1、核酸的化學(xué)一、是非題 1嘌呤堿分子中含有嘧啶堿結(jié)構(gòu)。 2核苷由堿基和核糖以型的CN糖苷鍵相連。 3核苷酸是由核苷與磷酸脫水縮合而成，所以說核苷酸是核苷的磷酸酯。 4核苷酸的堿基和糖相連的糖苷鍵是CO型。 5核糖與脫氧核糖的差別是糖環(huán)的2位有無羥基。 6核苷酸的等電點(diǎn)的大小取決于核糖上的羥基與磷酸基的解離。 7在DNA雙鏈之間，堿基配對A-T形成兩對氫鍵，C-G形成三對氫鍵，若胸腺嘧啶 C2位的羰基上的氧原于質(zhì)子化形成OH， AT之間也可形成三對氫鍵。 8任何一條DNA片段中，堿基的含量都是A=T，C=G。 9DNA堿基摩爾比規(guī)律僅適令于雙鏈而不適合于單鏈。 10用二苯胺法測定DNA含量必須用同

2、源的DNA作標(biāo)準(zhǔn)樣品。 11DNA變性后就由雙螺旋結(jié)構(gòu)變成線團(tuán)結(jié)構(gòu)。 12Tm值低的DNA分子中 （AT）高。 13Tin值高的DNA分子中（C-G）高。 14由于 RNA不是雙鏈，因此所有的 RNA分子中都沒有雙螺旋結(jié)構(gòu)。 15起始濃度高、含重復(fù)序列多的 DNA片段復(fù)性速度快。 16DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄部必須根據(jù)堿基配對的原則。 17某氨基酸t(yī)RNA反密碼子為GUC，在mRNA上相對應(yīng)的密碼子應(yīng)該是CAG。 18細(xì)胞內(nèi)DNA的核苷酸順序都不是隨機(jī)的而是由遺傳性決定的。 19RNA鏈的5 核苷酸的3羥基與相鄰核昔酸的5羥基以磷酸二酯鍵相連。 20假如某DNA樣品當(dāng)溫度升高到一定程度時，OD260

3、提高30，說明它是一條雙鏈 DNA。 21核酸外切酶能夠降解所有的病毒DNA。二、填空題1 核苷酸是由、和磷酸基連接而成。2 在各種RNA中含稀有堿基最多。 3Tm值高的DNA分子中的含量高。Tm值低的DNA分子中含量高。 4真核生物的DNA存在于，其生物學(xué)作用是。 5細(xì)胞內(nèi)所有的RNA的核苷酸順序都是由它們的決定的。 6將雙鏈DNA放置在pH2以下或pH12以上，其OD260，在同樣條件下單鏈 DNA的OD260。 7B型結(jié)構(gòu)的DNA雙螺旋，兩條鏈?zhǔn)瞧叫?，其螺距為每個螺旋的堿基數(shù)為。 8DNA抗堿的原因是。 9將A、U、C和G四種核苷酸溶解在pH3.5的緩沖液中，從負(fù)極向正極進(jìn)行電泳， 跑得

4、最快，跑得最慢。 10從Ecoli中分離的DNA樣品內(nèi)含有20的腺嘌呤（A），那么T，GC。 11某DNA片段的堿基順序?yàn)镚CTACTAAGC，它的互補(bǔ)鏈順序應(yīng)為。 12具有高度重復(fù)序列的DNA片段，如，具有中度重復(fù)序列的DNA片段，如和的基因，真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基因是序列。 13當(dāng)溫度逐漸升到一定高度時，DNA雙鏈稱為變性。當(dāng)溫度逐漸降低時，DNA的兩條鏈，稱為。 11DNA的復(fù)性速度與、以及DNA片段的大小有關(guān)。 15天然 DNA的負(fù)超螺旋是由于DNA雙螺旋中兩條鏈引起的，為手超螺旋。正超螺旋是由于DNA雙螺旋中兩條鏈引起的，為手超螺旋。 16tRNA的二級結(jié)構(gòu)呈形，三級結(jié)構(gòu)的形狀像。三、選擇

5、題 DNA的Tm與介質(zhì)的離子強(qiáng)度有關(guān)，所以DNA制品應(yīng)保存在： A、高濃度的緩沖液中 B、低濃度的緩沖液中 C、純水中 D、有機(jī)試劑中 2在以下的修飾堿基中哪種在氫鍵的形成方面不同于和它相關(guān)的堿基： A、2-甲基腺嘌呤 B、5-甲基胞嘧啶C、5-羥甲基胞噙陵D、1-甲基鳥瞟吟 3熱變性后的DNA：A、紫外吸收增加 B、磷酸二酯鍵斷裂 C、形成三股螺旋 D、（G-C）含量增加4DNA分子中的共價鍵有：A、堿基與脫氧核糖 1位碳（C-1）之間的糖苷鍵。B、磷酸與脫氧核糖2位碳上的羥基（2-OH）之間的酯鍵。C、堿基與脫氧核糖 2位碳（C-2）之間的糖音鍵。D、磷酸與脫氧核糖1位碳上的羥基（2-OH

6、）之間的酯鍵。5發(fā)生熱變性后的DNA復(fù)性速度與： A、DNA的原始濃度有關(guān)。 B、催化復(fù)性的酶活性有關(guān)。 C、與DN A的長短無關(guān)。 D、與DNA分子中的重復(fù)序列無關(guān)。6下面關(guān)于核酸的敘述除哪個外都是正確的： A、在嘌呤和嘧啶堿之間存在著堿基配對。 B、當(dāng)胸腺嘧啶與腺嘌呤配對時，甲基不影響氫鍵形成。 C、堿溶液只能水解RNA，不能水解DNA。 D、在DNA分子中由氫鍵連接的堿基平面與螺旋軸平行。7下列過程與DNA的人工克隆無關(guān)的是： A、用專一性的限制性內(nèi)切酶在特定的互補(bǔ)位點(diǎn)切割質(zhì)粒DNA和供體 B、通過連接酶催化質(zhì)粒DNA與供體DNA接合。 C、將重組后的DNA通過結(jié)合反應(yīng)引入寄主細(xì)胞。 D

7、、常常根據(jù)載體所具有的抗藥性來篩選含有重組DNA的細(xì)菌。8核酸分子中的共價鍵包括： A、嘌呤堿基第9位N與核糖第1位C之間連接的-糖苷鍵 B、磷酸與磷酸之間的磷酸酯鍵 C、磷酸與核糖第1位C之間連接的磷酸酯鍵 D、核糖與核糖之間連接的糖苷鍵9下列哪種物質(zhì)不是由核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合而成的復(fù)合物： A、病毒B、核糖體C、Ecoli的蛋白質(zhì)生物合成70S起始物 D、線粒體內(nèi)膜10下列關(guān)于核糖體的敘述正確的是： A、大小亞基緊密結(jié)合任何時候都不分開。 B、細(xì)胞內(nèi)有游離的也有與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖體。 C、核糖體是一個完整的轉(zhuǎn)錄單位。 D、核糖體由兩個相同的亞基組成。 11 Crick的擺動假說較好的描述了：

8、A、密碼子的第三位變動不影響與反密碼子的正確配對。 B、新生肽鏈在核糖體上的延長機(jī)理。 C、由鏈霉素引起的翻譯錯誤。D、溶原性噬菌體經(jīng)過誘導(dǎo)可變成烈性噬菌體。12分離出某種病毒核酸的堿基組成為：A27，G=30%，C=22%，T=21%，該病毒應(yīng)該為： A、單鏈DNA B、雙鏈DNA C、單鏈RNA D、雙鏈RNA四、問答與計算： 1用RNase T1限制降解tRNA得到一個長度為13個核苷酸的片段，再用RNaseT1完全降解得到下列產(chǎn)物：（a）ApCpApGp；（b）pGp；（c）ApCpU；（d）ApApUpApGp。用RNasec I完全降解得到下列產(chǎn)物：（a）ApGpApApUp；（b

9、）pGpApCp；（c）U；(d)ApGpApCp ，請寫出該片段的順序。 2某一寡聚十六核苷酸，用RNaseT1降解得到：（a）ApUpUpCpCpGp；（b） ApCpUpCpGp；（c） pUpCpCpA；（d）Gp各一分子。用RNaseA降解得到：（a）1ApUp； （b）GpGpApCp；（c）GpUp；(d) 5Cp；（e）2Up；（f）1A。請寫出該片段的順序。3 根據(jù)下列性質(zhì)判斷某一均勻的DNA樣品應(yīng)有的結(jié)構(gòu)：（a）可與甲醛進(jìn)行反應(yīng)，并且能作為DNA聚合酶的模板、熱變性時A260增加；（b）可與硝化纖維膜結(jié)合；(c)在高離子強(qiáng)度介質(zhì)中的沉降系數(shù)比在低離于強(qiáng)度介質(zhì)中稍高；（d）變

10、性時在CsCI中的浮力密度增加約0.011gcm3；(e) 變性后經(jīng)區(qū)帶離心得到A和B兩個片段。A被切開一個缺口產(chǎn)生C，在高離子強(qiáng)度介質(zhì)中，C與A的沉降系數(shù)相等，在低離子強(qiáng)度的介質(zhì)中比A低，無論在哪種情況下，C均比B高。4 DNA樣品在水浴中加熱到一定溫度，然后冷至室溫測其OD260，請問在下列情況下加熱與退火前后OD260的變化如何?（a）加熱的溫度接近該DNA的Tm值；（b）加 熱的溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過該DNA的Tm值。 有一核酸溶液通過實(shí)驗(yàn)得到下列結(jié)果：（a）加熱使溫度升高該溶液的紫外吸收增加。迅速冷卻紫外吸收沒有明顯的下降；（b）經(jīng)CsCI梯度離心后，核酸位于1.77g/ml溶液層。(c)核酸

11、經(jīng)熱變性后迅速冷卻再離心，原來的浮力密度1.77g/ml的區(qū)帶消失，新帶在1.72g/ml出現(xiàn)。此帶的紫外吸收只有原來的一半。將離心管里的組分重新混合，通過適當(dāng)溫度處理進(jìn)行退火，再離心后新帶消失，1.77g/ml的原帶又重新出現(xiàn)了。其紫外吸收與變性前相同。（d）用提高pH12然后中和到7的方法代替熱變性重復(fù)（c）步驟，得到與（c）步驟的第一次離心后相同的結(jié)果，但經(jīng)退火處理后1.72g/ml的區(qū)帶不消失。根據(jù)以上現(xiàn)象推斷該核酸樣品的結(jié)構(gòu)。 6如果Ecoli染色體DNA的75用來編碼蛋白質(zhì)假定蛋白質(zhì)的平均分子量為60×103。請問：若Ecoli染色體大約能編碼2000種蛋白質(zhì)。求該染色體

12、DNA的長度是多??？該染色體DNA的分子量大約是多少？（以三個堿基編碼一個氨基酸，氨基酸平均分子量為120u，核苷酸平均均分子量為640計算。） 7假定每個基因有900對核苷酸，并且有三分之一的DNA不編碼蛋白質(zhì)，人的一個體細(xì)胞（DNA量為6.4×109對核苷酸），有多少個基因？如果人體有1013個細(xì)胞那么人體DNA的總長度是多少千米？等于地球與太陽之間距離（2.2 ×109千米）的多少倍? 8根據(jù)同源蛋白質(zhì)的知識，說明為什么編碼同源蛋白質(zhì)的基因（DNA片段）可以雜交? 9有一噬菌體的突變株其DNA長度為15m，而野生型的DNA長度為17m，問該突變株的DNA中有多少個堿基

13、缺失？ 10用 RNaseT1降解純 tRNA樣品獲得一條寡核苷酸片段，用蛇毒磷酸二酯酶完全水解?？僧a(chǎn)生pA，pC，pU和U，其比例是1：2：1：，根據(jù)這一信息和tRNA3端的特點(diǎn)能否推斷tRNA3端的核百酸順序。 11解釋下列名詞：（1）稀有堿基；（2）DNA超螺旋；u）DNA的增色和減色效應(yīng)； （4）mRNA的帽子結(jié)構(gòu)；（5）反密碼子。答案一、是非題 1對。2對。3對。4錯。S對。6錯。7錯錯。9對。10錯。11對。12對。13對。14錯。15對。16對。17錯。18對。19對。20對。21錯。二、填空題 l堿基核糖 2tRNA 3（GC）（AT） 4核內(nèi)攜帶遺傳信息 5基因 6高不變 7

14、反向平行 54urn 10 8脫氧核糖的第2位碳原子上沒有羥基，不利于堿（-OH）作用使磷酸二酯鍵斷裂。 9UA 1020 60 11GCTTAGTAGC 12衛(wèi)星DNA tRNA rRNA單拷貝（不重復(fù)） 13解開重新結(jié)合復(fù)性 14起始濃度重復(fù)序列多少 15松弛（少繞）右扭緊（多繞）左 16三葉草倒L形三、選擇題 1A 2D 3A 4A 5A 6D 7B 8A 9D 10D 11A 12A四、問答與計算 1根據(jù)RNase T1降解 RNA生成Gp或以 Gp為 3-末端寡核苷酸片段的特性， pGp為該片段的 5-末端， ApCp為3-末端。根據(jù)RNase I降解RNA生成Cp， Up或以 Cp

15、，Up為 3-末端寡核苷酸片段的特性， GpApCp為 5-末端， U為 3-末端。將兩種酶降解的片段疊加，可得該片段的全部順序?yàn)椋?pGpApCpApGpApApUpApGpApCpU 2根據(jù)RNase T1特異性地降解G與相鄰核苷酸之間的磷酸二酯鍵生成Gp或以Gp 為3-末端寡核苷酸片段的特性，以及根據(jù)RNase A特異性地降解C和U與相鄰 核苷酸之間的磷酸二酯鍵生成Cp、Up，或以Cp、Up為3-末端寡核苷酸片段的特性，將兩種酶降解的片段疊加，可得該片段的全部順序?yàn)椋?ApUpUpCpCpGpGpApCpUpCpGpUpCpCpA 3根據(jù)DNA結(jié)構(gòu)鑒定的一般標(biāo)準(zhǔn)，可判斷DNA樣品是一個由

16、一條環(huán)狀單鏈A和一條線狀單鏈B組成的環(huán)狀DNA分子，B鏈的長度短于A，所以該環(huán)狀DNA分子具有部分單鏈。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也表明該DNA分子具有單鏈性質(zhì)（a，b，d，e，f）。由e可知A為環(huán)狀單鏈，只有這樣，在被切開一個切口時，才能產(chǎn)生與其沉降系數(shù)接近的線狀單鏈C。由于C的沉降系數(shù)B，A的長度B，所以A與B形成環(huán)狀分子，除A與B互補(bǔ)雙鏈外，還有A剩余部分的單鏈。(a) 加熱的溫度接近該DNA的Tm值，開始退火復(fù)性后的A260與變性前應(yīng)完全相同，因?yàn)樵诮咏黅m值的溫度時，DNA的兩條鏈并未完全分開，所以復(fù)性可以達(dá)到與變性前相同的程度。 （b）加熱的溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過該DNA的Tm值，退火復(fù)性后的A260比變性前

17、高，因?yàn)樵谶h(yuǎn)遠(yuǎn)超過Tm值的溫度時，DNA的兩條鏈完全分開復(fù)性不容易達(dá)到與變性前相同的程度。5（a）紫外吸收隨溫度升高而增大，迅速冷卻后，紫外吸收并不降低說明此樣品分子為含氫鍵豐富的雙鍵結(jié)構(gòu)。 （b） 經(jīng)CsCL密度梯度離心后，值較高，表明此樣品中除 DNA片段外，還有 RNA片段。 （c）熱變性后迅速離心，重新離心出現(xiàn)新帶，這說明兩條鏈的值不同，一條- 1.720是DNA的特征帶，另一條值1.80，由于密度太大，離心時不能形成區(qū)帶，但此鏈仍然完整存在，退火后重新出現(xiàn)就是證據(jù)。 (d) 雙鏈中值大的一條鏈被堿降解說明此鏈?zhǔn)荝NA。 綜上所述，此核酸樣品是由一條DNA片段和一條RNA片段形成的雜交

18、分子。6設(shè)Ecoli染色體應(yīng)有的堿基為x，編碼蛋白質(zhì)的基因片段中應(yīng)有的堿基對數(shù)為：3×2000×60000120=3×106=0.75x x=3×106/0.75=4×106（堿基對） 染色體的長度=0.34nm×4×106 =1.36×106nm。 染色體DNA的分子量640×4×1062.56×109 u7每個體細(xì)胞中有：（6.4×1096.4×109×1/3）/900=4.72×106(個基因) 每個體細(xì)胞中DNA的長度：6.4×

19、109×0.34nm=2.2×109nm=2.2km 人體內(nèi)DNA的總長度：2.2×1013千米等于地球與太陽之間距離的：（2.2×1013）（2.2×109）=104倍8同源蛋白質(zhì)是指來源不同的同一種蛋白質(zhì)，它們具有基本相同的氨基酸序列，所以它們的基因具有相同的核著酸序列。當(dāng)將帶有同源蛋白質(zhì)基因的N八片段，進(jìn)行雜交時形成雜交分子的機(jī)會就比較多。9顯然，突變株的DNA比正常株的DNA短2m2m2×104Å，2×104/3.4=5.88×103所以大約有5.88×103個堿基對缺失。10tRNA的功能是在蛋白質(zhì)生物合成的過程中，轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸到核糖體參與肽鏈的形成。其3-端有一共同的序列是CCA，根據(jù)蛇毒磷酸二酯酶的水解產(chǎn)物可以推斷該tRNA經(jīng)RNase T1降解的寡核苷酸片段順序?yàn)閁pUpCpCpA16解釋名詞： （l）稀有堿基又稱修飾堿基，這些堿基在核酸分子中含量比較少，但它們是天然存 在不是人工合成