蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能兼容_第1頁
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能兼容_第2頁
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能兼容_第3頁
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能兼容_第4頁
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能兼容_第5頁
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文檔簡介

1、關(guān)于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能兼容第一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)(protein)是由許多氨基酸(amino acids)通過肽鍵(peptide bond)相連形成的高分子含氮化合物,是生命活動(dòng)的載體。第二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)的分子組成The Molecular Component of Protein第一節(jié)第三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)的元素組成主要有C、H、O、N和 S。 有些蛋白質(zhì)含有少量其他元素,如:磷、鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬、碘等。 各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近,平均為16。根據(jù)生物樣品中的含氮量可以推算出蛋白質(zhì)的大致含量

2、。第四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一、組成人體蛋白質(zhì)的20種L-氨基酸存在自然界中的氨基酸有300余種,但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有20種,且均屬 L-氨基酸(甘氨酸除外)。第五張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月COO-C+NH3L-氨基酸的通式RH第六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月非極性脂肪族氨基酸極性中性氨基酸芳香族氨基酸酸性氨基酸堿性氨基酸二、氨基酸可根據(jù)側(cè)鏈結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行分類第七張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月幾種特殊氨基酸1.脯氨酸(亞氨基酸)CH2CHCOO-NH2+CH2CH2CH2CHCOO-NH2+CH2CH2 其他氨酸(-氨基

3、酸)COO-C+NH3RH第八張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2.半胱氨酸 胱氨酸二硫鍵-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3+-OOC-CH-CH2-SH+NH3-OOC-CH-CH2-SH+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3第九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 在蛋白質(zhì)翻譯后,脯氨酸和賴氨酸可分別被羥化為羥脯氨酸和羥賴氨酸。3.羥脯氨酸和羥賴氨酸第十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三、氨基酸的理化性質(zhì)兩性解離及等電點(diǎn)氨基

4、酸是兩性電解質(zhì),其解離程度取決于所處溶液的酸堿度。等電點(diǎn)(isoelectric point, pI) 在某一pH的溶液中,氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等,成為兼性離子,呈電中性。此時(shí)溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。(一)氨基酸具有兩性解離的性質(zhì)第十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月pH=pI+OH-pHpI+H+OH-+H+pHpI氨基酸的兼性離子 陽離子陰離子第十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)含共軛雙鍵的氨基酸具有紫外吸收性質(zhì)色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在 280 nm 附近。大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩種氨基酸殘基,所以測定蛋白質(zhì)溶液280nm的光吸收值

5、是分析溶液中蛋白質(zhì)含量的快速簡便的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收第十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(三)氨基酸與茚三酮反應(yīng)生成藍(lán)紫色化合物所有氨基酸及具有游離-氨基的肽與茚三酮反應(yīng)都產(chǎn)生藍(lán)紫色物質(zhì),只有脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)。氨基酸與茚三酮水合物共熱,可生成藍(lán)紫色化合物,其最大吸收峰在570nm處。由于此吸收峰值與氨基酸的含量存在正比關(guān)系,因此可作為氨基酸定量分析方法。第十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月四、氨基酸通過肽鍵連接而形成蛋白質(zhì)或活性肽(一)氨基酸通過肽鍵連接而形成肽+NH-CH-CHOHOOH甘氨酸-HOH甘氨酰甘氨酸NH2-CH-C-N-

6、CH-COOHHHHONH2-CH-C-N-CH-COOHHHHO肽鍵第十五張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二肽R2-N-CHCOH-NH2-CH-CR1ONH2-CH-COR10N-CHCOH-OH肽(peptide)是由氨基酸通過肽鍵縮合而形成的化合物。R3N-CHCOH-三肽十個(gè)以內(nèi)氨基酸構(gòu)成的肽稱為寡肽。十個(gè)以上氨基酸構(gòu)成的肽稱為多肽。氨基酸殘基N 末端:多肽鏈中有游離-氨基的一端C 末端:多肽鏈中有游離-羧基的一端第十六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 蛋白質(zhì)是由許多氨基酸殘基組成、折疊成特定的空間結(jié)構(gòu)、并具有特定生物學(xué)功能的多肽。一般而論,蛋白質(zhì)的氨基酸殘基數(shù)通

7、常在50個(gè)以上,50個(gè)氨基酸殘基以下則仍稱為多肽。第十七張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)體內(nèi)存在多種重要的生物活性肽 1. 谷胱甘肽(glutathione, GSH)第十八張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月GSH過氧化物酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH還原酶NADPH+H+ NADP+ GSH與GSSG間的轉(zhuǎn)換 第十九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 體內(nèi)許多激素屬寡肽或多肽 神經(jīng)肽(neuropeptide)2.多肽類激素及神經(jīng)肽第二十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)The Molecular Structure

8、of Protein 第二節(jié)第二十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)包括: 高級結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu)(primary structure)二級結(jié)構(gòu)(secondary structure)三級結(jié)構(gòu)(tertiary structure)四級結(jié)構(gòu)(quaternary structure)第二十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月定義:蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)指在蛋白質(zhì)分子從N-端至C-端的氨基酸排列順序。一、蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)主要的化學(xué)鍵:肽鍵,有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。 第二十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ),但不是決定

9、蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的唯一因素。第二十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二、蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu),即該段肽鏈主鏈骨架原子的相對空間位置,并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象。定義: CR2-CR1-CO-COHNHHCO-N-HHCOR3N-CH-HCOR10N-CH-OHH肽鏈主鏈骨架由氨基氮N、C和羰基C等3個(gè)原子依次重復(fù)排列構(gòu)成。 第二十五張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(一)參與肽鍵形成的6個(gè)原子在同一平面上肽鍵具有雙鍵屬性,參與肽鍵的6個(gè)原子C1、C、O、N、H、C2位于同一平面,C1和C2在平面上所處的位置為反式(trans)構(gòu)型,此同一平面上的

10、6個(gè)原子構(gòu)成了所謂的肽單元 (peptide unit) 。第二十六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 -螺旋 ( -helix) -折疊 (-pleated sheet) -轉(zhuǎn)角 (-turn) 無規(guī)卷曲 (random coil) (二)-螺旋結(jié)構(gòu)是常見的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)維持二級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵:氫鍵 第二十七張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)-螺旋結(jié)構(gòu)是常見的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)1)右手螺旋結(jié)構(gòu)。2)螺距為0.54nm,每一圈含有3.6個(gè)氨基酸殘基。3)靠鏈內(nèi)氫鍵維持的,每個(gè)肽鍵的N-H與第4個(gè)殘基的羰基氧形成氫鍵。4)側(cè)鏈基團(tuán)伸向螺旋外側(cè)。 第二十八張,PPT共

11、八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(三)-折疊使多肽鏈形成片層結(jié)構(gòu)1)-折疊是由兩條或多條伸展的多肽鏈靠氫鍵聯(lián)結(jié)而成的鋸齒狀結(jié)構(gòu)。2)維持-折疊結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的氫鍵在鏈與鏈之間形成,由一條鏈上的羰基氧和另一條鏈上的氨基N-H之間形成。3)側(cè)鏈基團(tuán)交替地分布于片層平面兩側(cè)。4)-折疊分平行式和反平行式。 第二十九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第三十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(四)-轉(zhuǎn)角-轉(zhuǎn)角也稱-回折,存在于球狀蛋白中。其特點(diǎn)是肽鏈回折180,使得第一個(gè)氨基酸殘基的C=O和與第四個(gè)殘基的N-H形成氫鍵。第三十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(四)無規(guī)卷曲無規(guī)卷曲是

12、用來闡述沒有確定規(guī)律性的那部分肽鏈結(jié)構(gòu)。第三十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(五)二級結(jié)構(gòu)可組成蛋白質(zhì)分子中的模體二個(gè)或三個(gè)具有二級結(jié)構(gòu)的肽段,在空間上相互接近,形成一個(gè)特殊的空間構(gòu)象,稱為模體(motif) ,也被稱為超二級結(jié)構(gòu)。第三十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月-螺旋-轉(zhuǎn)角(或環(huán))-螺旋模體鏈-轉(zhuǎn)角-鏈模體鏈-轉(zhuǎn)角-螺旋-轉(zhuǎn)角-鏈模體模體常見的形式第三十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月鈣結(jié)合蛋白中結(jié)合鈣離子的模體鋅指結(jié)構(gòu)第三十五張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(六)氨基酸殘基的側(cè)鏈影響二級結(jié)構(gòu)的形成蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)是以一級結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的。一段

13、肽鏈其氨基酸殘基的側(cè)鏈適合形成-螺旋或-折疊,它就會出現(xiàn)相應(yīng)的二級結(jié)構(gòu)。 第三十六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月多聚丙氨酸在pH7的水溶液中能形成-螺旋,多聚異亮氨酸不能形成螺旋,多聚脯氨酸不能形成螺旋。多聚賴氨酸在pH7不形成螺旋,而在pH12時(shí)自發(fā)形成螺旋。 實(shí)例1、-螺旋肽鏈中脯氨酸經(jīng)常形成-轉(zhuǎn)角,肽鏈中甘氨酸經(jīng)常形成-轉(zhuǎn)角。2、-轉(zhuǎn)角第三十七張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三、多肽鏈在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)一步折疊形成三級結(jié)構(gòu)疏水鍵、離子鍵、氫鍵和 范德華力等。主要的化學(xué)鍵:整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。定義:(一)三級結(jié)

14、構(gòu)是指整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置第三十八張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 肌紅蛋白 (Mb) N 端 C端第三十九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第四十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)結(jié)構(gòu)域是三級結(jié)構(gòu)層次上的獨(dú)立功能區(qū)分子量較大的蛋白質(zhì)常可折疊成多個(gè)結(jié)構(gòu)較為緊密且穩(wěn)定的區(qū)域,并各行其功能,稱為結(jié)構(gòu)域 (domain) 。大多數(shù)結(jié)構(gòu)域含有序列上連續(xù)的100至200個(gè)氨基酸殘基,若用限制性蛋白酶水解,含多個(gè)結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)常分解出獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域,而各結(jié)構(gòu)域的構(gòu)象可以基本不改變,并保持其功能。超二級結(jié)構(gòu)則不具備這種特點(diǎn)。因此,結(jié)構(gòu)域也可看作是球狀蛋白質(zhì)的獨(dú)

15、立折疊單位,有較為獨(dú)立的三維空間結(jié)構(gòu)。 第四十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月3-磷酸甘油醛脫氫酶亞基的結(jié)構(gòu)示意圖 第四十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(三)蛋白質(zhì)的多肽鏈須折疊成正確的空間構(gòu)象分子伴侶(chaperon)通過提供一個(gè)保護(hù)環(huán)境從而加速蛋白質(zhì)折疊成天然構(gòu)象或形成四級結(jié)構(gòu)。分子伴侶可逆地與未折疊肽段的疏水部分結(jié)合隨后松開,如此重復(fù)進(jìn)行可防止錯(cuò)誤的聚集發(fā)生,使肽鏈正確折疊。 分子伴侶也可與錯(cuò)誤聚集的肽段結(jié)合,使之解聚后,再誘導(dǎo)其正確折疊。 分子伴侶在蛋白質(zhì)分子折疊過程中二硫鍵的正確形成起了重要的作用。 第四十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月亞基之

16、間的結(jié)合主要是氫鍵和離子鍵。四、含有二條以上多肽鏈的蛋白質(zhì)具有四級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用,稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。許多功能性蛋白質(zhì)分子含有2條或2條以上多肽鏈。每一條多肽鏈都有完整的三級結(jié)構(gòu),稱為蛋白質(zhì)的亞基 (subunit)。第四十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月由2個(gè)亞基組成的蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)中,若亞基分子結(jié)構(gòu)相同,稱之為同二聚體(homodimer),若亞基分子結(jié)構(gòu)不同,則稱之為異二聚體(heterodimer)。 血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu)第四十五張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月五、蛋白質(zhì)的分類根據(jù)蛋白質(zhì)組成成分:單純蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)

17、 = 蛋白質(zhì)部分 + 非蛋白質(zhì)部分根據(jù)蛋白質(zhì)形狀:纖維狀蛋白質(zhì)球狀蛋白質(zhì)第四十六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)家族(protein family) : 氨基酸序列相似而且空間結(jié)構(gòu)與功能也十分相近的蛋白質(zhì)。屬于同一蛋白質(zhì)家族的成員,稱為同源蛋白質(zhì)(homologous protein) 。 蛋白質(zhì)超家族(superfamily) : 2個(gè)或2個(gè)以上的蛋白質(zhì)家族之間,其氨基酸序列的相似性并不高,但含有發(fā)揮相似作用的同一模體結(jié)構(gòu)。第四十七張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系The Relation of Structure and Function of

18、 Protein第三節(jié)第四十八張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(一)一級結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的基礎(chǔ)一、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)是高級結(jié)構(gòu)與功能的基礎(chǔ)牛核糖核酸酶的一級結(jié)構(gòu)二硫鍵第四十九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 天然狀態(tài),有催化活性 尿素、 -巰基乙醇 去除尿素、-巰基乙醇非折疊狀態(tài),無活性第五十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)一級結(jié)構(gòu)相似的蛋白質(zhì)具有相似的高級結(jié)構(gòu)與功能一級結(jié)構(gòu)相似的多肽或蛋白質(zhì),其空間構(gòu)象以及功能也相似。 氨基酸殘基序號胰島素 A5 A6 A10 A30 人 Thr Ser Ile Thr 豬 Thr Ser Ile Ala 狗 Thr Ser I

19、le Ala 兔 Thr Gly Ile Ser 牛 Ala Gly Val Ala 羊 Ala Ser Val Ala 馬 Thr Ser Ile Ala第五十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(三)重要蛋白質(zhì)的氨基酸序列改變可引起疾病例:鐮刀形紅細(xì)胞貧血N-val his leu thr pro glu glu C(146)HbS 肽鏈HbA 肽 鏈N-val his leu thr pro val glu C(146) 這種由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導(dǎo)致的疾病,稱為“分子病”。第五十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月肌紅蛋白/血紅蛋白含有血紅素輔基血紅素結(jié)構(gòu) 二、蛋白質(zhì)的

20、功能依賴特定空間結(jié)構(gòu)(一)血紅蛋白亞基與肌紅蛋白結(jié)構(gòu)相似第五十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月肌紅蛋白(myoglobin,Mb) 肌紅蛋白由一個(gè)多肽鏈和一個(gè)含鐵血紅素輔基組成,存在于骨骼肌和心肌等組織。它有8段-螺旋結(jié)構(gòu)。血紅素位于分子內(nèi)部的袋形空穴,以離子鍵形式與肽鏈中的兩個(gè)堿性氨基酸側(cè)鏈相連,肽鏈中的F8組氨酸殘基還與Fe2+形成配位結(jié)合,所以血紅素輔基與蛋白質(zhì)部分穩(wěn)定結(jié)合。 第五十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月血紅蛋白(hemoglobin,Hb)血紅蛋白具有4個(gè)亞基,每個(gè)亞基可結(jié)合1個(gè)血紅素并攜帶1分子氧。Hb亞基的三級結(jié)構(gòu)與肌紅蛋白極為相似。 第五十五張,

21、PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月Hb與Mb一樣能可逆地與O2結(jié)合, Hb與O2結(jié)合后稱為氧合Hb。氧合Hb占總Hb的百分?jǐn)?shù)(稱百分飽和度)隨O2濃度變化而改變。(二)血紅蛋白亞基構(gòu)象變化可影響亞基與氧結(jié)合第五十六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月肌紅蛋白(Mb)和血紅蛋白(Hb)的氧解離曲線第五十七張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月脫氧Hb亞基間和亞基內(nèi)的鹽鍵 第五十八張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月血紅素與氧結(jié)合后,鐵原子半徑變小,就能進(jìn)入卟啉環(huán)的小孔中,繼而引起肽鏈位置的變動(dòng)。第五十九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第六十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作

22、于2022年6月協(xié)同效應(yīng)(cooperativity)一個(gè)寡聚體蛋白質(zhì)的一個(gè)亞基與其配體結(jié)合后,能影響此寡聚體中另一個(gè)亞基與配體結(jié)合能力的現(xiàn)象,稱為協(xié)同效應(yīng)。 如果是促進(jìn)作用則稱為正協(xié)同效應(yīng) (positive cooperativity)如果是抑制作用則稱為負(fù)協(xié)同效應(yīng)(negative cooperativity)第六十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月別構(gòu)效應(yīng)(allosteric effect)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變伴隨其功能的變化,稱為別構(gòu)效應(yīng)。第六十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(三)蛋白質(zhì)構(gòu)象改變可引起疾病蛋白質(zhì)構(gòu)象疾?。喝舻鞍踪|(zhì)的折疊發(fā)生錯(cuò)誤,盡管其一級結(jié)構(gòu)

23、不變,但蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變,仍可影響其功能,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致疾病發(fā)生。這類疾病包括:人紋狀體脊髓變性病、老年癡呆癥、亨停頓舞蹈病、瘋牛病等。第六十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月瘋牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一組人和動(dòng)物神經(jīng)退行性病變。正常的PrP富含-螺旋,稱為PrPc。PrPc在某種未知蛋白質(zhì)的作用下可轉(zhuǎn)變成全為-折疊的PrPsc,從而致病。瘋牛病中的蛋白質(zhì)構(gòu)象改變第六十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)The Physical and Chemical Characters of Protein第六十五張,PP

24、T共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一、蛋白質(zhì)具有兩性電離的性質(zhì)蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外,氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團(tuán),在一定的溶液pH條件下都可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時(shí),蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢相等,即成為兼性離子,凈電荷為零,此時(shí)溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)( isoelectric point, pI)第六十六張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二、蛋白質(zhì)具有膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一,分子量可自1萬至100萬之巨,其分子的直徑可達(dá)1100nm,為膠粒范圍之內(nèi)。顆粒表面電荷水化膜蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素:第六十七張,PP

25、T共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)水化膜+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用溶液中蛋白質(zhì)的聚沉第六十八張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)破壞而引起變性在某些物理和化學(xué)因素作用下,其特定的空間構(gòu)象被破壞,也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu),從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。蛋白質(zhì)的變性(denaturation)第六十九張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月造成變性的因素:如加熱、乙醇等有機(jī)溶劑、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子及生物堿試劑等 。 變性的本質(zhì):破壞非共

26、價(jià)鍵和二硫鍵,不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。第七十張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 應(yīng)用舉例:臨床醫(yī)學(xué)上,變性因素常被應(yīng)用來消毒及滅菌。此外, 防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)制劑(如疫苗等)的必要條件。 第七十一張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月若蛋白質(zhì)變性程度較輕,去除變性因素后,蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能,稱為復(fù)性(renaturation) 。第七十二張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月在一定條件下,蛋白疏水側(cè)鏈暴露在外,肽鏈融會相互纏繞繼而聚集,因而從溶液中析出。變性的蛋白質(zhì)易于沉淀,有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀,但并不變性。 蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅(jiān)固的凝塊,此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中。 蛋白質(zhì)沉淀蛋白質(zhì)的凝固作用(protein coagulation)第七十三張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月四、蛋白質(zhì)在紫外光譜區(qū)有特征性吸收峰由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,因此在280nm波長處有特征性吸收峰。蛋白質(zhì)的A280與其濃度呈正比關(guān)系,因此可作蛋白質(zhì)定量測定。第七十四張,PPT共八十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)經(jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸也可發(fā)生茚三酮反應(yīng)。 蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱,呈現(xiàn)紫色或紅色,此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng),雙縮脲反應(yīng)可用來檢測蛋白質(zhì)水解程度。五、應(yīng)用蛋白質(zhì)呈色反應(yīng)可測定蛋白

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