1、P2實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程1.目的加強(qiáng)P2實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，規(guī)范實(shí)驗(yàn)人員儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)操作行為，確保P2實(shí)驗(yàn)室工作安全運(yùn)行。2.適用范圍適用于P2實(shí)驗(yàn)室的管理與操作。3.職責(zé)3.1實(shí)驗(yàn)人員：嚴(yán)格執(zhí)行P2實(shí)驗(yàn)室相關(guān)管理規(guī)定，規(guī)范操作行為。3.2實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人：監(jiān)督執(zhí)行P2實(shí)驗(yàn)室相關(guān)管理規(guī)定，及時(shí)糾正違規(guī)操作行為，發(fā)現(xiàn)不安全隱患及時(shí)上報(bào)。3.3科室負(fù)責(zé)人：監(jiān)督并定期抽查P2實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)定執(zhí)行情況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決P2實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行中出現(xiàn)的問題。4.準(zhǔn)入要求4.1只有經(jīng)過授權(quán)的人員才允許進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)。4.216歲以下兒童禁止進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)。4.3實(shí)驗(yàn)人員要接受相應(yīng)預(yù)防性生物制品的免疫接種。4.4禁止

2、將無關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)區(qū)。4.5外單位人員來訪、參觀、進(jìn)修，必須經(jīng)中心主管部門批準(zhǔn),未經(jīng)批準(zhǔn)不得進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)。4.6外來人員進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室，須由本室人員陪同，在嚴(yán)格遵守有關(guān)規(guī)定的條件下方可進(jìn)入,同時(shí)填寫外來人員進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室特殊區(qū)域登記表。4.7限制免疫耐受者進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4.8限制正在接受免疫抑制劑者進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4.9嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙、飲食、化妝等。5.進(jìn)入程序5.1進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室，伸手打開緩沖間內(nèi)空調(diào)和生物安全柜按鈕，使實(shí)驗(yàn)室和生物安全52將實(shí)驗(yàn)所需材料和物品放入生物安全柜中。5.3進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室緩沖區(qū),關(guān)閉外門，在工作服外加穿P2實(shí)驗(yàn)室專用罩衣（緊口,后系帶），戴一次性口罩、帽子和戴兩層

3、手套，換穿P2實(shí)驗(yàn)室專用鞋。需要時(shí)打開照明按鈕。54進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)，首先打開照明按鈕，打開前玻璃門，調(diào)節(jié)到要求的高度。將實(shí)驗(yàn)所需物品一次性放入實(shí)驗(yàn)臺(tái)內(nèi)，擺放要有秩序且要相對(duì)區(qū)分清潔物與污染物，凈化生物生物安全柜10分鐘左右。55觀察實(shí)驗(yàn)區(qū)負(fù)壓表指示數(shù)值是否在工作要求范圍內(nèi),如不能滿足要求則進(jìn)行負(fù)壓調(diào)節(jié)。觀察溫濕度計(jì)，填寫溫濕度計(jì)使用記錄。5.6實(shí)驗(yàn)人員手臂放進(jìn)生物安全柜內(nèi)大約1分鐘后,即可按無菌要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。5.7完成整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作后，將使用過的物品進(jìn)行分類處理。消毒整個(gè)工作臺(tái)面,再讓排風(fēng)至少運(yùn)行10分鐘。58放下前玻璃門，打開生物生物安全柜紫外線燈進(jìn)行毒。59離開實(shí)驗(yàn)操作區(qū)前脫去第二層手

4、套放到指定容器內(nèi)消毒處理。510填寫儀器使用記錄。6.實(shí)驗(yàn)后物品、污染物處理6.1對(duì)不可回收的污染物品小心包扎后,在高壓滅菌器內(nèi)按規(guī)定要求進(jìn)行高壓滅菌處理。然后按醫(yī)用垃圾交中心統(tǒng)一處理。62對(duì)可回收的污染物品小心包扎后，在高壓滅菌器內(nèi)按規(guī)定要求進(jìn)行高壓滅菌處理。之后轉(zhuǎn)入洗刷間進(jìn)行洗刷。6.3對(duì)一次性實(shí)驗(yàn)用品放入容器內(nèi)高壓滅菌，然后按醫(yī)用垃圾交中心統(tǒng)一處理。64對(duì)不可高壓滅菌處理的物品，應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)南緞┻M(jìn)行浸泡消毒?？苫厥盏奈锲?，送洗刷室;不可回收的物品，按中心“三廢”處理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。7.出實(shí)驗(yàn)室程序7.1打開實(shí)驗(yàn)室內(nèi)門，出來后隨手關(guān)閉。將實(shí)驗(yàn)室專用罩衣脫下，掛在緩沖區(qū)，待稍后進(jìn)行紫外線消

5、毒。脫掉一次性帽子、口罩和手套,放入待消毒的垃圾筒內(nèi),按門鎖按鈕，打開外門，更換拖鞋,打開紫外線按鈕，同時(shí)關(guān)閉排風(fēng)按鈕，然后關(guān)閉外門。注:若進(jìn)入時(shí)打開照明，則此時(shí)應(yīng)關(guān)閉。7.2如實(shí)驗(yàn)過程中在傳遞窗傳遞過污染性物品，在實(shí)驗(yàn)后應(yīng)進(jìn)行紫外線消毒。7.3待消毒完畢后（至少30分鐘），關(guān)閉生物安全柜和紫外線按鈕。8.注意事項(xiàng)8.1應(yīng)保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔。8.2工作臺(tái)內(nèi)部空間需用消毒劑擦洗，如消毒劑具有腐蝕性，要用自來水清洗臺(tái)面，以避免腐蝕。8.3操作臺(tái)內(nèi)的實(shí)驗(yàn)器具應(yīng)避免阻擋前后的穿孔網(wǎng)格，并且避免把東西卷入其中。所有的操作應(yīng)該在距離前面的格柵約10厘米以內(nèi)的工作面上進(jìn)行。8.4操作時(shí)應(yīng)動(dòng)作緩慢，減少不必要

6、的手和手臂伸進(jìn)和伸出空氣屏障，以免影響氣流。8.5工作臺(tái)在操作時(shí)，應(yīng)盡量減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)開門、關(guān)門，人員走動(dòng)等情況，以免影響室內(nèi)氣流。8.6通常情況下,在生物安全柜里面不要使用酒精燈或類似的明火，因?yàn)樗麄儠?huì)破壞氣流模式、損壞HE民過濾器,并且有火災(zāi)的危險(xiǎn)（除非有特殊的要求）。8.7警報(bào)燈或警鈴響時(shí)切勿繼續(xù)操作。8.8一旦工作臺(tái)在操作時(shí)出現(xiàn)意外事故，須在這些東西搬出之前,連同工作臺(tái)在內(nèi)進(jìn)行全面消毒，如果溢出的污水或液體集中在排液槽中,必須采取緊急措施將污水排出。同時(shí)填寫實(shí)驗(yàn)室潛在危險(xiǎn)材料溢出或淺出記錄。8.9試驗(yàn)結(jié)束后將試驗(yàn)物品移出生物安全柜,不得將生物安全柜當(dāng)成儲(chǔ)物箱。9.維護(hù)保養(yǎng)9.1當(dāng)生物安全

7、柜移動(dòng)后或?qū)嶒?yàn)室布局改動(dòng)時(shí)，應(yīng)該由有經(jīng)驗(yàn)的工作人員對(duì)生物安全柜的屏障作用重新進(jìn)行測試。9.2半年一次生物安全柜內(nèi)沉降菌檢測:生物安全柜消毒清潔后,紫外線照射30分鐘,開前門通風(fēng)十分鐘后，于工作臺(tái)面中部均勻放置兩塊已制好、經(jīng)檢驗(yàn)無菌的普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿,打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露30分鐘，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置，取出放36C培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)以上,用肉眼直接進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),以W1為合格。9.3檢查前玻璃驅(qū)動(dòng)裝置的松緊度。9.4每年請(qǐng)廠商對(duì)生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、潔凈度檢測一次。9.5根據(jù)需要更換紫外燈管和照明燈管。殺菌燈工作超過一定時(shí)間后會(huì)失去效果，當(dāng)工作臺(tái)燈照強(qiáng)度低于每平方厘米40微瓦時(shí),就應(yīng)更換新的殺菌燈。（可用紫外線燈表來測定工作臺(tái)表面的燈照強(qiáng)度）9.6應(yīng)根據(jù)需要更換高效過濾器（HEPA），由專業(yè)人員進(jìn)行操作。（高效空氣過濾器的壽命取決于如何使用它。在實(shí)驗(yàn)室的正常條件下，可以預(yù)測本過濾器至少可以使用五年。）9.7在開始工作之前要讓生物安全柜的風(fēng)機(jī)至少運(yùn)行3-5分鐘使生物安全柜內(nèi)的空氣進(jìn)行凈化。9.8定期對(duì)生物安全柜的工作臺(tái)面、內(nèi)壁（不包括送風(fēng)濾器擴(kuò)散板）和觀察窗的內(nèi)表面用消毒劑（