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文檔簡介

1、食物蛋白質肌肉蛋白質上皮或實質細胞中蛋白質結締組織中蛋白質血漿蛋白質血紅蛋白、白細胞中蛋白質內源性蛋白質組織或血液蛋白質氨基酸合成組織氨基酸生理活性物質活性肽生物胺核苷酸和核酸氨基酸吸收血中氨基酸氨基酸分解供能排泄糞氮皮膚、尿尿素、氨流動相流動相進樣器檢測器工作站高壓泵高壓泵高效液相色譜儀示意圖 氨基酸的呈色反應氨基酸的呈色反應氨基酸顯色用試劑和條件呈現(xiàn)色精氨酸-萘酚和次亞氯酸鈉（坂口氏反應）紅色胱氨酸、半胱氨酸亞硝基鐵氰化鉀、氰化鈉，在稀氨水中紅色半胱氨酸1，2-萘醌-4-磺酸鈉和次亞硫酸鈉紅色組氨酸、酪氨酸重氮苯磺酸，在堿性溶液中紅色色氨酸乙醛酸，在36N硫酸中紫色對二甲氨基苯甲醛，在12

2、N鹽酸中藍色酪氨酸磷鉬鎢酸藍色Millon反應，與硝酸汞在硝酸中加熱紅色酪、色、苯丙氨酸濃硝酸中加熱（黃蛋白反應）黃（堿化后轉紅）甘氨酸鄰苯二甲醛溶液綠色甲硫氨酸1高錳酸鉀 2碳酸鈉黃色脯氨酸、羥脯氨酸茚三酮黃色、橙黃靛紅天藍桂皮醛淺褐紫各種氨基酸測定方法的比較各種氨基酸測定方法的比較分析方法柱后衍生柱前衍生離子交換法茚三酮離子交換法OPA反相分配法OPA反相分配法PITC反相分配法DABS分析時間80分80分30分15分30分靈敏度通常分析檢測極限1nmol100pmols1nmol50pmols500pmols10pmols100pmols1pmol300pmols5pmols檢測1級、2

3、級胺可 見 光 ：570nm 440nm1級、2級胺熒光：EX：338nm EM：425nm1級胺熒光：EX：338nm EM：425nm1級、2級胺紫外光：254nm1級、2級胺可見光：455nm重現(xiàn)性（BT）0.2%0.2%2%2%0.5%分析精度C.V.%1-2%(1-2nmol)3-5%(1-2nmol)5-10%(50pmol)5-10%(100pmol)2-5%(200pmol)分 析 裝 置HPLC+其他裝置離子交換柱柱后衍生器離子交換柱柱后衍生器ODS C18柱ODS C18柱ODS C18柱 梯度洗脫梯度洗脫精密度實驗： 變異系數(shù) 4.21% 回收率：96.757.89% 最低檢測限：40nmol/L正常值：男 688.906 106.15 女 630.714 99.32 p0.05注意：尿放防腐劑；煮沸時間準確；濃度過大應稀釋靜脈血2ml離心0.4ml血漿去蛋白肝素抗凝進樣10l濾液色譜條件色譜柱：YWG-NH2 4.6mm200mm 10um檢測器：UV 256nm流動相：9.0/91.0(甲醇/水)pH3.0 5mmol/L H3PO4 緩沖溶液 流速1.0ml/mi

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