1、天津市秀鵬生物技術開發(fā)有限公司Tianjin Super Biotechnology Developing Co., Ltd.自身免疫疾病概述及自身抗體實驗室檢測uAID概念u是以皮膚、關節(jié)、血管及多系 統(tǒng)損害為主或伴免疫功能異常的一類疾病。多與自身免疫異常有關。u范圍廣泛AID免疫神經(jīng)心內呼吸腎內骨科皮膚血液容易誤診分類 經(jīng)典的系統(tǒng)性自身免疫疾病系統(tǒng)性脈管炎特發(fā)性炎性肌病其他免疫介導的系統(tǒng)性疾病 內分泌和生殖系統(tǒng)的自身疾病 肝膽管及胰腺的自身免疫疾病 胃腸道自身免疫疾病 自身免疫分類皮膚自身免疫疾病心血管和肺部自身免疫疾病神經(jīng)學自身免疫疾病 眼部自身免疫疾病 腎臟自身免疫疾病 血液自身免疫疾

2、病 自身免疫 結締組織?。–onnective tissue dieases, CTD）結締組織分布廣泛，CTD常常是多器官，多系統(tǒng)受累（膠原?。?風濕性疾病（rheumatic diseases,RD）變性風濕病，炎癥性風濕病，具有風濕性的代謝疾病 自身免疫病病(autoimmune diseases,AID)炎癥性風濕病，脈管炎疾病，胃腸病，甲狀腺病等 幾種名詞的解釋及包含關系RD CTD AID經(jīng)濟損失殘疾痛苦死亡藥物中毒5D 自身免疫疾病給患者帶來的危害靶抗原為內源物靶抗原為內源物全身癥狀，多全身癥狀，多系統(tǒng)損害系統(tǒng)損害原因不明，病程較原因不明，病程較長，易繼發(fā)疾病長，易繼發(fā)疾病 自身

3、免疫疾病的特點女性多于男性女性多于男性AID望聞問切望聞問切CT，MRI切片，活檢切片，活檢自身抗體自身抗體，ESR，CRP診斷方式診斷方式 自身免疫疾病的診斷1指抗自身細胞內、細胞表面和細胞外抗原成分的免疫球蛋白 2自身免疫應答是自身免疫性疾病最重要特征之一3絕大多數(shù)自身免疫性疾病伴有特征性的自身抗體（譜）4自身抗體檢測對自身免疫性疾病的診斷和鑒別診斷至關重要 自身抗體的定義 診斷診斷鑒別診斷鑒別診斷預測、預防預測、預防個體化醫(yī)療個體化醫(yī)療病程轉歸病程轉歸預后判斷預后判斷病情評估，病情評估，治療監(jiān)控治療監(jiān)控 自身抗體檢測的臨床意義血管炎概念u血管炎是血管壁及血管周圍有炎細胞浸潤，并伴有血管損

4、傷，包括纖維素沉積、膠原纖維變性、內皮細胞及肌細胞壞死，又稱脈管炎。u系統(tǒng)性血管炎是一組由血管炎性病變引起的疾病總稱，可以累及動脈、靜脈、毛細血管甚至淋巴管。因其受累血管的部位、大小、類型、病理等各不相同，使其臨床表現(xiàn)呈現(xiàn)出多樣化的特點。國際協(xié)會分類標準（2012年EULAR）u1.大血管性血管炎： 巨細胞動脈炎，大動脈炎（Takayasu） 。u2.中等血管性血管炎： 結節(jié)性多動脈炎，川崎病。u3.小血管炎 : (1) ANCA相關性血管炎:顯微鏡下多血管炎,韋格納肉芽腫,變應性肉芽腫性血管炎（CSS）;(2)免疫復合物血管炎:抗腎小球基底膜病, IgA血管炎（過敏性紫癜）,冷球蛋白癥血管炎

5、 ,低補體蕁麻疹性血管炎u4.多血管血管炎：Cogan綜合征、白塞病, u5.單一臟器血管炎：皮膚血管炎、原發(fā)性中樞神經(jīng)血管炎u6.系統(tǒng)性疾病相關性血管炎：類風濕關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等u7.可能病因相關性血管炎 ：乙肝病毒、丙肝病毒、藥物、腫瘤等。顯微鏡下多血管炎（MPA）u 90-95%的MPA患者為ANCAs陽性u ANCAs陽性中絕大多數(shù)（70%）為MPO-ANCAs（pANCA）u常規(guī)的熒光篩查采用乙醇固定的中性粒細胞u陽性的ANCA篩查結果通常要進行抗原特異性檢測，通常使用ELISA方法檢測PR3-ANCA和MPO-ANCA韋格納肉芽腫WGu肉芽腫性炎癥累及呼吸道以及壞死性血管炎累

6、及小-中型血管（如毛細血管，小靜脈，小動脈和動脈）u壞死性腎小球腎炎是很常見的u胞質熒光核型ANCAs（C-ANCA），蛋白酶3（PR3）特異性抗原是WG的高敏感性標記物教會山會議（CHCC）標準許爾斯特勞斯綜合征l 38-50%的患者中會檢測到ANCAl (ANCA陽性的患者中75-81%為pANCA，pANCA陽性的結果用ELISA方法進行抗MPO抗體的檢測，陽性率為92-100%l ANCA的滴度與CSS臨床相關性不明確l ANCA的存在與否對于兩種截然不同的臨床表現(xiàn)有著顯著意義抗腎小球基底膜?。ü诺屡了骨鹁C合癥）u抗GBM抗體陽性u腎小球腎炎和/或肺出血。血清學指標 陽性率抗GBM 1

7、00%ANCA（主要是MPO-ANCA） 20-35%ORGTEC檢測方案試劑名稱相關病癥敏感性Anti-MPO顯微鏡下多血管炎MPA、許爾斯特勞斯綜合征CSS70-90%Anti-PR3韋格納肉芽腫95%Anti-GBM古德帕斯丘綜合癥100%抗核抗體（ANA） 篩查-系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (SLE)-藥物性狼瘡-肖格倫綜合征-硬化癥-多肌炎/皮肌炎-原發(fā)性膽汁性肝硬化 (PBC)-混合性結締組織病- 在健康人群中也有可能出現(xiàn)Michael L. Astion ,University of Washington,Director of Laboratory Medicine這ANA-ELISA：在

8、歐美應用情況ANA-IFA: 65% 的實驗室在使用EIA: 25% 的實驗室在使用, 有 40%以上的占有量(也就是說，檢測量大的實驗室通常選擇 EIA)ORGENTEC的ELISA試劑盒：ANA Detect：ELISA 和Alegria兩種檢測方法1.混合包被26種抗原SS-A52RNP-ASm-FssDNAHistone H2AHistone H2BSS-A60RNP-CSm-GpolynucleosomesHistone H3 SS-B(La)Sm-BBScl-70monocucleosomesHistone H4RNP-70Sm-DJo-1Histone復合物PM-Scl-100R

9、NP/SmSm-EdsDNAHistone H1Centromere BSLE的ACR 分類標準 (Hochberg et al., 1997)1.蝶形紅斑2.盤狀皮膚病灶3.光過敏4.口腔潰瘍5.關節(jié)炎6.漿膜炎7.腎炎8.侵染神經(jīng)系統(tǒng)9.血液學癥狀10. 免疫學發(fā)現(xiàn)物 (anti-dsDNA, -Sm, -Cardiolipin)11. 高滴度的ANA判斷為SLE, 當: 11個標準中有4個以上的標準符合.自身抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的診斷A. 涉及關節(jié)涉及關節(jié) 1個大關節(jié)個大關節(jié) 0 2-10個大關節(jié)個大關節(jié) 1 1-3個小關節(jié)個小關節(jié) 2 4-10個小關節(jié)個小關節(jié) 3 超過超過1

10、0個關節(jié)（至少有一個小關節(jié)）個關節(jié)（至少有一個小關節(jié)） 5B血清學（分類標準要求至少滿足一項檢測結果）血清學（分類標準要求至少滿足一項檢測結果） RF陰性或陰性或ACPA陰性陰性 0 弱陽性弱陽性RF或弱陽性或弱陽性ACPA 2 強陽性強陽性RF或強陽性或強陽性ACPA 3C. 急性期反應物（分類標準要求至少滿足一項檢測結果）急性期反應物（分類標準要求至少滿足一項檢測結果） 正常正常CRP和正常和正常ESR 0 異常異常CRP或異常或異常ESR 1D. 癥狀持續(xù)時間癥狀持續(xù)時間 小于小于6周周 0 大于等于大于等于6周周 1 引用美國風濕病協(xié)會官方期刊2010.9（9）：2569-2581A+

11、B+C+D6分分 類風濕性關節(jié)炎類風濕性關節(jié)炎(RA) 自身抗體在類風濕關節(jié)炎（RA）的診斷ACPA:抗瓜氨酸化蛋白抗體（家族）抗核周因子抗體（APF）抗角蛋白抗體（AKA）抗聚絲蛋白抗體（AFA）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（Anti-CCP）抗波形瓜氨酸蛋白抗體（Anti-Sa）抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體（Anti-MCV）RF IgMRF IgAAnti-CCP2Anti-MCVRA sensitivity60-80%44%39-94%69.5-82%RA specificity80-95%84%81-100%90.3-98%Early RA sensitivity15-30%29-39%25-58

12、%57-71%Correlation with activity?yesnoyesCorrelation with outcomeyesyesyesyesAssociation with extra-articular manifestationyesyesyesyesK. Egerer, E. Feist, G.-R. BurmesterThe Serological Diagnosis of Rheumatoid Arthritis Antibodies to Citrullinated AntigensDtsch Arztebl Int 2009; 106 (10): 159-63ORG

13、ENTEC Anti-MCV 對比RF，CCP1.至少一個臨床標準 (血管血栓形成, 妊娠不良: 胎兒死亡 /自然流產) 加上2. 至少一個實驗室檢驗標準 (aPL 抗體 (狼瘡抗凝物), 抗心磷脂抗體, 抗2-糖蛋白I 抗體) 陽性檢測結果在12周以后重復進行檢測還是陽性自身抗體在抗磷脂綜合征（APS）的診斷2004年悉尼第十一屆aPL國際會議（2004悉尼標準）These data show that about 2/3 patient derived IgG monoclonal aCL are thrombogenic and suggest that some thrombogeni

14、c IgG aCL exert their effects through activating EC(endothelial cell).抗心磷脂抗體血栓Functional Analyses of Patient-derived IgG Monoclonal Anticardiolipin Antibodies Using In Vivo Thrombosis and In Vivo Microcirculation ModelsACA為急性腦血管病的危險因素。IgA可能為缺血性腦血管病的主要致病性抗體。急性腦血管病患者血清抗心磷脂抗體水平及其臨床意義。河南開封市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內科l 試劑的重要參數(shù)信息儲