1、大腸桿菌(d chn n jn)非中斷雜交基因定位院 系：生命科學(xué)學(xué)院(xuyun)班 號(hào)：周三上午(shngw)第5組組 員：王笑梅、金嵐 歐陽智山、阿布都實(shí) 驗(yàn) 日 期：2015年12月9日實(shí)驗(yàn)(shyn)結(jié)果：我們小組對(duì)BG板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，4個(gè)人的統(tǒng)計(jì)結(jié)果(ji gu)如下表所示：表1 本小組(xioz)BG板菌落統(tǒng)計(jì)表組員平板上生長(zhǎng)的菌落性質(zhì)BCDEFG1陽性173929174027陰性795460774471無法確定471161622陽性173630211731陰性735965747362無法確定105551073陽性173615111925陰性836182887566無

2、法確定0331694陽性333928336541陰性615653612239無法確定651961320表2 本小組BG板結(jié)果統(tǒng)計(jì)表B(arg)C(purE)D(trp)E(his)F(lac)G(gal)119.0 42.5 34.5 20.0 48.0 28.0 222.0 38.5 32.5 23.5 22.0 34.5 317.0 37.5 16.5 11.5 22.0 29.5 436.0 41.5 32.5 36.0 71.5 51.0 平均生長(zhǎng)菌落數(shù)23.5 40.0 29.0 22.8 40.9 35.8 菌落生長(zhǎng)百分?jǐn)?shù)23.5%40.0%29.0%22.8%40.9%35.8%

3、重組頻率23.5%40.0%29.0%22.8%40.9%35.8%本實(shí)驗(yàn)的選擇培養(yǎng)基有BG，共6個(gè)，其中B培養(yǎng)基不加精氨酸，C培養(yǎng)基不加腺嘌呤，D培養(yǎng)基不加色氨酸，E培養(yǎng)基不加組氨酸，F(xiàn)培養(yǎng)基以乳糖為碳源，G培養(yǎng)基以半乳糖為碳源，每一種培養(yǎng)基都能驗(yàn)證一個(gè)基因的表達(dá)與否，且基因重組的頻率與距離原點(diǎn)的距離有關(guān)，所以根據(jù)不同培養(yǎng)基中的存活菌數(shù)可以間接判斷重組頻率，也就可以得知基因排列的大概(dgi)順序，做出染色體圖。由此，我們小組得出的基因(jyn)順序?yàn)椋篎-C-G-D-B-E，即lac-pueE-gal-trp-arg-his。分析得到的染色體圖如下： lac purE his gal tr

4、p arg圖1 本小組實(shí)驗(yàn)結(jié)果(ji gu)推測(cè)染色體圖由于一個(gè)小組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有限，可能產(chǎn)生較大誤差，所以我們綜合了全班的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得到如下表所示的結(jié)果：表3 全班結(jié)果統(tǒng)計(jì)表 板號(hào) 組號(hào)BCDEFG板號(hào)排序一26.538.23229.54737.8FCGDEB二18.2536.7541.7529.8561.531.5FDCGEB三12.7527.2526.524.557.2536.75FGCDEB四15.37538.87525.625045.62524.875FCDGBE五23.5402920.2540.87535.75FCGDBE六9.527.6712.6733.82013.67ECFGDB

5、平均值17.6534.7927.9227.5845.3830.06FCGDEB由表3可知，本班結(jié)果得到的基因順序?yàn)镕CGDEB，即lac-pueE-gal-trp-his-arg。分析(fnx)得到的染色體圖如下： lac purE arg gal trp his 圖2 全班實(shí)驗(yàn)(shyn)結(jié)果推測(cè)染色體圖為了進(jìn)一步減小實(shí)驗(yàn)(shyn)數(shù)據(jù)產(chǎn)生的誤差，我們還綜合了全年級(jí)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得到如下表所示的結(jié)果：表4 全年級(jí)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表 板號(hào) 班次BCDEFG板號(hào)排序周三上午183528284530FCGDEB周三下午303626175328FCBGDE周四上午104645195942FCDGEB周四下午

6、17.0842.1338.2920.2567.6338.29FCDGEBFCGDEB全年級(jí)結(jié)果18.6339.6434.2521.1156.4234.62FCGDEB由表4可知，本年級(jí)結(jié)果得到的基因順序?yàn)镕CGDEB，即lac-pueE-gal-trp-his-arg。分析得到的染色體結(jié)果如下： lac purE arg gal trp his 圖3 全年級(jí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(ji gu)推測(cè)染色體圖表5 歷年(lnin)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表學(xué)年板號(hào)排序?qū)W生年級(jí)2010-2011FGCDEB20082011-2012FCDGEB20092012-2013FCDGEB20102013-2014FCGDEB20112

7、014-2015FGCDEB20122015-2016FCGDEB2013結(jié)果(ji gu)討論通過相關(guān)資料的查詢，能夠知道實(shí)際的基因順序?yàn)镕-C-G-D-E-B，即lac-purE-gal-trp-his-arg，與全班和全年級(jí)得到的基因順序幾乎完全一致，而我們組得到的結(jié)果為F-C-G-D-B-E，僅調(diào)換了E和B，即his和arg的順序，故本小組實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)與實(shí)際情況相比出現(xiàn)了誤差。再由表5觀察歷年實(shí)驗(yàn)結(jié)果，只有兩年與理論值相同，故存在一定實(shí)驗(yàn)誤差。分析(fnx)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程，我們猜測(cè)誤差主要出在兩個(gè)方面，一是操作誤差，二是計(jì)數(shù)誤差。1、操作(cozu)誤差因?qū)嶒?yàn)在超凈臺(tái)中進(jìn)行且無污染出現(xiàn)，

8、排除雜菌影響(yngxing)的原因。故操作誤差主要可能產(chǎn)生在以下兩方面：（1）在點(diǎn)種的時(shí)，為提高效率，兩位同學(xué)同時(shí)進(jìn)行。分別從兩個(gè)A板中沾取菌落，再點(diǎn)到BG板上，以B板為例，板中150號(hào)菌落來自A1板，51100號(hào)菌落來自A2板。且把BG板依次排列，由B板開始，向G板方向依次點(diǎn)樣，故最先點(diǎn)的那個(gè)板上的菌量較多，生長(zhǎng)也會(huì)比較好，這可能是B板數(shù)量偏大的一個(gè)原因。（2）在點(diǎn)種時(shí)用力較大，或是倒平板太薄造成了培養(yǎng)基破損，對(duì)計(jì)數(shù)造成了一定影響。2、計(jì)數(shù)誤差在計(jì)數(shù)方面，產(chǎn)生誤差的原因主要來自以下兩方面：每個(gè)人判定菌落的標(biāo)準(zhǔn)不同，面對(duì)流產(chǎn)菌落等多種多樣的結(jié)果，不同的人有不同的判斷，故在計(jì)數(shù)時(shí)菌落統(tǒng)計(jì)的結(jié)果產(chǎn)生較大差異