1、實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 觀察動(dòng)植物細(xì)胞的有絲分裂觀察動(dòng)植物細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理高等植物細(xì)胞有絲分裂的過程，分為分裂間期和分裂期高等植物細(xì)胞有絲分裂的過程，分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期。的前期、中期、后期、末期。有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞。有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞。細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色，如龍膽紫溶液。細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色，如龍膽紫溶液。先用低倍鏡找到根尖生長點(diǎn)的細(xì)胞，再用高倍鏡辨別各時(shí)先用低倍鏡找到根尖生長點(diǎn)的細(xì)胞，再用高倍鏡辨別各時(shí)期的染色體變化，并判斷該細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期。期的染色體變化，并判斷該細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)

2、時(shí)期。實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技術(shù)掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技術(shù)初步掌握繪制生物圖的方法（有絲分裂中期）初步掌握繪制生物圖的方法（有絲分裂中期）鞏固顯微鏡的使用方法鞏固顯微鏡的使用方法實(shí)驗(yàn)用具實(shí)驗(yàn)用具材料：材料：培養(yǎng)好的洋蔥（或蒜、蔥）培養(yǎng)好的洋蔥（或蒜、蔥）質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%15%的鹽酸溶液；的鹽酸溶液；體積分?jǐn)?shù)為體積分?jǐn)?shù)為95%95%的酒精溶液的酒精溶液質(zhì)量濃度為質(zhì)量濃度為0.01g/mL0.01g/mL或或0.02g/mL0.02g/mL的龍的龍膽紫溶液（

3、或醋酸洋紅液）。膽紫溶液（或醋酸洋紅液）。用具：用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、玻璃皿、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、玻璃皿、剪刀、鑷子、滴管、解剖針、剪刀、鑷子、滴管、解剖針、實(shí)驗(yàn)步驟和方法實(shí)驗(yàn)步驟和方法注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)課之前三到四天，取一個(gè)洋蔥放在廣口瓶上，瓶內(nèi)裝滿清水，實(shí)驗(yàn)課之前三到四天，取一個(gè)洋蔥放在廣口瓶上，瓶內(nèi)裝滿清水，讓洋蔥的底部接觸到瓶內(nèi)的水面。把整個(gè)裝置放在溫暖的地方。讓洋蔥的底部接觸到瓶內(nèi)的水面。把整個(gè)裝置放在溫暖的地方。等根長到等根長到5cm5cm時(shí)，即可用于實(shí)驗(yàn)。時(shí)，即可用于實(shí)驗(yàn)。洋蔥底部接觸水，不能離開水，也不能被水淹，這樣可洋蔥底部接觸水，不能離開水，也不能被水淹，

4、這樣可以同時(shí)滿足洋蔥根尖生長對(duì)水和空氣的需要以同時(shí)滿足洋蔥根尖生長對(duì)水和空氣的需要經(jīng)常換水，至少一天一次。因?yàn)楦饧?xì)胞代謝產(chǎn)物很多，經(jīng)常換水，至少一天一次。因?yàn)楦饧?xì)胞代謝產(chǎn)物很多，呼吸不斷產(chǎn)生呼吸不斷產(chǎn)生COCO2 2，水中，水中H H2 2COCO3 3增多，氧氣缺少，不利于根增多，氧氣缺少，不利于根尖生長，另外，微生物生長繁殖也會(huì)影響根的生長。尖生長，另外，微生物生長繁殖也會(huì)影響根的生長。一、洋蔥根尖的培養(yǎng)一、洋蔥根尖的培養(yǎng)切取根尖切取根尖3 mm3 mm這個(gè)長度，必須從根冠端算起。這個(gè)長度這個(gè)長度，必須從根冠端算起。這個(gè)長度已經(jīng)將分生區(qū)（細(xì)胞分裂區(qū)）包括進(jìn)來，若長度過長，制作已經(jīng)將分生

5、區(qū)（細(xì)胞分裂區(qū)）包括進(jìn)來，若長度過長，制作的裝片在顯微鏡的低倍鏡下尋找分生區(qū)困難。的裝片在顯微鏡的低倍鏡下尋找分生區(qū)困難。二、裝片的制作二、裝片的制作取材：取材：注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：取材時(shí)間在上午取材時(shí)間在上午1010時(shí)時(shí) 下午下午2 2時(shí)之間，此時(shí)，根尖細(xì)胞分生區(qū)時(shí)之間，此時(shí)，根尖細(xì)胞分生區(qū)細(xì)胞有絲分裂最活躍，便于觀察。細(xì)胞有絲分裂最活躍，便于觀察。取材位置一定要從根尖端算起，取取材位置一定要從根尖端算起，取2 2 3 mm3 mm，不可過長，因?yàn)?，不可過長，因?yàn)榻?jīng)過實(shí)驗(yàn)，在此長度內(nèi)已經(jīng)包括了根尖分生區(qū)。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)，在此長度內(nèi)已經(jīng)包括了根尖分生區(qū)。根尖示意圖根尖示意圖裝片示意圖裝片示意圖將剪取

6、的根尖立即放入盛有解離液的將剪取的根尖立即放入盛有解離液的玻璃皿中，在室溫下解離玻璃皿中，在室溫下解離3 35 5分鐘分鐘2 2、解離：、解離：注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：目的：使根尖組織細(xì)胞之間分離，制做裝片時(shí)細(xì)胞能夠單層目的：使根尖組織細(xì)胞之間分離，制做裝片時(shí)細(xì)胞能夠單層分布。否則細(xì)胞重疊在一起，無法觀察。分布。否則細(xì)胞重疊在一起，無法觀察。時(shí)間：時(shí)間：3 35 5分鐘，可根據(jù)具體情況調(diào)整為分鐘，可根據(jù)具體情況調(diào)整為5 5 8 8分鐘，溫度太分鐘，溫度太低，時(shí)間可長點(diǎn)，溫度較高，時(shí)間可短點(diǎn)。低，時(shí)間可長點(diǎn)，溫度較高，時(shí)間可短點(diǎn)。 試劑：解離液是由質(zhì)量分?jǐn)?shù)為試劑：解離液是由質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%15%的鹽

7、酸溶液和體積分?jǐn)?shù)為的鹽酸溶液和體積分?jǐn)?shù)為95%95%的酒精溶液按的酒精溶液按1 1：1 1混合而成。混合而成。將解離充分的根尖用鑷子取出，放入盛將解離充分的根尖用鑷子取出，放入盛有清水的玻璃皿中，漂洗約有清水的玻璃皿中，漂洗約1010分鐘分鐘3 3、漂洗：、漂洗：注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：目的：洗去根尖藥液，防止染色液（堿性）與藥液（鹽酸）發(fā)生目的：洗去根尖藥液，防止染色液（堿性）與藥液（鹽酸）發(fā)生中和反應(yīng)，影響染色效果；另外還可心防止鹽酸腐蝕顯微鏡鏡頭。中和反應(yīng)，影響染色效果；另外還可心防止鹽酸腐蝕顯微鏡鏡頭。將漂洗好的洋蔥根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為將漂洗好的洋蔥根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為0.01g/mL

8、0.01g/mL或或0.02g/mL0.02g/mL的龍膽紫溶液中的玻璃皿中，染色的龍膽紫溶液中的玻璃皿中，染色3 35 5分鐘分鐘4 4、染色：、染色：注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：染色液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好，特別是染色不能染色液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好，特別是染色不能過深，否則鏡下一片紫色，無法觀察。也不能過淺，否過深，否則鏡下一片紫色，無法觀察。也不能過淺，否則染色體的形態(tài)和數(shù)目不易辨清。則染色體的形態(tài)和數(shù)目不易辨清。用鑷子將這段洋蔥根尖取出來，放在載玻片上，加一滴清水，用鑷子將這段洋蔥根尖取出來，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一并用鑷子尖把

9、洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓載玻片，這樣可以使細(xì)胞分片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓載玻片，這樣可以使細(xì)胞分散開來。散開來。5 5、制片：、制片：注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：注意壓片時(shí)，不能使蓋玻片移動(dòng)，以免使材料模糊不清，而且要注意壓片時(shí)，不能使蓋玻片移動(dòng)，以免使材料模糊不清，而且要控制好力度。在載玻片上加一滴清水的目的是防止出現(xiàn)汽泡，影控制好力度。在載玻片上加一滴清水的目的是防止出現(xiàn)汽泡，影響觀察效果。響觀察效果。1 1、顯微鏡的使用、顯微鏡的使用三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察把制好的裝片先放在低倍鏡下觀察，慢慢移動(dòng)裝片，把制好的裝片先放在低倍鏡下觀察，慢慢移動(dòng)裝片，找到分生區(qū)細(xì)胞所在的位置。分生區(qū)細(xì)胞的特點(diǎn)是：找到分生區(qū)細(xì)胞所在的位置。分生區(qū)細(xì)胞的特點(diǎn)是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài)。細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài)。2 2、低倍鏡觀察、低倍鏡觀察找到分生區(qū)細(xì)胞后，換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和找到分生區(qū)細(xì)胞后，換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，直到看清細(xì)胞物像為止。反光鏡把視野調(diào)整清晰，直到看清細(xì)胞物像為止。3 3、高倍鏡觀察、高倍鏡觀察仔細(xì)觀察，可先找出處于分裂中期的細(xì)胞，然后再仔細(xì)觀察，可先找出處于分