(yàn)（identification test）是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)的方法來(lái)判斷藥物的真?zhèn)?。二?鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目（一） 性狀1. 外觀2. 溶解度3. 物理常數(shù)相對(duì)密度、餾程、熔點(diǎn)、凝點(diǎn)、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。（二） 一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn)（general identification

12、test）依據(jù)某一類(lèi)藥物的分子結(jié)構(gòu)或理化性質(zhì)的特征，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)巍?.有機(jī)氟化物2.有機(jī)酸鹽3.芳香第一胺 4.托烷生物堿 5.無(wú)機(jī)金屬鹽 6.無(wú)機(jī)酸根（三）專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)(specific identification test）是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)。它是依據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，通過(guò)某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)?。三?鑒別方法（一） 化學(xué)鑒別法1. 呈色反應(yīng)鑒別法2. 沉淀生成反應(yīng)鑒別法3. 熒光反應(yīng)鑒別法4. 氣體生成反應(yīng)鑒別法5. 測(cè)定生成物的熔點(diǎn)（二） 光譜鑒別法1.紫外光譜鑒別法 多數(shù)有機(jī)藥物分子中含有能吸收

13、紫外可見(jiàn)光的基團(tuán)而顯示特征吸收光譜，可做為鑒別的依據(jù)。常用： （1）測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)，或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)； （2）規(guī)定一定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)處的吸收度； （3）規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法； （4）規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收度比值法； （5）經(jīng)化學(xué)處理后，測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性。2.紅外光譜鑒別法 主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥。（三） 色譜鑒別法利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自得特征色譜行為進(jìn)行鑒別。1.薄層色譜鑒別法 2.高效液相色譜和氣相色譜鑒別法 （四） 生物學(xué)方法 利用微生物或試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行鑒別。四、 鑒別試驗(yàn)條件（一） 溶液的濃度（二） 溶液的溫度（三） 溶液的酸堿度（

14、四） 試驗(yàn)時(shí)間（五） 干擾成分的存在五、 鑒別試驗(yàn)的靈敏度（一） 反應(yīng)靈敏度和空白試驗(yàn)最低檢出量（m）最低檢出濃度(1:V 或 1:G)（二） 提高反應(yīng)靈敏度的方法1. 有機(jī)溶劑提取濃集2. 改進(jìn)觀測(cè)方法第三章 藥物的雜質(zhì)檢查教學(xué)時(shí)間： 教學(xué)目的與要求：掌握藥物中雜質(zhì)限量檢查的意義，雜質(zhì)限量的計(jì)算方法；熟悉一般雜質(zhì)的檢查原理與操作要點(diǎn)，特殊雜質(zhì)的檢查方法。教學(xué)重點(diǎn)： 雜質(zhì)限量檢查的意義，雜質(zhì)限量的計(jì)算方法教學(xué)難點(diǎn)：一般雜質(zhì)的檢查原理與操作要點(diǎn)；特殊雜質(zhì)的檢查方法教學(xué)方法：多媒體教學(xué)教學(xué)手段：多媒體教學(xué)教學(xué)過(guò)程與教學(xué)內(nèi)容：本章主要閱讀文獻(xiàn)資料：1 23第一節(jié) 概 述一、藥物的純度要求 藥物的純度

15、是指藥物純凈的程度。藥物的雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用、或影響藥物的療效和穩(wěn)定性、甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。藥物在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中，都可能引入雜質(zhì)。檢查藥物中的雜質(zhì)，控制其純度，是確保用藥安全、有效，保證藥品質(zhì)量的一個(gè)重要方面。藥物的純度主要由在藥品質(zhì)量標(biāo)推中的“檢查”項(xiàng)下的雜質(zhì)檢查來(lái)控制。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定有雜質(zhì)檢查的項(xiàng)目，同時(shí)還規(guī)定有檢查的方法和雜質(zhì)限量，檢查時(shí)應(yīng)完全按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求進(jìn)行。藥物的純度主要由“檢查”項(xiàng)來(lái)控制，除此以外，還與性狀、物理常數(shù)、含量測(cè)定等項(xiàng)目有關(guān)。如藥物中含有超過(guò)限量的雜質(zhì)，就可能使外觀發(fā)生變化，使理化常數(shù)超過(guò)規(guī)定的范圍，使含量偏低或活性降低。因此，應(yīng)該把藥物的性

16、狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)藥物的純度。二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi) （一） 雜質(zhì)的來(lái)源生產(chǎn)過(guò)程引入的雜質(zhì)在合成藥的生產(chǎn)過(guò)程中，末反應(yīng)完的原料、反應(yīng)的中間體和副產(chǎn)物，在精制時(shí)未能完全除去，就會(huì)成為產(chǎn)品中的雜質(zhì)。藥物在制成制劑的過(guò)程中，也可能產(chǎn)生新的雜質(zhì)。藥物的生產(chǎn)過(guò)程，常需使用有機(jī)溶劑、試劑以及由器具引入的無(wú)機(jī)雜質(zhì)等。藥物中還可能存在一些生物活性與有效成分有很大差異的無(wú)效、低效異構(gòu)體或晶形。2貯藏過(guò)程引入的雜質(zhì)藥品在貯藏過(guò)程中，受外界條件如溫度、濕度、光線、空氣的影響活微生物的作用，可能發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化，使藥物中產(chǎn)生有關(guān)雜質(zhì)

17、。（二）雜質(zhì)的種類(lèi)藥物中的雜質(zhì)按來(lái)源分類(lèi)，可分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。特殊雜質(zhì)是指在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中引入的雜質(zhì)。藥物中的雜質(zhì)按其性質(zhì)還可以分為信號(hào)雜質(zhì)和有害雜質(zhì)。信號(hào)雜質(zhì)一般無(wú)害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平。有害雜質(zhì)對(duì)人體有毒害，所以質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要加以嚴(yán)格控制，以保證用藥的安全。三、雜質(zhì)的限量檢查在不影響療效和不發(fā)生毒性的前提下，允許藥物中含有少量的雜質(zhì)。藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。藥物中雜質(zhì)的檢查，一般也不要求測(cè)定其含量，而只檢查是否超過(guò)限量。這種雜質(zhì)檢查的方法叫做雜質(zhì)的限量檢查。在

18、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中雜質(zhì)的檢查多數(shù)為限量檢查。進(jìn)行雜質(zhì)的限量檢查時(shí)，可取一定量被檢雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液與一定量供試品溶液在相同條件下處理，如顯色或產(chǎn)生沉淀等，通過(guò)比較反應(yīng)的結(jié)果，來(lái)確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)限量。使用此類(lèi)方法時(shí)，需注意平行原則。即供試品溶液和雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在完全相同的條件下反應(yīng)，如加入的試劑、反應(yīng)的溫度、放置的時(shí)間等均應(yīng)相同，只有這樣，反應(yīng)的結(jié)果才有可比性。此外，也有不與標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對(duì)比，而是取規(guī)定量的供試品，在一定條件下反應(yīng)，以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格，即以該條件下反應(yīng)的靈敏度來(lái)控制雜質(zhì)的量。藥物中雜質(zhì)的限量可按照下式來(lái)計(jì)算：雜質(zhì)限量雜質(zhì)的最大允許量供試品量×100%由于供試品(S)中所含

19、雜質(zhì)的量一般是通過(guò)與一定量雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較來(lái)確定的，雜質(zhì)的最大允許量也就是雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(C)與體積(V)的乘積獲得，因此雜質(zhì)限量(L)的計(jì)算可寫(xiě)成下式： 雜質(zhì)限量標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度×標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/ ×100%LC×V/S ×100%第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一、氯化物檢查法 原理 中國(guó)藥典的氯化物檢查法是利用氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀試液作用，生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，濁度不得更大。 方法 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml(溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性)

20、，再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)；置50m1納氏比色管中，加水使成約40ml，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0ml，用水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較。 討論 以上檢查方法中使用的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液每1ml相當(dāng)于10ug的C1。在測(cè)定條件下，氯化物濃度以50m1中含50ug80 ug的C1為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.08.0m1。在此范圍內(nèi)氯化物所顯渾濁梯度明顯，便于比較。 檢查在

21、硝酸酸性溶液中進(jìn)行。加入硝酸可避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成而干擾檢查，同時(shí)還可加速氯化銀沉淀的生成并產(chǎn)生較好的乳濁。酸度以50m1供試溶液中含稀硝酸10m1為宜。 為了避免光線使單質(zhì)銀析出，在觀察前應(yīng)在暗處放置5min。由于氯化銀為白色沉淀，比較時(shí)應(yīng)將比色管置黑色背景上，從上方向下觀察，比較。 供試品處理 有的藥物在以上條件下對(duì)檢查有干擾，應(yīng)作一定處理后再檢查。二、硫酸鹽檢查法 原理 硫酸鹽的檢查是利用微量硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性溶液中生成硫酸鋇的白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件下生成的渾濁比較，濁度不得更大。 方法 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水

22、溶解使成約40m1(溶液如顯堿性可滴加鹽酸使成中性)；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)；置50m1納氏比色管中，加稀鹽酸2 m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品頂下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液，置50 m1納氏比色管中，加水使成約40m1，加稀鹽酸2m1，搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入25氯化鋇溶液5m1，用水稀釋至50 m1，充分搖勻放置10min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較。 討論 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液每1m1相當(dāng)于0.1mg的SO42，本法適宜比濁的濃度范圍為每50m1溶液中含0.1mg0.5mg的SO42，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1.0 m15.0m1，在此范圍內(nèi)濁度梯度明顯

23、。 供試品溶液加鹽酸使成酸性，可防止碳酸鋇或磷酸鋇等沉淀的生成；溶液的酸度以50 m1中含稀鹽酸m1，溶液的pH值約為1為宜。 供試品處理 有的藥物在以上條件下，應(yīng)作一定處理后再檢查。三、鐵鹽檢查法（一） 硫氰酸鹽法 原理 鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所顯的顏色進(jìn)行比較，顏色不得更深。 方法 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解，使成25ml，移至50m1納氏比色管中，加稀鹽酸4 m1與過(guò)硫酸銨50mg，加水稀釋成35 m1后，加30硫氰酸銨溶液3m1，再加水適量使成50m1，如顯色，立即與標(biāo)淮鐵溶液定量按相同方法制

24、成的對(duì)照溶液比較。 討論 本法用硫酸鐵銨FeNH(SO4)·12H2O配制標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，并加入硫酸防止鐵鹽水解，使易于保存。標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液每1m1相當(dāng)于10 ug的Fe3+。在50m1溶液中，含F(xiàn)e3+50ug90 ug 時(shí)，溶液的吸收度與濃度呈良好線性關(guān)系。目視比色時(shí)，以50m1溶液中含10ug50 ug Fe3+ 為宜。在此范圍內(nèi)，顯色梯度明顯，易于區(qū)別。在鹽酸酸性條件下反應(yīng)，可防止Fe3+的水解。經(jīng)試驗(yàn)，以50 m1溶液中含稀鹽酸4m1為宜。加入氧化劑過(guò)硫酸銨既可氧化供試品中的Fe2+成Fe3+，同時(shí)可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。 反應(yīng)中加入的硫氰酸銨量較大，這是因?yàn)殍F鹽與硫氰

25、酸根離子的反應(yīng)為可逆反應(yīng)，加入過(guò)量的硫氰酸銨，不僅可以增加生成的配位離子的穩(wěn)定性，提高反應(yīng)靈敏度，還能消除氯化物等與鐵鹽生成配位化合物所引起的干擾。 供試品處理 有的藥物在以上條件下，應(yīng)作一定處理后再檢查。（二） 巰基醋酸法四、重金屬檢查法 重金屬系指在實(shí)驗(yàn)條件下能與S2作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫銻、鉍等。在藥品生產(chǎn)過(guò)程中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查時(shí)以鉛為代表。 第一法 硫代乙酰胺法 用于在實(shí)驗(yàn)條件下供試液澄清、無(wú)色、對(duì)檢查無(wú)干擾或經(jīng)處理后對(duì)檢查無(wú)干擾的藥物。 原理 硫代乙酰胺在弱酸性(pH3.5)條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，與微量重金屬離子生成黃色到棕黑色的

26、硫化物均勻混懸液。與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液用同法處理后所顯的顏色進(jìn)行比較，顏色不得更深。 方法 取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2m1與水適量使成25m1，加硫代乙酰胺試液2m1，放置2min后，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量按同法制成的對(duì)照液所形成的棕色進(jìn)行比較。 討論 用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液，并加入適量硝酸以防止鉛鹽水解。臨用前稀釋成每1m1含10ug Pb2+，本法的適宜目視比色范圍為每27ml溶液中含10ug20 ug Pb2+，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1.02.0 m1。 供試品處理 有的藥物在以上條件下，應(yīng)作一定處理后再檢查。 第二法 用于在水、乙醇中難溶，或能與重金屬離子形成配位

27、化合物的有機(jī)藥物。 原理 將供試品熾灼破壞后，加硝酸加熱處理，使有機(jī)物分解、破壞完全后，再按第一法進(jìn)行檢查。 方法 討論 熾灼溫度對(duì)重金屬檢查影響較大，如鉛在700經(jīng)6h熾灼，回收率僅為32。應(yīng)控制在500一600熾灼使完全灰化。熾灼殘?jiān)酉跛峒訜崽幚?，使有機(jī)物進(jìn)一步分解破壞完全。必須蒸干除盡氧化氮，否則形成的亞硝酸可氧化硫化氫析出硫，影響比色。蒸干后殘?jiān)欲}酸使重金屬成為氯化物，于水浴上蒸干趕除殘留鹽酸，再加水溶解，以氨試液調(diào)至對(duì)酚酞指示液顯中性，加醋酸鹽緩沖液(PH35)微熱溶解后，再依法檢查。為了消除鹽酸和其他試劑中可能引入重金屬的影響，除另有規(guī)定外，對(duì)照溶液應(yīng)加同樣同量試劑，在相同條件

28、下處理后，依法檢查。第三法 適用于有機(jī)藥物(如磺胺類(lèi)、巴比妥類(lèi))難溶于稀酸但能溶解于堿性水溶液的藥物，如磺胺類(lèi)、巴比妥類(lèi)藥物。原理 在堿性介質(zhì)中，以硫化鈉為顯色劑，使Pb2+生成PbS微粒的混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同樣處理后的顏色進(jìn)行比較，不得更深。方法 除另有規(guī)定外，取規(guī)定量的供試品，加氫氧化鈉試液5ml和水20ml使溶解后，加硫化鈉試液5滴，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同樣處理后的顏色進(jìn)行比較。 第四法 微孔濾膜法。適用于重金屬限量低的藥物。原理 通過(guò)微孔濾膜過(guò)濾，使試驗(yàn)條件下生成的硫化鉛沉淀富集于濾膜上，形成鉛斑，比較供試溶液和對(duì)照溶液鉛斑的顏色，來(lái)判斷供試品中的重金屬是否超過(guò)限量。方法五

29、、砷鹽檢查法 （一）古蔡法 原理 金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)件的砷化氫氣體，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同樣條件下生成的砷斑比較，來(lái)判定藥物中砷鹽的含量。 方法 檢查時(shí)，于導(dǎo)氣管C中裝入醋酸鉛棉花60mg(裝管高度約6080mm)，再于旋塞D的頂端平面上放一片溴化汞試紙，蓋上旋塞E并旋緊。標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備方法為：精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10min后，加鋅粒2g，立即將裝妥的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540水浴中，反應(yīng)45min，取出溴

30、化汞試紙，即得。另取規(guī)定量的供試品，加鹽酸5ml，加水23ml溶解后，照標(biāo)推砷斑制備方法操作，將供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，不得更深。 注意事項(xiàng)供試品處理（二) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法簡(jiǎn)稱(chēng)Ag(DDC)法 原理 金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)件的砷化氫，砷化氫與二乙基二硫代氨基甲酸銀作用，使其還原為紅色膠態(tài)銀，用目視比色法或在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液用同法處理后得到的有色溶液比較。方法 在砷化氫發(fā)生瓶A中，供試溶液(或標(biāo)準(zhǔn)砷溶液)的試驗(yàn)條件(如加酸量和試劑用量)均同古蔡法，加鋅粒后立即將生成的砷化氫導(dǎo)入盛有Ag(DDC)溶液5.0ml的D

31、管中，將A瓶置2540水浴中，反應(yīng)45min后，取出D管，添加氯仿至5.0ml，將供試溶液D管和標(biāo)難溶液D管同置白色背景上，自管上方向下觀察比較。必要時(shí)，可將吸收液分別移入1cm吸收池中，以Ag(DDC)溶液為空白，于510mn波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，供試溶液的吸收度不得大于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。注意事項(xiàng)六、溶液顏色檢查法有的藥物在生產(chǎn)過(guò)程中可能引入有色的雜質(zhì)，有的在貯藏過(guò)程中產(chǎn)生有色雜質(zhì)。溶液顏色檢查法是控制藥物中有色雜質(zhì)含量的方法。 （一）目視比色法 方法 取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，置25m1納氏比色管中，加水溶解并稀釋至10m1，另取規(guī)定色調(diào)和色號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液10m1，置納氏比色管中，兩管同置

32、白色背景上，自上向下透視或平視觀察，供試品管呈現(xiàn)的顏色與對(duì)照品管比較，不得更深。 標(biāo)準(zhǔn)比色液是由比色用重鉻酸鉀液(黃色)、比色用硫酸銅液(藍(lán)色)和比色用氯化鉆液(紅色)。分別取個(gè)同比例的以上三種比色液，配成黃綠、黃、橙黃、橙紅和棕紅五種色調(diào)的貯備液，貯備液再加水稀釋配成顏色深淺不同的10個(gè)色號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液。 （二） 分光光度法 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解，使成l0ml，必要時(shí)過(guò)濾，濾液按分光光度法于規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定，吸收度不得超過(guò)規(guī)定值。 （三） 色差計(jì)法 取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品分別制得供試品溶液和標(biāo)準(zhǔn)比色液，供試品溶液與水的色差值E*不得超過(guò)相應(yīng)色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)比色液與水的

33、色差值E*0。 七、易炭化物檢查法 易炭化物檢查法是檢查藥物中遇硫酸易炭化或易被氧化而呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。用硫酸呈色的方法可以簡(jiǎn)便地控制此類(lèi)雜質(zhì)的總量。 方法 取內(nèi)徑一致的比色管2支，甲管中加入規(guī)定的對(duì)照液5m1，乙管中加入硫酸5ml后，分次緩緩加入規(guī)定量的供試品，振搖使溶解。除另有規(guī)定外，靜置15min后，將兩管同置白色背景前，平視觀察，乙管所顯顏色不得比甲管更深。注意事項(xiàng) 八、溶液澄清度檢查法 澄清度的檢查是檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，對(duì)于用作注射液的原料藥的純度檢查，尤為重要。 原理 烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合成甲醛蹤，形成白色渾濁。方法 在室溫條件下，將用水稀釋至

34、一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對(duì)的比濁用玻璃管中，在暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下，照度為1000lx，從水平方向觀察、比較，用以檢查溶液的澄清度或渾濁程度。供試品溶解后應(yīng)立即檢視。濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制濁度標(biāo)準(zhǔn)原液配制濁度標(biāo)準(zhǔn)液配制注意事項(xiàng)九、熾灼殘?jiān)鼨z查法 中國(guó)藥典和美國(guó)藥典對(duì)熾灼殘?jiān)亩x：有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物加熱分解后，高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。熾灼殘?jiān)鼨z查用于控制有機(jī)藥物或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物中存在的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)。方法 取規(guī)定量的供試品，置巳熾灼至橫重的坩堝干，精密稱(chēng)定，緩緩熾灼至全部炭化，放冷至室溫；除另有規(guī)定外，加硫酸0.51ml使?jié)駶?rùn)，低溫加熱

35、至硫酸蒸氣除盡后，在700一800熾灼使完全炭化，移置干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱(chēng)定后，再在700一800熾灼至恒重，即得。注意事項(xiàng) 十、干燥失重測(cè)定法 干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后所減失的重量，以百分率表示。干燥失重得內(nèi)容物主要是水分，也包括其他揮發(fā)性物質(zhì)。測(cè)定的方法有以下幾種：（一） 常壓恒溫干燥法 本法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。 方法 將供試品置于相同條件下已干燥至恒重的扁形稱(chēng)量瓶?jī)?nèi)，精密稱(chēng)定。于烘箱內(nèi)在規(guī)定溫度下干燥至恒重，根據(jù)所減失的重量和取樣量計(jì)算供試品干燥失重。 注意事項(xiàng)（二）干燥劑干燥法 本法適用于受熱易分解或揮發(fā)的藥物。方法 將供試品置干燥器內(nèi)，利用器內(nèi)貯放的干燥刑，

36、吸收供試品中的水分，干燥至恒重。 注意事項(xiàng)（三） 減壓干燥法 是指在減壓下干燥的方法，適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。方法 在一定溫度下，恒采用減壓干燥器或恒溫減壓干燥箱，除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)減至267kPa以下。十一、有機(jī)溶劑殘留量檢查 有機(jī)溶劑殘留量檢查，用以檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程忠引入的有害有機(jī)溶劑。 中國(guó)藥典采用氣相色譜法檢查有機(jī)溶劑殘留。 中國(guó)藥典規(guī)定，在測(cè)定溶劑殘留前，應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，確定色譜系統(tǒng)應(yīng)符合：（1） 以待測(cè)物的色譜峰計(jì)算的理論塔板數(shù)應(yīng)大于1000。（2） 用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5；取標(biāo)準(zhǔn)溶液（含限量待測(cè)溶劑與內(nèi)標(biāo)）進(jìn)樣5次

37、，內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5%。（3） 若用外標(biāo)法測(cè)定，待測(cè)物峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于10%。 第一法 溶液直接進(jìn)樣法 方法注意事項(xiàng)第二法 頂空進(jìn)樣法 方法注意事項(xiàng)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法 特殊雜質(zhì)的檢查，主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異來(lái)進(jìn)行的。一、 利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異（一） 嗅味及揮發(fā)性的差異（二） 顏色的差異（三） 溶解行為的差異（四） 旋光性質(zhì)的差異（五） 對(duì)光吸收性質(zhì)的差異1. 紫外分光光度法 若雜質(zhì)在某一波長(zhǎng)處有最大吸收，而藥物在此波長(zhǎng)處無(wú)吸收，可以通過(guò)控制供試品溶液在此波長(zhǎng)處的吸收度來(lái)控制供試品中雜質(zhì)的量。有的雜質(zhì)紫外吸收光諾與

38、藥物的紫外吸收光譜重疊，但可改變藥物在某兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸收度比值，也可以通過(guò)控制供試溶液的吸收度比值來(lái)控制雜質(zhì)的量。若藥物在紫外區(qū)有明顯吸收，而雜質(zhì)吸收很弱或無(wú)吸收，可以通過(guò)控制吸收度來(lái)控制供試品中雜質(zhì)的量。2. 原子吸收分光光度法3. 紅外分光光度法 紅外分光光度法在雜質(zhì)檢查中主要用于藥物中無(wú)效或低效晶型的檢查。 某些多晶型的藥物由于其晶型結(jié)構(gòu)不同，某些化學(xué)鍵的鍵長(zhǎng)、鍵角等發(fā)生不同程度的變化，可導(dǎo)致紅外吸收光譜中的某些特征帶的頻率和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異，因此用紅外分光光度法檢查藥品中低效或無(wú)效晶型，結(jié)果可靠，方法簡(jiǎn)便。第三章 藥物的雜質(zhì)檢查 4. 熒光分析法（六） 吸附或分配性質(zhì)的差異藥物中有的雜

39、質(zhì)(如反應(yīng)的中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等)和藥物的性質(zhì)近似，需分離后再檢查。色譜法可以分離并檢測(cè)藥物中的雜質(zhì)，所以在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用廣泛。1. 薄層色譜法（1） 雜質(zhì)對(duì)照品法 適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對(duì)照品的情況。（2） 供試品自身對(duì)照法 適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品法的情況。要求供試品與所檢雜質(zhì)對(duì)顯色劑所顯的顏色應(yīng)相同，顯色靈敏度也相同或接近。（3） 對(duì)照藥物法 當(dāng)無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品，尤其是供試品所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與主成分斑點(diǎn)顏色有差異，難以判斷限量時(shí)，可用與供試品相同的藥物作為對(duì)照品，此對(duì)照藥物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。2. 紙色譜法3. 高效液相色譜法 中國(guó)藥典規(guī)定應(yīng)按各品

40、種項(xiàng)下要求，對(duì)儀器進(jìn)行色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，確定色譜系統(tǒng)達(dá)到要求。 （1）峰面積歸一化法 通常用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)。 方法 取定量供試品溶液進(jìn)樣，經(jīng)高效液相色譜儀分離后，測(cè)定、計(jì)算各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積的百分率，不能超過(guò)限量。 注意事項(xiàng) （2）不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 適用于沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)。 方法 將供試品溶液稀釋成一定濃度作為對(duì)照溶液。分別取供試品溶液和對(duì)照溶液進(jìn)樣，將供試品溶液中各雜質(zhì)峰面積及其總和，與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，以控制供試品中雜質(zhì)的量。 注意事項(xiàng)（3）加校正因子的主成分自身對(duì)照法 適用于有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)雜質(zhì)的含量測(cè)定。（4）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中雜質(zhì)

41、 適用于有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)雜質(zhì)的含量測(cè)定。方法 精密量取一定量?jī)?nèi)標(biāo)溶液和雜質(zhì)對(duì)照品溶液，配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照品溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量雜質(zhì)對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，計(jì)算出校正因子f；再將含內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液注入色譜儀，記錄色譜圖測(cè)量雜質(zhì)和內(nèi)標(biāo)峰面積或峰高，計(jì)算所含雜質(zhì)的量。 （5）外標(biāo)法測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分得含量 適用于有雜質(zhì)對(duì)照品的情況 方法 配制對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別取一定量注入色譜儀，測(cè)定對(duì)照品和供試品中測(cè)定組分的峰面積或峰高，根據(jù)峰面積與組分的量成正比，計(jì)算雜質(zhì)的含量。4. 氣相色譜法 氣相色譜法主要用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查，如藥物中殘留的溶劑等

42、。檢查的方法與高效液相色譜法相同。二、 利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異（一） 酸堿性的差異1. 規(guī)定消耗滴定液的體積2. pH值法3. 指示劑法（二） 氧化還原型的差異（三） 雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀（四） 雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色（五） 雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體1. 碳酸鹽檢查2. 氨或胺鹽檢查3. 氰化物檢查（六） 藥物經(jīng)有機(jī)破壞后檢查雜質(zhì)1. 硒檢查法2. 氟檢查法第四章 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證教學(xué)時(shí)間： 教學(xué)目的與要求：掌握藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容。熟悉藥物定量分析方法特點(diǎn)，樣品的前處理方法。教學(xué)重點(diǎn)： 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容。教學(xué)難點(diǎn)：藥物定量分析方法特點(diǎn)。

43、教學(xué)方法：多媒體教學(xué)教學(xué)手段：多媒體教學(xué)教學(xué)過(guò)程與教學(xué)內(nèi)容：本章主要閱讀文獻(xiàn)資料：1 23第一節(jié) 定量分析樣品的前處理方法一、概述 含金屬或鹵素的藥物，在分析前需要經(jīng)過(guò)不同方法處理之后，方進(jìn)行測(cè)定。處理方法因金屬或鹵素在分子中結(jié)合的程度而異。 這些藥物的分析方法可分為兩類(lèi)：（1）不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法；（2）經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法。二 、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 （一）直接測(cè)定法 含金屬藥物或某些鍵結(jié)合不牢固的有機(jī)金屬藥物，可直接選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行測(cè)定。（二）經(jīng)水解后測(cè)定法 1.直接回流后測(cè)定法 適用于含鹵素有機(jī)藥物結(jié)構(gòu)中鍵結(jié)合不牢固的藥物。 2.硫酸水解后測(cè)定法（三）經(jīng)氧化還原后測(cè)定法 1.堿性

44、還原后測(cè)定法 2. 酸性還原后測(cè)定法 3.利用藥物中游離的金屬離子的氧化性測(cè)定三 、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 有機(jī)破壞的方法將藥物分子破壞，使有機(jī)結(jié)合狀態(tài)的金屬及鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y(cè)定的無(wú)機(jī)化合物，用合適的分析方法進(jìn)行測(cè)定。有機(jī)破壞的方法，包括濕法破壞、干法破壞及氧瓶燃燒法。 （一）濕法破壞 1.硝酸-高氯酸法 2.硝酸-硫酸法 3.硫酸-硫酸鹽法（二）干法破壞 系將有機(jī)物灼燒灰化以達(dá)分解目的。適用于濕法不易破壞完全的有機(jī)藥物以及不能用硫酸破壞的有機(jī)藥物，不適用于含易揮發(fā)性金屬有機(jī)藥物的破壞。 （三）氧瓶燃燒法 系將有機(jī)藥物放入充滿氧氣的密閉的燃燒瓶中進(jìn)行燃燒，并將燃燒所產(chǎn)生的欲測(cè)物質(zhì)吸收于適當(dāng)?shù)奈找?/p>

45、中，根據(jù)欲測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)，采用適宜的分析方法進(jìn)行含鹵素有機(jī)藥物或含硫、氮、硒等其他元素的有機(jī)藥物的測(cè)定。1. 儀器裝置2. 稱(chēng)樣3. 燃燒分解操作4. 吸收液的選擇第二節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 一、容量分析法 （一）容量分析法的特點(diǎn) 容量分析法是將滴定液由滴定管滴加到待測(cè)藥物的溶液中，直到所加滴定液與待測(cè)藥物按化學(xué)計(jì)量關(guān)系反應(yīng)完全為止。根據(jù)滴定液的濃度和體積，就可計(jì)算出待測(cè)藥物的含量。 容量分析通常用于測(cè)定高含量或中含量組分，即被測(cè)組分的含量在1%以上。容量分析比較準(zhǔn)確，一般情況下相對(duì)誤差可達(dá)0.2%以下。 （二）容量分析法的計(jì)算問(wèn)題 1. 滴定度 2. 滴定度（T）的計(jì)算 3. 百分含量的計(jì)算 二

46、、光譜分析法 當(dāng)物質(zhì)與輻射能相互作用時(shí)，物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生能級(jí)躍遷。記錄出能級(jí)躍遷所產(chǎn)生的輻射能隨波長(zhǎng)的變化所得的圖譜稱(chēng)為光譜。利用物質(zhì)的光譜進(jìn)行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法稱(chēng)為光諧分析法，簡(jiǎn)稱(chēng)光譜法。 （一）紫外-可見(jiàn)分光光度法 1. 特點(diǎn) 紫外-可見(jiàn)分光光度法是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)波長(zhǎng)為200nm-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。 2. 朗伯-比耳定律 朗伯-比耳定律是吸收光度法的基本定律，說(shuō)明物質(zhì)對(duì)單色光吸收強(qiáng)弱與吸收光的物質(zhì)的濃度和厚度關(guān)系的定律。定律如下： A = ELC 式中，E-吸收系數(shù)，即單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度；A-吸收度；C-溶液濃度

47、；L-液層厚度。 吸收系數(shù)常用兩種方式表示，即摩爾吸收系數(shù)與百分吸收系數(shù)。 摩爾吸收系數(shù)是指在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為lmol/L，厚度為1cm時(shí)的吸收度，用 表示。百分吸收系數(shù)是指在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1(WV)，厚度為1cm時(shí)的吸收度，用E1%1cm表示。 3. 儀器校正和檢定 測(cè)定波長(zhǎng)檢定 吸收度準(zhǔn)確度檢定 雜散光檢查 4. 溶劑的要求 5. 測(cè)定法 （1）對(duì)照品比較法 （2）吸收系數(shù)法 （3）計(jì)算分光光度法 三、色譜分析法 色譜法是一種物理或物理化學(xué)分離分析方法。它先將混合物中各組分分離，而后逐個(gè)分析，因此是分析混合物的最有力手段。此法具有高靈敏度、高選擇性、高效能、分析速度快及應(yīng)用范

48、圍廣等優(yōu)點(diǎn)。 色譜法根據(jù)分離原理可分為：分配色譜、吸附色譜、離子交換色譜、分子排阻及親合色譜。根據(jù)操作形式可分為：柱色譜法、薄層色譜法、紙色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。 （一）高效液相色譜法 1. 對(duì)儀器的一般要求 Ch.P （2000）中，正文中各品種項(xiàng)下規(guī)定的條件，固定相種類(lèi)、流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類(lèi)型等不得任意改變。 2. 系統(tǒng)適用行試驗(yàn) （1）色譜柱的理論板數(shù)（n） n = 5.54 (tR/Wh/2)2 應(yīng)達(dá)到要求 （2）分離度 除另有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于1.5。 （3）重復(fù)性 除另有規(guī)定外，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0%。 （4）拖尾因子 除另有規(guī)定外，拖尾因子應(yīng)在0.95-1.

49、05之間。 3. 測(cè)定法 （1）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定法 （2）外標(biāo)法 1）標(biāo)準(zhǔn)曲線法 2）外標(biāo)一點(diǎn)法 第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測(cè)要求。 需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目有：鑒別試驗(yàn)，雜質(zhì)限量檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測(cè)定。 驗(yàn)證的內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專(zhuān)屬性、檢測(cè)限、定量限、線形、范圍和耐用性。 一、準(zhǔn)確度 準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以回收率（%）表示。 容量分析法回收率達(dá)到99.37%-100.3%，用UV 或 HPLC 法回收率要達(dá)到98%-102% 二、精密度

50、（一）精密度表示方法 精密度是指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。 偏差 （d） 相對(duì)偏差(SD) 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) 容量分析法RSD一般不應(yīng)大于0.2%(n=5)；UV法RSD一般不應(yīng)大于1%(n=3-5)； HPLC法RSD要小于2%(n=3-5)。 （二）重復(fù)性、中間精密度及重現(xiàn)性 三、專(zhuān)屬性 專(zhuān)屬性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性。 四、檢測(cè)限 檢測(cè)限是指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低濃度或量。 五、定量限 定量限是指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。 六、線形 線形是指在設(shè)計(jì)的范

51、圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)誤濃度直接成正比關(guān)系得程度。七、范圍范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線形、測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。八、耐用性 耐用性系指在測(cè)定條件有小的波動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。不同分析對(duì)象應(yīng)驗(yàn)證的內(nèi)容：1. 用于原料藥中主成分或制劑中有效成分含量測(cè)定的方法，除檢測(cè)限和定量限，其他6項(xiàng)指標(biāo)均需驗(yàn)證；2. 用于鑒別試驗(yàn)，只對(duì)專(zhuān)屬性和耐用性2項(xiàng)指標(biāo)有要求。3. 用于原料藥中雜質(zhì)測(cè)定或制劑中降解物質(zhì)測(cè)定： 用于定量，除檢測(cè)限，其余7項(xiàng)指標(biāo)均需驗(yàn)證；用于限度檢查，只對(duì)專(zhuān)屬性、檢測(cè)限和耐用性3項(xiàng)指標(biāo)有要求。第五章 巴比妥類(lèi)藥物的分析 教學(xué)時(shí)間： 教學(xué)目的與要求：掌握巴比妥類(lèi)藥物的鑒別方法，巴比妥類(lèi)藥物的含量測(cè)定方法。熟悉巴比妥類(lèi)藥物特殊雜質(zhì)檢查。了解巴比妥類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)與理化特征。教學(xué)重點(diǎn)： 巴比妥類(lèi)藥物的含量測(cè)定方法 銀量法 紫外分光光度法。教學(xué)難點(diǎn)：巴比妥類(lèi)藥物特殊雜質(zhì)檢查。教學(xué)方法：多媒體教學(xué)教學(xué)手段：多媒體教學(xué)教學(xué)過(guò)程與教學(xué)內(nèi)容：本章主要閱讀文獻(xiàn)資料：1 23一 巴比妥類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)剖析 巴比妥類(lèi)藥物為環(huán)狀酰脲類(lèi)鎮(zhèn)靜催眠藥物，是巴比妥酸的衍生物，基本結(jié)構(gòu)通式為： 巴比妥類(lèi)藥物的基本結(jié)構(gòu)可分為兩部分：一部分為母核巴比妥酸環(huán)狀丙二酰脲結(jié)構(gòu)，決定巴比妥類(lèi)藥物的共性，可用于與其他藥物相區(qū)別；另一部分為取代基部分，根據(jù)取代基（R