APC藥片的薄層剖析

實(shí)驗(yàn)報(bào)告班級(jí)：應(yīng)131-1組別：第七組姓名：APC藥片的薄層剖析一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)薄層色譜的原理和技術(shù)學(xué)會(huì)制備簡(jiǎn)易的薄層色譜掌握薄層色譜的操作技術(shù)學(xué)會(huì)利用薄層色譜技術(shù)對(duì)APC的定性分析學(xué)會(huì)吸附劑、溶劑、展開(kāi)劑的選擇二、 實(shí)驗(yàn)原理薄層層析（亦稱(chēng)薄板層析，簡(jiǎn)稱(chēng)TLC）是柱層析的一種特殊形式。即一種吸附薄層色譜分離法，它利用各成分對(duì)同一吸附劑吸附能力不同，使在移動(dòng)相（溶劑）流過(guò)固定相（吸附劑）的過(guò)程中，連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，由于各種化合物的吸附能力各不相同，在展開(kāi)劑上移時(shí)，它們進(jìn)行不同程度的解吸，從而達(dá)到各成分的互相分離的目的。若與作為標(biāo)準(zhǔn)的化合物在層析薄板上一起展開(kāi)，則可以根據(jù)這些已知化合物的Rf值對(duì)各斑點(diǎn)的組分進(jìn)行鑒定，一個(gè)化合物在薄層板上上升的高度與展開(kāi)劑上升的高度的比值稱(chēng)為該化合物的R值：R=化合物移動(dòng)的距離/展開(kāi)劑前沿移動(dòng)的距離ffR表示物質(zhì)移動(dòng)的相對(duì)距離，在條件固定的情況下，R對(duì)每一種化合物來(lái)說(shuō)是一個(gè)特ff定數(shù)值。R值的大小與展開(kāi)劑的極性有很大關(guān)系,展開(kāi)劑的極性越大，洗脫能力越強(qiáng)，Rff值越大。當(dāng)測(cè)量條件全部規(guī)定好后，任何一種穩(wěn)定化合物的R值是個(gè)常數(shù),而且它相當(dāng)于f該化合物的一個(gè)物理性質(zhì)。APC稱(chēng)復(fù)方阿斯匹林,又稱(chēng)復(fù)方乙酰水楊酸,是最常用的熱鎮(zhèn)痛藥。其組分是阿司匹林、乙酰苯胺、咖啡因。本實(shí)驗(yàn)采用的方法是對(duì)APC的三組分進(jìn)行展開(kāi)比較，即在一塊板上同時(shí)將已知的標(biāo)準(zhǔn)樣和樣品一起展開(kāi)，組分在薄層板上分離后，可以利用支持劑中加入的物質(zhì)發(fā)熒光的性質(zhì)，在紫外燈下使有組分的地方出現(xiàn)暗斑，用斑點(diǎn)中心到起點(diǎn)的距離以及展開(kāi)劑終點(diǎn)線到起點(diǎn)的距離計(jì)算R值，以確定是否為同一化合物。三、 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器f實(shí)驗(yàn)儀器：載玻片5個(gè)、點(diǎn)樣用毛細(xì)管，紫外熒光燈，鉛筆吹風(fēng)機(jī)、玻璃棒、鑷子，10ml小燒杯，150ml錐形瓶，廣口瓶，分液漏斗，表面皿，直尺。實(shí)驗(yàn)藥品：阿司匹林藥片一片、咖啡因純?cè)噭?、阿司匹林純?cè)噭⒁阴１桨芳冊(cè)噭?，硅膠GF254粉、1%的羧甲基纖維素鈉的水溶液，無(wú)水MgSO，CHCl4 2 2四、 實(shí)驗(yàn)步驟1?調(diào)漿鋪板：稱(chēng)取3g硅膠GH254于100ml的小燒杯中，加入9.6m慢加入1%的羧甲基纖維素鈉水溶液，用玻璃棒快速充分?jǐn)嚢璩珊隣睿瑢⑵渚鶆虻乖谳d玻片上，利用手的震蕩使糊狀物在載玻片上分布均勻。2?干燥與活化：將均勻制備好的板放在平整表面，自然晾干。將其放入110°C的烘箱中烘烤30min,稍冷，取出。（水分對(duì)活性的影響很大，須嚴(yán)格控制層析板的干燥與活化條件，且最好放置在24h以上后再放入烘箱中活化。）樣品液的準(zhǔn)備：將一片APC藥片用紙包碾碎轉(zhuǎn)移至100ml的小燒杯中，加入10ml的水充分?jǐn)嚢枞芙猓o置，將上層液體傾至分液漏斗中，加入5ml的二氯甲烷，充分?jǐn)嚢?，有機(jī)層分至干燥的錐形瓶中，加入少量的無(wú)水MgSO/蓋表面皿，備用。4?點(diǎn)樣：在層析板下端1.0cm處，（用鉛筆輕輕在層析板下端兩側(cè)化一起始線，并在點(diǎn)樣出用鉛筆作一記號(hào)為原點(diǎn)。）取拉好的毛細(xì)點(diǎn)樣管，分別蘸取APC藥片溶液、阿司匹林純樣品，點(diǎn)于原點(diǎn)上（左邊點(diǎn)藥片溶液，右端點(diǎn)純?cè)噭ㄗ⒁恻c(diǎn)樣用的毛細(xì)管不能混用，毛細(xì)管不能將薄層板表面弄破，樣品斑點(diǎn)直徑在1到2mm為宜）另取兩塊薄層板，分別點(diǎn)APC藥片溶液和咖啡因純?cè)噭悠泛虯PC藥片溶液與乙酰苯胺純?cè)噭Ｈ」芸谄秸拿?xì)管，于畫(huà)線處輕輕點(diǎn)樣（毛細(xì)管剛接觸薄板即可）。樣點(diǎn)間距1—1.5cm，斑點(diǎn)一般不超過(guò)2mm（注：因溶液太稀或樣點(diǎn)太小，可重復(fù)點(diǎn)樣。但應(yīng)在前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后，以防樣點(diǎn)被溶解掉。樣點(diǎn)過(guò)大，造成拖尾，擴(kuò)散等現(xiàn)象，影響分離效果）。用吹風(fēng)機(jī)吹干。5?展開(kāi)：取5ml的展開(kāi)劑（苯：乙醚：冰醋酸：甲醇=120:60:18:1混合溶劑）倒入廣口瓶（展開(kāi)缸用250ml廣口瓶代替，使用前須洗凈烘干）中，展開(kāi)劑液體深度在0.5cm左右即可，蓋好玻璃蓋，提前使缸內(nèi)達(dá)到蒸汽壓飽和。將點(diǎn)好樣品的層析板放于展開(kāi)瓶中，立即蓋上瓶塞，（薄層色譜的展開(kāi)，須在密閉容器中進(jìn)行），觀察展開(kāi)劑上升及樣品點(diǎn)情況。在展開(kāi)劑前沿距離層析板上沿1cm時(shí)將層析板取出，立即標(biāo)記前沿，用吹風(fēng)機(jī)吹干。6?顯色與定位：將烘干的層析板放入254nm紫外燈下觀察，可清晰地看出樣品展開(kāi)后的斑點(diǎn)，用鉛筆標(biāo)注（范圍，濃度中心點(diǎn)），后根據(jù)所測(cè)得數(shù)據(jù)求出R值，由R及已知樣ff品的R值分析APC藥片中的主要成分可能時(shí)什么化合物。f7.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將廢硅膠刮至垃圾袋，板洗干凈后送回原處。五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)調(diào)成均勻糊狀過(guò)程中動(dòng)作要快，調(diào)漿不宜過(guò)干或者過(guò)稀。過(guò)稀，水分蒸發(fā)后，板表面較粗糙,制板不均勻；過(guò)稠，板容易出現(xiàn)拖動(dòng)或停頓造成的層紋。鋪板的厚度要均勻，否則影響分離效果。干燥活化時(shí)，水分對(duì)活性的影響很大，必須嚴(yán)格控制層析板的干燥與活化條件。用于萃取劑的二氯甲烷最好不要提前取好，因?yàn)槠錇榈头悬c(diǎn)物，對(duì)人體有害。保證萃取條件的無(wú)水性，量取二氯甲烷的小量筒和盛放有機(jī)層的錐形瓶必須干燥無(wú)水，干燥劑無(wú)水硫酸鎂不能提前取，以防其吸收空氣中水影響其干燥效果。點(diǎn)樣用的毛細(xì)管必須專(zhuān)用，不得混用，否則有交叉污染。點(diǎn)樣時(shí)點(diǎn)樣要輕，否則固定相會(huì)粘到點(diǎn)樣管下方,切勿點(diǎn)樣過(guò)重而使薄層破壞。7?樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大，點(diǎn)樣斑點(diǎn)擴(kuò)散大。若樣品濃度太稀時(shí)，需重復(fù)點(diǎn)樣，而且要待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重點(diǎn)，以防樣點(diǎn)過(guò)大，造成拖尾、擴(kuò)散等現(xiàn)象，影響分離效果。8?樣品點(diǎn)直徑應(yīng)不超過(guò)2mm，距離薄層板底部約1cm，樣品點(diǎn)之間間距約1?1.5cm,注意樣品點(diǎn)決不能浸到展開(kāi)劑中且展開(kāi)劑一定要在點(diǎn)樣線以下。9?展開(kāi)劑離薄層板上緣約1cm時(shí)應(yīng)停止走板，取出用吹風(fēng)機(jī)吹干。不可使展開(kāi)劑走到板的盡頭，板取出后要及時(shí)標(biāo)記展開(kāi)劑前沿，否則展開(kāi)劑揮發(fā)后難以確定。10?觀察斑點(diǎn)時(shí)，要同時(shí)描出斑點(diǎn)形狀，以便于確定斑點(diǎn)中心。11.實(shí)驗(yàn)完成后要根據(jù)薄板斑點(diǎn)位置繪出圖形，不可人為改變斑點(diǎn)位置及形狀，保證實(shí)驗(yàn)的真實(shí)性。六、數(shù)據(jù)處理（圖見(jiàn)附頁(yè)）藥物組分A乙酰苯胺R=d/dB咖啡因R=d/dC乙酰水楊R=d/dd=5.30f id=5.00fi i酸d=5.20f id11.600.301.500.301.700.33d23.100.582.800.563.100.60d34.200.793.710.744.150.80dA3.200.601.300.264.100.79計(jì)算過(guò)程如下所示：A中R二d/d=1.60/5.30=0.30f11R=d/d=3.10/5.30=0.58f22R=d/d=4.20/5.30=0.79f33R=d/d=3.20/5.30=0.60（乙酰苯胺標(biāo)準(zhǔn)液）f44樣品于標(biāo)準(zhǔn)液的相對(duì)誤差為：（R-R）/R=（0.60-0.58）/0.60*100%=3.33%f4f2f4結(jié)論：APC藥片組成中可能含有乙酰苯胺。B中R=d/d=1.50/5.00=0.30f11R=d/d=2.80/5.00=0.56f22R=d/d=3.71/5.00=0.74f33R=d/d=1.30/5.00=0.26（咖啡因標(biāo)準(zhǔn)液）樣品于標(biāo)準(zhǔn)液的相對(duì)誤差為：（Rf-R4）/R4=（0.30-0.26）/0.26*100%=15.38%結(jié)論：APC藥片組成中可能含有咖啡因C中R=d/d=1.70/5.20=0.33f11R=d/d=3.10/5.20=0.60f22R=d/d=4.15/5.20=0.80f33R=d/d=4.10/5.20=0.79（乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)液）f44樣品于標(biāo)準(zhǔn)液的相對(duì)誤差為：(R-R)/R=(0.80-0.79)/0.79*100%=1.27%f3f4f4結(jié)論：APC藥片組成中可能含有乙酰水楊酸。六結(jié)果與討論經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理可以看出，藥物組分中都有與標(biāo)準(zhǔn)試樣相近的R值，可見(jiàn)APC中含有乙f酰苯胺、咖啡因、乙酰水楊酸成分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)藥品中相關(guān)成分的R值和標(biāo)準(zhǔn)試樣的fR值并不完全一致，而R值應(yīng)該是常數(shù)，導(dǎo)致這種情可能有如下幾個(gè)原因：ff調(diào)漿過(guò)程中沒(méi)有攪拌均勻，阻礙其向前