1、儀器的組成操作前準(zhǔn)備開機(jī)及關(guān)機(jī)工作站使用數(shù)據(jù)分析注意事項(xiàng)主體 安捷倫1260HPLC 流動(dòng)相瓶、四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器附件 電腦、顯示器、打印機(jī)等安捷倫安捷倫1260HPLC1260HPLC流動(dòng)相瓶四元泵自動(dòng)進(jìn)樣器柱溫箱二極管陣列檢測(cè)器四元泵自動(dòng)進(jìn)樣器柱溫箱二極管陣列檢測(cè)器排氣閥流動(dòng)相瓶電源開關(guān)指示燈色譜柱色譜柱流動(dòng)相選擇流動(dòng)相過濾流動(dòng)相超聲與脫氣流動(dòng)相冷卻流動(dòng)相選擇 分類：組成分-單組分和多組分 極性-極性、弱極性、非極性 常用溶劑：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等 （溶劑最好為HPLC級(jí)，水為超純水） 其中多采用二元或多元組合溶劑作為流動(dòng)相，通過調(diào)節(jié)各組分的

2、比例改變流動(dòng)相的極性，已達(dá)到最佳的分離效果，對(duì)于部分情況還可以加入緩沖鹽，調(diào)節(jié)出峰時(shí)間和達(dá)到改善峰型的效果。流動(dòng)相過濾 為了除去流動(dòng)相中的雜質(zhì),保護(hù)系統(tǒng)和色譜柱，在流動(dòng)相使用完后，裝入新的溶劑前應(yīng)使用抽濾瓶對(duì)溶劑進(jìn)行過濾。濾膜濾膜：有機(jī)膜和水系膜，二者不能混用。一般HPLC流動(dòng)相過濾使用孔徑為0.45m的濾膜。針對(duì)混合溶劑首選有機(jī)濾膜過濾。流動(dòng)相超聲與脫氣 為了除去溶解在流動(dòng)相中得氣泡,降低基線噪音，在HPLC開機(jī)前應(yīng)把各溶劑瓶在超聲機(jī)中超聲30min左右。 對(duì)于溶解在流動(dòng)相中的極微氣體，安捷倫1260HPLC四元泵中集合了脫氣機(jī)，可以進(jìn)一步對(duì)混合后的流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理。流動(dòng)相冷卻 流動(dòng)相在超

3、聲機(jī)中長(zhǎng)時(shí)間超聲后，由于水分子振動(dòng)摩擦，使水溫上升，因此流動(dòng)相瓶中的溶劑也會(huì)被加熱。加熱后的流動(dòng)相進(jìn)入液相系統(tǒng)和色譜柱后，會(huì)影響基線噪聲的增加，使平穩(wěn)時(shí)間延長(zhǎng)。1260HPLC及化學(xué)工作站開機(jī)使用與關(guān)機(jī)打開計(jì)算機(jī)打開主機(jī)電源點(diǎn)擊儀器1聯(lián)機(jī)進(jìn)入工作站排氣（A/B/C/D）調(diào)節(jié)流速與流動(dòng)相比例關(guān)閉排氣閥打開柱溫箱逐步增大流速檢查壓力穩(wěn)定后打開檢測(cè)器跑基線穩(wěn)定后清洗針與管路樣品命名進(jìn)樣檢測(cè)保存數(shù)據(jù)沖洗管路及關(guān)機(jī)關(guān)機(jī)前，用90%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5-1小時(shí)，流量1.0mL/min，再用100%有機(jī)溶劑（甲醇）沖0.5小時(shí)，然后保存方法和儀器設(shè)置。退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)。關(guān)掉液相主機(jī)各

4、模塊電源開關(guān)，拔掉電源插頭。做好儀器使用登記。進(jìn)入工作站主界面方法和各模塊參數(shù)設(shè)置跑基線樣品命名與進(jìn)樣檢測(cè)進(jìn)入工作站主界面方法和各模塊參數(shù)設(shè)置在各模塊中空白處點(diǎn)擊右鍵，選擇“方法”編輯參數(shù)。1bar14.5psi0.1MPa=100kPa不同儀器單位不同視圖在線信號(hào)信號(hào)窗口1跑基線至少平穩(wěn)至少平穩(wěn)30min單次樣品：樣品命名序列樣品：命名與序列表設(shè)置進(jìn)樣檢測(cè)樣品色譜圖進(jìn)入儀器1脫機(jī)打開數(shù)據(jù)文件夾打開樣品色譜圖色譜峰編輯色譜峰數(shù)據(jù)打印報(bào)告色譜峰實(shí)例打開儀器1脫機(jī)數(shù)據(jù)文件夾序列樣品數(shù)據(jù)單次樣品數(shù)據(jù)樣品數(shù)據(jù)樣品數(shù)據(jù)色譜圖色譜圖色譜圖編輯色譜峰數(shù)據(jù)色譜峰手動(dòng)積分報(bào)告打印報(bào)告主峰數(shù)據(jù)主峰要求：分離度1.

5、50.95對(duì)稱因子 1.05塔板數(shù)8000以上min5101520mAU01020304050607080*DAD1 A, Sig=248,4 Ref=off (VPA-TDM-2VPA-SCJ 2015-03-24 11-31-16VPA-20150324001.D)12患者患者丙戊酸鈉血藥濃度檢測(cè)丙戊酸鈉血藥濃度檢測(cè)色譜圖色譜圖環(huán)己烷羧酸丙戊酸鈉min5101520mAU01020304050607080*DAD1 A, Sig=248,4 Ref=off (VPA-TDM-2VPA-SCJ 2015-04-01 11-36-49VPA-20150401005.D)min05101520mAU01020304050607080*DAD1 A, Sig=248,4 Ref=off (VPA-TDM-2VPA-SCJ 2015-04-01 11-36-49VPA-20150401008.D)12空白標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰實(shí)例色譜峰實(shí)例氘燈是易耗品，分析前應(yīng)最后開燈，不分析樣品應(yīng)及時(shí)關(guān)閉氘燈；流動(dòng)相不要使用多日存放的蒸餾水，一般不易超過三天（易長(zhǎng)菌），影響基線平衡；儀器使用后，應(yīng)用90%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5-1h，流量1.0mL/min，再用100甲醇沖洗0.5h；開機(jī)時(shí)，打開排氣閥，設(shè)置流動(dòng)相為100%水，泵流量5.0mL/min，若此時(shí)