1、第十一章第十一章 藥品微生物藥品微生物鄭鈴鄭鈴福建醫(yī)科大學(xué)福建醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院第一節(jié)第一節(jié) 藥品生境特征藥品生境特征第一節(jié)第一節(jié) 藥品生境特征藥品生境特征從微生物學(xué)角度考慮，藥品生境特征可分為：從微生物學(xué)角度考慮，藥品生境特征可分為：1. 藥品具備微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)條件，一藥品具備微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)條件，一旦被污染，微生物可在其中生長(zhǎng)繁殖。旦被污染，微生物可在其中生長(zhǎng)繁殖。2. 藥品由于含有不同種類的抑菌劑或防腐劑，對(duì)微藥品由于含有不同種類的抑菌劑或防腐劑，對(duì)微生物具有一定的殺滅或抑制作用。生物具有一定的殺滅或抑制作用。 藥品生境的主要特征藥品生境的主要特征與

2、微生物生長(zhǎng)繁殖相關(guān)的生境特征可歸內(nèi)為以與微生物生長(zhǎng)繁殖相關(guān)的生境特征可歸內(nèi)為以下下5大類：大類：1. 糖類和蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分糖類和蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分 2. 離子物質(zhì)離子物質(zhì) 3. 水分水分 4. 酸堿度酸堿度 5. 滲透壓滲透壓 6. 抑制劑或防腐劑抑制劑或防腐劑 第二節(jié)第二節(jié) 藥品微生物污染的來(lái)藥品微生物污染的來(lái)源、種類及其衛(wèi)生學(xué)意義源、種類及其衛(wèi)生學(xué)意義藥品微生物污染的來(lái)源和種類藥品微生物污染的來(lái)源和種類 藥品微生物污染的來(lái)源有：藥品微生物污染的來(lái)源有：1. 來(lái)源于原輔料本身的污染來(lái)源于原輔料本身的污染 2. 來(lái)源于空氣微生物來(lái)源于空氣微生物3. 來(lái)源于水微生物來(lái)源于水微生物 4. 其他來(lái)源

3、其他來(lái)源 主要來(lái)源是生產(chǎn)藥品的原輔料染菌量過(guò)高，主要來(lái)源是生產(chǎn)藥品的原輔料染菌量過(guò)高，其次是生產(chǎn)流程不合理、用水處理不當(dāng)其次是生產(chǎn)流程不合理、用水處理不當(dāng) 不同種類藥品的微生物污染不同種類藥品的微生物污染 根據(jù)用藥途徑和使用要求，藥品可分為兩大類：根據(jù)用藥途徑和使用要求，藥品可分為兩大類： 規(guī)定滅菌藥品，這類藥品要求達(dá)到無(wú)菌。規(guī)定滅菌藥品，這類藥品要求達(dá)到無(wú)菌。 非規(guī)定滅菌藥品，這類藥品允許存在一定數(shù)量的細(xì)菌，非規(guī)定滅菌藥品，這類藥品允許存在一定數(shù)量的細(xì)菌，但對(duì)染菌的數(shù)量和種類有相應(yīng)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。但對(duì)染菌的數(shù)量和種類有相應(yīng)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。規(guī)定滅菌藥品的微生物污染規(guī)定滅菌藥品的微生物污染 1.注射劑和

4、輸液劑注射劑和輸液劑 根據(jù)國(guó)家藥典，此類藥品必須達(dá)到無(wú)菌要求。根據(jù)國(guó)家藥典，此類藥品必須達(dá)到無(wú)菌要求。 當(dāng)生產(chǎn)環(huán)境不潔、滅菌不徹底、瓶塞不嚴(yán)或漏氣等原當(dāng)生產(chǎn)環(huán)境不潔、滅菌不徹底、瓶塞不嚴(yán)或漏氣等原因存在時(shí)，這類藥品可能污染微生物。因存在時(shí)，這類藥品可能污染微生物。 污染的微生物以革蘭陰性菌多見(jiàn)，如大腸埃希菌、產(chǎn)污染的微生物以革蘭陰性菌多見(jiàn)，如大腸埃希菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌和銅綠假單胞菌等；也可見(jiàn)到革蘭氣桿菌、變形桿菌和銅綠假單胞菌等；也可見(jiàn)到革蘭陽(yáng)性菌、真菌和放線菌等的污染。陽(yáng)性菌、真菌和放線菌等的污染。規(guī)定滅菌藥品的微生物污染規(guī)定滅菌藥品的微生物污染2.滴眼劑和眼藥膏滴眼劑和眼藥膏 根據(jù)國(guó)家

5、藥典，滴眼劑和眼藥膏必須保持無(wú)菌狀態(tài)根據(jù)國(guó)家藥典，滴眼劑和眼藥膏必須保持無(wú)菌狀態(tài) 滴眼劑和眼藥膏由于滴眼劑和眼藥膏由于pH與滲透壓接近于淚液，非常適與滲透壓接近于淚液，非常適合細(xì)菌生長(zhǎng)合細(xì)菌生長(zhǎng) 常見(jiàn)的污染菌有銅綠假單胞菌、葡萄球菌、類白喉?xiàng)U常見(jiàn)的污染菌有銅綠假單胞菌、葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、枯草桿菌等。菌、枯草桿菌等。規(guī)定滅菌藥品的微生物污染規(guī)定滅菌藥品的微生物污染3.其他滅菌和無(wú)菌制劑其他滅菌和無(wú)菌制劑 包括體內(nèi)埋植制劑、創(chuàng)面用制劑和海綿劑等包括體內(nèi)埋植制劑、創(chuàng)面用制劑和海綿劑等 這些制劑在生產(chǎn)和使用過(guò)程中也易被各種微生物污染這些制劑在生產(chǎn)和使用過(guò)程中也易被各種微生物污染非規(guī)定滅菌藥品的微生

6、物污染非規(guī)定滅菌藥品的微生物污染 1.口服制劑口服制劑 主要有固體劑型和液體劑型兩種。主要有固體劑型和液體劑型兩種。 固體劑型由于含水量較低，較少受到微生物污染。固體劑型由于含水量較低，較少受到微生物污染。 液體劑型較易受到微生物污染。液體劑型較易受到微生物污染。 糖漿劑易受到真菌污染。糖漿劑易受到真菌污染。 以動(dòng)植物為原料的制劑，最易受到來(lái)自動(dòng)物或土壤中以動(dòng)植物為原料的制劑，最易受到來(lái)自動(dòng)物或土壤中微生物污染。微生物污染。非規(guī)定滅菌藥品的微生物污染非規(guī)定滅菌藥品的微生物污染 2.外用制劑外用制劑 乳膏劑和凝膠劑由于含水量較高，糊劑由于含淀粉量乳膏劑和凝膠劑由于含水量較高，糊劑由于含淀粉量較多

7、，在貯存和反復(fù)使用過(guò)程中易受細(xì)菌或霉菌的污較多，在貯存和反復(fù)使用過(guò)程中易受細(xì)菌或霉菌的污染。染。 常見(jiàn)的污染菌有葡萄球菌、變形桿菌、大腸埃希菌、常見(jiàn)的污染菌有葡萄球菌、變形桿菌、大腸埃希菌、厭氧芽胞梭菌，以及酵母菌和霉菌等。厭氧芽胞梭菌，以及酵母菌和霉菌等。非規(guī)定滅菌藥品的微生物污染非規(guī)定滅菌藥品的微生物污染 3.消毒劑與洗滌劑消毒劑與洗滌劑 常檢出革蘭陰性桿菌，如銅綠假單胞菌、克雷伯菌、常檢出革蘭陰性桿菌，如銅綠假單胞菌、克雷伯菌、大腸埃希菌大腸埃希菌4.中藥材中藥材 最容易受微生物，尤其是真菌污染最容易受微生物，尤其是真菌污染 中成藥在貯藏過(guò)程中還常常受到螨類的污染中成藥在貯藏過(guò)程中還常常

8、受到螨類的污染藥品微生物的衛(wèi)生學(xué)意義藥品微生物的衛(wèi)生學(xué)意義 1.微生物引起藥品變質(zhì)微生物引起藥品變質(zhì) 藥品變質(zhì)的現(xiàn)象藥品變質(zhì)的現(xiàn)象 異味異味 變色變色 黏稠現(xiàn)象黏稠現(xiàn)象 顆粒現(xiàn)象顆?，F(xiàn)象 其他現(xiàn)象，沉淀、混濁或云霧狀改變，也可產(chǎn)生其他現(xiàn)象，沉淀、混濁或云霧狀改變，也可產(chǎn)生菌團(tuán)或膜狀物。菌團(tuán)或膜狀物。藥品微生物的衛(wèi)生學(xué)意義藥品微生物的衛(wèi)生學(xué)意義藥品變質(zhì)的判斷依據(jù)藥品變質(zhì)的判斷依據(jù) 從藥品中分離到病原微生物從藥品中分離到病原微生物 口服及外用藥檢出的微生物總數(shù)超過(guò)限度標(biāo)準(zhǔn)口服及外用藥檢出的微生物總數(shù)超過(guò)限度標(biāo)準(zhǔn) 無(wú)菌制劑中檢出微生物無(wú)菌制劑中檢出微生物 藥品中雖未檢出微生物，但存在微生物所產(chǎn)生的毒

9、性藥品中雖未檢出微生物，但存在微生物所產(chǎn)生的毒性代謝產(chǎn)物，如熱原質(zhì)、真菌毒素等代謝產(chǎn)物，如熱原質(zhì)、真菌毒素等 藥品出現(xiàn)上述肉眼可見(jiàn)的感觀性狀改變和（或）理化藥品出現(xiàn)上述肉眼可見(jiàn)的感觀性狀改變和（或）理化性狀改變。性狀改變。 藥品微生物的衛(wèi)生學(xué)意義藥品微生物的衛(wèi)生學(xué)意義藥品變質(zhì)的后果藥品變質(zhì)的后果 出現(xiàn)有害的微生物代謝產(chǎn)物出現(xiàn)有害的微生物代謝產(chǎn)物 微生物污染藥品后，在微生物污染藥品后，在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中可釋放大量有害物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中可釋放大量有害物質(zhì) 失去藥用價(jià)值失去藥用價(jià)值 微生物污染藥品后，可降解藥品中的微生物污染藥品后，可降解藥品中的活物物質(zhì)，導(dǎo)致藥品失效活物物質(zhì)，導(dǎo)致藥品失效 危害用藥者

10、的身心健康危害用藥者的身心健康 染菌藥品被誤用后，可能導(dǎo)染菌藥品被誤用后，可能導(dǎo)致藥源性感染（致藥源性感染（drug-borne infection）、中毒或超敏）、中毒或超敏等不良反應(yīng)等不良反應(yīng) 第三節(jié)第三節(jié) 藥品微生物檢測(cè)藥品微生物檢測(cè)與衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)與衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)藥品微生物檢測(cè)的特殊性藥品微生物檢測(cè)的特殊性 1.藥品生境的多樣性和復(fù)雜性藥品生境的多樣性和復(fù)雜性 不同劑型藥品的酸堿度、滲透壓和含水量均不同，不同劑型藥品的酸堿度、滲透壓和含水量均不同，有些劑型還含有一定的抑菌劑或防腐劑。這些因有些劑型還含有一定的抑菌劑或防腐劑。這些因素構(gòu)成了藥品生境的多樣性和復(fù)雜性，由此導(dǎo)致素構(gòu)成了藥品生境的多樣性和

11、復(fù)雜性，由此導(dǎo)致微生物在不同藥品中具有不同的生長(zhǎng)繁殖特征。微生物在不同藥品中具有不同的生長(zhǎng)繁殖特征。 2.微生物數(shù)量少，分布不均微生物數(shù)量少，分布不均一般情況下，污染藥品的微生物不僅數(shù)量較少，一般情況下，污染藥品的微生物不僅數(shù)量較少，而且在原輔料、半成品、成品和包裝材料上的分而且在原輔料、半成品、成品和包裝材料上的分布是不均勻的布是不均勻的 。藥品微生物檢測(cè)的特殊性藥品微生物檢測(cè)的特殊性3.多數(shù)為亞致死狀態(tài)的損傷菌多數(shù)為亞致死狀態(tài)的損傷菌 這些損傷菌如果直接用常規(guī)方法檢測(cè)時(shí)，可出現(xiàn)這些損傷菌如果直接用常規(guī)方法檢測(cè)時(shí)，可出現(xiàn)“陰性陰性”或計(jì)數(shù)偏低的結(jié)果?；蛴?jì)數(shù)偏低的結(jié)果。4.微生物消長(zhǎng)的多變性微

12、生物消長(zhǎng)的多變性藥品微生物消長(zhǎng)多變性的主要表現(xiàn)為，污染藥品藥品微生物消長(zhǎng)多變性的主要表現(xiàn)為，污染藥品的微生物可隨貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸衰亡，也可的微生物可隨貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸衰亡，也可因環(huán)境條件適宜而大量繁殖因環(huán)境條件適宜而大量繁殖 藥品微生物檢查內(nèi)容藥品微生物檢查內(nèi)容 藥品微生物檢查的內(nèi)容主要包括：藥品微生物檢查的內(nèi)容主要包括： 無(wú)菌檢查（無(wú)菌檢查（sterility tests） 微生物限度檢查（微生物限度檢查（microbial limit tests） 細(xì)菌內(nèi)毒素和熱原質(zhì)檢查細(xì)菌內(nèi)毒素和熱原質(zhì)檢查 （bacterial endotoxin test, pyrogen test）無(wú)菌檢查

13、法無(wú)菌檢查法 無(wú)菌檢查的定義：無(wú)菌檢查的定義： 系指用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、系指用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料、及其他品種是否無(wú)菌的方法。若供試品符合無(wú)輔料、及其他品種是否無(wú)菌的方法。若供試品符合無(wú)菌檢查法的規(guī)定，則表明供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)菌檢查法的規(guī)定，則表明供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。現(xiàn)微生物污染。 凡是直接進(jìn)入人體血循環(huán)系統(tǒng)、肌肉、皮下組織或接凡是直接進(jìn)入人體血循環(huán)系統(tǒng)、肌肉、皮下組織或接觸創(chuàng)傷、潰瘍和燒傷等部位而發(fā)揮作用的制品，或者觸創(chuàng)傷、潰瘍和燒傷等部位而發(fā)揮作用的制品，或者要求無(wú)菌的材料、滅菌器具等都要進(jìn)行無(wú)菌檢查，以要求無(wú)菌的材

14、料、滅菌器具等都要進(jìn)行無(wú)菌檢查，以最大限度地保證這些制劑或用品不帶有活菌。最大限度地保證這些制劑或用品不帶有活菌。無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法 常用的無(wú)菌檢查方法：常用的無(wú)菌檢查方法： 包括需氧菌、厭氧菌和真菌三類微生物的檢查包括需氧菌、厭氧菌和真菌三類微生物的檢查 要求用最嚴(yán)格的無(wú)菌操作法，將待檢藥品或材料的檢要求用最嚴(yán)格的無(wú)菌操作法，將待檢藥品或材料的檢樣分別接種于適合微生物生長(zhǎng)的不同培養(yǎng)基中，置于樣分別接種于適合微生物生長(zhǎng)的不同培養(yǎng)基中，置于適宜溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間，逐日觀察微生物生長(zhǎng)情況，適宜溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間，逐日觀察微生物生長(zhǎng)情況，并結(jié)合陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)的結(jié)果，判斷是否受到微并結(jié)合陽(yáng)性和陰

15、性對(duì)照試驗(yàn)的結(jié)果，判斷是否受到微生物污染，從而判斷供試品是否合格。生物污染，從而判斷供試品是否合格。無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法 常用的無(wú)菌檢查方法：常用的無(wú)菌檢查方法： 硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基用于需氧菌和厭氧菌檢查，改硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基用于需氧菌和厭氧菌檢查，改良馬丁培養(yǎng)基用于霉菌檢查，聚山梨酯良馬丁培養(yǎng)基用于霉菌檢查，聚山梨酯80培養(yǎng)基用于培養(yǎng)基用于油劑藥品的無(wú)菌檢查，使之成為均勻的乳濁液。油劑藥品的無(wú)菌檢查，使之成為均勻的乳濁液。 無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法供試品的無(wú)菌檢查供試品的無(wú)菌檢查 I.無(wú)菌檢查的抽樣無(wú)菌檢查的抽樣隨機(jī)抽樣方法有隨機(jī)抽樣方法有3種，百分?jǐn)?shù)抽樣法、固定抽樣種，百分?jǐn)?shù)抽樣法、固定抽

16、樣法和綜合抽樣法。法和綜合抽樣法。在無(wú)菌檢查的抽樣時(shí)，應(yīng)特別注意在無(wú)菌檢查的抽樣時(shí)，應(yīng)特別注意“批批”的概念的概念在抽樣時(shí)還應(yīng)關(guān)注在抽樣時(shí)還應(yīng)關(guān)注“檢驗(yàn)數(shù)量檢驗(yàn)數(shù)量”和和“檢驗(yàn)量檢驗(yàn)量”這這兩個(gè)概念兩個(gè)概念 無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法供試品的無(wú)菌檢查供試品的無(wú)菌檢查 II.陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn) 供試品無(wú)菌檢查試驗(yàn)必須同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性和陰性對(duì)供試品無(wú)菌檢查試驗(yàn)必須同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)，以保證試驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)可靠照試驗(yàn)，以保證試驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)可靠 陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)是檢查陽(yáng)性對(duì)照菌在加入供試品的陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)是檢查陽(yáng)性對(duì)照菌在加入供試品的培養(yǎng)基中能否生長(zhǎng)，以驗(yàn)證供試品有無(wú)抑菌活性培養(yǎng)基中能否生長(zhǎng)，

17、以驗(yàn)證供試品有無(wú)抑菌活性物質(zhì)和試驗(yàn)條件是否符合要求的試驗(yàn)。物質(zhì)和試驗(yàn)條件是否符合要求的試驗(yàn)。 陰性對(duì)照試驗(yàn)是在無(wú)菌檢查時(shí)，應(yīng)取相應(yīng)溶劑和陰性對(duì)照試驗(yàn)是在無(wú)菌檢查時(shí)，應(yīng)取相應(yīng)溶劑和稀釋液同法操作，作為陰性對(duì)照。稀釋液同法操作，作為陰性對(duì)照。 無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法供試品的無(wú)菌檢查供試品的無(wú)菌檢查 III. 無(wú)菌檢查結(jié)果判斷無(wú)菌檢查結(jié)果判斷 各培養(yǎng)物按規(guī)定溫度連續(xù)培養(yǎng)各培養(yǎng)物按規(guī)定溫度連續(xù)培養(yǎng)14 天。培養(yǎng)期間逐天。培養(yǎng)期間逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)根據(jù)根據(jù)中國(guó)藥典中國(guó)藥典的無(wú)菌檢查規(guī)定，在培養(yǎng)期結(jié)的無(wú)菌檢查規(guī)定，在培養(yǎng)期結(jié)束后，只有當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照管渾濁并確有細(xì)菌生長(zhǎng)、束后，只有

18、當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照管渾濁并確有細(xì)菌生長(zhǎng)、陰性對(duì)照管澄清時(shí)，才可依據(jù)所觀察到的現(xiàn)象判陰性對(duì)照管澄清時(shí)，才可依據(jù)所觀察到的現(xiàn)象判斷無(wú)菌檢查的結(jié)果斷無(wú)菌檢查的結(jié)果 無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法 無(wú)菌檢查的環(huán)境要求無(wú)菌檢查的環(huán)境要求 無(wú)菌檢查試驗(yàn)的所有操作均必須在嚴(yán)格控制的無(wú)菌保無(wú)菌檢查試驗(yàn)的所有操作均必須在嚴(yán)格控制的無(wú)菌保障條件下進(jìn)行，以確保無(wú)菌檢查結(jié)果的正確障條件下進(jìn)行，以確保無(wú)菌檢查結(jié)果的正確 中國(guó)藥典中國(guó)藥典規(guī)定無(wú)菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度規(guī)定無(wú)菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度 10 000 級(jí)級(jí)下的局部潔凈度下的局部潔凈度 100 級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行，其全過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，

19、防止微生統(tǒng)中進(jìn)行，其全過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。檢出。無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法 無(wú)菌檢查的培養(yǎng)基要求無(wú)菌檢查的培養(yǎng)基要求 培養(yǎng)基制備：可按培養(yǎng)基制備：可按中國(guó)藥典中國(guó)藥典規(guī)定的處方制備，也規(guī)定的處方制備，也可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基 培養(yǎng)基的適用性檢查：在無(wú)菌檢查正式開(kāi)始前或同時(shí)，培養(yǎng)基的適用性檢查：在無(wú)菌檢查正式開(kāi)始前或同時(shí)，要求對(duì)無(wú)菌檢查用的硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基和改良馬要求對(duì)無(wú)菌檢查用的硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌性檢查和

20、靈敏度檢查丁培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌性檢查和靈敏度檢查 無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法 無(wú)菌檢查方法的驗(yàn)證試驗(yàn)無(wú)菌檢查方法的驗(yàn)證試驗(yàn) 在建立藥品無(wú)菌檢查法時(shí)，要對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證，以確在建立藥品無(wú)菌檢查法時(shí)，要對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證，以確認(rèn)所建方法適合于該藥品的無(wú)菌檢查。認(rèn)所建方法適合于該藥品的無(wú)菌檢查。 驗(yàn)證方法同樣也有薄膜過(guò)濾法和直接接種法兩種。驗(yàn)證方法同樣也有薄膜過(guò)濾法和直接接種法兩種。無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法 無(wú)菌檢查的局限性與規(guī)定滅菌藥品的無(wú)菌保證無(wú)菌檢查的局限性與規(guī)定滅菌藥品的無(wú)菌保證 由于無(wú)菌檢查局限性，規(guī)定滅菌藥品在由于無(wú)菌檢查局限性，規(guī)定滅菌藥品在SAL概率意義概率意義上的無(wú)菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無(wú)菌檢查，

21、而應(yīng)上的無(wú)菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無(wú)菌檢查，而應(yīng)取決于生產(chǎn)過(guò)程中采用驗(yàn)證合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的取決于生產(chǎn)過(guò)程中采用驗(yàn)證合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的質(zhì)量保證體系。管理和良好的質(zhì)量保證體系。 微生物限度檢查微生物限度檢查 微生物限度檢查的定義：微生物限度檢查的定義： 是指檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、敷料受到微生物是指檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、敷料受到微生物污染程度的方法。污染程度的方法。 藥品微生物限度檢查的內(nèi)容包括微生物總數(shù)（細(xì)菌總藥品微生物限度檢查的內(nèi)容包括微生物總數(shù)（細(xì)菌總數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)）檢查和控制菌檢查數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)）檢查和控制菌檢查 。 微生物限度檢查微生物限度檢

22、查藥品微生物總數(shù)檢查藥品微生物總數(shù)檢查 定義：檢測(cè)藥物在單位質(zhì)量（定義：檢測(cè)藥物在單位質(zhì)量（g）、體積（）、體積（ml）或表面）或表面積（積（cm2）內(nèi)所含的活菌數(shù)量，用來(lái)判斷藥品受微生物）內(nèi)所含的活菌數(shù)量，用來(lái)判斷藥品受微生物污染的程度。污染的程度。 是藥品質(zhì)量的一個(gè)重要評(píng)價(jià)指標(biāo)。是藥品質(zhì)量的一個(gè)重要評(píng)價(jià)指標(biāo)。 檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌總數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)的計(jì)數(shù)檢查。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌總數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)的計(jì)數(shù)檢查。微生物限度檢查微生物限度檢查藥品微生物總數(shù)檢查藥品微生物總數(shù)檢查 根據(jù)根據(jù)中國(guó)藥典中國(guó)藥典規(guī)定規(guī)定 細(xì)菌落總數(shù)是指每克、每毫升或每細(xì)菌落總數(shù)是指每克、每毫升或每10 cm2在需氧條件在需氧

23、條件下，下，3035培養(yǎng)培養(yǎng)3d天，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)的菌天，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)。落數(shù)。 霉菌和酵母菌菌落計(jì)數(shù)，采用玫瑰紅鈉瓊脂或酵母浸霉菌和酵母菌菌落計(jì)數(shù)，采用玫瑰紅鈉瓊脂或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂為培養(yǎng)基，出粉胨葡萄糖瓊脂為培養(yǎng)基，2328培養(yǎng)培養(yǎng)5d 微生物限度檢查微生物限度檢查控制菌的檢查控制菌的檢查 定義：藥品中不得檢出的細(xì)菌就稱為控制菌定義：藥品中不得檢出的細(xì)菌就稱為控制菌 中國(guó)藥典中國(guó)藥典規(guī)定的控制菌檢查項(xiàng)目包括：規(guī)定的控制菌檢查項(xiàng)目包括： 大腸埃希菌、大腸菌群、沙門菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、大腸菌群、沙門菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌屬和白色念珠菌。銅綠

24、假單胞菌、梭菌屬和白色念珠菌。 其中，梭菌屬包括能產(chǎn)生強(qiáng)烈外毒素的產(chǎn)氣莢膜梭其中，梭菌屬包括能產(chǎn)生強(qiáng)烈外毒素的產(chǎn)氣莢膜梭菌、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌和艱難梭菌。菌、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌和艱難梭菌。 微生物限度檢查微生物限度檢查 微生物限度檢查的要求微生物限度檢查的要求 環(huán)境要求：環(huán)境要求： 細(xì)菌和控制菌的培養(yǎng)溫度為細(xì)菌和控制菌的培養(yǎng)溫度為3035，霉菌和酵母菌的培養(yǎng)，霉菌和酵母菌的培養(yǎng)溫度為溫度為2328。 檢驗(yàn)量：檢驗(yàn)量： 是指一次試驗(yàn)所用的供試品量。是指一次試驗(yàn)所用的供試品量。 微生物限度檢查的供試品檢驗(yàn)量通常為微生物限度檢查的供試品檢驗(yàn)量通常為10g或或10ml，化學(xué)膜劑，化學(xué)膜劑為為100

25、cm2，貴重藥品和微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。，貴重藥品和微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。微生物限度檢查微生物限度檢查 微生物限度檢查的要求微生物限度檢查的要求 培養(yǎng)基的適應(yīng)性檢查與檢查方法的驗(yàn)證：培養(yǎng)基的適應(yīng)性檢查與檢查方法的驗(yàn)證： 在建立藥品微生物限度檢查法時(shí)，同樣應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性在建立藥品微生物限度檢查法時(shí)，同樣應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查和檢查方法的驗(yàn)證，以確認(rèn)所采用的培養(yǎng)基和方法適合于檢查和檢查方法的驗(yàn)證，以確認(rèn)所采用的培養(yǎng)基和方法適合于該藥品的細(xì)菌、霉菌和酵母菌數(shù)，以及控制菌的測(cè)定。該藥品的細(xì)菌、霉菌和酵母菌數(shù)，以及控制菌的測(cè)定。熱原和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法熱原和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 熱原（

26、熱原（pyrogen）：）： 泛指那些能引起機(jī)體發(fā)熱的物質(zhì)。熱原普遍存在于自泛指那些能引起機(jī)體發(fā)熱的物質(zhì)。熱原普遍存在于自然水、自來(lái)水、塵埃中，細(xì)菌內(nèi)毒素也是熱原的來(lái)源然水、自來(lái)水、塵埃中，細(xì)菌內(nèi)毒素也是熱原的來(lái)源之一。之一。 細(xì)菌內(nèi)毒素（細(xì)菌內(nèi)毒素（endotoxin） 是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的組分，是在細(xì)菌死亡破裂后釋是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的組分，是在細(xì)菌死亡破裂后釋放出的毒性脂多糖（放出的毒性脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）。）。 熱原和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法熱原和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 熱原檢查法熱原檢查法 也稱為家兔熱原試驗(yàn)也稱為家兔熱原試驗(yàn) 將一定劑量的供試品靜脈注入家兔體內(nèi)，

27、在規(guī)定時(shí)間將一定劑量的供試品靜脈注入家兔體內(nèi)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱內(nèi)觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定原的限度是否符合規(guī)定熱原和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法熱原和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 又稱為鱟試驗(yàn)（又稱為鱟試驗(yàn)（Limulus test） 利用鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)制，來(lái)判斷供利用鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)制，來(lái)判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn) 規(guī)定滅菌藥品的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定滅菌藥品的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn) 制劑

28、通則、品種項(xiàng)下要求無(wú)菌的制劑及標(biāo)示無(wú)菌的制制劑通則、品種項(xiàng)下要求無(wú)菌的制劑及標(biāo)示無(wú)菌的制劑，應(yīng)符合無(wú)菌檢查法規(guī)定。用于手術(shù)、燒傷或嚴(yán)重劑，應(yīng)符合無(wú)菌檢查法規(guī)定。用于手術(shù)、燒傷或嚴(yán)重?fù)p傷的局部給藥制劑，應(yīng)無(wú)菌檢查法規(guī)定。損傷的局部給藥制劑，應(yīng)無(wú)菌檢查法規(guī)定。 藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn) 非規(guī)定滅菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)非規(guī)定滅菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)第四節(jié)第四節(jié) 藥品微生物污染預(yù)防藥品微生物污染預(yù)防藥品微生物污染預(yù)防藥品微生物污染預(yù)防一、防止藥品微生物污染的措施一、防止藥品微生物污染的措施二、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理二、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理 防止藥品微生物污染措施防止藥品微生物污染措施1. 加強(qiáng)藥物的

29、生產(chǎn)管理加強(qiáng)藥物的生產(chǎn)管理2. 合理使用防腐劑合理使用防腐劑 3. 實(shí)施微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)施微生物學(xué)檢驗(yàn) 4. 合理貯存藥品合理貯存藥品 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求1.藥品生產(chǎn)環(huán)境的管理藥品生產(chǎn)環(huán)境的管理（1）潔凈室的分級(jí)）潔凈室的分級(jí) 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求1. 藥品生產(chǎn)環(huán)境的管理藥品生產(chǎn)環(huán)境的管理（2）藥品生產(chǎn)環(huán)境空氣潔凈度的要求）藥品生產(chǎn)環(huán)境空氣潔凈度的要求 我國(guó)要求我國(guó)要求 非最終滅菌藥品，對(duì)于灌裝前不需除菌濾過(guò)的藥液配制要求非最終滅菌藥品，對(duì)于灌裝前不需除菌濾過(guò)的藥液配制要求100級(jí)或級(jí)或

30、10000級(jí)背景下局部級(jí)背景下局部100級(jí)，對(duì)于灌裝前需除菌濾過(guò)的級(jí)，對(duì)于灌裝前需除菌濾過(guò)的藥液配制要求藥液配制要求10000級(jí)級(jí) 最終滅菌藥品，對(duì)于大容量注射劑最終滅菌藥品，對(duì)于大容量注射劑(50ml)的灌封要求的灌封要求100級(jí)或級(jí)或10000級(jí)監(jiān)督下的局部級(jí)監(jiān)督下的局部100級(jí)，對(duì)于注射劑的稀配、濾過(guò)以及小級(jí)，對(duì)于注射劑的稀配、濾過(guò)以及小容量注射劑的灌封等要求容量注射劑的灌封等要求10000級(jí)級(jí)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求2.設(shè)備管理設(shè)備管理 設(shè)備：設(shè)備：GMP要求生產(chǎn)、檢驗(yàn)設(shè)備均應(yīng)有使用、維修、保養(yǎng)要求生產(chǎn)、檢驗(yàn)設(shè)備均應(yīng)有使用、維修、保養(yǎng)記錄，并由專人管理。記錄，并由專人管理。工藝用水系統(tǒng)工藝用水系統(tǒng) ：是藥品生產(chǎn)過(guò)程的重要環(huán)節(jié)，要對(duì)其生產(chǎn)：是藥品生產(chǎn)過(guò)程的重要環(huán)節(jié)，要對(duì)其生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)行全面監(jiān)控。過(guò)程進(jìn)行全面監(jiān)控。 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理要求3.物料管理物料管理建立物料管理系統(tǒng)建立物料管理系統(tǒng) 制定物料管理制度制定物料管理制度 科學(xué)的倉(cāng)儲(chǔ)管理科學(xué)的倉(cāng)儲(chǔ)管理 藥