1、第十四章中藥制劑分析 9/26/20221藥物分析第十四章中藥制劑分析 9/24/20221藥物分析第十四章 內(nèi)容1了解中藥制劑的分類(lèi)及中藥制劑分析的特點(diǎn)2熟悉中藥制劑分析的一般程序3掌握中藥制劑常用的定量分析方法9/26/20222藥物分析第十四章 內(nèi)容1了解中藥制劑的分類(lèi)及中藥制劑分析的特點(diǎn)2一、定義 中藥制劑是根據(jù)藥典、制劑規(guī)范和其它規(guī)定的處方，將中藥的原料藥物加工制成具有一定規(guī)格，可以直接用于防病、治病的藥品第一節(jié) 概述9/26/20223藥物分析一、定義第一節(jié) 概述9/24/20223藥物分析注意：中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的單方或復(fù)方制劑。中藥的成方制劑又稱

2、為中成藥9/26/20224藥物分析注意：中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的單同物異名 同名異物（30多種，鱗毛蕨科、蹄蓋蕨科、 紫萁科、烏毛蕨科）貫眾二、中藥制劑分析的特點(diǎn) 中藥市場(chǎng)混亂1.9/26/20225藥物分析同物異名 同名異物（30多種，鱗毛蕨科、蹄蓋蕨科、貫眾二同物異名現(xiàn)象嚴(yán)重： 重樓為百合科Paris polyphylla Smith. 的根莖又名七葉一枝花、蚤休、草河車(chē) 拳參為蓼科Polygonum bistra L.的根莖又名草河車(chē)9/26/20226藥物分析同物異名現(xiàn)象嚴(yán)重：9/24/20226藥物分析生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)及部位差異麻黃 東北西北（-）麻黃

3、堿含量 （+）麻黃堿含量GAP 中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中藥材質(zhì)量的不穩(wěn)定性2.9/26/20227藥物分析生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)及部位差異麻黃 東北西北（-）麻黃堿益母草 水蘇堿 營(yíng)養(yǎng)期含量最高 益母草堿 營(yíng)養(yǎng)期含量最低薄荷腦 秋季葉變黃時(shí)含量最高丹參酮 11、12月份含量最高9/26/20228藥物分析益母草 水蘇堿 營(yíng)養(yǎng)期含量最高薄荷腦 不同部位人參皂苷的含量 重量比(%) 總皂苷含量(%) 周皮 6.9 2.60韌皮 46.6 3.04木質(zhì)部 46.5 0.319/26/20229藥物分析不同部位人參皂苷的含量 重量比(%) 總皂苷含量(%五倍子 鞣質(zhì)（70%）槐米 蘆?。?0%）長(zhǎng)春花 長(zhǎng)

4、春新堿（百萬(wàn)分之一）美登木 美登木堿（千萬(wàn)分之一）各種有效成分含量相差懸殊3.9/26/202210藥物分析五倍子 鞣質(zhì)（70%）各種有效成分含量相差懸殊3.9 中藥藥效的發(fā)揮是多種成分協(xié)同作用的結(jié)果，因此應(yīng)從整體上來(lái)控制中藥的質(zhì)量成分復(fù)雜且大多數(shù)有效成分尚不十分清楚4.9/26/202211藥物分析 中藥藥效的發(fā)揮是多種成分成分復(fù)雜且大多數(shù)有效鞣質(zhì) 地榆（止血） 其他（無(wú)藥效）有效 無(wú)效同一成分在不同藥材中的藥理作用不同5.9/26/202212藥物分析鞣質(zhì) 地榆（止血）有效 無(wú)效同一成分在不同藥材中的例 三黃瀉心湯干浸膏有效成分與濃縮干燥方法的關(guān)系(%) 常壓 減壓 逆浸透 成分 濃縮 濃

5、縮 噴霧大黃酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8小檗堿 34.5 37.5 94.5黃連堿 6.3 12.0 93.7黃岑苷 77.4 77.6 98.5制劑工藝不同，有效成分的量也不同6.9/26/202213藥物分析例 三黃瀉心湯干浸膏有效成分與濃縮干燥方法的關(guān)系(%) 丸、散、片、錠、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、顆粒、糖漿等劑型繁多，輔料干擾大7.9/26/202214藥物分析丸、散、片、錠、合、酒、酊、劑型繁多，輔料干擾大7.9/24 針對(duì)不同的劑型，采用相應(yīng)的方法進(jìn)行分離純化后測(cè)定蠟丸 蜂蠟蜜丸 蜂蜜糊劑 糯米粉、黃米粉曲劑 發(fā)酵膠劑 豆油、黃酒、冰糖9/26/202215藥物分

6、析 針對(duì)不同的劑型，采用相應(yīng)的方法進(jìn)行分離純化后測(cè)中藥制劑的分類(lèi)二、中國(guó)藥典（2000年版）一部（二十六種）丸劑 膠劑 膏藥 顆粒劑 滴眼劑散劑 合劑 露劑 糖漿劑 軟膏劑片劑 酒劑 茶劑 滴丸劑 注射劑錠劑 酊劑 搽劑 膠囊劑 滴鼻劑栓劑 巴布膏劑 橡膠膏劑 氣霧劑噴霧劑 煎膏劑（膏滋）流浸膏劑與浸膏劑9/26/202216藥物分析中藥制劑的分類(lèi)二、中國(guó)藥典（2000年版）一部（二十六種）丸（一）液體制劑用藥材提取物制備的液體制劑合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑 滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等（無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯微鑒別）9/26/202217藥物分析（一）液體制劑用藥材提取物制備的液體制劑

7、合劑、糖漿劑、酒劑、1、合劑與口服液（單劑量合劑也可稱為“口服液”）合劑系指藥材用水或其他溶劑，采用適宜方法提取，經(jīng)濃縮制成的內(nèi)服液體制劑pH微生物限度裝量相對(duì)密度一般檢查項(xiàng)目9/26/202218藥物分析1、合劑與口服液（單劑量合劑也可稱為“口服液”）合劑系指藥材2、酒劑與酊劑酒劑酊劑藥材用蒸餾酒提取制成的澄清液體制劑藥物用規(guī)定濃度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液體制劑一般檢查項(xiàng)目甲醇量檢查（GC）總固體微生物限度含乙醇量（GC）裝量9/26/202219藥物分析2、酒劑與酊劑酒劑酊劑藥材用蒸餾酒提取制成的澄清液體制劑藥物（二）半固體制劑軟膏裝量微生物限度檢查項(xiàng)目常用基質(zhì) 油脂性、水溶性 乳劑

8、型（乳膏劑）藥物、藥材細(xì)粉、藥材提取物與適量基質(zhì)混合制成的半固體外用制劑9/26/202220藥物分析（二）半固體制劑軟膏裝量檢查項(xiàng)目常用基質(zhì) 油脂性、水溶 藥材提取液的濃縮液（三）半流體制劑煎膏劑(膏滋)流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體）（無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯微鑒別）9/26/202221藥物分析 藥材提取液的濃縮液（三）半流體制劑煎膏劑(膏滋)（無(wú)植物組藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉蜜或糖制成的半流體制劑1、煎膏劑(膏滋) 相對(duì)密度不溶物 裝量微生物限度檢查項(xiàng)目應(yīng)無(wú)焦臭、異味，無(wú)糖結(jié)晶析出9/26/202222藥物分析藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉1、煎膏劑(膏滋) 相對(duì)密度檢2、流浸膏

9、劑與浸膏劑（半/固）藥材用適宜的溶劑提取，蒸去部分或全部溶劑，調(diào)整濃度至規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)而制成的制劑裝量微生物限度檢查項(xiàng)目1ml流 浸膏 1g 原藥材1g 浸膏 2 5g 原藥材9/26/202223藥物分析2、流浸膏劑與浸膏劑（半/固）藥材用適宜的溶劑提取，蒸去部分生產(chǎn)提取溶劑大多為水或稀醇檢測(cè)時(shí)一般需經(jīng)有機(jī)提取后分析對(duì)于流浸膏，有的測(cè)總固體量以控制其質(zhì)量有效成分不明或無(wú)定量方法的，可 測(cè)一定溶劑的浸出物含量 有效成分明確且有適當(dāng)方法 ，測(cè)定有效成分的含量9/26/202224藥物分析生產(chǎn)提取溶劑大多為水或稀醇檢測(cè)時(shí)一般需經(jīng)有機(jī)提取后分析對(duì)于流（四）固體制劑 藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、制備而成丸

10、劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑（有植物組織與細(xì)胞，可做顯微鑒別）9/26/202225藥物分析（四）固體制劑 藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、1、 丸劑 指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的黏合劑或其他輔料制成球形或類(lèi)球形制劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等檢查項(xiàng)目水分、重量差異(按丸或重量)裝量差異(按一次劑量分裝的)溶散時(shí)限、微生物限度9/26/202226藥物分析1、 丸劑 指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的黏裝量差異(按一次劑量分裝的)水分、重量差異(按丸或重量)溶散時(shí)限微生物限度檢查項(xiàng)目9/26/202227藥物分析裝量差異水分、重量差異溶散時(shí)限

11、檢查項(xiàng)目9/24/202227水分規(guī)定大蜜丸、小蜜丸、濃縮蜜丸 15.0%水蜜丸、濃縮水蜜丸 12.0%水丸、糊丸、濃縮水丸 9.0%裝量差異高低溶散時(shí)限6丸，照崩解時(shí)限檢查法9/26/202228藥物分析水分規(guī)定大蜜丸、小蜜丸、濃縮蜜丸 15.0%裝量差異高溶重量差異第一法（按丸服用）每次最高丸數(shù)或每 丸（1.5g），10份高低高低第二法（按重量服）每份10丸，10份 高 低9/26/202229藥物分析重量差異第一法（按丸服用）每次最高丸數(shù)或每高高第二法（按重量2、 散劑 一種或多種藥材混合制成的粉末狀制劑，分內(nèi)服和外用散劑 檢查項(xiàng)目均勻度水分裝量差異微生物限度9/26/202230藥物分

12、析2、 散劑 一種或多種藥材混合制成的粉 檢均勻度取供試品適量置光滑紙上，平鋪約5cm2，將其表面壓平，在亮處觀察，應(yīng)呈現(xiàn)均勻的色澤，無(wú)花紋、色斑水分9.0%9/26/202231藥物分析均勻度取供試品適量置光滑紙上，平鋪水分9.0%9/24/23、顆粒劑 藥材提取物與適宜輔料或藥材細(xì)粉制成的顆粒狀制劑，分為可溶性顆粒劑、混懸性顆粒劑、泡騰性顆粒劑 檢查項(xiàng)目粒度 水分 溶化性裝量差異 微生物限度9/26/202232藥物分析3、顆粒劑 藥材提取物與適宜輔料或藥材細(xì) 檢查項(xiàng)目粒度粒度 1號(hào)篩4號(hào)篩8%(左右輕輕往返3分鐘)溶化性裝量差異單劑量包裝 同丸劑多劑量包裝 最低裝量檢查法(附錄 C) 平

13、均裝量標(biāo)示裝量 每個(gè)裝量限量% 9/26/202233藥物分析粒度 1號(hào)篩8%(左右輕輕往返3分鐘)溶化性裝量差異單4、 片劑 藥材提取物加藥材細(xì)粉或藥材細(xì)粉與適宜輔料混勻壓制而成的園片狀或異形片狀的制劑，分為浸膏片、半浸膏片和全粉片檢查項(xiàng)目重量差異崩解時(shí)限微生物限度原粉片30浸膏片1h薄膜衣片1h9/26/202234藥物分析4、 片劑 藥材提取物加藥材細(xì)粉或藥材細(xì)檢查5、膠囊劑硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑 檢查項(xiàng)目水分裝量差異崩解時(shí)限微生物限度9/26/202235藥物分析5、膠囊劑硬膠囊劑 檢查項(xiàng)目水分9/24/202235藥物第二節(jié) 中藥制劑分析的一般程序 含量測(cè)定檢查鑒別取樣提取純化9

14、/26/202236藥物分析第二節(jié) 中藥制劑分析的一般程序 含量測(cè)定檢查鑒別取樣提取9供試品溶液的制備一、（一）提取方法1、萃取法 利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同，使物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，將測(cè)定組分提取出來(lái)的方法9/26/202237藥物分析供試品溶液的制備一、（一）提取方法1、萃取法 用于皂苷類(lèi)正丁醇氯仿乙醚、石油醚醋酸乙酯（1）萃取溶劑的選擇.用于生物堿類(lèi)用于黃酮類(lèi)用于揮發(fā)油9/26/202238藥物分析用于皂苷類(lèi)正丁醇氯仿乙醚、石油醚醋酸乙酯（1）萃取溶劑的選擇（2）水相pH的選擇酸性成分 比其pKa低12個(gè)pH單位 比其pKa高12個(gè)pH單位 堿性成分9/26/

15、202239藥物分析（2）水相pH的選擇酸性成分 比其pKa高12個(gè)p（3）儀器和提取次數(shù)（4）酒劑和酊劑先揮去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鑒別1次含量測(cè)定 3 4次9/26/202240藥物分析（3）儀器和提取次數(shù)（4）酒劑和酊劑先揮去乙醇（5）防止2、冷浸法 樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時(shí)間的提取方法適宜易溶出的組分適宜遇熱不穩(wěn)定的藥物 費(fèi)時(shí)（8 24小時(shí)）特點(diǎn)適用范圍適宜植物性粉末不宜動(dòng)物性粉末9/26/202241藥物分析2、冷浸法 樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時(shí)間的親脂性 親水性石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水9/26/202242藥物分析親脂性 3、回流提

16、取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的提取方法加快溶出速度，省時(shí)適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜較難溶出的組分特點(diǎn)儀器普通回流裝置通過(guò)更換溶劑，使提取更完全9/26/202243藥物分析3、回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的提9/26/202244藥物分析9/24/202244藥物分析4、連續(xù)回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方法節(jié)省溶劑，提高提取效率適宜受熱穩(wěn)定的藥物費(fèi)時(shí)特點(diǎn)儀器索氏提取器9/26/202245藥物分析4、連續(xù)回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)9/26/202246藥物分析9/24/202246藥物分析5、水蒸氣蒸餾法 適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸出的

17、組分的測(cè)定麻黃堿、檳榔堿、丹皮酚、揮發(fā)油9/26/202247藥物分析5、水蒸氣蒸餾法 適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸6、超聲提取法 超聲波振蕩器（超聲波清洗器） 簡(jiǎn)便 省時(shí) 提取率高 利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取原理 超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射，出現(xiàn)“空化”現(xiàn)象（氣泡的形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超過(guò)1000個(gè)大氣壓的沖擊力9/26/202248藥物分析6、超聲提取法 超聲波振蕩器（超聲波清洗器） 7、超臨界流體萃?。⊿FE法）當(dāng)壓力和溫度超過(guò)氣體的臨界點(diǎn)時(shí)所形成的單一相態(tài)超臨界流體 是一種處于超臨界點(diǎn)之上的流體，是介于氣體與液體之間的一種物相，兼有氣體與液體的一些特性9/26/

18、202249藥物分析7、超臨界流體萃取（SFE法）當(dāng)壓力和溫度超過(guò)氣體的臨超臨界氣體超臨界流體氣體T 壓力T 壓力9/26/202250藥物分析氣體超臨界流體氣體T T 壓力9/24/20225SFE 工藝流程9/26/202251藥物分析SFE 工藝流程9/24/202251藥物分析 超臨界流體萃取與化學(xué)法萃取相比有以下突出的優(yōu)點(diǎn)： （1） 它具有與液體相似的密度，因而具有與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力；（2）溶質(zhì)在流體中的擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似，具有傳質(zhì)快，提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)； （3）超臨界流體的表面張力為零，易滲透到樣品中，帶走測(cè)定組分；9/26/202252藥物分析 超臨界流體萃取與化學(xué)法萃取相

19、比有以下突出的優(yōu)點(diǎn)： （1）（4）超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體，萃取后溶劑可立即變成氣體而逸出，易達(dá)到濃集的目的；（6） CO2價(jià)格便宜，純度高，容易取得，且在生產(chǎn)過(guò)程中循環(huán)使用，從而降低成本；（5） CO2是一種不活潑的氣體, 萃取過(guò)程不發(fā)生化學(xué)反應(yīng),且屬于不燃性氣體,無(wú)味、無(wú)臭、無(wú)毒，故安全性好；（7） 該技術(shù)易與其他儀器聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化9/26/202253藥物分析（4）超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體，萃取后溶劑可立即變成氣體（二）純化方法1、萃取法 利用藥物與雜質(zhì)溶解性能的不同進(jìn)行分離例生物堿鹽氨水H2O9/26/202254藥物分析（二）純化方法1、萃取法 利用藥物與雜質(zhì)溶解性2、柱色譜

20、法（1）保留測(cè)定組分在柱上，洗去雜 質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分（2）保留雜質(zhì)于柱上常用固定相硅膠氧化鋁大孔吸附樹(shù)脂9/26/202255藥物分析2、柱色譜法（1）保留測(cè)定組分在柱上，洗去雜（2）保留雜質(zhì)于鑒別試驗(yàn)二、鑒定有臨床療效的已知成分黃連 小檗堿（抗菌消炎） 麻黃 麻黃堿（支氣管哮喘）烏頭 烏頭堿（毒性）洋地黃 強(qiáng)心苷（強(qiáng)心）延胡索 延胡索乙素（鎮(zhèn)痛）9/26/202256藥物分析鑒別試驗(yàn)二、鑒定有臨床療效的已知成分黃連 小檗（一）顯微鑒別（含生藥粉制劑）丸劑、片劑、膠囊劑、散劑快速，簡(jiǎn)便，覆蓋面大 選擇原則1、應(yīng)選有專屬性的特征進(jìn)行鑒別2、多來(lái)源的藥材應(yīng)選擇共有的特征進(jìn)行 鑒別9/26/

21、202257藥物分析（一）顯微鑒別（含生藥粉制劑）丸劑、片劑、膠囊劑、散劑快速，1、水牛角濃縮粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黃6、黃連7、梔子8、郁金9、黃芩安宮牛黃丸9/26/202258藥物分析1、水牛角濃縮粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黃6、黃連7、（二）化學(xué)鑒別抗干擾能力差顯色、熒光例 二妙丸中蒼術(shù)的鑒別蒼術(shù)酮蒼術(shù)炔9/26/202259藥物分析（二）化學(xué)鑒別抗干擾能力差顯色、熒光例 二妙丸中蒼術(shù)（三）色譜鑒別TLC法應(yīng)用最多 （Rf、顏色、熒光）GC法 適用于含揮發(fā)性成分 的藥物 HPLC法常與含量測(cè)定同時(shí)進(jìn) 行9/26/202260藥物分析（三）色譜鑒別TLC法應(yīng)用最多GC法

22、適用于含揮發(fā)陰、陽(yáng)對(duì)照法陽(yáng)性對(duì)照 將要鑒別的藥材按制劑 工藝處理，再按鑒別方 法提取的溶液陰性對(duì)照 把制劑中要鑒別的藥材 除去，用剩下的各味藥 按制劑工藝處理，再按 鑒別方法提取的溶液 9/26/202261藥物分析陰、陽(yáng)對(duì)照法陽(yáng)性對(duì)照 將要鑒別的藥材按制劑 O O O O O O O O O O 例陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照樣品9/26/202262藥物分析 例陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照大補(bǔ)陰丸 黃柏的TLC法鑒別 樣品對(duì)照藥材小檗堿O O OO O 例9/26/202263藥物分析大補(bǔ)陰丸 黃柏的TLC法鑒別 薄層板的選擇 硅膠G板（可加0.3% 0.5% CMC-Na） 多用 氧化鋁板 常用于生物堿類(lèi)藥物

23、聚酰胺板 常用于黃酮類(lèi)及酚類(lèi) 藥物 纖維素板 常用于氨基酸類(lèi)藥物 9/26/202264藥物分析薄層板的選擇 定義： 中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜（四）中藥鑒別新技術(shù)中藥指 紋圖譜9/26/202265藥物分析定義：（四）中藥鑒別新技術(shù)中藥指 2. 色譜指紋圖譜的基本屬性模糊性 強(qiáng)調(diào)分析、比較指紋圖譜的相似性，而不是完全相同。是一種綜合的、量化的色譜鑒別手段。整體性 將指紋圖譜作為一個(gè)整體來(lái)分析和比較它的綜合特征以達(dá)到鑒別的目的。9/26/202266藥物分析2. 色譜指紋圖譜的基本屬性模糊性 強(qiáng)調(diào)分析、比較色譜指紋圖譜在

24、中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥的全貌。不需要清楚每一個(gè)組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)；不需要對(duì)每一個(gè)組分都進(jìn)行定量；只要求不同批號(hào)的同一種藥品的指紋圖譜保持一致。9/26/202267藥物分析色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥的全貌。93. 指紋圖譜的應(yīng)用9/26/202268藥物分析3. 指紋圖譜的應(yīng)用9/24/202268藥物分析雅蓮云蓮味蓮雅蓮云蓮9/26/202269藥物分析雅蓮云蓮味蓮雅蓮云蓮9/24/202269藥物分析IIIIII訶 子小訶子大訶子絨毛訶子9/26/202270藥物分析IIIIII訶 子小訶子大訶子絨毛訶子9/24/2022人參須根人參主根9/26/2022

25、71藥物分析人參須根人參主根9/24/202271藥物分析不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜9/26/202272藥物分析不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜9/24/202272藥物分析指紋圖譜研究過(guò)程中的注意事項(xiàng)：1、在藥效學(xué)指導(dǎo)下進(jìn)行研究，保證指紋圖譜反映的化學(xué)成分包括中藥材中有效部位所含的絕大部分成分或有效成分的全部。2、樣品的預(yù)處理過(guò)程及測(cè)定方法應(yīng)簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、易行，且專屬性、準(zhǔn)確度與重現(xiàn)性好。9/26/202273藥物分析指紋圖譜研究過(guò)程中的注意事項(xiàng)：9/24/202273藥物分析雜質(zhì)檢查三、水分總灰分和酸不溶性灰分重金屬砷鹽殘留農(nóng)藥 主要項(xiàng)目9/26/202274藥物分析雜質(zhì)檢查三、水分主要項(xiàng)目

26、9/24/202274藥物分析雜質(zhì)來(lái)源及檢查意義水分 結(jié)塊、霉變或有效成分水解灰分 控制藥物本身及泥土、沙石 等無(wú)機(jī)雜質(zhì)砷鹽 劇毒，常由除草劑、殺蟲(chóng)劑 或化肥引入重金屬 環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入 殘留農(nóng)藥 有毒9/26/202275藥物分析雜質(zhì)來(lái)源及檢查意義水分 結(jié)塊、霉變或有效成分水解灰分 烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分）甲苯法 （含揮發(fā)性成分）減壓干燥法（含揮發(fā)性成分貴重藥） GC法（一）水分測(cè)定法9/26/202276藥物分析烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分）（一）水分測(cè)定法9/24/20酸不溶性灰分的測(cè)定總灰分的測(cè)定（二）總灰分和酸不溶性灰分的測(cè)定9/26/202277藥物分析酸不溶性灰分的測(cè)

27、定總灰分的測(cè)定（二）總灰分和酸不溶性灰分WHO規(guī)定植物藥鉛10ppm鎘0.3ppm干法破壞濕法破壞硫代乙酰胺法（三）重金屬的測(cè)定9/26/202278藥物分析WHO規(guī)定植物藥鉛10ppm鎘0.3ppm干法破壞濕法破干法破壞（ChP）濕法破壞（USP）(調(diào)到中性)9/26/202279藥物分析干法破壞（ChP）濕法破壞（USP）(調(diào)到中性)9/2堿融法破壞濕法破壞堿融法H+（四）砷鹽的測(cè)定9/26/202280藥物分析堿融法破壞堿融法H+（四）砷鹽的測(cè)定9/24/202280藥（五）殘留農(nóng)藥的測(cè)定1、總氯量的測(cè)定2、總磷量的測(cè)定3、GC法9/26/202281藥物分析（五）殘留農(nóng)藥的測(cè)定1、總氯

28、量的測(cè)定2、總磷量的測(cè)定3、GC 中國(guó)藥典中藥制劑含量測(cè)定所占比例 版本 % 1977 1.48 1985 5.31 1990 8.73 1995 12.81 2000 62.09 （HPLC 36% TLCS 24% GC 3%)含量測(cè)定項(xiàng)目的選定四、9/26/202282藥物分析 中國(guó)藥典中藥制劑含量測(cè)定所占比例含量測(cè)定項(xiàng)目的選定測(cè)定項(xiàng)目的選定原則1 首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立 含量測(cè)定方法2 其次考慮臣藥及其他味藥3 有效成分明確的，可選有效成分4 成分類(lèi)別清楚的，可測(cè)某一類(lèi)總 成分的含量9/26/202283藥物分析測(cè)定項(xiàng)目的選定原則1 首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立9/5 檢測(cè)成分應(yīng)

29、歸屬某單一藥味6 檢測(cè)成分應(yīng)與中醫(yī)用藥的功能主 治相近7 確無(wú)法含量測(cè)定的，可測(cè)定浸出 物含量化學(xué)分析法色譜法常用定量方法分光光度法9/26/202284藥物分析5 檢測(cè)成分應(yīng)歸屬某單一藥味化學(xué)分析法色譜法常用定量方（一）化學(xué)分析法重量分析法 容量分析法特點(diǎn) A、準(zhǔn)確度、精密度高 B、抗干擾能力差例9/26/202285藥物分析（一）化學(xué)分析法重量分析法 容量分析法特點(diǎn) A（二）分光光度法UV法 比色法特點(diǎn) A、靈敏度高 B、簡(jiǎn)便、快速 C、精密度稍低 D、干擾多 9/26/202286藥物分析（二）分光光度法UV法 比色法特點(diǎn) A、靈敏度蘆丁黃芩苷小檗堿 丹皮酚9/26/202287藥物分析

30、蘆丁黃芩苷小檗堿 丹皮酚9/24/202287藥物分析（三）TLCS法 測(cè)定薄層板上斑點(diǎn)對(duì)單色光的吸收或反射的強(qiáng)度而進(jìn)行定量的方法特點(diǎn) A、分離效果好 B、適用于無(wú)法用UV、HPLC 法測(cè)定的組分 C、準(zhǔn)確度、精密度低于HPLC9/26/202288藥物分析（三）TLCS法 測(cè)定薄層板上斑點(diǎn)對(duì)單色光的吸2000年版中國(guó)藥典（2000年版）薄層掃描法品種 品種數(shù)量 TLCS數(shù)量 占總數(shù)%534（藥材） 20 3.74458（成藥） 32 6.99978（總數(shù)） 52 10.739/26/202289藥物分析2000年版中國(guó)藥典（2000年版）薄層掃描法品種 品種1、 選擇測(cè)定條件（1）薄層色譜條

31、件分離好 不拖尾（2）檢測(cè)方法吸收測(cè)定法熒光測(cè)定法反射法透射法（3）掃描方式 單波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)線性掃描法鋸齒掃描法外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法9/26/202290藥物分析1、 選擇測(cè)定條件（1）薄層色譜條件分離好 不拖尾（2（4）散射參數(shù)SX薄層板的散射使Kubelka-Munk方程9/26/202291藥物分析（4）散射參數(shù)SX薄層板的散射使Kubelka-Munk方程（1）薄層板 均勻、平整2、 注意事項(xiàng)（2）點(diǎn)樣量 準(zhǔn)確（4）顯色劑 均勻、適當(dāng)（5）保護(hù)斑點(diǎn) 用相同大小潔凈玻璃蓋住薄層板，并用透明膠紙封住邊緣，以起固定和隔絕空氣作用（3）斑點(diǎn) 應(yīng)完全分離，不拖尾9/26/202292藥物分析（1）薄層板

32、均勻、平整2、 注意事項(xiàng)（2）點(diǎn) 樣 樣 對(duì) 對(duì) 樣 樣 對(duì) 對(duì) 樣 樣 對(duì) 對(duì) 低 高 低 高 低 高 外標(biāo)法（兩點(diǎn)校正法）9/26/202293藥物分析 外9/26/202294藥物分析9/24/202294藥物分析（四）HPLC法RP - HPLC色譜柱 ODS流動(dòng)相 甲醇 - 水PIC 反離子 氫氧化四丁基銨色譜柱 ODSRP - PIC 反離子 烷基磺酸鹽 無(wú)機(jī)陰離子外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法9/26/202295藥物分析（四）HPLC法RP - HPLC色譜柱 OD離子對(duì)色譜法（PIC） 極性流動(dòng)相中加入離子對(duì)試劑，與被分析離子生成中性離子對(duì)，從而增加在非極性固定相中的溶解度，使分配系數(shù)增大9

33、/26/202296藥物分析離子對(duì)色譜法（PIC）9/24/202296藥物分析2000年版中國(guó)藥典（2000年版）HPLC法品種 品種數(shù)量 HPLC數(shù)量 占總數(shù)%534（藥材） 54 10.11458（成藥） 48 10.48978（總數(shù)） 102 20.599/26/202297藥物分析2000年版中國(guó)藥典（2000年版）HPLC法品種 品種應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑處方 麻黃125g 桂枝125g 白芍125g 干姜125 五味子125g 細(xì)辛62g 甘草(蜜炙) 法半夏188gNOTES：合劑是在傳統(tǒng)湯劑基礎(chǔ)上改進(jìn)后的一種新劑型生物堿桂皮醛芍藥甙揮發(fā)油三萜皂甙9/26/202298藥物分析應(yīng)

34、用實(shí)例-小青龍合劑處方生物堿桂皮醛芍藥甙揮發(fā)油三萜皂甙應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑 制法 以上八味，細(xì)辛、桂枝提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與白芍、麻黃、五味子、甘草加水煎煮至味盡，合并煎液，濾過(guò)，濾液和蒸餾后的水溶液合并，濃縮至約1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏劑項(xiàng)下滲漉法，用70%乙醇作溶劑，浸漬24小時(shí)后進(jìn)行滲漉，漉液濃縮，與上述藥液合并，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至1000ml，加入苯甲酸鈉3g與細(xì)辛、桂枝揮發(fā)油，攪勻，即得。9/26/202299藥物分析應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑 制法 以上八味，細(xì)辛、桂枝性狀 本品為棕黑色的液體；氣微香，味甜、微辛。功能與主治 解表化飲，止咳平喘。用于風(fēng)寒

35、水飲，惡寒發(fā)熱，無(wú)汗，喘咳痰稀。用法與用量 口服，一次10-20ml，一日3次，用時(shí)搖勻。9/26/2022100藥物分析性狀 本品為棕黑色的液體；氣微香，味甜、微辛。9/24方藥分析：君 麻黃發(fā)汗為君臣 桂枝解表為臣佐 甘草恐發(fā)汗太過(guò), 佐以甘草緩 之使 白芍、干姜、細(xì)辛、法半夏、五 味子幾藥合力共為使?？赏獍l(fā)汗，內(nèi)行水，散表里之邪。9/26/2022101藥物分析方藥分析：9/24/2022101藥物分析漢代張仲景傷寒論小青龍湯近代由重慶桐君閣中藥廠該湯劑為合劑本方治療傷寒表不解，心下有水氣，干嘔，發(fā)熱而咳。近代也用于慢性支氣管炎，支氣管哮喘、肺氣腫，均見(jiàn)咳、喘、痰白清稀者。9/26/20

36、22102藥物分析漢代張仲景傷寒論小青龍湯9/24/2022102藥物供試品溶液與陰性對(duì)照液的制備： 取合劑10 ml，石油醚分3次萃取，合并石油醚萃取液油層，濃縮至1ml，為供試品溶液A； 水層用Na2CO3調(diào)PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，殘?jiān)?ml甲醇溶解，為供試品溶液B；NOTES：陰性對(duì)照液如上法同步進(jìn)行。9/26/2022103藥物分析供試品溶液與陰性對(duì)照液的制備：9/24/2022103藥物分1. 桂皮醛的鑒別 取供試品液A、陰性對(duì)照液、桂皮醛對(duì)照液（1ug/ml）15ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，環(huán)己烷-乙酸乙酯（17：3）展開(kāi)，晾干，噴2，4二硝基苯肼

37、乙醇T.S，供試品A與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的橙色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。9/26/2022104藥物分析1. 桂皮醛的鑒別9/24/2022104藥物分析2. 細(xì)辛揮發(fā)油的鑒別 取供試品液A、陰性對(duì)照液、細(xì)辛揮發(fā)油對(duì)照液（1：10乙醚液）5ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，環(huán)己烷展開(kāi)，晾干，噴10%香草醛濃硫酸T.S，加熱至顯色，供試品A與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的粉紅色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。9/26/2022105藥物分析2. 細(xì)辛揮發(fā)油的鑒別9/24/2022105藥物分析3. 麻黃堿的鑒別 取供試品液B，陰性對(duì)照液，麻黃堿對(duì)照品液（1mg/ml）各5ul，點(diǎn)于同一硅膠G，氯仿-甲醇

38、-濃氨水（20：5：0.5）展開(kāi)，晾干，噴茚三酮T.S，加熱至斑點(diǎn)顯色，供試品B與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。9/26/2022106藥物分析3. 麻黃堿的鑒別9/24/2022106藥物分析 取合劑5ml，上聚酰胺柱，DW洗脫，洗脫液水浴濃縮至干，用1ml甲醇溶解，為供試品溶液C； 聚酰胺柱再用95%乙醇洗脫，棄取洗脫液，用3M氨乙醇液洗脫，收集洗脫液水浴蒸干， 1ml甲醇溶解，為供試品溶液D。9/26/2022107藥物分析 取合劑5ml，上聚酰胺柱，DW洗脫，洗4. 芍藥甙的鑒別 取供試品液C、陰性對(duì)照液、芍藥甙對(duì)照液（1mg/ml）10ul，點(diǎn)于同一硅膠

39、G板上，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸（8：1：2：0.04）展開(kāi)，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，供試品C與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的紫色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。 9/26/2022108藥物分析4. 芍藥甙的鑒別9/24/2022108藥物分析5. 甘草酸的鑒別 取供試品液D、陰性對(duì)照液、甘草酸銨對(duì)照液（2mg/ml）2ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-蒸餾水（30：2：2：4）展開(kāi)，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，UV燈365nm觀察，供試品D與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的紫色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。9/26/2022109藥物分析5. 甘草酸的鑒別

40、9/24/2022109藥物分析含量測(cè)定HPLC法測(cè)定芍藥甙的含量?jī)x器與色譜條件 BECKMAN 332型高效液相色譜儀163型可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)儀，220nm427型記錄及數(shù)據(jù)處理儀色譜柱為YWGC18流動(dòng)相乙腈-水（15：85）9/26/2022110藥物分析含量測(cè)定HPLC法測(cè)定芍藥甙的含量9/24/2022110藥標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱取芍藥甙5.08mg，溶于水至50ml量瓶中，定容，分別吸取0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容?；厥章蕼y(cè)定 精密吸取除去白芍制成的合劑（即陰性對(duì)照液）0.3ml與適量芍藥甙對(duì)照品液，通過(guò)0.5g聚酰胺柱，用水洗脫至50ml量瓶中至

41、刻度，依前述條件測(cè)定，平均回收率為99.42%，RSD為0.23%（n=3）。9/26/2022111藥物分析標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱取芍藥甙5.08mg，溶于水至50m樣品測(cè)定 取自制小青龍合劑搖勻，用濾紙過(guò)濾，精密吸取0.3ml濾液通過(guò)聚酰胺柱，以不同回收率測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)定。9/26/2022112藥物分析樣品測(cè)定 9/24/2022112藥物分析9/26/2022113藥物分析9/24/2022113藥物分析 分析實(shí)例萬(wàn)氏牛黃清心丸處方 牛黃10g 朱砂60g 黃連200g 黃芩120g 梔子120g 郁金80g9/26/2022114藥物分析 分析實(shí)例萬(wàn)氏牛黃清心丸處方9/24/20221

42、14藥分析實(shí)例萬(wàn)氏牛黃清心丸制法以上六味，除牛黃外，朱砂水飛或粉碎成極細(xì)粉；其余黃連等四味粉碎成細(xì)粉；將牛黃研細(xì)，與上述粉末配研，過(guò)篩，混勻。每100g粉末加煉蜜100-200g制成大蜜丸，即得。古方為糊丸，亦有水丸9/26/2022115藥物分析分析實(shí)例萬(wàn)氏牛黃清心丸制法以上六味，除牛黃外，朱砂水飛性狀本品為紅棕色至棕褐色的大蜜丸；氣特異，味甜、微澀、苦。功能主治清熱解毒，鎮(zhèn)驚安神。用于熱邪內(nèi)閉，煩躁不安，神昏譫語(yǔ)，小兒高熱驚厥。9/26/2022116藥物分析性狀本品為紅棕色至棕褐色的大蜜丸；氣特異，味甜、微澀、苦方藥分析 本方來(lái)源于明.痘疹世醫(yī)心法 ，本方為清心開(kāi)竅劑，主治熱邪內(nèi)陷心包所

43、致竅閉神昏癥。 方中牛黃，清心解毒，豁痰開(kāi)竅為君藥；黃連、黃芩、梔子清熱瀉火，為臣藥；朱砂清心，重鎮(zhèn)安神，郁金行氣開(kāi)竅共為佐使藥，合用以奏透邪瀉熱，開(kāi)竅安神之效。9/26/2022117藥物分析方藥分析 本方來(lái)源于明.痘疹世醫(yī)心法 ，本方為清方藥分析牛黃清熱解毒藥，主含膽酸類(lèi)成分。黃連清熱燥濕藥，主要為小檗堿。黃芩清熱燥濕藥，主要為黃酮類(lèi)。梔子清熱瀉火藥，主含梔子甙。朱砂安神藥，主含硫化汞（HgS）。郁金活血去瘀藥，主含揮發(fā)油。 9/26/2022118藥物分析方藥分析9/24/2022118藥物分析鑒別 顯微鑒別郁金糊化淀粉團(tuán)塊幾乎無(wú)色。梔子種皮石細(xì)胞。黃芩纖維淡黃色，梭形，厚壁，孔溝細(xì)。黃

44、連纖維鮮黃色，壁稍厚，紋孔明顯。朱砂不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色。9/26/2022119藥物分析鑒別 顯微鑒別9/24/2022119藥物分析郁金糊化淀粉團(tuán)塊梔子種皮石細(xì)胞黃芩纖維黃連纖維朱砂不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色9/26/2022120藥物分析郁金糊化淀粉團(tuán)塊9/24/2022120藥物分析 化學(xué)鑒別1. 朱砂的鑒別 取本品3g，加水適量，研勻，反復(fù)洗去懸浮物，可得少量朱紅色沉淀，取出，加入鹽酸1ml及銅片少量，加熱煮沸，銅片由黃色變?yōu)殂y白色。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S NOTES：在酸性條件下，朱砂與銅片發(fā)生置換反應(yīng)析出

45、金屬汞，在銅片表面形成銀白色汞齊。9/26/2022121藥物分析 化學(xué)鑒別1. 朱砂的鑒別9/24/2022121藥物分析2. 人工牛黃的鑒別 取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研勻，加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加熱回流30min,放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。 膽酸和豬去氧膽酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。9/26/2022122藥物分析2. 人工牛黃的鑒別9/24/2022122藥物分析TLC法 CMC-Na，硅膠G展開(kāi)劑 醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇 （32:6:1:1）顯色劑 10%磷鉬酸乙醇液， 1100C,10m

46、in9/26/2022123藥物分析TLC法 CMC-Na，硅膠G9/24/2022123藥物人工牛黃供試品牛黃空白豬去氧膽酸膽酸9/26/2022124藥物分析人工牛黃供試品牛黃空白豬去氧膽酸膽酸9/24/20221243. 黃芩的鑒別 供試品溶液的制備：取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研勻，加甲醇20ml，加熱回流1hr,放冷，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。 對(duì)照品溶液的制備：黃芩甙對(duì)照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。9/26/2022125藥物分析3. 黃芩的鑒別9/24/2022125藥物分析TLC法 CMC-Na，硅膠G （4%醋酸鈉）展開(kāi)劑 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 （5:3:1:1）顯色劑 2%三氯化鐵乙醇液使斑點(diǎn)更為集中-OH與Fe+3絡(luò)合9/26/2022126藥物分析TLC法 CMC-Na，硅膠G 黃芩甙供試品黃芩空白9/26/2022127藥物分析黃芩甙供試品黃芩空白9/24/2022127藥物分析4. 梔子的鑒別 供試品溶液的制備：取本品3g，加乙醚15ml，研磨，棄去乙醚。殘?jiān)鼡]干乙醚，加醋酸乙酯30ml，加熱回流1hr,放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。 對(duì)照品溶液的制備：梔子甙對(duì)照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。9/26/2022128藥物分析4. 梔子的鑒別9/2