1、2005級(jí)微生物學(xué)復(fù)習(xí)題一、緒論1、十九世紀(jì)哪兩個(gè)焦點(diǎn)問(wèn)題的爭(zhēng)論促使了微生物學(xué)的誕生？ 問(wèn)題一：微生物不能自發(fā)產(chǎn)生 問(wèn)題二：傳染病的性質(zhì)是什么2、Pasteur 是設(shè)計(jì)怎么的實(shí)驗(yàn)來(lái)否認(rèn)“自然發(fā)生學(xué)說(shuō)？巴斯德實(shí)驗(yàn)：巴斯德將營(yíng)養(yǎng)液(如肉湯)裝入帶有彎曲細(xì)管的瓶中，彎管是開口的，空氣可無(wú)阻地進(jìn)入瓶中，而空氣中的微生物那么被阻而沉積于彎管底部，不能進(jìn)入瓶中。巴斯德將瓶中液體煮沸，使液體中的微生物全被殺死，然后放冷靜置，結(jié)果瓶中不發(fā)生微生物。此時(shí)如將曲頸管打斷，使外界空氣不經(jīng)“沉淀處理而直接進(jìn)入營(yíng)養(yǎng)液中，不久營(yíng)養(yǎng)液中就出現(xiàn)微生物了?？梢娢⑸锊皇菑臓I(yíng)養(yǎng)液中自然發(fā)生的，而是來(lái)自空氣中原已存在的微生物(孢子

2、)。1864年巴斯德在法國(guó)國(guó)家科學(xué)院報(bào)告了他的工作。原定和他辯論的有名的自然發(fā)生論者FA巴斯德實(shí)驗(yàn)意義巴斯德通過(guò)試驗(yàn)證實(shí)酒和醋的釀造過(guò)程實(shí)際上是微生物發(fā)酵的過(guò)程，而且認(rèn)為不同發(fā)酵是由不同種類微生物所引起的，酒精發(fā)酵是有酵母菌引起的，乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵和丁酸發(fā)酵都是由不同的細(xì)菌所引起的。意義：1發(fā)現(xiàn)并證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的2徹底否認(rèn)“自然發(fā)生學(xué)說(shuō)3為免疫學(xué)提供理論預(yù)防接種3、什么是柯赫法那么？柯赫法那么是德國(guó)科學(xué)家柯赫(Koch)(1843-1940)根據(jù)自己的工作經(jīng)驗(yàn)以及他的前輩Henle的觀點(diǎn)提出的一套科學(xué)驗(yàn)證方法,成功地驗(yàn)證了細(xì)菌與病害的關(guān)系。其內(nèi)容為：1、在每一病例中都出現(xiàn)這種微生物2

3、、要從寄主別離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出來(lái)3、用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主，同樣的疾病會(huì)重復(fù)發(fā)生4、從試驗(yàn)發(fā)病的寄主中能再度別離培養(yǎng)出這種微生物來(lái)二、實(shí)驗(yàn)技術(shù)1、提高顯微鏡分辨率的措施？利用油鏡可提高顯微鏡分辨率。油鏡的工作原理：在顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中，物鏡的性能最為重要。普通光學(xué)顯微鏡通常配置有幾個(gè)物鏡，可分為枯燥系和油浸系兩種物鏡。枯燥系物鏡與標(biāo)本之間的介質(zhì)是空氣，而油浸系物鏡與標(biāo)本之間的介質(zhì)是香柏油。假設(shè)玻片與物鏡之間的介質(zhì)為空氣，那么當(dāng)光線通過(guò)玻片后發(fā)生曲折，產(chǎn)生散射現(xiàn)象，進(jìn)入物鏡的光線顯然減少，這樣就降低了視野的照明度；反之，假設(shè)玻片與物鏡之間的介質(zhì)為香柏油，當(dāng)光線通

4、過(guò)載玻片后，可直接通過(guò)香柏油進(jìn)入物鏡而不發(fā)生折射。油鏡的放大倍數(shù)最大，對(duì)微生物研究最為重要。利用油鏡不但能增加照明度，更主要是能增加數(shù)值口徑N.A，也增加顯微鏡的分辨力。2、微生物純種培養(yǎng)的方法？純培養(yǎng)技術(shù)主要包括：培養(yǎng)基的配制與滅菌技術(shù)、無(wú)菌操作技術(shù)、工業(yè)微生物別離與純化技術(shù)、厭氧微生物純培養(yǎng)技術(shù)、工業(yè)微生物菌種保藏技術(shù)等。1培養(yǎng)基的配制和滅菌技術(shù)培養(yǎng)基：是將微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用人工的方法配制而成的用于培養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。分類： 1.按來(lái)源分類 天然培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基 半合成培養(yǎng)基2.按特殊用途分類 加富培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基3.按物理狀態(tài)分類 固體培養(yǎng)基 液體培

5、養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基滅菌：是指殺死或消滅所有微生物，包括營(yíng)養(yǎng)體、孢子和芽孢。消毒：一般是指消滅有害微生物的營(yíng)養(yǎng)體和病原菌。培養(yǎng)基的配制方法： 1.按照配方的組分及用量先分別稱量并配成液體。 2 .根據(jù)要求調(diào)到一定的酸堿度(pH)。 3.假設(shè)制成固體那么參加2瓊脂并加熱融化。 4.根據(jù)需要的數(shù)量分裝入試管或三角瓶中，加上棉塞或蓋上紗布。 5.包扎好滅菌后備用培養(yǎng)基及常用器皿的滅菌：1.棉塞制作與器皿包扎 棉塞起過(guò)濾的作用，只能讓空氣透過(guò)，而空氣中的微生物那么不能通過(guò)。 制作棉塞應(yīng)采用普通未脫脂的棉花，醫(yī)用脫脂棉會(huì)吸水，不宜采用。用牛皮紙包扎棉花塞局部，防止水蒸氣弄濕。2.培養(yǎng)基與器皿的高壓蒸汽滅菌

6、 一般培養(yǎng)基常用0.1MPa，約120優(yōu)點(diǎn)：時(shí)間短，滅菌效果好。可以殺死所有的微生物，包括最耐熱的細(xì)菌芽孢及其他休眠體。注意：滅菌的因素是高溫而不是高壓，故滅菌鍋內(nèi)的冷空氣要徹底排除，否那么，壓力雖然到達(dá)0.1MPa，但溫度并沒(méi)有到達(dá)要求3.玻璃器皿的干熱滅菌比濕熱滅菌法所需的溫度要高些(150170)，時(shí)間也要長(zhǎng)些(12h)，且包扎器皿的紙或棉塞容易燒焦。2無(wú)菌操作技術(shù)目的：防止純培養(yǎng)物被其他微生物所污染。1.無(wú)菌環(huán)境條件：無(wú)菌環(huán)境是指在無(wú)菌室、無(wú)菌箱、超凈工作室或超凈工作臺(tái)等無(wú)菌或相對(duì)無(wú)菌的環(huán)境條件下進(jìn)行操作。2.無(wú)菌操作接種技術(shù)：接種時(shí)，關(guān)鍵是要嚴(yán)格進(jìn)行正確的無(wú)菌操作，其要點(diǎn)是要充分利用

7、酒精燈焰周圍的高溫區(qū)(無(wú)菌區(qū))，即接種時(shí)，管口和瓶口始終保持在火焰(如酒精燈焰)旁邊，進(jìn)行熟練的移接種操作，以便保證微生物的純種培養(yǎng)。此外，挑取和移接微生物純培養(yǎng)物用的接種環(huán)及接種針，使用時(shí)用火焰灼燒滅菌；轉(zhuǎn)移液體純培養(yǎng)物時(shí)，應(yīng)采用無(wú)菌吸管或無(wú)菌移液槍。3工業(yè)微生物別離和純化技術(shù)微生物的別離與純化獲得只含有某一種或某一株微生物純培養(yǎng)的過(guò)程。方法一般是根據(jù)該微生物的特性，設(shè)計(jì)適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，以利于該微生物的生長(zhǎng)繁殖，或參加某些抑制因素，造成只利于此菌生長(zhǎng)，而不利于他菌生長(zhǎng)的環(huán)境條件，從而淘汰其他雜菌。然后再通過(guò)各種稀釋法，使它們?cè)诠腆w培養(yǎng)基上形成單菌落，從而獲得我們所需要的純菌株。平板是

8、指經(jīng)熔化的固體培養(yǎng)基倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，冷卻凝固而成的盛有固體培養(yǎng)基的平面。方法分類：1.稀釋混合倒平板法2.稀釋涂布平板發(fā)(三角形無(wú)菌玻璃涂棒涂布) *常用3.平板劃線別離法 (接種環(huán)有規(guī)那么地劃線) *常用3、微生物的保藏的原理？如何防止菌種衰退?保藏的根本原理：使微生物的新陳代謝處于最低或幾乎停止的狀態(tài)，因而極少或不發(fā)生變異； 保藏方法通常都是基于溫度、水分、氧氣、營(yíng)養(yǎng)成分和滲透壓等方面考慮； 保藏條件都是人工方法創(chuàng)造的低溫、枯燥、缺氧環(huán)境。防止菌種衰退方法和措施：1. 控制傳代次數(shù)2. 創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件3. 利用不易衰退的細(xì)胞移種傳代4. 采用有效的菌種保藏方法5. 講究菌種選育技術(shù)6

9、. 定期進(jìn)行別離純化三、微生物分類1、寫出種、變種、菌株的定義。菌株strain從自然界中經(jīng)別離得到的任何一種微生物的純別離物，或在實(shí)驗(yàn)室中任何由一個(gè)獨(dú)立別離的單細(xì)胞繁殖而成的純培養(yǎng)物均可以成為某菌種的一個(gè)菌株。菌株是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最根底最常用的操作實(shí)體。種species可以認(rèn)為是表型特征十分相似、親緣關(guān)系極其接近的一群菌株的總稱(可用一個(gè)典型菌株作為該種的模式種)。種是微生物最根本的分類單位。 亞種subspecies一般是指某以明顯而穩(wěn)定的變異特性與模式種不同的種。亞種是正式分類單位中最低的等級(jí)。變種variety那么是亞種的同義詞，但現(xiàn)已較少用。2、生物大分子作為進(jìn)化標(biāo)尺依據(jù)？為什么16

10、SrRNA一把好的譜系分析的“分子尺?大分子進(jìn)化標(biāo)尺依據(jù)：蛋白質(zhì)、RNA和DNA序列進(jìn)化變化的顯著特點(diǎn)是進(jìn)化速率相對(duì)恒定，也就是說(shuō)，分子序列進(jìn)化的改變量于分子進(jìn)化的時(shí)間成正比。在兩群生物中，如果同一種分子的序列差異很大時(shí)進(jìn)化距離遠(yuǎn)，進(jìn)化過(guò)程中很早就分支了如果兩群種生物同一來(lái)源的大分子的序列根本相同處在同一進(jìn)化水平上大量的資料說(shuō)明：功能重要的大分子或者大分子中功能重要的區(qū)域，比功能不重要的分子或分子區(qū)域進(jìn)化變化速度低。16SrRNA是一把好的譜系分析的“分子尺原因：rRNA具有重要且恒定的生理功能在16SRNA分子中，既含有高度保守的序列區(qū)域，又有中度保守和高度變化的序列區(qū)域，因而它適用于進(jìn)化距

11、離不同的各類生物親緣關(guān)系的研究16SrRNA分子量大小適中，便于序列分析rRNA在細(xì)胞中含量大，也易于提取16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中，因此它可作為測(cè)量各類生物進(jìn)化的工具3、Carl Woese提出的分子進(jìn)化樹?微生物在其中的位置？答：1981年伍斯等根據(jù)某些代表生物16SrRNA(或18SrRNA)序列比擬，首次提出了一個(gè)函蓋整個(gè)生命界的系統(tǒng)樹，而后又進(jìn)行了屢次修改和補(bǔ)充，圖12-3就是近年提出的一個(gè)全生命系統(tǒng)樹， 該系統(tǒng)樹勾畫了生物進(jìn)化的大致輪廓。從圖中可以看出，這是有根的樹，根部的結(jié)代表地球上最先出現(xiàn)的生命，它是現(xiàn)有生物的共同祖先，生物最初的進(jìn)化就從這里開始。rRNA序列

12、分析說(shuō)明，它最初先分成兩支：一支開展成為今天的細(xì)菌(真細(xì)菌)；另一支是古生菌-真核生物分支，它進(jìn)化過(guò)程中進(jìn)一步分叉分別開展成古生菌和真核生物。因此，從該系統(tǒng)樹所反映的進(jìn)化關(guān)系，說(shuō)明古生菌和真核生物屬姊妹群，它們之間的關(guān)系比它們與真細(xì)菌之間的關(guān)系更密切。從該系統(tǒng)樹還可以看出，古生菌分支的結(jié)點(diǎn)離根部最近，其分支距離也最短，這說(shuō)明它是現(xiàn)存生物中進(jìn)化變化最少、最原始的一個(gè)類群。真核生物那么離共同祖先最遠(yuǎn)，它們是進(jìn)化程度最高的生物種類。4、微生物的命名法？目前最權(quán)威的細(xì)菌鑒定手冊(cè)是什么？微生物的命名法：微生物與其他生物一樣，按國(guó)際命名法規(guī)命名，即采用雙名發(fā)或三名發(fā)，給每一種微生物取一個(gè)國(guó)際學(xué)術(shù)界都公認(rèn)的

13、科學(xué)名稱，即學(xué)名(scientific name)。雙名法(binominal nomenclature)屬名種名屬名在前，是一個(gè)表示該種微生物主要特征的名詞，首字母應(yīng)大寫；種名在后，是一個(gè)描述微生物次要特征的形容詞或名詞，首字母小寫。例如：大腸埃希氏菌學(xué)名Escherichia coli三名法(trinominal nomenclature)屬名種名亞種或變種的加詞當(dāng)某一種微生物是亞種或變種時(shí)，其學(xué)名那么采用三名法表示。例如：枯草芽孢桿菌黑色亞種學(xué)名Bacillus subtilis (subsp.) niger subsp.或var.一般可以省略。目前最權(quán)威的細(xì)菌鑒定手冊(cè)：?伯杰氏鑒定細(xì)菌

14、學(xué)手冊(cè)?，簡(jiǎn)稱?伯杰氏手冊(cè)?。補(bǔ)充：?系統(tǒng)手冊(cè)?在?伯杰氏鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)?的根底上修訂的。四、微生物形態(tài)與細(xì)胞結(jié)構(gòu)1、細(xì)菌的主要特征和繁殖方式？細(xì)菌的主要特征：1.細(xì)胞微細(xì)2.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單3.胞壁堅(jiān)韌 4.多以二分裂方式繁殖 的單細(xì)胞多形性原核生物細(xì)菌的繁殖方式：細(xì)菌一般進(jìn)行無(wú)性繁殖, 最主要的無(wú)性繁殖方式是裂殖，即一個(gè)細(xì)胞通過(guò)分裂(二分分裂或折斷分裂)，結(jié)果由一個(gè)母細(xì)胞形成大小根本相等的兩個(gè)子細(xì)胞。過(guò)程大致如下：菌體細(xì)胞延長(zhǎng)核質(zhì)體伸長(zhǎng)并分成兩份中間的細(xì)胞膜由外向中心作環(huán)狀推進(jìn)形成細(xì)胞質(zhì)隔膜(細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)體分成兩半) 中間的細(xì)胞壁跟著從外向內(nèi)縊陷形成橫隔壁，并把細(xì)胞膜分成兩層橫隔壁逐漸分成兩層兩個(gè)

15、子細(xì)胞別離。有少數(shù)芽生細(xì)菌能象酵母菌一樣進(jìn)行芽殖, 即在母細(xì)胞一端先形成一個(gè)小突起, 待其長(zhǎng)大后再與母細(xì)胞別離的一種繁殖方式。此外，還有極少數(shù)細(xì)菌種類主要是大腸桿菌，在實(shí)驗(yàn)室條件下能通過(guò)性菌毛進(jìn)行有性接合。2、細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)Gram+、Gram與功能？gram染色的原理和步驟？知道常規(guī)的幾種Gram+、Gram的菌種？1細(xì)胞壁的主要功能是：1.維持細(xì)胞外形，保護(hù)細(xì)胞免受外力的損傷；2.作為鞭毛運(yùn)動(dòng)的支點(diǎn)；3.為細(xì)胞的正常分裂增殖所必需；4.具有一定屏障作用，對(duì)大分子或有害物質(zhì)起阻攔作用；5.與細(xì)菌的抗原性、致病性及對(duì)噬菌體的敏感性密切相關(guān)。陽(yáng)性細(xì)胞壁：較厚，機(jī)械強(qiáng)度較高，化學(xué)組成較簡(jiǎn)單，主要

16、含肽聚糖和磷壁酸；陰性細(xì)胞壁：較薄，機(jī)械強(qiáng)度較低，但層次較多，成分較復(fù)雜，主要成分除蛋白質(zhì)、肽聚糖和脂多糖外，還有磷脂質(zhì)、脂蛋白等。2革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟，具體操作方法是革蘭氏染色法步驟：1.先用結(jié)晶紫液初染。 2.再用碘液媒染與結(jié)晶紫形成不溶于水的復(fù)合物。 3.接著用95乙醇進(jìn)行脫色。 4.最后再用番紅(沙黃)液復(fù)染。革蘭氏染色原理：1.陽(yáng)性細(xì)胞壁較厚而緊密，肽聚糖網(wǎng)層次多、交聯(lián)緊密、不含類脂質(zhì)。當(dāng)用乙醇脫色時(shí)，因失水而引起肽聚糖層網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的孔徑縮小乃至關(guān)閉，阻止了結(jié)晶紫碘的復(fù)合物洗脫，故菌體最后仍呈紫色或紫紅色。2.陰性細(xì)胞壁薄，外膜層的類脂含量高，而肽聚糖

17、層薄和交聯(lián)度差，當(dāng)乙醇脫色時(shí)，外膜層的物質(zhì)迅速被溶解，通透性增大，結(jié)晶紫碘復(fù)合物被抽提洗脫，細(xì)胞褪成無(wú)色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，結(jié)果陰性菌呈現(xiàn)紅色。3常規(guī)的幾種革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌：無(wú)芽孢1.短桿菌 2.棒狀桿菌 3.乳酸桿菌 4.雙歧桿菌有芽孢1.枯草芽孢桿菌常規(guī)的幾種革蘭氏陰性細(xì)菌：無(wú)芽孢1.大腸埃希氏菌 2.醋酸桿菌 3.假單胞菌3、細(xì)胞膜的組成與結(jié)構(gòu)、功能？液態(tài)鑲嵌模型?(1)細(xì)胞膜的組成：主要是蛋白質(zhì)(占5070)和脂質(zhì)(占2030)，還有少量的核酸和糖類。脂質(zhì)主要是磷脂，每一個(gè)磷脂分子由一個(gè)帶正電荷的親水極性頭和兩條不帶電荷的疏水極性尾組成。(2)細(xì)胞膜的生理功能：1.具有高度的選擇透

18、性，控制營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收及代謝產(chǎn)物的排除，維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓的結(jié)構(gòu)屏障。2.含有各種呼吸酶系，是氧化磷酸化和光合磷酸化產(chǎn)生ATP的部位。3.是細(xì)胞壁和糖被的各種組分生物合成的場(chǎng)所。4.質(zhì)膜上的間與DNA復(fù)制別離及細(xì)胞間隔形成密切相關(guān)。5.是鞭毛的著生點(diǎn)并為其運(yùn)動(dòng)提供能量。(3)液態(tài)鑲嵌模型(細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu))：有具有高度定向性的磷脂雙分子層中鑲嵌著可移動(dòng)的膜蛋白構(gòu)成。具體地說(shuō)，細(xì)胞質(zhì)膜由兩層磷脂分子整齊地排列而成，親水行的極性頭朝向膜的內(nèi)外兩個(gè)外表，疏水的兩極性尾相對(duì)朝向膜的內(nèi)層中央。磷脂雙分子層中間和內(nèi)外外表鑲嵌著各種可移動(dòng)的膜蛋白質(zhì)，從而形成一種獨(dú)特的液體磷脂雙分子曾鑲嵌結(jié)構(gòu)。4、細(xì)菌芽孢的組

19、成與結(jié)構(gòu)？芽孢的耐熱機(jī)制？芽孢某些細(xì)菌在生長(zhǎng)發(fā)育后期由于環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)的缺乏及有害代謝產(chǎn)物的積累，就會(huì)在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)內(nèi)生孢子稱為芽孢。注意：一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽孢，一個(gè)芽孢萌發(fā)為一個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，故細(xì)菌產(chǎn)芽孢并無(wú)繁殖功能，而是產(chǎn)芽孢細(xì)菌生存的一種形式芽孢spore的構(gòu)成：由芽孢衣、芽孢殼、皮層和芽孢壁等包著核心(原生質(zhì)體)構(gòu)成的。芽孢的耐熱機(jī)制:1.芽孢具有復(fù)雜而獨(dú)特的多層結(jié)構(gòu)，使芽孢外殼厚而致密，不易滲透，折光性強(qiáng)。 2.芽孢中水分含量低(約40)，而且大局部以結(jié)合水方式存在。 3.芽孢中含有特殊成分吡啶二羧酸鈣，與芽孢對(duì)外界因素抵抗力和穩(wěn)定性密切相關(guān)。 4.酶類含量少且具有抗熱性。5、細(xì)菌鞭毛的

20、結(jié)構(gòu)及其推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)的特點(diǎn)？鞭毛的結(jié)構(gòu)：大體上可分為基體(埋于細(xì)胞膜和壁中)、鉤形鞘(靠近細(xì)胞外表)和鞭毛絲(伸出細(xì)胞外貿(mào))3局部。推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)的特點(diǎn)：鞭毛的生理功能是運(yùn)動(dòng)，鞭毛的運(yùn)動(dòng)引起菌體的運(yùn)動(dòng)，以實(shí)現(xiàn)其趨性，其運(yùn)動(dòng)方式有泳動(dòng)、滑動(dòng)、滾動(dòng)或旋轉(zhuǎn)。鞭毛逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，菌體翻騰，鞭毛順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，菌體前進(jìn)。鞭毛細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)速度是驚人的。6、放線菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)、繁殖方式？鏈霉菌的生活史？ (1)放線菌(actionmycete)的形態(tài)與結(jié)構(gòu)個(gè)體形態(tài)：是一類主要呈絲狀生長(zhǎng)和以孢子繁殖的原核生物。其中種類繁多。形態(tài)各異，他的菌體是由分支狀菌絲組成的，菌絲細(xì)胞在培養(yǎng)生長(zhǎng)階段無(wú)橫隔膜，故一般呈多核的單細(xì)胞狀態(tài)。

21、菌絲可以分為基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲三種。基內(nèi)菌絲又稱初級(jí)菌絲或營(yíng)養(yǎng)菌絲，較細(xì)。在瓊指培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，營(yíng)養(yǎng)菌絲深入到培養(yǎng)基中或匍匐生長(zhǎng)在培養(yǎng)基外表上吸取營(yíng)養(yǎng)。營(yíng)養(yǎng)菌絲在培養(yǎng)基中可分泌和形成各種具有抗菌作用或特殊生理活性的物質(zhì)，有的還能產(chǎn)生水溶性或脂溶性的各種色素，是培養(yǎng)基或菌落呈現(xiàn)相應(yīng)的顏色，成為鑒定菌種的重要依據(jù)。氣生菌絲又稱次級(jí)菌絲或二級(jí)菌絲，較營(yíng)養(yǎng)菌絲粗。它是由營(yíng)養(yǎng)菌絲體發(fā)育后，長(zhǎng)出培養(yǎng)基外并伸向空間的直形或彎曲而分支的菌絲。氣生菌絲顏色較深，有的也產(chǎn)生色素。孢子絲 又稱產(chǎn)孢絲或繁殖菌絲，由氣生菌絲逐步成熟時(shí)分化而成。孢子絲的形態(tài)多樣，有直形、波曲形，鉤形及螺旋形等。孢子絲的排列方式有

22、交替著生，叢生和輪生等，孢子絲的這種形態(tài)與排列上的差異是進(jìn)行分類鑒定的重要依據(jù)。放線菌群體特征：菌落周圍具有放射狀菌絲而得名。放線菌菌落由菌絲體組成，一般呈圓形或近圓形，枯燥，不透明，外表呈致密的絲絨狀或彩色的干粉狀。菌落顏色多樣，正面呈現(xiàn)孢子顏色，反面呈現(xiàn)菌絲顏色，培養(yǎng)基中往往分泌有水溶性色素。繁殖方式：主要以形成各種孢子進(jìn)行無(wú)性繁殖。最常見的孢子是分生孢子，如鏈霉菌。 少數(shù)放線菌如諾卡氏菌是以營(yíng)養(yǎng)菌絲分裂形成分生孢子進(jìn)行繁殖的。3種孢子形成方式：1.橫隔分裂形成分生孢子 諾卡氏菌分為孢子絲的細(xì)胞膜內(nèi)陷和細(xì)胞壁和細(xì)胞膜同時(shí)內(nèi)陷并向中心縊縮兩種。2.形成孢子囊產(chǎn)生孢囊孢子 鏈孢霉囊菌3.在菌絲

23、頂端形成少量孢子鏈霉菌的生活史：7、霉菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)、繁殖方式？有性孢子和無(wú)性孢子？霉菌的有性生活史？霉菌的形態(tài)霉菌先由一個(gè)孢子萌發(fā)出芽長(zhǎng)出芽管，繼而長(zhǎng)成管狀的菌絲hyphae。菌絲是霉菌營(yíng)養(yǎng)體的根本單位。菌絲通過(guò)頂端細(xì)胞的不斷延伸和分支形成初級(jí)菌絲，繼續(xù)分支成為次級(jí)菌絲，最后生長(zhǎng)發(fā)育形成菌絲體或菌叢。霉菌菌體是由分支或不分支的菌絲組成，許多菌絲交織在一起成為菌絲體。 少數(shù)霉聚的菌絲中間無(wú)橫隔膜，呈分支管狀多核的單細(xì)胞；多數(shù)霉菌的菌絲中間有橫隔膜，菌絲呈分支成串的多細(xì)胞(每個(gè)細(xì)胞內(nèi)含可有一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核)?；鶅?nèi)菌絲或營(yíng)養(yǎng)菌絲是伸入培養(yǎng)基內(nèi)負(fù)責(zé)吸收和運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)的菌絲特化構(gòu)造：假根(rhizoid)

24、、匍匐菌絲(stolon)、附著枝有營(yíng)養(yǎng)菌絲體產(chǎn)生具有延伸功能的弧形匍匐菌絲，在培養(yǎng)基外表向四周蔓延生長(zhǎng)。有匍匐菌絲分化出分支狀的假根,接觸基質(zhì)并吸取養(yǎng)分。氣生菌絲或次級(jí)菌絲與培養(yǎng)基外表相連接的伸向空中生長(zhǎng)的菌絲特化構(gòu)造：主要特化成各種形態(tài)的子實(shí)體 子實(shí)體是指在其里面或上面可產(chǎn)無(wú)性或有性孢子，有一定的形狀和結(jié)構(gòu)的各種菌絲體組織。霉菌的結(jié)構(gòu)霉菌菌絲細(xì)胞有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)及其內(nèi)含物、細(xì)胞核等組成。細(xì)胞壁厚實(shí)而堅(jiān)韌。高等陸生霉菌主要成分為幾丁質(zhì) 低等水生霉菌主要成分為纖維素。細(xì)胞膜與酵母菌細(xì)胞膜類似。細(xì)胞質(zhì)及其內(nèi)含物幼齡菌絲細(xì)胞質(zhì)飽滿均勻 成熟或老齡的菌絲細(xì)胞質(zhì)中形成液泡。細(xì)胞核由雙層核膜包裹

25、，核膜上有許多膜孔，核內(nèi)有核仁和染色體。霉菌的繁殖方式(1)產(chǎn)無(wú)性孢子進(jìn)行無(wú)性繁殖：1.孢子囊孢子 2.分生孢子(最常見) 3.厚垣孢子(一種休眠體)4.節(jié)孢子 5.芽孢子無(wú)性繁殖不經(jīng)過(guò)兩性菌絲細(xì)胞的配合，只是氣生菌絲細(xì)胞的分裂或轉(zhuǎn)化而形成同種新個(gè)體的過(guò)程。(2)產(chǎn)有性孢子進(jìn)行無(wú)性繁殖：1.結(jié)合孢子 2.子囊孢子 3.卵孢子有性繁殖是兩個(gè)性細(xì)胞結(jié)合而產(chǎn)生新個(gè)體的過(guò)程。一般包括質(zhì)配即細(xì)胞質(zhì)融合，核配即兩個(gè)核融合和減數(shù)分裂3個(gè)階段。霉菌的有性生活史：8、酵母的形態(tài)與結(jié)構(gòu)、繁殖方式？酵母的有性生活史？酵母的形態(tài)：酵母菌為單細(xì)胞真核生物，其細(xì)胞形態(tài)一般為球形、橢圓形、卵形或香腸形等。其體積比細(xì)菌大20

26、幾倍。酵母的細(xì)胞結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁厚度與菌齡有關(guān)，幼齡菌較薄。酵母菌細(xì)胞壁可分3層：外層的組成成分是甘露聚糖和磷酸甘露聚糖；中間層的組成成分是蛋白質(zhì)；內(nèi)層是的組成成分是葡聚糖，是維持細(xì)胞壁機(jī)械強(qiáng)度的主要成分。由瑪瑙螺胃液制成的蝸牛酶，含有甘露聚糖酶、纖維素酶、葡萄酸酶、幾丁質(zhì)酶和脂酶等多種酶，對(duì)酵母菌細(xì)胞壁能起水解作用，可用于制備原生質(zhì)體。細(xì)胞膜由2層磷脂分子所組成，除鑲嵌著球狀蛋白質(zhì)外，還含有固醇類(原核生物中是罕見的)。主要成分為蛋白質(zhì)、類脂和少量糖類。所含的固醇類中，主要是麥角固醇(維生素D的前體，在紫外線照射下可轉(zhuǎn)化為維生素D)。細(xì)胞核由雙曾多孔核膜包裹著，含有由DNA和組蛋白結(jié)合而成的線狀

27、典型染色體，核內(nèi)還有1個(gè)或幾個(gè)核仁，它是合成核糖體的場(chǎng)所。補(bǔ)充：質(zhì)粒，是一種超螺旋的閉合環(huán)狀DNA分子，可構(gòu)建成為外源基因的表達(dá)載體。細(xì)胞質(zhì)含有豐富的酶等蛋白質(zhì)、各種內(nèi)含物以及中間代謝產(chǎn)物等，是細(xì)胞代謝活動(dòng)的重要場(chǎng)所。 成熟和老齡細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)較大的液泡和各種貯藏物，主要是異染顆粒、肝糖粒和脂肪粒，它們是細(xì)胞內(nèi)貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。線粒體細(xì)胞進(jìn)行能量代謝的場(chǎng)所，是細(xì)胞的能量倉(cāng)庫(kù)。主要功能是進(jìn)行氧化磷酸化作用。液泡細(xì)胞的貯藏庫(kù)，與細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行物質(zhì)交換，同時(shí)還有調(diào)節(jié) 細(xì)胞滲透壓的作用。酵母的有性生活史：9、如何進(jìn)行噬菌體培養(yǎng)純化？烈性噬菌體、溫和噬菌體、敏感性細(xì)菌、溶原性細(xì)菌、原噬菌體、溶原化？烈性噬菌體侵

28、染宿主菌時(shí)，將其頭部DNA注入菌體細(xì)胞內(nèi)，并在細(xì)胞內(nèi)形成大量的子代噬菌體，從而引起菌體細(xì)胞裂解死亡，同時(shí)釋放出成熟的子代噬菌體。溫和噬菌體當(dāng)噬菌體吸附并侵入宿主細(xì)胞后，能將其DNA插入(整合)到宿主細(xì)胞核DNA的一定位置上成為前(原)噬菌體，并可長(zhǎng)期隨宿主DNA的復(fù)制而同步復(fù)制，因而在一般情況下不進(jìn)行增殖和引起宿主細(xì)八的裂解，這一類型的噬菌體稱為溫和噬菌體。溶原性細(xì)菌受到溫和噬菌體侵染而帶有原噬菌體卻又沒(méi)有形態(tài)上可見到的噬菌體粒子的宿主菌，稱為溶原性細(xì)菌，簡(jiǎn)稱溶原菌。宿主細(xì)菌一般檢查不到噬菌體的存在，但卻具有產(chǎn)生成熟噬菌體粒子的潛在能力，溫和噬菌體侵入宿主細(xì)菌后所產(chǎn)生的這種特性，稱為溶原性。原

29、噬菌體當(dāng)噬菌體吸附并侵入宿主細(xì)胞后，能將其DNA插入(整合)到宿主細(xì)胞核DNA的一定位置上成為前(原)噬菌體。溶原化途徑溫和噬菌體將DNA整合到宿主菌染色體上，宿主菌可繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖。敏感性噬菌體10、以大腸桿菌T4噬菌體為例說(shuō)明噬菌體的構(gòu)造及繁殖過(guò)程。一步生長(zhǎng)曲線及其特征參數(shù)？大腸桿菌T4噬菌體的結(jié)構(gòu)：T4噬菌體由頭部、尾部和頸部3個(gè)局部組成。頭部橢圓形的頭部呈20面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，其衣殼由212個(gè)衣殼粒組成，含8種蛋白質(zhì)。頭部衣殼內(nèi)，一條線狀雙鏈DNA分子折疊盤繞其中。尾部尾部呈螺旋對(duì)稱結(jié)構(gòu)，由尾鞘、尾髓(尾管)、基板、刺突和尾絲5個(gè)局部組成。尾髓：是頭部DNA注入宿主細(xì)胞的通道 刺突：有吸附功

30、能 尾絲：具有專一的吸附在敏感宿主菌細(xì)胞外表相應(yīng)受體上的功能頸部由頸環(huán)和頸須構(gòu)成。頸須自頸環(huán)上發(fā)出，其功能是裹住吸附前的尾絲。大腸桿菌T4噬菌體的繁殖過(guò)程：吸附(adsorption)噬菌體吸附宿主細(xì)胞時(shí)，尾部末端的尾絲散開并附著于細(xì)胞外表的特異性受體上，刺突和基板固著于細(xì)胞外表。不同噬菌體吸附于宿主細(xì)胞的部位不同。宿主細(xì)胞外表對(duì)個(gè)種噬菌體也具有特異性的受體，同時(shí)吸附作用也受各種外界因素的影響。侵入(penetration)吸附后，尾髓末端所攜帶的少量溶菌酶水解局部細(xì)胞壁的肽聚糖產(chǎn)生一小孔洞，然后尾髓收縮為原長(zhǎng)的一半，將尾髓推出并插入到細(xì)胞內(nèi)。接著，頭部的核酸通過(guò)中空的尾髓注入到宿主細(xì)胞中，而

31、將蛋白質(zhì)外殼留在細(xì)胞外。增殖(replication)雙鏈DNA的烈性噬菌體的增殖是按早期、次早期和晚期基因的順序來(lái)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯和復(fù)制的。成熟(maturity)成熟過(guò)程實(shí)際是噬菌體的裝配過(guò)程。裂解(burst)當(dāng)大量的子代噬菌體在宿主菌內(nèi)完全成熟后，由于所產(chǎn)生的脂肪酶和溶菌酶分別對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞壁的水解作用，促使宿主細(xì)胞產(chǎn)生裂解作用，從而使大量的子代噬菌體釋放出來(lái)。一步生長(zhǎng)曲線以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以噬菌斑數(shù)為縱坐標(biāo)作圖。由此繪制而成的定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線，稱為一步生長(zhǎng)曲線或一級(jí)生長(zhǎng)曲線。1.潛伏期(latent phase)從噬菌體吸附并將DNA注入宿主細(xì)胞至第一個(gè)成熟的子代

32、噬菌體從宿主細(xì)胞中釋放出來(lái)之前這段時(shí)間，稱為潛伏期。2.裂解期(buurst phase)緊接在潛伏期后，宿主細(xì)胞迅速裂解，培養(yǎng)液中大量的子代噬菌體不斷地釋放出來(lái)，表現(xiàn)在噬菌體效價(jià)急劇增高，也稱為突破期，生長(zhǎng)曲線表現(xiàn)為一陡斜的直線。3.平穩(wěn)期(plateau phase)被感染的宿主細(xì)胞在裂解期全部被裂解后，培養(yǎng)液中的噬菌體效價(jià)到達(dá)最高電，此時(shí)便進(jìn)入平穩(wěn)期。補(bǔ)充：效價(jià)指每毫升試樣中所含有的侵染性噬菌體粒子數(shù)，又稱噬菌斑形成單位。 噬菌斑在平板的菌苔上形成一個(gè)肉眼可見的無(wú)菌、透亮、近圓形的空斑。11、噬菌體對(duì)發(fā)酵工業(yè)的危害？如何防治？對(duì)發(fā)酵工業(yè)的危害：在短短的幾個(gè)小時(shí)內(nèi)，發(fā)酵液中的菌體全部被破壞

33、，不能再繼續(xù)發(fā)酵積累產(chǎn)物。輕那么減產(chǎn)，重那么倒罐，給發(fā)酵工業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的威脅并造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。工業(yè)上預(yù)防噬菌體感染的措施：1.消滅噬菌體及其寄主菌。2.保證無(wú)菌空氣凈化系統(tǒng)的嚴(yán)密有效。3.徹底消除設(shè)備死角及滲漏，排除隱患。4.嚴(yán)防種子攜帶噬菌體進(jìn)入發(fā)酵罐(種子液要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格噬檢)。5.備有不同噬菌體類型的生產(chǎn)菌，定期輪換使用菌種。6.選育抗噬菌體突變菌株。7.必要時(shí)可考慮添加某些噬菌體抑制劑。五、工業(yè)上重要的微生物及產(chǎn)品1、工業(yè)應(yīng)用的主要細(xì)菌及其產(chǎn)品？大腸桿菌革蘭氏陰性，運(yùn)動(dòng)(周毛)或不運(yùn)動(dòng)，無(wú)芽孢，一般無(wú)莢膜。菌落呈白色至黃白色，擴(kuò)展，光滑，閃光。主要用途有: 制取氨基酸、制備多種酶、作為

34、基因工程受體菌、作為水和食品中微生物學(xué)檢驗(yàn)的指示菌。谷氨酸棒狀桿菌大多數(shù)種不運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽(yáng)性。 主要用途有：高產(chǎn)谷氨酸、生產(chǎn)其它多種氨基酸、生產(chǎn)5核苷酸、水楊酸、棒狀桿菌素等。乳酸桿菌革蘭氏陽(yáng)性菌老培養(yǎng)物中的細(xì)胞可能是陰性，無(wú)芽孢，多數(shù)不運(yùn)動(dòng)。主要用途有：工業(yè)生產(chǎn)乳酸、發(fā)酵生產(chǎn)乳制品、生產(chǎn)其它乳酸發(fā)酵食品、生產(chǎn)藥用乳酸菌制劑、生產(chǎn)禽畜益生菌制劑。雙歧桿菌革蘭氏陽(yáng)性、不形成芽孢、不運(yùn)動(dòng)。主要用途有：生產(chǎn)微生態(tài)制劑、生產(chǎn)含活性雙歧桿菌的乳制品。以雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌為主、再輔以嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌等菌種，混種發(fā)酵生產(chǎn)而成的酸乳，是一種具有很好保健作用的功能性食品?？莶菅挎邨U菌 俗稱枯草桿菌無(wú)

35、莢膜，運(yùn)動(dòng)周生鞭毛，革蘭氏染色陽(yáng)性。主要用途有：生產(chǎn)各種酶制劑、發(fā)酵生產(chǎn)核苷、生產(chǎn)某些抗生素、生產(chǎn)各種多肽、蛋白質(zhì)類藥物和酶。2、產(chǎn)抗生素的主要生產(chǎn)菌？青霉素：產(chǎn)黃青霉 紅霉素：紅色鏈霉菌螺旋霉素：生二素鏈霉菌頭孢菌素C：頂孢頭孢子菌 鏈霉素：灰色鏈霉菌慶大霉素：棘孢小單孢菌 四環(huán)素：金霉素鏈霉菌 3、釀酒酵母的形態(tài)特點(diǎn)與繁殖及其生產(chǎn)上的用途？形態(tài)特點(diǎn)：酵母菌的細(xì)胞主要由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、液泡和線粒體等構(gòu)成。酵母細(xì)胞壁與細(xì)菌細(xì)胞壁相比，在堅(jiān)韌性上較差，在結(jié)構(gòu)和組成分上也大不相同。酵母細(xì)胞壁可分三層：外層的組成分是甘露聚糖和磷酸甘露聚糖，約占40 % 45%；中間層是蛋白質(zhì)，約占5

36、% 10%, 其中有些是與甘露聚糖相結(jié)合的各種酶類如葡聚糖酶、蔗糖酶、脂酶等；內(nèi)層的組成分是葡聚糖，約占35% 45%，為分枝狀聚合物, 是維持細(xì)胞壁機(jī)械強(qiáng)度的主要成分。此外，細(xì)胞壁中還含有酯類3% 8%、少量幾丁質(zhì)1% 2%和灰分。酵母菌為真核微生物，其細(xì)胞核由雙層多孔核膜包裹著，膜孔直徑約為80 100 nm，用以增大膜的透性和膜內(nèi)外的物質(zhì)交換。細(xì)胞核中含有由DNA和組蛋白結(jié)合而成的線狀典型染色體。在有氧時(shí)生長(zhǎng)的酵母細(xì)胞質(zhì)中，分布有一種數(shù)目較多，棒狀或圓筒狀，大小為0.3 10.5 3m的細(xì)胞器 線粒體。在老齡的酵母細(xì)胞質(zhì)中，出現(xiàn)一個(gè)被單層膜包圍的液泡。繁殖方式：可分為無(wú)性繁殖和有性繁殖兩

37、種方式。無(wú)性繁殖主要有芽殖、裂殖、產(chǎn)無(wú)性孢子節(jié)孢子、擲孢子、厚垣孢子等三種方式，而有性繁殖那么以產(chǎn)生有性孢子子囊孢子的方式進(jìn)行繁殖。其中，最典型和最主要的繁殖方式是芽殖、裂殖和產(chǎn)子囊孢子釀酒酵母主要用途有：用于生產(chǎn)酒精乙醇、用于生產(chǎn)白酒和其它飲料酒、用于食品工業(yè)生產(chǎn)多種食品、用于醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)各種醫(yī)藥品。4、淀粉酶、蛋白酶、檸檬酸、谷氨酸的主要生產(chǎn)菌？淀粉酶：黑曲霉 蛋白酶：魯氏毛霉檸檬酸：黑曲霉 谷氨酸：5、毛霉、根霉、曲霉、青霉形態(tài)上的差異？毛霉根霉(rhizopus) 的菌絲無(wú)橫膈膜，單細(xì)胞。菌絲體白色，氣生性強(qiáng)，在固體培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)交織成疏松的棉絮狀菌落，可蔓延充滿整個(gè)培養(yǎng)皿。根霉在固

38、體培養(yǎng)基上或自然培養(yǎng)物上生長(zhǎng)時(shí)，由營(yíng)養(yǎng)菌絲體產(chǎn)生具有延伸功能的弧形匍匐菌絲 (stolon)，在培養(yǎng)基外表向四周蔓延生長(zhǎng)。由匍匐菌絲分化出分枝狀的假根 (rhizoid)，接觸基質(zhì)并吸取養(yǎng)分。在與假根相對(duì)的方向上生出孢囊梗柄，頂端膨大形成孢子囊，內(nèi)生孢子囊孢子。孢子囊內(nèi)有一近球形的囊軸，囊軸莖部與梗相連處有囊托。孢子囊成熟后，孢子囊壁消解或破裂，可釋放出大量的孢子囊孢子。曲霉(aspergillus) 的菌絲有橫膈膜，為多細(xì)胞絲狀真菌。某些菌絲細(xì)胞特化膨大成為厚壁的足細(xì)胞，由足細(xì)胞生出直立的分生孢子梗無(wú)橫隔，頂部膨大形成球形的頂囊。在頂囊的外表以放射狀生出一層或兩層小梗初生小梗、次生小梗，小梗

39、的頂端著生成串的分生孢子。頂囊、小梗及分生孢子鏈一起構(gòu)成分生孢子穗或分生孢子頭，分生孢子穗具有各種不同的顏色和形狀 。青霉(penicillium) 的菌絲與曲霉相似，有橫隔，多細(xì)胞，但無(wú)足細(xì)胞。分生孢子梗也有橫隔直接由氣生菌絲生出，頂端不膨大成為頂囊，而是經(jīng)過(guò)屢次分枝成為帚狀枝孢子穗。帚狀枝是由單輪、二輪或多輪分枝構(gòu)成，對(duì)稱或不對(duì)稱。最后一輪分枝稱為小梗，在小梗頂端產(chǎn)生成串的藍(lán)綠色分生孢子。有極少數(shù)青霉能產(chǎn)生閉囊殼，內(nèi)生子囊和子囊孢子。六、微生物營(yíng)養(yǎng)1、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型的分類？答：根據(jù)能源的性質(zhì)不同可把微生物分為光能營(yíng)養(yǎng)型微生物和化能營(yíng)養(yǎng)型微生物 根據(jù)碳源的性質(zhì)不同可把微生物分為自養(yǎng)型或無(wú)機(jī)

40、營(yíng)養(yǎng)型微生物和異養(yǎng)型或有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型微生物(1)光能自養(yǎng)型微生物光能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型微生物又稱光能自養(yǎng)型微生物。它們具有光合色素，既能通過(guò)光合磷酸化作用產(chǎn)生ATP，又能以復(fù)原性無(wú)機(jī)化合物為供氫體，復(fù)原二氧化碳而合成細(xì)胞物質(zhì)。例：藻類 某些原核微生物如藍(lán)細(xì)菌 綠硫細(xì)菌和紫硫細(xì)菌(2)光能異養(yǎng)型微生物光能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型微生物又稱光能異養(yǎng)型微生物。它們像光能自養(yǎng)微生物一樣能夠利用光能， 但必須以外源有機(jī)化合物作為主要碳源和供氫體，在人工培養(yǎng)時(shí)通常還需要提供生長(zhǎng)因子。例：紅假單胞菌(3)化能自養(yǎng)型微生物化能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型微生物又稱化能自養(yǎng)型微生物。它們能利用無(wú)機(jī)化合物氧化時(shí)釋放的能量，把二氧化碳中的碳復(fù)原成細(xì)胞有機(jī)物碳

41、架中的碳。例：氧化亞鐵硫桿菌(4)光能異養(yǎng)型微生物化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型微生物又稱化能異養(yǎng)型微生物。它們以有機(jī)化合為碳源，利用有機(jī)化合物氧化過(guò)程中氧化磷酸化提供的ATP而生長(zhǎng)。這類微生物的特點(diǎn)是其能源與碳源往往相同。例：原生動(dòng)物 真菌 大多數(shù)細(xì)菌、放線菌2、培養(yǎng)基應(yīng)該具備微生物生長(zhǎng)所需要六大營(yíng)養(yǎng)要素？功能？實(shí)驗(yàn)室中常用的藥品？1.水水是微生物最根本的組成成分，在微生物細(xì)胞中含量達(dá)7090，因而水也是微生物最根本的營(yíng)養(yǎng)要素。生理功能：1.微生物體內(nèi)體外的溶劑，絕大多數(shù)營(yíng)養(yǎng)成分通過(guò)水來(lái)溶解和吸收，代謝廢物通過(guò)水進(jìn)行排泄。 2.是細(xì)胞質(zhì)組分，直接參與各種代謝活動(dòng)。 3. 比熱高，傳熱快，有利于調(diào)節(jié)細(xì)胞溫度和

42、保持環(huán)境溫度的穩(wěn)定。2.碳源碳源凡被微生物用來(lái)構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中碳架來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物。微生物對(duì)碳源的需要量最大，是微生物所需的最根本營(yíng)養(yǎng)要素。生理功能：1.為菌體本身的合成提供碳架來(lái)源 2.為生命活動(dòng)提供能量3.可作能源 4.是微生物細(xì)胞物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物的重要組成局部異養(yǎng)微生物糖類是最好的碳源，其中以葡萄糖和蔗糖最為通用。自養(yǎng)微生物可利用CO2和非C=C鍵化合物作為生長(zhǎng)的主要碳源或唯一碳源。3.氮源氮源凡能被微生物用于構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和代謝產(chǎn)物中氮素來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物。氮源物質(zhì)一般不能用作能源，只有少數(shù)自養(yǎng)菌能利用銨鹽、硝酸鹽既作為氮源又作為能源。生理功能：1. 為菌體本身的合成代謝提供氮素來(lái)源 2.

43、可為極少數(shù)微生物的生命活動(dòng)提供能量 3.是微生物細(xì)胞物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物的重要組成局部氮素自養(yǎng)微生物能夠利用無(wú)機(jī)氮來(lái)合成有機(jī)物的微生物固氮微生物利用空氣中氮分子的微生物4.無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽為微生物生長(zhǎng)提供必需的礦質(zhì)元素。生理功能：1.參與酶的組成，構(gòu)成酶活性基，激活酶活性。 2.維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性 3.調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓 4.控制細(xì)胞的氧化復(fù)原電位 5.作為某些微生物生長(zhǎng)的能源物質(zhì)微生物對(duì)無(wú)機(jī)鹽的需求量通常將無(wú)機(jī)鹽分為主要元素和微量元素兩類主要元素：磷、硫、鉀、鈉、鈣、鎂等元素參與細(xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)的組成，并有能量轉(zhuǎn)移、細(xì)胞透性調(diào)節(jié)等作用，微生物對(duì)它們的需求量相對(duì)大些，沒(méi)有它們，微生物不能生長(zhǎng)。微量元素：鐵、

44、錳、銅、鋅、鈷等元素的鹽類進(jìn)入細(xì)胞一般是作為酶的輔助因子，微生物對(duì)它們的需求量甚少，一般配制培養(yǎng)基時(shí)沒(méi)有另外參加的必要。5.生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子又稱生長(zhǎng)因素，是指某些微生物不能用普通的碳源和氮源物質(zhì)合成，而必須另外參加少量的生長(zhǎng)需求的有機(jī)物質(zhì)。不同微生物需要不同的生長(zhǎng)因子。生理功能：以輔酶與輔基的形式參與代謝中的酶促反響。補(bǔ)充：營(yíng)養(yǎng)缺陷型(auxotrophic)微生物缺乏合成生長(zhǎng)因子能力的微生物。3、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原理和方法？根本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基？伊紅和美藍(lán)鑒別大腸桿菌的原理？設(shè)計(jì)培養(yǎng)基方法(1)調(diào)查研究 1.查閱文獻(xiàn)，走訪同行 2.調(diào)查生態(tài)，觀察“嗜好(2)試驗(yàn)比擬培養(yǎng)基的類

45、型按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分是否完全區(qū)分1.根本培養(yǎng)基minimal medium亦稱“最低限度培養(yǎng)基。它只能保證某些微生物的野生型菌株正常生長(zhǎng)，是含有營(yíng)養(yǎng)要求最低成分的合成培養(yǎng)基，常用“表示。經(jīng)過(guò)誘變的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能生長(zhǎng)。2.完全培養(yǎng)基complete medium在根本培養(yǎng)基中參加一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)蛋白胨，即參加生長(zhǎng)因子而成完全培養(yǎng)基?？捎脕?lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要，常用“表示。按培養(yǎng)基的用途區(qū)分3.鑒別培養(yǎng)基differential medium在培養(yǎng)基中參加某些試劑或化學(xué)藥品，使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差異，因而有助于快速鑒別某種微生物。伊

46、紅美藍(lán)(EMB)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。原理：大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，并和指示劑伊紅美藍(lán)發(fā)生結(jié)合，結(jié)果大腸桿菌形成較小的、帶有金屬光澤的紫黑色菌落。4、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式？促進(jìn)擴(kuò)散與主動(dòng)運(yùn)輸?shù)膮^(qū)別？基團(tuán)轉(zhuǎn)位的原理？4種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸機(jī)制實(shí)際上一種或多種運(yùn)送方式可能同時(shí)存在于一種微生物中，對(duì)不同的營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)行跨膜運(yùn)輸而互不干擾。1.單純擴(kuò)散simple diffusion少數(shù)低相對(duì)分子質(zhì)量的物質(zhì)是靠被動(dòng)擴(kuò)散滲入或滲出細(xì)胞，擴(kuò)散的速度靠細(xì)胞內(nèi)外的濃度梯度來(lái)決定。擴(kuò)散由高濃度向低濃度，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)外此物質(zhì)濃度到達(dá)平衡時(shí)便不再進(jìn)行擴(kuò)散。被動(dòng)擴(kuò)散的動(dòng)力來(lái)自細(xì)胞內(nèi)外的濃度差。擴(kuò)散并不是微生物細(xì)胞吸

47、收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要方式。水和一些氣體分子(CO2 O2)等簡(jiǎn)單化合物可通過(guò)單純擴(kuò)散透過(guò)細(xì)胞膜。2.促進(jìn)擴(kuò)散facilitated diffusion促進(jìn)擴(kuò)散與單純擴(kuò)散相似，也是靠物質(zhì)的濃度梯度進(jìn)行，而不消耗能量，但與單純擴(kuò)散不同的是促進(jìn)擴(kuò)散需要專一性的載體蛋白存在于細(xì)胞膜上，可與相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)物結(jié)合形成復(fù)合物，然后擴(kuò)散到膜內(nèi)部，并釋放出營(yíng)養(yǎng)物。促進(jìn)擴(kuò)散的動(dòng)力來(lái)自細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)外此物質(zhì)濃度到達(dá)平衡時(shí)便不再進(jìn)行擴(kuò)散。3.主動(dòng)運(yùn)送active transport主動(dòng)運(yùn)送又稱主動(dòng)運(yùn)輸，是細(xì)胞膜的最重要的特性之一，類似于促進(jìn)擴(kuò)散過(guò)程，但不同的是被運(yùn)輸?shù)臓I(yíng)養(yǎng)物或溶質(zhì)可以逆濃度梯度移動(dòng)，并且需要消耗代

48、謝能。參加細(xì)胞形成能量的抑制劑，如疊氮化物或碘乙酸那么可抑制主動(dòng)運(yùn)輸，而促進(jìn)擴(kuò)散和被動(dòng)擴(kuò)散不受影響。4.基團(tuán)移位group translocation某些細(xì)菌自外界吸收特定的糖類，跨膜運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)部是以其磷酸化的衍生物被釋放的形式來(lái)進(jìn)行的，這種運(yùn)輸方式需要能量，類似主動(dòng)運(yùn)送，細(xì)胞內(nèi)部的糖的磷酸鹽不能跨膜運(yùn)出。大腸桿菌吸收葡萄糖是依靠這種方式進(jìn)行的。優(yōu)點(diǎn)：雖然在運(yùn)輸過(guò)程中消耗了1分子ATP，但能量并未浪費(fèi)，而是有效地保存在糖6磷酸中。5、Na+,K+-ATP酶系統(tǒng)？Na+-K+-ATPase是存在于原生質(zhì)膜上的一種重要離子通道蛋白功能：利用ATP能量將Na+由細(xì)胞內(nèi)泵出細(xì)胞外，并將K+泵入細(xì)胞內(nèi)

49、該酶由大小兩個(gè)亞基組成MW：12萬(wàn)，5.5萬(wàn)作用步驟：1ATP酶E在細(xì)胞內(nèi)側(cè)與3個(gè)Na+結(jié)合，同時(shí)消耗能量2. 磷酸化ATP酶E+構(gòu)象變化將Na+排出胞外，并與2個(gè)K+結(jié)合3. K+激發(fā)E+脫磷酸化恢復(fù)為E，同時(shí)將K+運(yùn)入細(xì)胞七、微生物生長(zhǎng)1、微生物生長(zhǎng)的測(cè)定方法？1細(xì)胞物質(zhì)總量測(cè)定1.直接測(cè)定法a.體積測(cè)定法通常將待測(cè)定的培養(yǎng)液放置在刻度離心管中作自然沉降或進(jìn)行一定時(shí)間的離心，觀察沉降物的體積。b.干重測(cè)量法采用離心法或過(guò)濾法獲得菌體，然后烘干至恒重，稱量。一般干重為濕重的1020。2.生理指標(biāo)法氮量測(cè)定法(常用)：粗蛋白總量含氮量6.252微生物細(xì)胞數(shù)的測(cè)定1.直接計(jì)數(shù)法此法比擬常用，但得

50、到的結(jié)果是包括死細(xì)胞在內(nèi)的總菌數(shù)。2.平板菌落計(jì)數(shù)法3.DNA含量測(cè)定法4.比色(比濁)法2、微生物生長(zhǎng)曲線并解釋之？1.延遲期lag phase又稱停滯期、調(diào)整期和適應(yīng)期。這是培養(yǎng)基接種后開始的一個(gè)適應(yīng)期。生理特征：a. 菌體內(nèi)物質(zhì)量明顯增長(zhǎng)，菌體體積增大，桿菌那么表現(xiàn)為菌體明顯伸長(zhǎng)。b. 代謝活潑。c. 對(duì)外界不良環(huán)境條件如食鹽濃度、溫度、輻射及抗生素等化學(xué)藥品的反響敏感。2.對(duì)數(shù)期logarithmic phase又稱指數(shù)期，是指細(xì)菌經(jīng)過(guò)對(duì)新環(huán)境的適應(yīng)階段后，細(xì)胞數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增加的階段。生理特征：a. 細(xì)胞高速生長(zhǎng)繁殖。b. 溫度影響細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖速度，接近最適生長(zhǎng)溫度那么速度快。c.

51、處于對(duì)數(shù)前期的細(xì)胞對(duì)理化因素仍比擬敏感，而且菌體大小均勻，單個(gè)存在的細(xì)胞占多數(shù)。因此在研究細(xì)菌的代謝和遺傳特性時(shí)，使用這個(gè)時(shí)期的細(xì)胞較佳。d. 用處于對(duì)數(shù)期后期的細(xì)菌接種適宜的發(fā)酵培養(yǎng)基可以縮短延遲期。3.穩(wěn)定期stationary phase又稱平衡期或行定期。由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗和有生理毒性的代謝物質(zhì)在培養(yǎng)基中的積累，以及其他條件對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)不利的改變，到對(duì)數(shù)期的末期，細(xì)菌分裂速度降低，繁殖率和死亡率逐漸趨于平衡，活菌數(shù)根本保持穩(wěn)定。生理特征：a. 細(xì)胞分裂速率降低，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)累積細(xì)胞貯存物。大多數(shù)產(chǎn)芽孢細(xì)菌那么在此時(shí)產(chǎn)生芽孢。b. 代謝活動(dòng)繼續(xù)進(jìn)行，并保持相當(dāng)水平。c. 穩(wěn)定期的長(zhǎng)短因菌種

52、和培養(yǎng)條件而異，是積累代謝產(chǎn)物的重要階段。4.衰亡期decline phase 穩(wěn)定期后期，由于營(yíng)養(yǎng)缺乏、代謝廢物堆積會(huì)使細(xì)菌死亡速度超過(guò)繁殖速度，活菌數(shù)明顯下降，從而進(jìn)入衰亡期。生理特征：a. 細(xì)胞內(nèi)顆粒更明顯，出現(xiàn)液泡，細(xì)胞出現(xiàn)多種形態(tài)，包括畸形和衰退形。b. 因細(xì)菌本身所產(chǎn)生的酶和代謝產(chǎn)物的作用而使菌體分解死亡。c. 衰亡期與其他各期相比相對(duì)較長(zhǎng)，其時(shí)限取決于細(xì)菌本身的特性及環(huán)境條件。4、倍增時(shí)間、比生長(zhǎng)速率？微生物生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)monod方程？連續(xù)培養(yǎng)的條件？ P94-96倍增時(shí)間：對(duì)數(shù)期內(nèi)戲劇細(xì)胞數(shù)目以穩(wěn)定的速率按幾何級(jí)增加，因此根據(jù)細(xì)胞增加的總數(shù)可以計(jì)算出細(xì)胞每分裂一次所需要的時(shí)間時(shí)代

53、時(shí)間G，亦稱菌體倍增時(shí)間比生長(zhǎng)速率：連續(xù)培養(yǎng)：在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的培養(yǎng)容器內(nèi)不斷添加新鮮培養(yǎng)基，同時(shí)不斷放出培養(yǎng)物，從而使微生物所需營(yíng)養(yǎng)能及時(shí)得到補(bǔ)充，有害的代謝產(chǎn)物及時(shí)排除，菌體生長(zhǎng)不受影響，始終維持在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的一種培養(yǎng)方法。裝置：培養(yǎng)室，無(wú)菌培養(yǎng)基容器和調(diào)節(jié)流速的控制系統(tǒng)。必要時(shí)還裝有通氣、攪拌裝置。5、控制微生物生長(zhǎng)繁殖的主要方法及原理有哪些？滅菌(sterilization)采用強(qiáng)烈的理化因素是任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。消毒(disinfection)采用較溫和的理化因素，僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對(duì)人體有害的病原菌，而對(duì)被消毒的物體根本無(wú)害的措施。防腐(an

54、tisepsis)利用某種理化因素完全抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖，從而到達(dá)防止食品等發(fā)生質(zhì)變的措施主要?jiǎng)?chuàng)造低溫、缺氧、枯燥、高滲、高酸度的環(huán)境和添加防腐劑化療(chemotherapy)利用具有高度選擇毒力(對(duì)病原菌具有高度毒力而對(duì)宿主無(wú)顯著毒性)的化學(xué)物質(zhì)來(lái)抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)繁殖，從而治療該傳染病1.物理滅菌高溫滅菌原理：a 高溫能引起蛋白質(zhì)和核酸不可逆地變性失活 b 高溫能破壞細(xì)胞質(zhì)中其他活性物質(zhì) c 細(xì)胞膜被熱溶解而形成小孔使胞內(nèi)物質(zhì)泄漏致死濕熱滅菌效果比干熱滅菌好：1. 由于濕熱易于傳遞熱量，濕熱蒸汽的穿透力比干熱大 2. 濕熱易破壞保持蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的氫鍵等結(jié)構(gòu)，從而加速其變性高溫

55、滅菌的方法：干熱滅菌法灼燒是一種最徹底的干熱滅菌方法，但它只能用于接種環(huán)、接種針等少數(shù)對(duì)象的滅菌。濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效2.化學(xué)殺菌或抑菌外表消毒劑對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性，不能用作微生物活細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)治療用藥劑。原理：當(dāng)其在極低濃度時(shí)，常常會(huì)對(duì)微生物的生命活動(dòng)起到刺激作用，隨著濃度逐漸增高，就相繼出現(xiàn)抑菌和殺菌作用，形成一個(gè)連續(xù)的作用譜抗代謝藥物原理：抗代謝藥物在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與微生物所必需的代謝物類似，以致能競(jìng)爭(zhēng)性地于特定酶結(jié)合，阻礙酶的功能發(fā)揮，干擾代謝的正常進(jìn)行?？股?、填寫下表殺菌方法使用溫度作用時(shí)間應(yīng)用舉例巴斯德消毒法608515s30min用于牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進(jìn)行高溫

56、滅菌的液體烘箱滅菌法160170常用玻璃器皿，金屬器皿及其它枯燥耐熱物品高壓滅菌鍋法1211520min適合一切培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌7、以下物品采用什么方法滅菌？說(shuō)明理由。培養(yǎng)基 玻璃器皿 室內(nèi)空氣 酶溶液培養(yǎng)基：高壓蒸汽滅菌法 時(shí)間短，滅菌效果好它可以殺滅所有的微生物, 包括最耐熱的細(xì)菌芽孢及其它休眠體。玻璃器皿：干熱滅菌法室內(nèi)空氣：紫外線滅菌酶溶液：8、青霉素的作用機(jī)理？細(xì)菌耐藥性機(jī)理是哪些?青霉素的作用機(jī)理：青霉素抑制肽聚糖的合成，因而細(xì)菌細(xì)胞膜合成受阻，是革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌變成僅由細(xì)胞膜包裹著的脆弱圓形細(xì)胞。細(xì)菌耐藥性機(jī)理：1.產(chǎn)生破壞藥物的酶，使有活性的藥物變成沒(méi)有作用的物質(zhì)2.

57、改變細(xì)胞膜透性，阻止藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)3.改變藥物作用的部位4.產(chǎn)生某種具有保護(hù)作用的物質(zhì)5.改變代謝途徑9、試舉例說(shuō)明日常生活中防腐、消毒和滅菌的實(shí)例，及其原理。 原理見上題5滅菌、消毒與防腐均為控制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法，但程度不同。舉例包括：發(fā)酵滅菌、醫(yī)學(xué)消毒和食品防腐。消毒劑殺死微生物的原理包括：1改變細(xì)胞膜的滲透性或損害細(xì)胞膜，影響正常的物質(zhì)交換，損傷細(xì)胞。2氧化作用，可使細(xì)胞物質(zhì)如酶氧化，使細(xì)胞物質(zhì)失去活性。3改變?cè)|(zhì)的膠體性質(zhì)，使菌體蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生沉淀、變性或凝固。八、微生物代謝1、發(fā)酵、有氧呼吸、無(wú)氧呼吸概念根據(jù)微生物進(jìn)行生物氧化時(shí)有無(wú)外界的最終電子受體，可以把微生物生物氧化分為

58、呼吸和發(fā)酵兩大類。發(fā)酵沒(méi)有任何外源的最終電子受體的生物氧化類型呼吸有外源的最終電子受體的生物氧化類型有氧呼吸又稱好氧呼吸(aerobic respiration)，是一種最普通又最重要的生物氧化或產(chǎn)能方式。特點(diǎn)：是底物脫下的氫經(jīng)完整的呼吸鏈respiratory chain，RC又稱電子傳遞鏈electron transport chain，ETC傳遞，最終被外源分子氧接受，產(chǎn)生了水并釋放出ATP形式的能量。這種遞氫和受氫都必須在有氧條件下完成的生物氧化作用，是一種高效產(chǎn)能方式。好氧和兼性厭氧微生物在有氧條件下進(jìn)行氧化的方式。無(wú)氧呼吸又稱厭氧呼吸(anaerobic respiration)，

59、指一類呼吸鏈末端的氫受體為O2以外的外源氧化物。這是一類在無(wú)氧條件下進(jìn)行的、產(chǎn)能效率較低的特殊呼吸。特點(diǎn)：底物脫氫后，經(jīng)局部呼吸鏈遞氫，最終由氧化態(tài)的無(wú)機(jī)物或有機(jī)物受氫，并完成氧化磷酸化產(chǎn)能反響。在無(wú)氧呼吸過(guò)程中，電子供體和電子受體之間也需要細(xì)胞色素等起傳遞作用并伴隨有磷酸化作用。厭氧和兼性厭氧微生物在無(wú)氧條件下營(yíng)無(wú)氧呼吸。發(fā)酵 發(fā)酵(fermentation)是指在無(wú)氧等外源氫受體的條件下，底物脫氫后所產(chǎn)生的復(fù)原力H未經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交某一內(nèi)源中間代謝物接受，以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類微生物氧化反響。特點(diǎn)：是以有機(jī)化合物作為電子供體被氧化和電子受體被復(fù)原，電子的傳遞不經(jīng)過(guò)細(xì)胞色素等中間

60、電子遞體，直接由電子供體交給電子受體，因此可以看作是分子內(nèi)的轉(zhuǎn)移。 這種氧化作用不徹底，最終形成復(fù)原性產(chǎn)物，只放出一局部化學(xué)能，而大局部能量仍貯存在復(fù)原性產(chǎn)物中。產(chǎn)能效率比：有氧呼吸無(wú)氧呼吸發(fā)酵2、酒精發(fā)酵的途徑、第一型、第二型發(fā)酵？經(jīng)典的異型乳酸發(fā)酵與雙歧桿菌異型發(fā)酵乳酸的異同？3、采用化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)解釋ATP產(chǎn)生機(jī)理。 化學(xué)滲透假說(shuō)的要點(diǎn)是：A線粒體內(nèi)膜的電子傳遞是一個(gè)質(zhì)子泵 B在電子傳遞鏈中，電子由高能狀態(tài)傳遞到低能狀態(tài)時(shí)釋放出來(lái)的能量，用于驅(qū)動(dòng)膜內(nèi)側(cè)的H+遷移到膜外側(cè)膜對(duì)H+是不通透的。這樣，在膜的內(nèi)側(cè)與外側(cè)就產(chǎn)生了跨膜質(zhì)子梯度pH和電位梯度 C在膜內(nèi)外勢(shì)能差pH和的驅(qū)動(dòng)下，膜外高能質(zhì)子