1、PRDM1基因在喉癌構(gòu)造中表達(dá)的研究及臨床意義王洪江，李培華，劉穩(wěn)，許學(xué)谷【摘要】目的以喉鱗狀細(xì)胞癌構(gòu)造為研究工具，探究抑癌基因PRD1對喉癌產(chǎn)生、生長的作用及其臨床意義。要領(lǐng)用免疫構(gòu)造化學(xué)SP法檢測38例喉癌構(gòu)造及同期12例患者聲帶息肉構(gòu)造中PRD1卵白的表達(dá)，對喉癌中PRD1在差異原發(fā)部位、病理分級、臨床分期及淋逢迎轉(zhuǎn)移的表達(dá)環(huán)境舉行統(tǒng)計學(xué)闡發(fā)。結(jié)果PRD1在聲帶息肉中的陽性表達(dá)率(10/12，83.3%)顯著高于喉癌構(gòu)造中陽性表達(dá)率(17/38，44.7%)，經(jīng)闡發(fā)其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。喉癌構(gòu)造中PRD1的陽性表達(dá)率與臨床分期及頸部淋逢迎轉(zhuǎn)移有相干性(P0.05)，與原發(fā)部位

2、及病理分級無相干性(P0.05)。結(jié)論喉癌的產(chǎn)生與抑癌基因PRD1的失活有關(guān)，因此PRD1大概成為喉癌早期診斷、研究基因治療及斷定預(yù)后的緊張靶基因?！娟P(guān)鍵詞】喉癌；PRD1；免疫組化Abstrat:bjetiveTinvestigatetherleandlinialsignifianeftheexpressinfPRD1geneinthearingenesisandprgressinflaryngealsquausellarina(LS).ethdsTheexpressinfPRD1asdetetedbyiunhistheistryethdin38asesfLSand12asesfvalrdp

3、lyp,andtheexpressinfPRD1asanalyzedinLSithdifferentpriarysites,pathlgialgrades,TNstagingandlyphndeetastasis.ResultsThepsitiveexpressinratefPRD1invalrdplyp(83.3%)asbviuslyhigherthanthatinLS(44.7%),hihhadsignifiantstatistialdifferene(P0.05).ThereasapsitiverrelatinbeteenPRD1expressinandTNstagingandlyphn

4、deetastasis(P0.05),hilethereasnrrelatinithpriarysitesandpathlgialgrade(P0.05).nlusinTheinativatinfPRD1isrrelatediththearingenesisandprgressinflaryngealarina.PRD1aybeavitaltargetgenefrearlydiagnsis,genetherapyandprgnsisfLS.喉癌是頭頸部腫瘤中較為常見的惡性腫瘤，它的產(chǎn)生如今以為是多種因素綜互助用的結(jié)果，研究開端證明喉癌的產(chǎn)生與遺傳突變有關(guān)，而且常表示為一系列基因的突變，如癌基因

5、活化以及抑癌基因的失活。由于基因調(diào)控信號的非常，使細(xì)胞的生長調(diào)控機(jī)制紊亂，從而造成細(xì)胞惡變形成惡性腫瘤。比年來隨著遺傳學(xué)及分子生物學(xué)的生長，已經(jīng)研究了多種與喉癌產(chǎn)生有相干性的基因，如ylinD1、P16、PTEN、Survivin等。本研究應(yīng)用免疫組化要領(lǐng)檢測38例患者喉鱗癌及同期12例患者聲帶息肉中PRD1卵白的表達(dá)環(huán)境，并闡發(fā)它們與喉癌差異病理特性的干系，在此底子上探究其在喉癌產(chǎn)生生長中大概的作用機(jī)制及臨床意義。1資料和要領(lǐng)1.1臨床資料喉癌構(gòu)造標(biāo)本均取自2022年4月至2022年4月在我科擔(dān)當(dāng)手術(shù)治療的原發(fā)性喉癌患者，每例患者術(shù)前均未經(jīng)放、化療且均經(jīng)病理證明。此中男36例，女2例；年事4

6、574歲。原發(fā)部位：聲門上型8例，聲門型30例；病理分級：高分化17例，中分化14例，低分化7例；TN分期根據(jù)UI1997國際分期尺度：期3例，期18例，期10例，期7例；淋逢迎轉(zhuǎn)移：有頸淋逢迎轉(zhuǎn)移26例，無頸淋逢迎轉(zhuǎn)移12例。同期取12例手術(shù)切除的聲帶息肉作比較研究。1.2試劑PRD1單克隆抗體usenlnalanti-Blip-1購自美國NVUS公司，事情濃度為1100。二抗試劑盒購自北京中杉金橋生物技能。1.3免疫組化染色全部標(biāo)本離體后，立即放入液氮罐中儲存，然后放入-80冰箱中。均經(jīng)通例白臘包埋，4一連切片，利用S-P法舉行染色。標(biāo)本脫蠟、水化，微波抗原修復(fù)，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，分

7、化、返藍(lán)，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠關(guān)閉。PBS緩沖液做陰性比較，試劑公司提供陽性比較。1.4免疫組化結(jié)果斷定尺度以細(xì)胞核或和細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色物質(zhì)為陽性。根據(jù)參考文獻(xiàn)1尺度，陽性細(xì)胞計數(shù)要領(lǐng)為：每張切片隨機(jī)不雅察5個高倍視野，每個視野計數(shù)200個細(xì)胞，以陽性細(xì)胞計數(shù)10%為陰性，10%30%為陽性，30%為強(qiáng)陽性。2結(jié)果2.1喉癌及聲帶息肉構(gòu)造中PRD1卵白的表達(dá)免疫組化染色表現(xiàn)，PRD1的陽性表達(dá)重要位于細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。在喉癌中表達(dá)陽性率為44.7%(圖1)，在聲帶息肉中的表達(dá)陽性率為83.3%(圖2)，統(tǒng)計學(xué)闡發(fā)其差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0.05。喉癌聲門型陽性13例43.3%，

8、聲門上型陽性4例50.0%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；高分化組陽性9例52.9%，中低分化組陽性8例38.1%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；期陽性13例61.9%，期陽性4例23.5%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；無淋逢迎轉(zhuǎn)移組陽性10例83.3%，有淋逢迎轉(zhuǎn)移組陽性7例26.9%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.2PRD1卵白表達(dá)與喉癌臨床病理特性的干系見表1。PRD1卵白的表達(dá)程度與喉癌的原發(fā)部位和分化程度無顯著相干性，與臨床分期及頸部淋逢迎轉(zhuǎn)移有相干性。表1PRD1卵白表達(dá)與喉癌臨床病理學(xué)特性的干系3討論喉癌等惡性腫瘤的產(chǎn)生是多因素綜互助用的結(jié)果，隨著分子生物學(xué)的生長，基因在腫瘤產(chǎn)生中的作用越來越受到器重，因此探求特異的腫瘤

9、標(biāo)記基因就成了熱門。特異標(biāo)記基因?qū)Ω赌[瘤的早期診斷、防范及基因治療的探究有緊張的意義，本研究展現(xiàn)PRD1與喉癌的干系，試圖為喉癌的基因治療學(xué)開發(fā)新的途徑。PRD1基因最初被創(chuàng)造是其失活在大B細(xì)胞淋巴瘤中的作用。PRD1基因位于人6號染色體q21-q22.1位置上，此區(qū)很少產(chǎn)生B細(xì)胞淋巴瘤2。它具有7個外顯子，外顯子2-4可以編碼SET樣布局的成效區(qū)，外顯子編碼5-7編碼DNA結(jié)合區(qū)3。研究創(chuàng)造4，PRD1可以或許調(diào)控成熟B細(xì)胞向漿細(xì)胞分化，按捺一些與B細(xì)胞增殖有關(guān)的基因如Bl6、Pax5等的表達(dá)，促進(jìn)它們向漿細(xì)胞分化。另有報道2，5PRD1基來由于重排、突變、移位及轉(zhuǎn)錄與翻譯的失平衡等緣故原由

10、導(dǎo)致了大B細(xì)胞淋巴瘤的產(chǎn)生。因此提示PRD1具有抑癌基因的作用。Garia等6研究創(chuàng)造，喉正常黏膜等鱗狀細(xì)胞中有PRD1卵白的表達(dá)，提示其在鱗狀細(xì)胞的分化中起緊張作用。有研究陳訴肺鱗狀細(xì)胞癌中出現(xiàn)結(jié)合區(qū)非常的PRD1卵白表達(dá)1，推測大概其與靶基因結(jié)合停滯，使部門在活化歷程中必要按捺的基因不克不及被按捺，促進(jìn)了腫瘤的產(chǎn)生。但如今關(guān)于PRD1基因在喉鱗癌中的表達(dá)尚未見報道。本研究結(jié)果表白，PRD1卵白在喉癌中的表達(dá)比聲帶息肉組低，而且喉癌分化程度高者低于中低分化組，臨床、期的表達(dá)高于臨床、期，無頸淋逢迎轉(zhuǎn)移者高于有頸部淋逢迎轉(zhuǎn)移者，統(tǒng)計學(xué)闡發(fā)提示PRD1與喉癌的浸潤程度、淋逢迎轉(zhuǎn)移有關(guān)，表白PRD

11、1大概到場了喉癌的產(chǎn)生、浸潤、淋逢迎轉(zhuǎn)移的調(diào)治。支持了PRD1作為抑癌基因的結(jié)論。綜上所述，PRD1大概成為一種新的指標(biāo)用于臨床檢測，為訂定公正的治療方案以進(jìn)步喉癌綜合治療結(jié)果和斷定預(yù)后提供必然的理論根據(jù)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1劉艷艷，楊樹軍，馬杰，等.抑癌基因PRD1在肺癌構(gòu)造中的表達(dá)J.中華腫瘤雜志,2022,296：434-436.2PasqualuiL,pagn,HuldsrthJ,etal.InativatinfthePRD1/BLIP1geneindiffuselargeBelllyphaJ.JExped，2022，203(2):311-317.3RenB,heeKJ,KiTH,etal.PRDI-BF1/Blip-1repressinisediatedbyrepressrsftheGruhfailyfprtEinsJ.GenesDev，1999，13(1):125-137.4alaeKL,LinKI,Tunyaplin.RegulatryehanissthatdeterinethedevelpentandfuntinfplasaellsJ.AnnuRevIunl，2022，21:205-230.5Ta,Gez,hadburnA,etal.utatinalanalysisf