1、實驗七實驗七 酵母菌的形態(tài)觀察及酵母菌的形態(tài)觀察及 死活細(xì)胞的鑒別、細(xì)胞活力測定死活細(xì)胞的鑒別、細(xì)胞活力測定實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式 學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實驗方法學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實驗方法 掌握酵母菌的一般形態(tài)及其與細(xì)菌的區(qū)別掌握酵母菌的一般形態(tài)及其與細(xì)菌的區(qū)別實驗原理 酵母菌：是單細(xì)胞真核微生物，大小通常比常見酵母菌：是單細(xì)胞真核微生物，大小通常比常見細(xì)菌大幾倍甚至幾十倍細(xì)菌大幾倍甚至幾十倍 繁殖方式：芽殖、裂殖、無性孢子繁殖、有性孢繁殖方式：芽殖、裂殖、無性孢子繁殖、有性孢子繁殖子繁殖 美藍(lán)氧化型呈藍(lán)色，還原型為無色。美藍(lán)氧化

2、型呈藍(lán)色，還原型為無色。 活的酵母菌細(xì)胞具有新陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有活的酵母菌細(xì)胞具有新陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有較強的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)檩^強的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。無色的還原型。實驗材料實驗材料 菌種：釀酒酵母菌種：釀酒酵母 溶液或試劑：溶液或試劑：0.05%和和0.1%美藍(lán)美藍(lán) 儀器及其他用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片等儀器及其他用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片等實驗步驟實驗步驟 滴加滴加1美藍(lán)染液，按無菌操作挑取少量酵母菌美藍(lán)染液，按無菌操作挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均勻苔放在染液中，混合均勻 蓋好蓋玻片蓋好蓋玻片 3min后鏡檢，由低倍鏡到高倍

3、鏡，并根據(jù)顏色后鏡檢，由低倍鏡到高倍鏡，并根據(jù)顏色區(qū)別死活細(xì)胞區(qū)別死活細(xì)胞 30min后再次觀察后再次觀察 0.05%美藍(lán)染液重復(fù)上述操作美藍(lán)染液重復(fù)上述操作實驗結(jié)果實驗結(jié)果 設(shè)計一個表格，內(nèi)容：不同濃度、不同時間下酵設(shè)計一個表格，內(nèi)容：不同濃度、不同時間下酵母菌的活細(xì)胞數(shù)和死亡細(xì)胞數(shù)。母菌的活細(xì)胞數(shù)和死亡細(xì)胞數(shù)。 繪制一張圖，該圖可明確區(qū)分出活細(xì)胞和死細(xì)胞，繪制一張圖，該圖可明確區(qū)分出活細(xì)胞和死細(xì)胞，標(biāo)明美蘭的濃度、作用時間、放大倍數(shù)，標(biāo)明美蘭的濃度、作用時間、放大倍數(shù)，分析討論分析討論 相同濃度不同時間進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞計數(shù)有無相同濃度不同時間進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞計數(shù)有無差別，可能原因是什么

4、？差別，可能原因是什么？ 不同濃度相同時間進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞計數(shù)有無不同濃度相同時間進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞計數(shù)有無差別，可能原因是什么？差別，可能原因是什么？實驗八實驗八 微生物大小的測定微生物大小的測定一、目的要求一、目的要求 1、學(xué)習(xí)并掌握用測微尺測定微生物 大小的方法。 2、了解目鏡測微尺和鏡臺測微尺的原理 3、增強對微生物細(xì)胞大小的感性認(rèn)識。二、實驗器材及用品二、實驗器材及用品 1、菌種 酵母菌 2、儀器或其它用具 目鏡測微尺，鏡臺測微尺，顯微鏡。三、基本原理三、基本原理 微生物細(xì)胞大小，是微生物的形態(tài)特征之一，也是分類鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小，只能在顯微鏡下測量。用來測量微生物細(xì)胞大

5、小的工具有目鏡測微尺和鏡臺測微尺。 鏡臺測微尺 鏡臺測微尺是中央部分刻有精確等分鏡臺測微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片。線的載玻片。 一般將一般將1cm1cm等分為等分為100100格，每格長度等格，每格長度等于于0 001cm01cm（即（即100m100m）。是專用于校）。是專用于校正目鏡測微尺每格長度的。正目鏡測微尺每格長度的。目鏡測微尺目鏡測微尺 目鏡測微尺是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的目鏡測微尺是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片，其中央刻有精確的刻度，有等分圓形小玻片，其中央刻有精確的刻度，有等分5050小格或小格或100100小格兩種，每小格兩種，每5 5小格間有一長線相

6、小格間有一長線相隔。隔。 由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同，目鏡測微尺每小格所代表的實際長度也不同，目鏡測微尺每小格所代表的實際長度也就不同，因此，目鏡測微尺不能直接用來測量就不同，因此，目鏡測微尺不能直接用來測量微生物的大小，在使用前必須用鏡臺測微尺進(jìn)微生物的大小，在使用前必須用鏡臺測微尺進(jìn)行校正，以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接行校正，以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡下該目鏡測微尺每小格的相對值，然后才物鏡下該目鏡測微尺每小格的相對值，然后才可用來測量微生物的大小。可用來測量微生物的大小。 顯微測微尺顯微測微尺校對四、操作步驟1 1、

7、裝目鏡測微尺、裝目鏡測微尺2 2、校正目鏡測微尺、校正目鏡測微尺（1 1）放鏡臺測微尺）放鏡臺測微尺 將鏡臺測微尺刻度面朝上放在顯微將鏡臺測微尺刻度面朝上放在顯微鏡載物臺上。鏡載物臺上。（2 2）先用低倍鏡觀察，將鏡臺測微尺有刻度的部分移至）先用低倍鏡觀察，將鏡臺測微尺有刻度的部分移至視野中央，調(diào)節(jié)焦距，當(dāng)清晰的看到鏡臺測微尺的刻度后，視野中央，調(diào)節(jié)焦距，當(dāng)清晰的看到鏡臺測微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動目鏡使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行。轉(zhuǎn)動目鏡使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行。利用移動器移動鏡臺測微尺，使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩線完利用移動器移動鏡臺測微尺，使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩線完全重合，然

8、后分別數(shù)出兩重合線之間鏡臺測微尺和目鏡測全重合，然后分別數(shù)出兩重合線之間鏡臺測微尺和目鏡測微尺所占格數(shù)。用同樣的方法換成高倍鏡和油鏡進(jìn)行校正，微尺所占格數(shù)。用同樣的方法換成高倍鏡和油鏡進(jìn)行校正，分別測出在高倍鏡和油鏡下，兩重合線之間兩尺分別所占分別測出在高倍鏡和油鏡下，兩重合線之間兩尺分別所占格數(shù)。格數(shù)。3.計下兩吻合刻度間，目鏡測微尺與物鏡測微尺的格數(shù)。計下兩吻合刻度間，目鏡測微尺與物鏡測微尺的格數(shù)。按下列公式算出目鏡測微尺每小格所代表長度。按下列公式算出目鏡測微尺每小格所代表長度。目鏡測微尺每格長度（微米）目鏡測微尺每格長度（微米） 兩吻合刻度間物鏡測微尺格數(shù)兩吻合刻度間物鏡測微尺格數(shù)10

9、m= 兩吻和刻度間目鏡測微尺格數(shù)兩吻和刻度間目鏡測微尺格數(shù)例如：目鏡測微尺的例如：目鏡測微尺的5格等于物鏡測微尺的格等于物鏡測微尺的2格，則目鏡格，則目鏡測微尺測微尺1格格=（210）/5=4微米微米 低倍鏡下-倍目鏡測微尺每格長度為- 高倍鏡下-倍目鏡測微尺每格長度為- 油鏡下-倍目鏡測微尺每格長度為-注：要求測量10個酵母細(xì)胞的平均值目鏡測微尺標(biāo)定記錄10 x40 x100 x目鏡格數(shù)物鏡格數(shù)目鏡測微尺每格長度3、菌體大小測定 先用低倍鏡和高倍鏡找到標(biāo)本后，換油鏡測定酵母菌的直徑。 測定時，通過轉(zhuǎn)動目鏡測微尺和移動載玻片，測出細(xì)菌直徑或?qū)捄烷L所占目鏡測微尺的格數(shù)。 最后將所測得的格數(shù)乘以目鏡測微尺（用油鏡時）每格所代表的長度，即為該菌的實際大小。注意事項 1、鏡臺測微尺的玻片很薄，在標(biāo)定油鏡時，要格外注意，以免壓碎鏡臺測微尺或損壞鏡頭； 2、標(biāo)定目鏡測微尺時，一定要準(zhǔn)確對正目鏡測微尺與鏡臺測微尺的重合線。五、實驗報告 1 1、不同放大倍數(shù)下，目鏡測微尺標(biāo)定的結(jié)果。不同放大倍數(shù)下，目鏡測微尺標(biāo)定的結(jié)果。 2 2、酵母菌實際測量的結(jié)果。、酵母菌實際測量的結(jié)果。 3 3、結(jié)論：本實驗所用酵母菌