1、培養(yǎng)液種類(lèi)和濃度對(duì)草履蟲(chóng)個(gè)體及數(shù)量的影響摘要：實(shí)驗(yàn)選取玉米粒、奶粉、熟雞蛋黃、小麥和酵母5種材料配制成培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)草履蟲(chóng).同時(shí)觀察它們對(duì) 草履蟲(chóng)種群生長(zhǎng)的影響.結(jié)果顯示：玉米粒、奶粉、熟雞蛋黃培養(yǎng)液為草履蟲(chóng)理想培養(yǎng)液.配制3種理想材料的 不同波度梯度的培養(yǎng)液，探究適合草履蟲(chóng)生長(zhǎng)和繁殖的最適濃度.結(jié)果顯示：玉米粒培養(yǎng)液的最適濃度為每1 000 mL水中加10 20 g玉米粒；熟雞蛋黃培養(yǎng)液的最適濃度為每60 mL冷開(kāi)水中加入0. 1 0. 2 g熟雞蛋 黃；奶粉培養(yǎng)液的最適濃度為每1 000 mL水中加入12 g奶粉.這說(shuō)明培養(yǎng)液種類(lèi)和濃度對(duì)草履蟲(chóng)的生長(zhǎng) 和繁殖均有不同程度的影響.關(guān)鍵詞：培養(yǎng)液

2、；草履蟲(chóng)；數(shù)量；種群生長(zhǎng)；個(gè)體形態(tài)草履蟲(chóng)為原生動(dòng)物，纖毛綱，是原生動(dòng)物門(mén)的 代表生物，并且草履蟲(chóng)為單細(xì)胞生物，能夠自由生 活，個(gè)體比較大，容易培養(yǎng)，繁殖快，有3萬(wàn)多個(gè)基 因，是很多實(shí)驗(yàn)研究及動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要材 料口f.草履蟲(chóng)在許多研究領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，但由 于環(huán)境的破壞，水體的污染，野外采集越來(lái)越困難， 且野外采集的樣本中常有許多其他的生物，分 離并純化野外帶回的草履蟲(chóng)，并找出適合草履蟲(chóng)生 長(zhǎng)的培養(yǎng)液及其濃度，既有利于草履蟲(chóng)的大量培 養(yǎng)，也能夠降低成本，提高效率.本實(shí)驗(yàn)選用5種培 養(yǎng)液，旨在找出適合草履蟲(chóng)生活的最佳培養(yǎng)液及其 最合適濃度.1材料與方法1.1草履蟲(chóng)的采集在有機(jī)質(zhì)多的污水中，常有

3、許多草履蟲(chóng).野外 采集時(shí)，選擇水底部的泥土上有一層白膜的地方， 或者選擇有枯草的地方舀水采集Ef.采回后放一 夜，泥沙沉到燒杯底部，白膜在燒杯水面上，從白膜 處取材，在顯微鏡下可觀察到有大量草履蟲(chóng).1.2草履蟲(chóng)的分離取玻片放在顯微鏡的置物臺(tái)上，用干凈的小吸 管吸取牛肉汁（牛肉與水2:1煮熟），滴一滴在玻片 的左端，再取另一個(gè)吸管吸取液體，滴一滴在玻片 右端，兩滴液體相距23 cm.用牙簽從牛肉汁一 端引一條線，將兩滴液體連到一起逐煩.在顯微鏡下可以看到，牛肉汁會(huì)使草履蟲(chóng)產(chǎn)生 強(qiáng)烈反應(yīng)，根據(jù)其趨利避害的特性，草履蟲(chóng)會(huì)向著 牛肉汁的方向快速移動(dòng).而其他小生物反應(yīng)不敏 感，游動(dòng)很慢,不等那些其他生物

4、渡過(guò)溝線就用吸 水紙將溝線切斷5.將與其他小生物分離開(kāi)來(lái)的 草履蟲(chóng)接種到已配置好的蘆葦稈培養(yǎng)液中，對(duì)草履 蟲(chóng)進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，在室溫下培養(yǎng)78 d.1.3培養(yǎng)液的配制配制5種培養(yǎng)液寥，每種設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每試 管 5 mL.玉米粒培養(yǎng)液：10 g玉米粒加入到1 000 mL水中，煮沸20 min,然后進(jìn)行冷卻和過(guò)濾，最后 定容至1 000 mL并分裝.熟雞蛋黃培養(yǎng)液：0.2 g熟雞蛋黃加入到60 mL的冷開(kāi)水中，研磨并充分?jǐn)嚢?奶粉培養(yǎng)液：2.0 g奶粉加入到1 000 mL 水中，煮沸2 min,然后進(jìn)行冷卻和過(guò)濾，最后定容 至1 000 mL并分裝.小麥培養(yǎng)液：10 g小麥加入到1 000 mL

5、水 中，煮沸5 min,然后進(jìn)行冷卻和過(guò)濾，最后定容至 1 000 mL并分裝.酵母培養(yǎng)液：1 000 mL的冷開(kāi)水加1片酵 母，待其充分溶解以后分裝.1.4培養(yǎng)方法往盛有培養(yǎng)液的每個(gè)試管中用毛細(xì)吸管接種 10只草履蟲(chóng)，用蓬松的棉花給試管封口，既可以 防止草履蟲(chóng)被原生生物污染，也能夠使細(xì)菌進(jìn)入試 管中，在25笆的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)草履蟲(chóng)，每天定 時(shí)取樣計(jì)數(shù)口嘰1. 5計(jì)數(shù)方法滴一滴培養(yǎng)液在玻片上，在液滴內(nèi)放一些棉 絮，阻礙草履蟲(chóng)的運(yùn)動(dòng)，便于對(duì)草履蟲(chóng)進(jìn)行觀察計(jì) 數(shù)1.6 3種培養(yǎng)液不同濃度梯度的配制配制玉米粒、奶粉和熟雞蛋黃3種不同濃度梯 度的培養(yǎng)液寥此，每種設(shè)置3個(gè)重復(fù).玉米粒培養(yǎng)液：分別取5,

6、10,20,40,80 g玉 米粒加入1 000 mL水中，煮沸15 min,冷卻、過(guò)濾 后定容至1 000 mL.奶粉培養(yǎng)液：分別取0.5,1,2,4,8 g奶粉加 入1 000 mL水中，煮沸2 min,冷卻、過(guò)濾后定容 至 1 000 mL.熟雞蛋黃培養(yǎng)液：分別取0. 05,0. 1,0. 2, 0. 4,0. 8 g熟雞蛋黃加入60 mL冷開(kāi)水中，充分?jǐn)?拌.2結(jié)果與分析2.1培養(yǎng)液的選擇通過(guò)觀察分析以及計(jì)數(shù),可以發(fā)現(xiàn)熟雞蛋黃培 養(yǎng)液和奶粉培養(yǎng)液的培養(yǎng)效果最好，玉米粒培養(yǎng)液 的培養(yǎng)效果也較好，而酵母培養(yǎng)液和小麥培養(yǎng)液培 養(yǎng)草履蟲(chóng)的效果最差，5種培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)的具體 統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1 ；由

7、于酵母培養(yǎng)液和小麥培養(yǎng)液不 適合草履蟲(chóng)生長(zhǎng)繁殖，因此只觀察其他3種培養(yǎng)液 中草履蟲(chóng)的種群形態(tài)，其結(jié)果如表2.結(jié)合表1和表2可以知道，酵母培養(yǎng)液中草履 蟲(chóng)壽命太短，小麥培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)高峰時(shí)數(shù)量較 少，都不適合草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖.熟雞蛋黃、玉 米粒和奶粉都是生活中常見(jiàn)的材料，用熟雞蛋黃培 養(yǎng)液、玉米粒培養(yǎng)液以及奶粉培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)草履蟲(chóng) 都是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的選擇.在玉米粒培養(yǎng)液中，草履 蟲(chóng)達(dá)到高峰時(shí)所用時(shí)間是最短的，如果需要在短期 內(nèi)培養(yǎng)非常多的草履蟲(chóng)，最好選用玉米粒培養(yǎng)液; 如果要求在一段較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)都有草履蟲(chóng)可以觀 察，最好選用奶粉培養(yǎng)液和熟雞蛋黃培養(yǎng)液，因?yàn)?在這2種培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)可以存活很久.此外，

8、玉 米粒培養(yǎng)液中能夠培養(yǎng)出蟲(chóng)體大、結(jié)構(gòu)特征明顯的 草履蟲(chóng)，且密度適中，種群增長(zhǎng)快，這種培養(yǎng)液比較 適合應(yīng)用于大規(guī)模培養(yǎng)以及對(duì)草履蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn) 行觀察的研究;奶粉培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)密度大，適合 用于分子進(jìn)化生物學(xué)和分子遺傳學(xué)等要求蟲(chóng)體密 度大的研究領(lǐng)域.但是，奶粉培養(yǎng)液培養(yǎng)不適合用 作生理實(shí)驗(yàn)，因?yàn)槟谭壑械柠}等物質(zhì)會(huì)對(duì)細(xì)胞的生 理活動(dòng)產(chǎn)生影響逐；用熟雞蛋黃培養(yǎng)的草履蟲(chóng)中 有許多顆粒物質(zhì)，在顯微鏡下內(nèi)部結(jié)構(gòu)不清晰，因 此，最好在實(shí)驗(yàn)一周前轉(zhuǎn)入到其他培養(yǎng)液中進(jìn)行培 養(yǎng)，以使實(shí)驗(yàn)效果更加理想.表1 5種培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)達(dá)到高峰時(shí)的 時(shí)間、數(shù)量及全部死亡所需時(shí)間培養(yǎng)液達(dá)到高峰時(shí) 所需時(shí)間/d達(dá)到高峰時(shí)數(shù)量/個(gè)

9、全部死亡所需時(shí)間/d熟雞蛋黃培養(yǎng)液2586058奶粉培養(yǎng)液2072148玉米粒培養(yǎng)液757636酵母培養(yǎng)液1410419小麥培養(yǎng)液914230表2 3種理想培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)數(shù)量達(dá)到高峰時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)培養(yǎng)液草履蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)熟雞蛋黃培養(yǎng)液蟲(chóng)體內(nèi)有較多顆粒，內(nèi)部結(jié)構(gòu)不明顯奶粉培養(yǎng)液種群密度大,個(gè)體形態(tài)適中玉米培養(yǎng)液蟲(chóng)體大，結(jié)構(gòu)明顯2.2 3種培養(yǎng)液不同濃度對(duì)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)和繁殖的 影響玉米粒、奶粉和熟雞蛋黃3種材料配制而成的 培養(yǎng)液，是草履蟲(chóng)最適合的培養(yǎng)液，配制其不同濃 度的培養(yǎng)液，在相同的條件下培養(yǎng)草履蟲(chóng)并計(jì)數(shù)統(tǒng) 計(jì)，來(lái)探究培養(yǎng)液不同濃度對(duì)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)、繁殖的 影響.其結(jié)果如圖1、圖2和圖3.由圖1可以看出，

10、在60 mL冷開(kāi)水中分別加 入0.1 g和0.2 g熟雞蛋黃配制而成的培養(yǎng)液中， 草履蟲(chóng)達(dá)到高峰時(shí)的種群密度分別是610個(gè)/mL 和860個(gè)/mL,而其他濃度的種群密度在340個(gè)/ mL以下，由此可以看出，適合草履蟲(chóng)生長(zhǎng)和繁殖 的熟雞蛋黃的濃度為每60 mL冷開(kāi)水中加入0. 1 0, 2 g熟雞蛋黃；當(dāng)濃度為每60 mL冷開(kāi)水中的 熟雞蛋黃小于0. 1 g或大于0. 2 g時(shí)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)和 繁殖的速度減慢；當(dāng)每60 mL冷開(kāi)水中加入0. 8 g 熟雞蛋黃時(shí)，草履蟲(chóng)的數(shù)量為0,可能是這種濃度 的熟雞蛋黃培養(yǎng)液不能長(zhǎng)期存放，短時(shí)間內(nèi)就會(huì)腐 敗、變質(zhì).由此可知，熟雞蛋黃的不同濃度會(huì)對(duì)草履奶椅培養(yǎng)液旅度

11、/ 圖2不同濃度的奶粉培養(yǎng)液中高峰時(shí)草履蟲(chóng)的數(shù)量從圖2中的數(shù)據(jù)可以得知，草履蟲(chóng)在不同濃度 的奶粉培養(yǎng)液中生長(zhǎng)良好,其數(shù)量分別是642個(gè)/ mL和721個(gè)/mL；當(dāng)濃度小于1%。時(shí)，草履蟲(chóng)的數(shù) 量不到300個(gè)/mL,生長(zhǎng)繁殖速度明顯下降了，可 能的原因是，培養(yǎng)液中奶粉含量太少，產(chǎn)生的細(xì)菌 數(shù)量較少，草履蟲(chóng)的食物不充足；而在濃度大于 2%。的時(shí)候，草履蟲(chóng)生長(zhǎng)緩慢，甚至不能生長(zhǎng)，說(shuō)明 2%。的濃度也不適合草履蟲(chóng)生活.從圖3中的數(shù)據(jù)可以得知，當(dāng)在1 000 mL水 中分別加入10. 0g和20. 0g的玉米粒時(shí)，草履蟲(chóng)的 生長(zhǎng)和繁殖速度較快，數(shù)量分別為576個(gè)/mL和 413個(gè)/mL；當(dāng)濃度小于1.

12、0% ,草履蟲(chóng)的繁殖速度 明顯減緩，原因可能是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較少，細(xì)菌數(shù)量產(chǎn) 生較少，草履蟲(chóng)不能夠快速繁殖；當(dāng)濃度大于 2. 0%時(shí),草履蟲(chóng)繁殖速度也變慢了；當(dāng)濃度達(dá)到每 1 000 mL水中含有80. 0 g玉米粒時(shí)，草履蟲(chóng)的數(shù) 量為。.其原因可能是高滲作用導(dǎo)致細(xì)胞失水，細(xì) 胞失水過(guò)多，草履蟲(chóng)萎縮死亡，這與房英春等羽研 究結(jié)果相似.We表米一粒埃藻潦治虬史）圖3不同濃度的玉米粒培養(yǎng)液中高峰時(shí)草履蟲(chóng)的數(shù)量3討論本次實(shí)驗(yàn)所選用的5種材料，并不是所有的都 適合用來(lái)培養(yǎng)草履蟲(chóng).其中小麥和酵母不是配制培 養(yǎng)液的理想材料.每60 mL冷開(kāi)水加入0. 1-0. 2 g熟雞蛋黃制成的熟雞蛋黃培養(yǎng)液最適合草履蟲(chóng) 生

13、長(zhǎng),奶粉培養(yǎng)液的最適濃度為每1 000 mL水中 加入1.02.0 g的奶粉，玉米粒培養(yǎng)液的最適濃 度為1. 0%2. 0%.濃度太高或者太低都不適合 草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖.濃度過(guò)低營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)少，不利 于細(xì)菌的生長(zhǎng)與繁殖，會(huì)使草履蟲(chóng)養(yǎng)分得不到及時(shí) 供應(yīng)；而當(dāng)培養(yǎng)液的濃度過(guò)高時(shí)有的會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液 （熟雞蛋黃）腐敗、變質(zhì)，進(jìn)而影響草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)和 繁殖,最終導(dǎo)致草履蟲(chóng)全部死亡；有的則會(huì)由于高 滲作用，導(dǎo)致細(xì)胞萎縮、死亡.本次實(shí)驗(yàn)中，草履蟲(chóng)在不同培養(yǎng)液中的種群形 態(tài)表現(xiàn)為玉米粒培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)種群密度達(dá)到高 峰的速度較快，草履蟲(chóng)從開(kāi)始培養(yǎng)到全部死亡所需 時(shí)間為一個(gè)月左右，持續(xù)時(shí)間也較長(zhǎng).此外，玉米粒 培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)具有蟲(chóng)體大，結(jié)構(gòu)特征明顯等特 征，適合大規(guī)模培養(yǎng)以及草履蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察；奶 粉培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)的特點(diǎn)為密度大、形態(tài)適中、存 活時(shí)間長(zhǎng)（一個(gè)多月左右），既可以用作長(zhǎng)時(shí)間觀 察，也適用于要求種群密度大的分子進(jìn)化生物學(xué)和 分子遺傳學(xué)研究.但是，用奶粉培養(yǎng)液培養(yǎng)出的草 履蟲(chóng)不適合做生理實(shí)驗(yàn)，因?yàn)槟?/p>