1、GB4789-200334項(xiàng)GB4789-200839項(xiàng)方法改變125項(xiàng)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 總則食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 空腸彎曲菌檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 鮮乳中抗生素殘留檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢

2、驗(yàn) 雙歧桿菌檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 食品中乳酸菌檢驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸桿菌計(jì)數(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 糞大腸菌群計(jì)數(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)菌落總數(shù)測定大腸菌群計(jì)數(shù)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)沙門氏菌檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn)副溶血弧菌檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備樣品處理和接種增菌培養(yǎng)選擇性分離平板分離培養(yǎng)挑選菌落并進(jìn)行

3、生化試驗(yàn)生化結(jié)果及血清學(xué)試驗(yàn)初步判斷自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備玻璃器皿清潔新購的器皿：流水沖洗12%（工業(yè)用）鹽酸浸泡26h 流水沖洗用過的器皿：直接清洗；高壓滅菌后清洗自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備消毒和滅菌濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌法適用于耐熱的物品干熱滅菌：干烤箱適用于在高溫下不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品（160170持續(xù)2h）自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備過濾除菌：濾器適用于對溫度不耐受的某些添加物紫外線：200-275nm，250-270nm；10m2無菌室需裝30w紫外燈1只（距臺面1m）自然科學(xué)GB47

4、89涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備高壓蒸汽滅菌效果測定：留點(diǎn)溫度計(jì)測試法：160，50化學(xué)指示劑測試法：OK試紙微生物學(xué)測試法：可直接取得滅菌效果的數(shù)據(jù)，是最可靠的方法嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞菌片（每片含1-5106），溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備紫外線消毒要求：保持燈管無塵定期用酒精棉球擦拭紫外線輻射強(qiáng)度不低于70w/cm2，照射時(shí)間25min 經(jīng)常檢測紫外線強(qiáng)度。紫外線強(qiáng)度儀使用時(shí)間1000h時(shí)定期更換燈管自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)菌落總數(shù)測定定義：食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、pH

5、、需氧性質(zhì)等），所得1mL（或1g）檢樣中形成菌落的總數(shù)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)菌落總數(shù)測定只包括一群在平板計(jì)數(shù)瓊脂上生長發(fā)育的嗜中溫需氧菌或兼性厭氧菌的菌落總數(shù)不包括厭氧菌、微需氧菌和嗜冷菌及有特殊營養(yǎng)要求的菌自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)菌落總數(shù)測定計(jì)算公式：N=C/（n12）dN-樣品中菌落數(shù)；C-平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和；n1-第一個(gè)適宜稀釋度平板上的菌落數(shù)；n2-第二個(gè)適宜稀釋度平板上的菌落數(shù)；d-稀釋因子（第一稀釋度）自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)菌落總數(shù)測定-涂布法自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)大腸菌群

6、計(jì)數(shù)定義大腸菌群：一群在36條件下培養(yǎng)48h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。最可能數(shù)（MPN）：基于泊松分布的一種間接計(jì)數(shù)方法自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)埃希菌屬檸檬酸桿菌屬腸桿菌屬克雷伯菌屬自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)大腸菌群計(jì)數(shù)MPN檢索表MPN值：表示樣品中活菌密度的估測數(shù)，是細(xì)菌密度的估計(jì)值MPN測定的最理想結(jié)果應(yīng)是最低稀釋度的全部管為陽性，最高稀釋度的全部管為陰性自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)大腸菌群計(jì)數(shù)檢索表為10倍稀釋，設(shè)3個(gè)稀釋度：當(dāng)按10倍加大或減少接種量時(shí)，所得結(jié)果按表內(nèi)數(shù)值相應(yīng)降低或增加10倍當(dāng)懷疑水

7、樣有嚴(yán)重污染時(shí)，可用10倍稀釋系列接種3個(gè)以上稀釋度應(yīng)做到最高稀釋度至少有1管陰性自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)表:不同稀釋樣品確定MPN所需乘積倍數(shù)舉例實(shí)例陽性反應(yīng)管數(shù)選擇編碼結(jié)果確定MPN乘積倍數(shù)51ml50.1ml50.01ml50.001ml50.0001ml1552005-2-01002554105-4-11003530005-3-0104555315-3-110005010000-1-010自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)大腸菌群計(jì)數(shù)當(dāng)從表上查不到所得到的陽性管組合時(shí)，最好是重新檢測或查閱更完整的MPN檢索表表內(nèi)所列陽性管組合是最為常見的，出現(xiàn)機(jī)率為99%

8、以上，未列出的陽性組合，其總數(shù)不到1%自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)大腸菌群計(jì)數(shù)MPN法還可用于測定食品中其它細(xì)菌，如沙門菌、糞鏈球菌、亞硫酸鹽還原菌等須選用適合其生物特性的選擇性培養(yǎng)基自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)時(shí)間：3d開始，5d結(jié)束培養(yǎng)溫度：2528計(jì)數(shù)方法：選擇菌落數(shù)在10150之間的平皿計(jì)數(shù)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)生長特征 霉菌有分支的絲狀體，菌絲粗長，在條件適宜的培養(yǎng)基里，菌絲無限伸長沿培養(yǎng)基表面蔓延自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)霉菌的基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲都常帶

9、有不同顏色，因而菌落邊緣和中心，正面和背面顏色常常不同，如青霉菌：孢子青綠色，氣生菌絲無色，基內(nèi)菌絲褐色自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)霉菌在固體培養(yǎng)表面形成絮狀、絨毛狀和蜘蛛網(wǎng)狀菌落自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)大多數(shù)酵母菌沒有絲狀體，在固體培養(yǎng)基上形成的菌落和細(xì)菌的很相似，只是比細(xì)菌菌落大且厚液體培養(yǎng)也和細(xì)菌相似，有均勻生長、沉淀或在液面形成菌膜 自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)腸桿菌科、弧菌科及金葡菌檢測培養(yǎng)特性觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察生理生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)平板劃線分離自然科學(xué)GB4

10、789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)培養(yǎng)特性觀察固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基菌落大小形態(tài)顏色（色素是水溶性還是脂溶性）光澤度透明度質(zhì)地隆起形狀邊緣特征及遷移性等表面生長情況（菌膜、環(huán)）混濁度沉淀色素運(yùn)動擴(kuò)散自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)培養(yǎng)特性觀察自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)1. 銅綠假單胞菌2.志賀氏菌 3.枯草芽孢桿菌 自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 染色特性形狀大小排列方式細(xì)胞結(jié)構(gòu)（包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、鞭毛、芽孢等） 自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)革蘭染色革蘭染色法是1884年由丹麥病理學(xué)家所創(chuàng)立的。革蘭染色法可

11、將所有的細(xì)菌區(qū)分為革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-）兩大類，是細(xì)菌學(xué)上最常用的鑒別染色法。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)革蘭染色G-菌的細(xì)胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質(zhì)，而且肽聚糖層較薄、交聯(lián)度低，故用乙醇或丙酮脫色時(shí)溶解了類脂質(zhì)，增加了細(xì)胞壁的通透性，使初染的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物易于滲出，結(jié)果細(xì)菌就被脫色，再經(jīng)石炭酸復(fù)紅復(fù)染后就成紅色自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)革蘭染色G+菌細(xì)胞壁中肽聚糖層厚且交聯(lián)度高，類脂質(zhì)含量少，經(jīng)脫色劑處理后反而使肽聚糖層的孔徑縮小，通透性降低，因此細(xì)菌仍保留初染時(shí)的顏色自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)革蘭染色自然科

12、學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌TSI：-/+賴氨酸脫羧酶：+靛基質(zhì)：-（如為+則需甘露醇+山梨醇+）尿素（）：-KCN：-自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌三糖鐵（TSI）試驗(yàn) 腸道桿菌科為革蘭氏陰性菌，可發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。三糖鐵瓊脂試驗(yàn)是利用糖類發(fā)酵的不同與硫化氫產(chǎn)生與否，將腸道桿菌科各組細(xì)菌或各菌屬加以初步區(qū)分自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌使用接種針先穿刺至底部，而后于斜面作劃線接種，培養(yǎng)18-24小時(shí)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌自然科學(xué)GB4789涉及的微

13、生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌三糖鐵瓊脂斜面培養(yǎng)基含有1乳糖及蔗糖與0.1葡萄糖作為發(fā)酵基質(zhì)，且以酚紅作為酸堿指示劑，如培養(yǎng)基由橘紅轉(zhuǎn)為黃色，表示有糖類發(fā)酵。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌斜面堿性（紅色-）底部酸性（黃色+）產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣（或-產(chǎn)氣時(shí)會造成瓊脂裂開）：表示僅葡萄糖發(fā)酵。因微生物優(yōu)先分解葡萄糖產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基變黃自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌但因葡萄糖含量低，斜面上產(chǎn)生的微量酸立即氧化而呈堿性反應(yīng)，同時(shí)培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)也隨之利用而產(chǎn)堿，培養(yǎng)基底部則因氧張力較小，且微生物生長較慢，故仍維持酸性反應(yīng)自然科學(xué)G

14、B4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌斜面酸性（黃色+）底部酸性（黃色+）產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣（或-） ：表示除了葡萄糖發(fā)酵外，乳糖與（或）蔗糖也發(fā)酵。由于乳糖與蔗糖濃度高，經(jīng)繼續(xù)發(fā)酵，可維持培養(yǎng)基斜面與底部保持酸性反應(yīng)。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌斜面堿性（紅色-）底部堿性（紅色-）或無變化（橘紅色）：表示無糖類發(fā)酵。而蛋白質(zhì)則于有氧或厭氧條件下進(jìn)行代謝產(chǎn)生氨，而使培養(yǎng)基呈堿性反應(yīng)，如有氧與厭氧均發(fā)生蛋白質(zhì)分解，則斜面與底部均呈堿性反應(yīng)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基中含有硫代硫酸鈉作為產(chǎn)生硫

15、化氫的基質(zhì)，且含硫酸亞鐵作為檢測此無色產(chǎn)物之指示劑，若微生物有硫化氫產(chǎn)生，會與亞鐵離子作用生成不溶性硫化亞鐵之沉淀，進(jìn)而使培養(yǎng)基變黑培養(yǎng)基變黑自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)斜面紅色，底面黃色制好的培養(yǎng)基培養(yǎng)基全黃色斜面、底部黃色，并產(chǎn)生H2S斜面紅色，底部黃色，產(chǎn)生H2S底面黃色，并產(chǎn)生CO2對照管自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌為使結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)于接種培養(yǎng)18-24小時(shí)內(nèi)觀察結(jié)果，以確保糖類尚未用盡，且蛋白質(zhì)分解之堿性終產(chǎn)物尚未產(chǎn)生。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)原理：細(xì)菌（如陰溝腸桿菌）含有氨

16、基酸脫羧酶，使羧基釋出，生成胺類和二氧化碳。此反應(yīng)在偏酸的條件下進(jìn)行。當(dāng)培養(yǎng)基含胺類時(shí)呈堿性反應(yīng)，使指示劑變色。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌接種：用幼齡培養(yǎng)液作為菌種，直接接種。接種后封液體石蠟，對照管與測定管同時(shí)接種封油。腸桿菌科的細(xì)菌于37培養(yǎng)4天觀察結(jié)果：陽性-先黃色后變?yōu)樽仙驇Ъt色調(diào)的紫色；陰性-黃色；對照管-黃色自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基質(zhì)，與對二甲氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈色

17、結(jié)果：陰性（液面黃）；陽性（液面玫瑰紅）自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌尿素酶試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解、產(chǎn)生2個(gè)分子的氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，酚紅呈粉紅色。其活性最適pH為結(jié)果：陰性-黃；陽性-紅自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌氰化鉀試驗(yàn) 原理：KCN可抑制某些細(xì)菌的呼吸酶系統(tǒng)。細(xì)胞色素、細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶以鐵卟啉作為輔基，KCN能與鐵卟啉結(jié)合使這些酶失去活性從而抑制

18、細(xì)菌的生長自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌結(jié)果：渾濁（未抑制）+；清亮（抑制）-接種時(shí)注意菌量不宜過多注意：氰化鉀是劇毒藥品，操作時(shí)必須小心。培養(yǎng)基用畢，每管加幾粒硫酸亞鐵和KOH以解毒，然后清洗自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-沙門氏菌意義：當(dāng)培養(yǎng)基中KCN含量為1：13300或1：10000時(shí)，腸桿菌科中沙門氏菌、志賀氏菌和大腸埃希菌的生長受到抑制而其他菌大多能生長自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-志賀氏菌TSI：-/+-葡萄糖半固體：動力-葡萄糖銨、西蒙氏檸檬酸鹽、賴氨酸脫羧酶、尿素、KCN、水楊苷和七葉苷

19、：-自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-志賀氏菌葡萄糖銨利用原理：當(dāng)細(xì)菌可以利用銨鹽作為唯一氮源且不需要尼克酸和某些氨基酸作為生長因子時(shí)，可以在葡萄糖銨培養(yǎng)基上生長。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-志賀氏菌結(jié)果：陽性者斜面上有正常大小的菌落生長，陰性者不生長或生長極微小的菌落意義大腸埃希菌可利用銨鹽作為唯一氮源，且不需要尼克酸作為生長因子-生長自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-志賀氏菌志賀菌屬可利用銨鹽作為唯一氮源，但需要尼克酸作為生長因子-不生長變形桿菌和摩根氏菌屬不能利用銨鹽作為唯一氮源，補(bǔ)給尼克酸也不能生長-不生長自

20、然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-志賀氏菌西蒙氏檸檬酸鹽利用原理：當(dāng)細(xì)菌可以利用銨鹽作為唯一氮源，同時(shí)利用檸檬酸鹽為唯一碳源時(shí)，可以在葡萄糖銨培養(yǎng)基上生長。細(xì)菌生長時(shí)，分解檸檬酸生成碳酸鹽，使培養(yǎng)基變堿自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-志賀氏菌結(jié)果：陽性者斜面上菌落生長，培養(yǎng)基由綠色轉(zhuǎn)為藍(lán)色，陰性者不生長意義腸桿菌科中大腸埃希菌屬、志賀氏菌屬、愛德華氏菌屬和摩根氏菌屬均為陰性其它菌屬多為陽性自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌3.5%氯化鈉TSI：-/+-氧化酶試驗(yàn)：+革蘭氏染色：-，棒狀、弧狀、卵原狀等多形態(tài)，無

21、芽胞，有鞭毛自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌嗜鹽試驗(yàn)：在無氯化鈉和10%氯化鈉胰胨水不生長或微弱生長，在7%氯化鈉胰胨水生長良好自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌氧化酶試驗(yàn) 氧化酶亦即細(xì)胞色素氧化酶，為細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的終末呼吸酶，氧化酶先使細(xì)胞色素C氧化，然后此氧化型細(xì)胞色素C再使對苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應(yīng)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌注意：鹽酸二甲基對苯二胺溶液容易氧化，溶液應(yīng)裝在棕色瓶中，并在冰箱內(nèi)保存，如溶液變?yōu)榧t褐色，即不宜使用。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測

22、技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌鐵、鎳鉻絲等金屬可催化鹽酸二甲基對苯二胺呈紅色反應(yīng)，若用它來挑取菌苔，會出現(xiàn)假陽性，故必須用白金絲或玻璃棒（或牙簽）來挑取菌苔自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌在濾紙上滴加試劑，以剛剛打濕濾紙為宜，如濾紙過濕，會防礙空氣與菌苔接觸，從而延長了反應(yīng)時(shí)間，造成假陰性意義：是區(qū)分腸桿菌科細(xì)菌和弧菌科細(xì)菌的重要試驗(yàn)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌嗜鹽試驗(yàn)觀察滲透壓對細(xì)菌生長的影響。由于不同菌類耐鹽性不同，故常以此作為鑒別特征。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-副溶血性弧菌一般

23、可根據(jù)不同種類的菌株，選擇其適合生長的培養(yǎng)基，在其中加入不同量的NaCl，接種后觀察其生長與否，以判斷其耐鹽性注意：接種的細(xì)菌量不宜過多自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-金黃色葡萄球菌Baird-Parker平板血漿凝固酶試驗(yàn)：+過氧化氫酶試驗(yàn)：+自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-金黃色葡萄球菌過氧化氫酶試驗(yàn) 過氧化氫酶又稱接觸酶，能催化過氧化氫分解為水和氧。試劑：3過氧化氫溶液（H2O2）自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)生理生化試驗(yàn)-金黃色葡萄球菌注意：過氧化氫酶是1種以正鐵血紅素作為輔基的酶，所以測試菌所生長的培養(yǎng)基不可含有血紅素

24、或紅血球。自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)血清學(xué)試驗(yàn) 血清學(xué)反應(yīng)：相應(yīng)的抗原與抗體在體外一定條件下作用，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀、凝集現(xiàn)象。 自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)的特點(diǎn) 抗原抗體的結(jié)合具有特異性，當(dāng)有共同抗原存在時(shí)，會出現(xiàn)交叉反應(yīng)抗原抗體的結(jié)合是分子表面的結(jié)合，這種結(jié)合雖相當(dāng)穩(wěn)定，但是可逆的自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)血清學(xué)試驗(yàn)抗原抗體的結(jié)合是按一定比例進(jìn)行的，只有比例適當(dāng)時(shí)，才能出現(xiàn)可見反應(yīng)自然科學(xué)GB4789涉及的微生物常規(guī)檢測技術(shù)血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)的兩個(gè)階段第一階段為抗原抗體特異性結(jié)合階段，反應(yīng)速度很快，只需幾秒至幾分鐘反應(yīng)即可完畢，但不出現(xiàn)肉眼可見現(xiàn)象自