1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。UREA-SOP-邁克試劑標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀四川省邁克科技有限責(zé)任公司SichuanMAKERScienceTechnologyCO.,Ltd四川省邁克科技有限責(zé)任公司編制試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀目錄1.臨床意義1.1醫(yī)學(xué)決定水平2.檢測(cè)原理3.樣品準(zhǔn)

2、備3.1樣品3.2樣品穩(wěn)定性4試劑盒4.1試劑盒組成4.2試劑準(zhǔn)備4.3試劑穩(wěn)定性4.4試劑盒訂貨指南5.操作步驟5.1檢測(cè)參數(shù)設(shè)置5.2校準(zhǔn)5.2.1校準(zhǔn)物5.2.2校準(zhǔn)物準(zhǔn)備5.2.3校準(zhǔn)物穩(wěn)定性5.2.4校準(zhǔn)間隔5.2.5校準(zhǔn)物溯源性5.2.6校準(zhǔn)物訂貨指南5.3質(zhì)控5.3.1質(zhì)控物5.3.2可接受性判定5.3.3質(zhì)控物訂貨指南6.交叉污染7方法學(xué)特性7.1線性范圍7.2精密度7.3靈敏度7.4抗干擾能力7.5抗凝劑的影響8.方法的可溯源性9.參考值范圍10安全性和注意事項(xiàng)11技術(shù)服務(wù)12主要參考文獻(xiàn)試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-

3、GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀1.臨床意義尿素是人體蛋白質(zhì)分解代謝產(chǎn)物，此外氨在肝臟尿素循環(huán)中也能合成尿素。90%以上的尿素通過腎臟排泄，其余主要由胃腸道和皮膚丟失。尿素檢測(cè)主要見于：腎功能低下、腎前氮質(zhì)血癥（如充血性心力衰竭、休克）、腎后氮血癥、胃腸道出血、高蛋白飲食、藥物影響（如皮質(zhì)類固醇類、四環(huán)素等）、妊娠后期、重癥肝臟功能不全、營(yíng)養(yǎng)不良、脂性腎病變。1.1醫(yī)學(xué)決定水平1.9mmol/L低于此值常伴有體內(nèi)水分過多或肝臟功能不全。8.2mmol/L高于此值應(yīng)考慮引起血清中尿素氮增高的各種原因。檢測(cè)血清肌酐對(duì)判斷腎功能狀態(tài)會(huì)有所幫助。15.8mmol/L高于此值常伴有嚴(yán)重

4、的腎功能衰竭，應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)脑\斷和治療措施。如果確有腎臟疾病，應(yīng)確定其性質(zhì)。2.檢測(cè)原理尿素H20NH+4CO2NH+4-酮戊二酸NADH谷氨酸NAD+H2O尿素在尿素酶催化下，水解生成氨和二氧化碳，氨在-酮戊二酸和還原型輔酶I存在下，經(jīng)谷氨酸脫氫酶(GLDH)催化生成谷氨酸。同時(shí)，還原型輔酶I被氧化成氧化型輔酶I。還原型輔酶I在340nm波長(zhǎng)處有吸收峰，其吸光度下降的速率與待測(cè)樣品中尿素的含量成正比。3.樣本準(zhǔn)備3.1樣品本試劑盒用于體外檢測(cè)血清或血漿中尿素的含量。樣品為空腹血清或血漿（0.1mg肝素或1.8mgEDTA-Na2可抗凝1.0ml血液）。樣品應(yīng)在低溫條件下運(yùn)輸保存。3.1樣品穩(wěn)定

5、性在2小時(shí)內(nèi)分離血清/血漿，分離后的樣品在1530可穩(wěn)定8小時(shí)，時(shí)間大于8小時(shí)，需在28保存,時(shí)間大于48小時(shí),需在-1520冰凍保存，但不可反復(fù)凍融。4.試劑盒4.1試劑組成：R1：檢測(cè)試劑1Tris緩沖液120.0mmol/L-酮戊二酸7.0mmol/LADP0.6mmol/LGLDH1KU/L脲酶6KU/LR2：檢測(cè)試劑2NADH0.25mmol/L4.試劑準(zhǔn)備：即用型液體雙試劑,開瓶裝載即可使用，用后應(yīng)及時(shí)冷藏保存。4.3試劑穩(wěn)定性：試劑密閉避光貯存可穩(wěn)定12個(gè)月，開瓶上機(jī)穩(wěn)定30天。4.4試劑盒訂貨指南貨號(hào)產(chǎn)品編碼規(guī)格包裝瓶型AB01G7010102001717R160ml3R245

6、ml17170瓶型AB01G6010102001706R190ml2R245ml17060瓶型AB01H9010102001702R150ml4R250ml17020瓶型AB01A0010102001100R140ml2R210ml2通用瓶型試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.操作步驟5.1標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)參數(shù)設(shè)定：5.1.1日立7060分析儀檢測(cè)參數(shù)TestUrea&TestNameUreaUnitmmol/LDataModeOnBoardReportNameUreaControlInterva

7、l1000InstrumentFactor(Y=aX+b)abExpectedValueExpectedValueAge(M)(F)100Y2.70-8.202.70-8.20-100Y2.70-8.202.70-8.202.70-8.202.70-8.20TechnicalLimit0.00-35.00-STDConc.Pos.SamplePre.Dil.Calib.LotNo.QualitativeNo(1)0.00W300999000001(1)0(2)*#300#000002(2)0(3)01000000000000(3)0(4)01000000000000(4)0(5)0100000

8、0000000(5)0(6)01000000000000(6)0TestUreaAssayCodeRate-A10Wavelength(2nd/Primary)405/340AssayPoint21-27-0-0DiluentWS.Vol.(Normal)300S.Vol.(Decrease)50350S.Vol.(Increase)600ABS.Limit5500DecreaseProzoneLimitUpperReagentT12400&T200T3600&T400CalibrationTypeLinear2200AutoTimeOutBlank0SDLimit999.9Span0Dupl

9、icateLimit2002Point720SensitivityLimit0Full0S1ABSLimit800032000CompensatedLimit注：“&”表示用戶自定義通道號(hào)；“*”輸入校準(zhǔn)物標(biāo)示值；“#”表示用戶自定義校準(zhǔn)液位置號(hào)試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.1.2日立7170分析儀檢測(cè)參數(shù)5.1.2.17170屏幕界面1試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.1.2

10、.27170屏幕界面2試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.1.2.37170屏幕界面3試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.1.2.47170屏幕界面4注：“&”表示用戶自定義通道號(hào)；“*”輸入校準(zhǔn)物標(biāo)示值；“#”表示用戶自定義校準(zhǔn)液位置號(hào)試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.1.3日

11、立7020分析儀檢測(cè)參數(shù)5.1.3.17020屏幕界面儀器菜單界面項(xiàng)目名稱NO.界面項(xiàng)目Urea1TestNameUrea2AssayCode(Mthd)速率法A3AssayCode(Test)04RactionTime105AssayPoint1226AssayPoint2287AssayPoint308AssayPoint409WaveLeng(SUB)40510WaveLeng(MAIN)34011SampleVolume3.012R1Volume24013R1POS&14R1BottleSize大15R2Volume16R2POS17R2BottleSize18R3Volume6019

12、R3POS&20R3BottleSize大21Calib.Type線性22Calib.Type(Wght)023Calib.Conc.10.0024Calib.Pos.19925Calib.Conc.2*26Calib.Pos.2#27Calib.Conc.328Calib.Pos.329Calib.Conc.430Calib.Pos.431Calib.Conc.532Calib.Pos.533Calib.Conc.634Calib.Pos.635S1ABS36KFactor37K2Factor38K3Factor試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitb

13、yUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀續(xù)上表39K4Factor40K5Factor41AFactor42BFactor43CFactor44SDLimit999.945DuplicateLimit20046SensLimit047SIABSLimit(L)800048SIABSLimit(H)3200049ABS.Limit550050ABS.Limit(D/I)減少51Prz.Limit52Prz.Limit(U/D)53Prz.(EndPoint)54ExpectValue(L)2.7055ExpectValue(H)8.2056Instr.Fact.(a)57Ins

14、tr.Fact.(b)58Keysetting注：“&”表示用戶自定義通道號(hào)；“*”輸入校準(zhǔn)物標(biāo)示值；“#”表示用戶自定義校準(zhǔn)液位置號(hào)試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀5.2校準(zhǔn)5.2.1校準(zhǔn)物使用邁克科技有限責(zé)任公司的尿素校準(zhǔn)液（商品名為UreaCalibrationLiquid，Urea-CL）進(jìn)行兩點(diǎn)校準(zhǔn)或使用邁克科技有限責(zé)任公司生產(chǎn)的多項(xiàng)液體校準(zhǔn)血清（商品名為Muti-CalibrationSerum，M-CS）進(jìn)行兩點(diǎn)校準(zhǔn)。5.2.2校準(zhǔn)物穩(wěn)定性邁克科技公司的尿素校準(zhǔn)液在28可密閉

15、保存可穩(wěn)定12個(gè)月；邁克科技公司生產(chǎn)的多項(xiàng)液體校準(zhǔn)血清-15-20可穩(wěn)定24個(gè)月，28可密閉保存可穩(wěn)定5天。5.2.3校準(zhǔn)物準(zhǔn)備尿素校準(zhǔn)液和多項(xiàng)液體校準(zhǔn)血清置室溫放置15分鐘,混勻后即可使用，混勻時(shí)應(yīng)避免氣泡產(chǎn)生；用后及時(shí)冷藏保存。5.2.4校準(zhǔn)間隔邁克尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑具有良好的開瓶穩(wěn)定性,一批試劑間28貯存30天無瓶間差，我們推薦校準(zhǔn)間隔為30天。當(dāng)試劑批號(hào)更換、儀器維修或光源等配件更換后應(yīng)重新進(jìn)行校準(zhǔn)。5.2.5校準(zhǔn)物溯源性邁克尿素校準(zhǔn)液和多項(xiàng)液體校準(zhǔn)血清采用Fluka公司提供的純度為99.9%的尿素原料，用萬(wàn)分之一電子天平準(zhǔn)確稱量，并用對(duì)尿素有穩(wěn)定作用的生物緩沖液或經(jīng)穩(wěn)定化處

16、理的人血清（來源同邁克液體質(zhì)控血清）準(zhǔn)確定容而成。尿素的標(biāo)示值是利用邁克科技有限責(zé)任公司尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑和日本Kainos公司提供的尿素校準(zhǔn)液及尿素檢測(cè)試劑，在全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)，同時(shí)平行檢測(cè)大量臨床正常和異常樣品，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后確認(rèn)的靶值。日本Kainos公司的尿素校準(zhǔn)液采用尿素改良UV-GLDH法檢測(cè)試劑在日本JSCC指定的權(quán)威參考實(shí)驗(yàn)室在全自動(dòng)生化分析儀上確定的尿素靶值。5.2.6校準(zhǔn)物訂貨指南品名貨號(hào)產(chǎn)品編碼規(guī)格包裝瓶型Urea-CLBS07050102190070051ml5塑料瓶M-CSBS02150102190020153ml5塑料滴瓶5.3質(zhì)控5.3.1質(zhì)控物使

17、用邁克科技有限責(zé)任公司生產(chǎn)的液體生化質(zhì)控血清（商品名為：Auto-Normserum，ANS、Auto-Pathologyserum，APS）。邁克液體生化質(zhì)控血清來源于健康正常人血清，其中HIV、HCV、HBV傳染性指標(biāo)經(jīng)國(guó)家食品和藥品監(jiān)督管理局（SDA）批準(zhǔn)的方法檢測(cè)，結(jié)果均為陰性，但不排除存在潛在感染的危險(xiǎn)性，使用時(shí)應(yīng)視病人樣品同等對(duì)待。血清添加物為高純度的尿素，反應(yīng)特性接近臨床新鮮血清，基質(zhì)效應(yīng)小。邁克液體生化質(zhì)控血清采用活性物質(zhì)穩(wěn)定技術(shù)，確保尿素的穩(wěn)定性。血清不含劇毒物質(zhì)（如NaN3、硫柳汞等），對(duì)環(huán)境不造成污染,且不含蛋白酶水解抑制劑，確保血清活性成份的反應(yīng)特性。尿素檢測(cè)的范圍值是

18、依據(jù)邁克科技公司尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑和配套校準(zhǔn)物，采用邁克試劑標(biāo)準(zhǔn)操作參數(shù)在全自動(dòng)生化分析儀上對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后確定。5.3.2可接受性判定質(zhì)控血清的檢測(cè)值應(yīng)在給定質(zhì)控范圍或符合用戶室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則。5.3.3質(zhì)控物訂貨指南品名貨號(hào)產(chǎn)品編碼規(guī)格包裝瓶型ANSB003500102000030505ml10塑料滴瓶APSB004500102000040505ml10塑料滴瓶試劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀6.交叉污染本試劑具有良好的抗交叉污染能力。不對(duì)邁克其它試劑造成

19、污染，且不受邁克其它試劑的污染。7.方法學(xué)特性7.1線性范圍：0.0035.00mmol/L。樣品中的Urea超出線性范圍，可采用減量操作，或用蒸餾水按比例稀釋后檢測(cè)。7.2精密度：對(duì)邁克液體生化質(zhì)控血清1例、臨床標(biāo)本4例進(jìn)行50次重復(fù)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如下。批內(nèi)精密度批間精密度血清檢測(cè)次數(shù)均值（mmol/L）標(biāo)準(zhǔn)差變異系數(shù)（CV%）血清檢測(cè)次數(shù)均值（mmol/L）標(biāo)準(zhǔn)差變異系數(shù)（CV%）I503.550.0952.82I503.540.1022.88II506.210.142.25II506.350.1682.64III5013.890.282.02III5013.970.2882.06IV50

20、24.260.341.40IV5024.750.331.33V5037.950.381.00V5038.230.501.307.3靈敏度：本試劑最低檢測(cè)限為0.1mmol/L,計(jì)算是由零濃度的尿素樣品平行檢測(cè)20次,取其均值加3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差而得來。7.4抗干擾能力：膽紅素855mol/L，血紅蛋白0.5g/L，維生素C6mmol/L,脂濁5%（以甘油三酯含量表示相當(dāng)于10.0mmol/L）時(shí)對(duì)檢測(cè)結(jié)果無影響。7.5抗凝劑的影響：常規(guī)抗凝劑EDTA-Na2、EDTA-K2、肝素、枸櫞酸鈉等不影響本法對(duì)尿素的檢測(cè)，但草酸鹽、NaF類抗凝劑要影響本法對(duì)尿素檢測(cè)，應(yīng)避免使用。8.方法學(xué)可溯性:邁克Urea

21、試劑（Y）與日本Kainos公司尿素改良UV-GLDH法試劑（X）比對(duì)：回歸方程：r=0.99,Y=0.974X+0.57,n=50檢測(cè)范圍：0.0042.00mmol/L9.參考值范圍2.708.20mmol/L，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考值范圍。10.安全性和注意事項(xiàng)血漿樣品不能使用含銨鹽的抗凝劑，血清等樣品可能含有乙肝等病毒,有被感染的危險(xiǎn)性,采血時(shí)應(yīng)采取防范措施；本試劑含有NaN3應(yīng)避免與鉛銅等金屬接觸；試劑反應(yīng)后所產(chǎn)生的廢液及使用后難降解的包裝材料應(yīng)集中收集后交當(dāng)?shù)丨h(huán)境廢物處理站處理。11.技術(shù)服務(wù)有關(guān)產(chǎn)品技術(shù)咨詢請(qǐng)與本公司技術(shù)開發(fā)部聯(lián)系,電話關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量投

22、訴請(qǐng)與本公司質(zhì)管部聯(lián)系,電話于新裝機(jī)用戶，本公司可提供技術(shù)支持，電話劑項(xiàng)目：尿素UV-GLDH法檢測(cè)試劑盒UreaAssayReagentKitbyUV-GLDHMethod適用于：日立系列自動(dòng)生化分析儀12.主要參考文獻(xiàn)12.1葉應(yīng)嫵，等.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社，1997年第二版：25912.2Tietz,N.W.,SpecimenCollectionandProcessing;SourcesofBiologicalVariation,TextbookofClinicalChemistq42ndEdition,W.B.Sa

23、unders,Philadelphia,PA(1994).12.3NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards,ProceduresfortheHandlingandProcessingofBloodSpecimens;ApprovedGuideline,NCCLSpublicationH18-A,Villanova,PA(1990).12.4NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards,HowtoDefine,Determine,andUtilizeReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory;ApprovedGuideline,NCCLSpublicationC