1、生物化學(xué)考前輔導(dǎo)生命科學(xué)系1content一、各類學(xué)校題型與分值卷 面 分 析填空：20 30空， 10 15分；選擇：10 15題， 1015分；名詞：510個(gè)， 1020分簡(jiǎn)答題：5 8個(gè)，2040分； 計(jì)算：1 2題， 10 15分；問(wèn)答題： 40 50分；機(jī)會(huì)題比例很低！2content二、反復(fù)考察的知識(shí)點(diǎn)樣 卷 分 析酶活計(jì)算DNA復(fù)制、RNA轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的生物合成生物氧化代謝調(diào)節(jié)：酶活、酶量（操縱子）；激素糖、脂、蛋白、核酸代謝3名詞解釋：化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)是目前最有說(shuō)服力的解釋氧化磷酸化作用機(jī)理的學(xué)說(shuō)，電子傳遞釋放出的自由能驅(qū)動(dòng)H從線粒體基質(zhì)跨過(guò)內(nèi)膜進(jìn)入到膜間隙（膜外），從而形成跨線粒

2、體內(nèi)膜外高內(nèi)低的H電化學(xué)梯度。當(dāng)H通過(guò)FOF1-ATP合酶回流進(jìn)入線粒體基質(zhì)時(shí)生成ATP42.化學(xué)滲透學(xué)說(shuō) 關(guān)于光合磷酸化的機(jī)理有多種學(xué)說(shuō)，如中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō)、變構(gòu)學(xué)說(shuō)、化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)等，其中被廣泛接受的是化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)。 化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)(chemiosmotic theory)由英國(guó)的米切爾(Mitchell1961)提出，該學(xué)說(shuō)假設(shè)能量轉(zhuǎn)換和偶聯(lián)機(jī)構(gòu)具有以下特點(diǎn)： 由磷脂和蛋白多肽構(gòu)成的膜對(duì)離子和質(zhì)子的透過(guò)具有選擇性 具有氧化還原電位的電子傳遞體不勻稱地嵌合在膜 膜上有偶聯(lián)電子傳遞的質(zhì)子轉(zhuǎn)移系統(tǒng) 膜上有轉(zhuǎn)移質(zhì)子的ATP酶 在解釋光合磷酸化機(jī)理時(shí)，該學(xué)說(shuō)強(qiáng)調(diào)：光合電子傳遞鏈的電子傳遞會(huì)伴隨膜內(nèi)外兩側(cè)產(chǎn)

3、生質(zhì)子動(dòng)力(proton motive force,pmf)，并由質(zhì)子動(dòng)力推動(dòng)的合成。許多實(shí)驗(yàn)都證實(shí)了這一學(xué)說(shuō)的正確性。567問(wèn)答：以原核生物為例，闡述蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程。（10）答：蛋白質(zhì)的合成亦稱翻譯，可分為四個(gè)階段：1. 氨基酸的活化氨酰tRNA（2） 2. 大腸桿菌中肽鏈合成的起始 （3）mRNA上的SD序列可與小亞基上16SrRNA的3進(jìn)行堿基配對(duì)，在起始因子的參與下先形成30S起始復(fù)合物，再形成70S起始復(fù)合物（70S-mRNA-fMettRNAfMet）。3. 多肽鏈的延長(zhǎng)（3） 在多肽鏈上每增加一個(gè)氨基酸都需要經(jīng)過(guò)進(jìn)位，轉(zhuǎn)肽和移位三個(gè)步驟。重復(fù)進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位，肽鏈沿NC方向

4、延伸。4. 翻譯的終止及肽鏈的釋放 （2） 錦上添花：新生肽鏈的折疊與后加工8 蛋白質(zhì)合成的機(jī)理一、氨基酸的活化二、原核生物多肽鏈的合成過(guò)程四、真核生物多肽鏈的合成三、多核糖體與核糖體循環(huán)9氨基酸的活化EEAAEAAtRNAAAEtRNAAAEtRNAAA氨基酸ATP +氨酰腺苷酸E-AMPPPi第一步AMP第二步E氨基酸的活化3-氨酰-tRNA10N-甲酰甲硫氨酰-tRNAiMet的形成CHO-HN-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S COO- +H2N-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S COO-Met-tRNAiMetfMet-tRNAtMetN10-CHO-FH4FH4

5、轉(zhuǎn)甲酰酶11氨酰- tRNA合成酶特點(diǎn) a、專一性： 對(duì)氨基酸有極高的專一性，每種氨基酸都有專一的酶，只作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸。 對(duì)tRNA 具有極高專一性。 b、校對(duì)作用：氨酰- tRNA合成酶的水解 部位可以水解錯(cuò)誤活化的氨基酸。12原核生物多肽鏈的合成過(guò)程 原核生物多肽鏈的合成分為三個(gè)階段：肽鏈合成的起始、肽鏈的延伸、肽鏈合成的終止和釋放。1、肽鏈合成的起始2、肽鏈的延長(zhǎng)3、肽鏈合成的終止及釋放13肽鏈合成的起始30S亞基 mRNA IF3- IF1復(fù)合物30S mRNA GTP- fMet tRNA- IF2- IF1復(fù)合物70S起始復(fù)合物codonanticodonA位

6、P位 mRNA +30S亞基-IF3A位IF-353IF2GTPP位IF3 IF2 IF1IF2-GTP-fMet-tRNAIF350S亞基IF2+ IF1+GDP+PiIF-1IF170S起始復(fù)合物14某些原核生物mRNA中蛋白質(zhì)合成起始區(qū)的序列15肽鏈的延長(zhǎng)12122323進(jìn)位肽鍵形成移位進(jìn)位(TuTs)GTPGTPN-端2353C-端肽鍵形成153（EF-G） 16肽鏈合成的終止及釋放（1）釋放因子RF1或RF2進(jìn)入核糖體A位。 （2）多肽鏈的釋放（3）70S核糖體解離53UAG30S亞基50S亞基53UAGtRNARF17肽鍵的形成18TuTs循環(huán)TsTs-GDP19多多核糖體與核糖體

7、循環(huán)合成完畢的肽鏈多核糖體3mRNA延伸中的肽鏈5核糖體循環(huán)20多細(xì)胞水平分子水平細(xì)胞水平神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)激素調(diào)節(jié)酶調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)脂水糖核酸無(wú)機(jī)鹽等主要知識(shí)點(diǎn)回顧前 言21 酶和輔酶 生物氧化 糖化學(xué)及糖代謝 脂化學(xué)及脂代謝、生物膜 核酸及核酸代謝 蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)代謝 物質(zhì)代謝調(diào)節(jié)及激素的作用機(jī)制主要知識(shí)點(diǎn)回顧目 錄22主要知識(shí)點(diǎn)回顧一、酶與輔酶酶的本質(zhì)、催化特點(diǎn)、分類 核酶、抗體酶、固定化酶、別構(gòu)酶酶的組成、活性中心概念酶作用專一性假說(shuō)誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 米氏方程、轉(zhuǎn)換數(shù)（Kcat）、酶活抗體酶80年代后期出現(xiàn)的，本質(zhì)是免疫球蛋白。在易變區(qū)被賦予了酶催化性。核酶是非蛋白酶。它是一類特殊的RNA

8、。能夠催化RNA分子中的磷酸酯鍵的水解及其逆反應(yīng)。當(dāng)酶被底物飽和時(shí)，每一催化中心在單位時(shí)間內(nèi)所能轉(zhuǎn)換底物分子的數(shù)量，即每摩爾酶活性中心在單位時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)換底物的摩爾數(shù)（/S） 。 分子活性寡聚蛋白（多個(gè)亞基）1IU：在最適條件下，每分鐘內(nèi)催化1mol產(chǎn)物生成所需的酶量。比活性（U/mg蛋白質(zhì)）23酶活力計(jì)算題10ml唾液，稀釋20倍，取1ml測(cè)定淀粉酶活力，測(cè)知每5min水解淀粉產(chǎn)生2.5g還原糖,測(cè)定其稀釋液中蛋白質(zhì)含量為1mg/ml,計(jì)算唾液中淀粉酶的總活力，比活力，轉(zhuǎn)換數(shù)(S-1 )。酶活定義：在最適條件下每分鐘水解淀粉生成1g葡萄糖的酶量稱為1個(gè)活力單位。葡萄糖分子量180,淀粉酶分子量5

9、0000?？偦盍?200 2.5/5=100 U比活力=2.5/51=0.5 U/mg轉(zhuǎn)換數(shù)=(2.5/560180)/(1/5104+3) =12.5107 /54000=2314.8 (S-1 )24主要知識(shí)點(diǎn)回顧一、酶與輔酶酶的作用機(jī)制 理解酸堿催化、共價(jià)催化等（P391）酶的抑制作用 三種可逆抑制劑影響酶反應(yīng)的因素 溫度、pH、激活劑0 10 20 30 40 50 60 2.01.51.00.5產(chǎn)物麥芽糖的毫克數(shù)高級(jí)結(jié)構(gòu)活性中心解離EDTA半胱氨酸金屬離子25酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)(kinetics of enzyme-catalyzed reactions)是研究酶促反應(yīng)速度

10、及其影響因素的科學(xué)。這些因素主要包括酶的濃度、底物的濃度、pH、溫度、抑制劑和激活劑等。注意：速度指反應(yīng)的初速度V0 ；研究某一因素對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響時(shí)，應(yīng)該維持反應(yīng)中其它因素不變。261）. 米氏方程Km 即為米氏常數(shù)，Vmax為最大反應(yīng)速度當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時(shí),即V =1/2Vmax,Km =S 上式表示,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度。因此,米氏常數(shù)的單位為mol/L。Km值小，1/Km大，親和力大。底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響271/V-1/Km 0 1/S斜率= Km/ Vmax1/Vmax雙倒數(shù)作圖法28酶的抑制 (機(jī)制)CompetitiveNon-com

11、petitiveUncompetitiveEE另一結(jié)合區(qū)抑制劑底物圖解抑制機(jī)理及說(shuō)明I 只與自由的 E 結(jié)合，會(huì)與 S 競(jìng)爭(zhēng)；S可克服 I 的抑制。I 可與自由的 E 或 ES 結(jié)合， S不能克服 I 的抑制。I 只能與 ES 結(jié)合， S反而有利 I 的抑制。E + S ES E + P + IEI E + S ES E + P + + I I EI + S EIS E + S ES E + P + I EIS XVmax 不變；Km 變大Vmax 變??；Km 不變Vmax 及 Km 均變小29酶的活性部位與酶的活性直接相關(guān)的區(qū)域?yàn)槊傅幕钚灾行?。是酶與底物結(jié)合并發(fā)揮其催化作用的部位。結(jié)合酶的輔

12、助因子是活性中心的重要組成部分?；钚灾行牡陌被釟埢谝患?jí)結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠(yuǎn)，甚至位于不同肽鏈，通過(guò)折疊后而在空間結(jié)構(gòu)上相互靠近。30酶活性的調(diào)節(jié)控制一）別構(gòu)調(diào)節(jié)通過(guò)酶構(gòu)象的改變來(lái)調(diào)節(jié)酶活性的作用稱為變構(gòu)調(diào)節(jié)。大部分別構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)曲線不符合米氏方程。給酶共價(jià)結(jié)合一個(gè)基團(tuán)或者去掉一個(gè)基團(tuán)，從而改變其活性的調(diào)節(jié)方式。常見(jiàn)磷酸化。糖原磷酸化酶a 糖原磷酸化酶b二）共價(jià)調(diào)節(jié)Active relaxed formInactive tense form31主要知識(shí)點(diǎn)回顧一、酶與輔酶酶的調(diào)節(jié)作用 酶活調(diào)節(jié)：酶原激活、可逆的共價(jià)修飾、別構(gòu)調(diào)節(jié) 酶量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行輔酶 水溶性維生素的活性形式及功能P43432

13、核酶：具有催化活性的RNA。非蛋白酶，識(shí)別特定RNA片段，進(jìn)行內(nèi)切，具有內(nèi)切，連接，聚合等核酸酶功能。如： 原生動(dòng)物四膜蟲(chóng)26SRNA的內(nèi)含子L19 RNA可自行催化（no protein）。核酸酶：即核酸水解酶，化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，催化核酸的水解。核酶（ribozyme)和核酸酶33主要知識(shí)點(diǎn)回顧二、生物氧化（氧化磷酸化）1、概念、特點(diǎn) P1142、高能磷酸化合物類型磷氧鍵型化合物 3-磷酸甘油酸磷酸、乙酰磷酸、 ATP、磷酸烯醇式丙酮酸、氮磷鍵型化合物 磷酸肌酸、磷酸精氨酸硫酯鍵型化合物 ?；o酶A甲硫鍵型化合物 S-腺苷甲硫氨酸核苷酸衍生物34主要知識(shí)點(diǎn)回顧3、脫氫酶的輔酶： NAD+、N

14、ADP+、FAD、FMNNAD+NADP+核苷酸衍生物35主要知識(shí)點(diǎn)回顧二、生物氧化（氧化磷酸化）4、電子傳遞鏈成員、排列順序、抑制劑NADH-Q 還原酶琥珀酸-Q 還原酶細(xì)胞色素還原酶細(xì)胞色素氧化酶非蛋白電子載體可溶性外周蛋白36主要知識(shí)點(diǎn)回顧二、生物氧化（氧化磷酸化）5、氧化磷酸化作用機(jī)制（化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)）、P/O、解偶聯(lián)劑（DNP作用機(jī)制）6、氧化磷酸化的調(diào)控 能荷7、底物水平磷酸化37主要知識(shí)點(diǎn)回顧三、糖化學(xué)及糖代謝1、糖的概念、分類2、重要的單糖及衍生物 單糖磷酸酯、糖苷（0-糖苷鍵、N-糖苷鍵）、氨基糖3、單糖的物理性質(zhì) 變旋現(xiàn)象5、常見(jiàn)二糖 單糖單位、糖苷鍵類型 還原糖鑒定4、單糖

15、的化學(xué)性質(zhì) 成脎、成苷、顏色反應(yīng)38糖原合成糖代謝糖異生主要知識(shí)點(diǎn)回顧TCA循環(huán)丙酮酸氧化脫羧糖原分解激酶：能夠在ATP和任何一種底物之間起催化作用，轉(zhuǎn)移磷酸基團(tuán)的一類酶。磷酸酶：水解磷酸基團(tuán)的酶。HMS途徑生理意義（肝臟中6-P-G磷酸酶、肌肉中Cori循環(huán)）（6-P-G脫氫酶）（6-P-G）NADPH+H+，磷酸戊糖異構(gòu)化基團(tuán)轉(zhuǎn)移供能（糖原合酶、糖原分支酶、UDP-G焦磷酸化酶）（糖原磷酸化酶、糖原轉(zhuǎn)移/脫支酶、磷酸葡萄糖變位酶）有氧EMP厭氧乳酸發(fā)酵乙醇發(fā)酵（丙酮酸脫氫酶系/TPP）3NADH+H+、FADH2 、 GTPNADH+H+2ATP39糖酵解ATPATP第一階段第二階段耗能A

16、TPATP產(chǎn)能NADH+H+40酶促化學(xué)修飾對(duì)酶活性的調(diào)節(jié) 酶化學(xué)修飾類型酶活性改變糖原磷酸化酶磷酸化酶b激酶糖原合成酶丙酮酸脫羧酶磷酸果糖激酶丙酮酸脫氫酶HMG-CoA還原酶HMG-CoA還原酶激酶乙酰CoA羧化酶脂肪細(xì)胞甘油三脂脂肪酶黃嘌呤氧化酶磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化磷酸化/脫磷酸化-SH/-S-S-激活/抑制激活/抑制抑制/激活抑制/激活抑制/激活抑制/激活抑制/激活激活/抑制抑制/激活激活/抑制脫氫酶/氧化酶41主要知識(shí)點(diǎn)回顧四、脂化學(xué)（生物膜）及脂代謝1、脂質(zhì)的概

17、念、分類及作用（貯存、結(jié)構(gòu)、活性脂質(zhì)） （脂質(zhì)體 P81）2、脂肪酸種類、理化性質(zhì) 熔點(diǎn)（與烷烴鏈長(zhǎng)度成正比，與不飽和程度成反比）、溶解度、成脂酰CoA、 乳化作用3、三酰甘油的理化性質(zhì) 皂化、酸值、碘值7、脂蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能5、萜（VA、VD、VE、VK，異戊二烯）和類固醇（類固醇激素，環(huán)戊烷多氫菲）6、膽固醇、膽汁酸4、磷脂 甘油磷脂、鞘磷脂母體化合物結(jié)構(gòu)式 典型化合物:腦磷脂、卵磷脂的結(jié)構(gòu)組成42？LDLCMVLDLHDL他汀類藥物將食物中的TG從小腸轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇到肝外組織細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性TG到脂肪及肌肉組織將膽固醇從周圍組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟43主要知識(shí)點(diǎn)回顧四、生物膜1、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（流

18、體鑲嵌模型）、膜脂組成影響磷脂流動(dòng)性的因素：所含的FA不飽和程度、鏈長(zhǎng)，膽固醇、鞘磷酯的含量，膜蛋白及溫度，pH等等。 44主要特征： 膜中的磷脂疏水尾相對(duì)，極性頭朝外，基本結(jié)構(gòu)是磷脂雙分子層，有一定的流動(dòng)性。 蛋白質(zhì)分子有的鑲嵌在膜脂中，有的貫穿磷脂雙層，膜Pr可側(cè)向運(yùn)動(dòng)，圍繞與膜平面垂直的軸旋轉(zhuǎn)，但不能翻滾。 膜Pr與膜脂，膜Pr與膜Pr等的相互作用限制了膜的流動(dòng)性。 膜在化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)上的不對(duì)稱性，保證了膜功能（物質(zhì)運(yùn)輸，信息傳遞）的方向性。 糖類多以糖蛋白，糖脂的形成結(jié)合在細(xì)胞表面天線，在接受信息與細(xì)胞識(shí)別上起重要作用。 膜結(jié)構(gòu)液態(tài)鑲嵌模型（1972，S.J.Singer） 液態(tài)鑲嵌模

19、型（液晶態(tài)鑲嵌模型）膜是蛋白質(zhì)在粘滯的流體狀脂質(zhì)雙層中所形成的鑲嵌物。側(cè)向擴(kuò)散/移動(dòng)、翻轉(zhuǎn)、全反式偏轉(zhuǎn)異構(gòu)化運(yùn)動(dòng)、圍繞與膜平面垂直的軸擺動(dòng)、旋轉(zhuǎn)45主要知識(shí)點(diǎn)回顧四、生物膜2、生物膜的主要功能 能量轉(zhuǎn)換、物質(zhì)運(yùn)輸、信息識(shí)別與傳遞主動(dòng)運(yùn)輸 Na+,K+-ATP酶（泵） 下P47被動(dòng)運(yùn)輸糖和氨基酸的運(yùn)送磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)磷酸化酶系統(tǒng)（PTS）協(xié)同運(yùn)輸基團(tuán)轉(zhuǎn)運(yùn)46酮體的合成脂代謝脂肪酸的合成主要知識(shí)點(diǎn)回顧（軟）脂肪酸的氧化129ATP活化（胞漿），轉(zhuǎn)運(yùn)（肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶），-氧化（線粒體）甘油代謝 脂肪動(dòng)員膽固醇的合成乙酰CoATCA羥甲基戊二酸單酰CoA（HMG- CoA）酮體肝內(nèi)生成，肝外利用（硫

20、解/激酶）膽固醇代謝：膽汁酸、激素、VD3儲(chǔ)能（膽鹽乳化、脂蛋白運(yùn)輸）乙酰乙酸、-羥丁酸、丙酮HMG-CoA裂解酶HMG-CoA還原酶甘油三酯脂肪酶檸檬酸-丙酮酸穿梭至胞漿乙酰輔酶A羧化酶3-磷酸甘油磷酸二羥丙酮3-磷酸甘油酸EMP單位碳原子產(chǎn)能效率高47主要知識(shí)點(diǎn)回顧五、核酸及核酸代謝1、核酸定義2、分類 DNA RNA （紫外吸收）一級(jí)結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu) 雙螺旋 tRNA mRNA rRNA PCR（變性、復(fù)性、雜交）增色、減色效應(yīng)三級(jí)結(jié)構(gòu)高級(jí)結(jié)構(gòu) （蛋白復(fù)合物）3、分離、提純、定量 理解4、核苷酸序列測(cè)定 理解48PCR（聚合酶鏈?zhǔn)?反應(yīng)） 即聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(Polymerase Chain

21、 Reaction)，是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 PCR技術(shù)的基本原理：PCR由變性-退火-延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：模板DNA的變性：加熱至93左右，模板DNA雙鏈解離，成為單鏈；單鏈DNA與引物的退火(復(fù)性)：溫度降至55左右，特異性的引物與模板DNA單鏈的3末端結(jié)合；引物的延伸：DNA模板-引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為原料，合成一條新鏈；這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板，重復(fù)變性-退火-延伸三過(guò)程，就可獲得更多DNA。每完成一個(gè)循環(huán)需24分鐘， 23小時(shí)就能將目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。 PCR技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用：P59649DNase I足跡試驗(yàn) 蛋白

22、質(zhì)結(jié)合在DNA片段上，能保護(hù)結(jié)合部位不被DNase破壞，DNA分子經(jīng)酶切作用后遺留下該片段(亦稱“足跡”)，進(jìn)而可以確定它的序列。在電泳凝膠的放射性自顯影圖片上，相應(yīng)于蛋白質(zhì)結(jié)合的部位沒(méi)有放射性標(biāo)記條帶。 DNase I足跡試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程如下：待檢雙鏈DNA分子用32P作末端標(biāo)記，通常只標(biāo)記一端；蛋白質(zhì)與DNA混合，等兩者結(jié)合后，加入適量的DNase I，消化DNA分子，控制酶的用量，使之達(dá)到每個(gè)DNA分子只發(fā)生一次磷酸二酯鍵斷裂，并列設(shè)置未加蛋白質(zhì)的對(duì)照；從DNA上除去蛋白質(zhì)，將變性的DNA加樣在測(cè)序凝膠中作電泳和放射性自顯影，與對(duì)照組相比后解讀出足跡部位的核苷酸序列。50嘌呤元素來(lái)源嘧啶元

23、素來(lái)源核酸代謝嘌呤核苷酸合成主要知識(shí)點(diǎn)回顧堿基降解核蛋白經(jīng)胃酸、核酸酶、核苷酸酶、核苷磷酸化酶成磷酸戊糖和堿基嘧啶核苷酸合成NH3+CO2+H2O（黃嘌呤氧化酶） 痛風(fēng) 別嘌呤醇嘧啶嘌呤 尿酸從頭合成、補(bǔ)救途徑PRPP脫氧核糖核苷酸合成P399 圖33-11DNA復(fù)制、RNA生物合成51主要知識(shí)點(diǎn)回顧5、DNA復(fù)制起始 - 延伸 - 終止結(jié)果:半保留端粒、端粒酶（真核生物）（酶、輔助因子、全過(guò)程）DNA聚合酶III過(guò)程:半不連續(xù)岡崎片段復(fù)制叉移動(dòng)方向單鏈結(jié)合蛋白R(shí)NA引物DNA連接酶DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶DNA解旋酶引物酶引發(fā)體DNA聚合酶I52復(fù)制叉53主要知識(shí)點(diǎn)回顧6、RNA生物合成起始 - 延

24、伸 - 終止轉(zhuǎn)錄泡識(shí)別部位 結(jié)合部位 RNA轉(zhuǎn)錄開(kāi)始+1 （GTP，ATP)（酶、輔助因子、全過(guò)程）逆轉(zhuǎn)錄酶54逆轉(zhuǎn)錄酶是一種多功能酶以RNA為模板合成互補(bǔ)的DNA鏈，形成RNADNA的雜合分子。具有Rnase H樣的活力，水解RNADNA的雜合分子中的RNA。以新合成的單鏈DNA為模板，合成互補(bǔ)鏈，形成雙鏈DNA分子。55主要知識(shí)點(diǎn)回顧6、RNA生物合成轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工原核生物真核生物mRNAtRNArRNAmRNAtRNArRNA去除內(nèi)含子加帽又加尾甲基化3-CCA-OH甲基化修飾剪接、甲基化修飾多數(shù)不用加工567、原核細(xì)胞基因表達(dá)的模型操縱子學(xué)說(shuō) 主要知識(shí)點(diǎn)回顧誘導(dǎo)操縱子（乳糖操縱子） 分

25、解代謝 阻遏操縱子（色氨酸操縱子） 合成代謝 組成：?jiǎn)?dòng)子、操縱基因、結(jié)構(gòu)基因 葡萄糖效應(yīng)（降解物阻遏）衰減作用組成酶誘導(dǎo)酶cAMP受體蛋白（CRP）降解物基因活化蛋白（CAP）OR+cAMP作用于啟動(dòng)子，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄葡萄糖分解代謝產(chǎn)物抑制腺苷酸環(huán)化酶活性，cAMP減少，分解代謝酶轉(zhuǎn)錄水平低。57啟動(dòng)子操縱基因結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)基因，轉(zhuǎn)錄調(diào)控的控制部位，RNA聚合酶的結(jié)合部位，是基因轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)。58主要知識(shí)點(diǎn)回顧原核細(xì)胞基因表達(dá)的模型操縱子學(xué)說(shuō) 誘導(dǎo)操縱子（乳糖操縱子） 分解代謝 阻遏操縱子（色氨酸操縱子） 合成代謝 衰減作用衰減子：一種位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)區(qū)的終止子。轉(zhuǎn)錄是否進(jìn)行轉(zhuǎn)錄是否繼續(xù)59主要知

26、識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解1、蛋白質(zhì)的基本單位AA -氨基酸結(jié)構(gòu)式酸堿化學(xué)（AAo、PI）光學(xué)性質(zhì)AA的分離 分配層析 離子交換層析化學(xué)反應(yīng)AA分類（R基極性特點(diǎn)）芳香族氨基酸（280nm）茚三酮顯色、Sanger反應(yīng)、Edman反應(yīng)60主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解2、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)一級(jí)結(jié)構(gòu)：AA的排列順序 肽鍵 一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定二級(jí)結(jié)構(gòu)：借助氫鍵形成的規(guī)則結(jié)構(gòu) 四種三級(jí)結(jié)構(gòu)：疏水作用 空間折疊 分子伴侶 功能單位四級(jí)結(jié)構(gòu)：疏水作用 亞基間相互作用 別構(gòu)酶X射線衍射法結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系（肌紅蛋白、血紅蛋白）蛋白質(zhì)的變性本質(zhì)：蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵被破壞，引起天然構(gòu)

27、象解體。現(xiàn)象：生物活性喪失，一些側(cè)鏈基團(tuán)暴露，溶解度降低形成沉淀，分子結(jié)構(gòu)松散，易被蛋白水解酶分解。變性劑：尿素、鹽酸胍、SDS超二級(jí)結(jié)構(gòu)（基元或膜體）：、 P220 結(jié)構(gòu)域：功能域，三級(jí)結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，相對(duì)獨(dú)立的緊密球?qū)嶓w。P222亞基：四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中每個(gè)球狀蛋白質(zhì)稱為亞基。P242球狀蛋白折疊層次61主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解3、蛋白質(zhì)的分離、純化、表征蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)純化方法分子大小溶解度電荷選擇性吸附親和層析凝膠過(guò)濾SDS等電點(diǎn)沉淀鹽溶、鹽析離子交換IEFPAGE疏水層析蛋白質(zhì)表面疏水性差別生物學(xué)親和力理解P315表7-7電泳純含量測(cè)定方法：凱氏定氮（16%

28、）、雙縮脲法（肽鍵）、考馬斯亮藍(lán)法62主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解4、蛋白質(zhì)的降解內(nèi)源性蛋白降解機(jī)制：溶酶體、泛肽標(biāo)記外源性蛋白消化：胰蛋白酶：堿性氨基酸糜蛋白酶：芳香族氨基酸（胰凝乳蛋白酶）羧肽酶：羧基末端肽（小肽）氨肽酶：氨基末端肽（小肽） 外源性AA吸收：依賴于Na+的主動(dòng)運(yùn)輸-谷氨酸?；h(huán)（GSH）63主要知識(shí)點(diǎn)回顧轉(zhuǎn)氨基作用氧化脫氨（L-谷氨酸脫氫酶）聯(lián)合脫氨（轉(zhuǎn)氨酶與L谷氨酸脫氫酶聯(lián)合脫氨、腺嘌呤核苷酸循環(huán)聯(lián)合脫氨）氨的運(yùn)輸：肌肉內(nèi)葡萄糖-丙氨酸循環(huán)（谷氨酸脫氫酶、谷氨酰胺合成酶）谷氨酰胺關(guān)鍵酶：氨甲酰磷酸合成酶與TCA的聯(lián)系：精氨琥珀酸AA種類：瓜、精、鳥(niǎo)、天冬氨酸

29、等維生素作為輔酶的作用一碳單位 FH4，S-腺苷甲硫氨酸5、AA的分解64蛋白質(zhì)的生物合成（原核生物）主要知識(shí)點(diǎn)回顧 AA的活化與搬運(yùn)氨基酰tRNA的合成 肽鏈合成的起始起始復(fù)合物的形成 四個(gè)階段 （70S-mRNA-fMet-tRNA） 肽鏈的延伸包括進(jìn)位,轉(zhuǎn)肽,移位. 肽鍵的終止終止codon 信號(hào)肽結(jié)構(gòu)及功能RNA種類及作用蛋白質(zhì)分子伴侶蛋白質(zhì)的后加工（一級(jí)、高級(jí)）65主要知識(shí)點(diǎn)回顧七、物質(zhì)代謝調(diào)節(jié)和激素的作用機(jī)制1、P540圖39-1 四大物質(zhì)代謝相互關(guān)系示意圖 乙酰輔酶A的來(lái)源與去路2、P543圖39-5 主要產(chǎn)能營(yíng)養(yǎng)物分解代謝的三個(gè)步驟細(xì)胞漿：EMP HMS 脂肪酸合成線粒體：TCA 氧化 氧化磷酸化細(xì)胞核：核酸生物合成內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：蛋白生物合成溶酶體：水解酶6667主要知識(shí)點(diǎn)回顧七、激素的作用機(jī)制激素由細(xì)胞分泌出來(lái)，由體液運(yùn)往各靶器官和靶細(xì)胞起作用。高等動(dòng)物的激素分三類；含氮類激素、類固醇激素、脂肪酸衍生物激素。作用機(jī)制： 含氮類激素的作用機(jī)制第二信使學(xué)說(shuō) 類固醇激素的作用機(jī)制調(diào)節(jié)基因