蛋白質(zhì)總結(jié)氨基酸蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)構(gòu)和三維結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)的分離、純化和表征重要實(shí)驗(yàn)生工081班蛋白質(zhì)總結(jié)氨基酸生工081班蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與相關(guān)功能1.肌紅蛋白2.紅蛋白3.免疫球蛋白4.輔基血紅素（可與氧、一氧化碳、氫離子結(jié)合）5.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系：取決于以一級(jí)結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象

a.一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一級(jí)結(jié)構(gòu)的變異與分子?。ㄧ牭稜罴?xì)胞貧血病）一級(jí)結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化（細(xì)胞色素）b.空間結(jié)構(gòu)與生物功能——蛋白質(zhì)的變構(gòu)現(xiàn)象（血紅蛋白）6.血紅蛋白與肌紅蛋白的比較蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與相關(guān)功能1.肌紅蛋白膠原蛋白（膠原）膠原蛋白類型：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、·····Ⅶ。屬結(jié)構(gòu)糖蛋白。每股肽鏈為左手螺旋，多由Gly-Pro-Y序列重復(fù)而成，含三種不常見的氨基酸（5－羥賴氨酸、4－羥脯氨酸和3－羥脯氨酸）肌球蛋白（掌握結(jié)構(gòu)）由兩條相同的重鏈和兩對(duì)不同的輕鏈組成。頭部有ATP結(jié)合位點(diǎn)（具ATP酶活性）和肌動(dòng)蛋白結(jié)合位點(diǎn)。裝配成骨骼肌的粗絲。肌動(dòng)蛋白：球狀單體，組成骨骼肌的細(xì)絲膠原蛋白（膠原）膠原蛋白類型：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、·····Ⅶ。屬結(jié)三維結(jié)構(gòu)輔基血紅素（與氧結(jié)合部位）氨基酸殘基數(shù)與氧結(jié)合構(gòu)象改變與氧親和力與氧結(jié)合曲線肌紅蛋白一條多肽鏈1個(gè)153Fe(II)原子以第六個(gè)配價(jià)鍵與氧進(jìn)行可逆氧合作用鐵卟啉位移呈圓頂狀平面狀大血紅蛋白4個(gè)多肽亞基4個(gè)α2(141)β2(146)Fe(II)原子以第六個(gè)配價(jià)鍵與氧進(jìn)行可逆氧合作用去氧血紅蛋白（T態(tài)）和氧合血紅蛋白（R態(tài)）小K三維結(jié)構(gòu)輔基血紅素（與氧結(jié)合部位）氨基酸殘基數(shù)與氧結(jié)合構(gòu)象改蛋白質(zhì)的性質(zhì)和分離、純化

1、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)

等電點(diǎn)與它所含的酸堿氨基酸數(shù)目比例有關(guān)等離子點(diǎn)蛋白質(zhì)的一個(gè)特征常數(shù)2蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)維持蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)穩(wěn)定的因素（3點(diǎn)）3蛋白質(zhì)沉淀的方法等電點(diǎn)沉淀法（ 可逆、不變性)

鹽析法 （可逆、不變性） 有機(jī)溶劑沉淀法（可逆或不可逆） 重金屬鹽沉淀法 （變性） 生物堿試劑 （變性） 加熱沉淀法（變性）強(qiáng)酸堿沉淀（不可逆）4蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性（溫和條件、變性因素、常用變性劑）蛋白質(zhì)的性質(zhì)和分離、純化1、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì) 5蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)5蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)6、蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定

a.根據(jù)化學(xué)組成測(cè)定最低相對(duì)分子質(zhì)量b.滲透壓法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量c.沉降分析法（超速離心法）d.※凝膠過濾法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量（分子篩層析）此法比較簡(jiǎn)單，不要求復(fù)雜的儀器，就能精確地測(cè)出Mre.※SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量6、蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定a.根據(jù)化學(xué)組成測(cè)定最低相對(duì)根據(jù)分子大小不同的方法 透析和超過濾利用溶解度差別的純化方法（實(shí)踐最常用的方法a鹽析b有機(jī)溶劑分級(jí)分離）根據(jù)電荷不同的純化方法（PAGE、醋酸纖維素薄膜電泳、離子交換層析）利用選擇性吸附的純化方法利用對(duì)配體的特異生物學(xué)親和層析:一步處理即親和力的純化方法可分離所需蛋白質(zhì)，純度很高

7蛋分離純化白質(zhì)的根據(jù)分子大小不同的方法 透析和超過濾7蛋分離純化白質(zhì)的（一）蛋白質(zhì)的含量測(cè)定①凱氏定氮法②雙縮尿法③

Folin-酚試劑法④紫外吸收法⑤考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法靈敏度高，重復(fù)好⑥膠體金測(cè)定法 靈敏度最高（二）蛋白質(zhì)的純度測(cè)定電泳、沉降、HPLC和溶解度分析等。8蛋白質(zhì)的含量測(cè)定和純度鑒定（一）蛋白質(zhì)的含量測(cè)定8蛋白質(zhì)的含量測(cè)定和純度鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)部分氨基酸紙層析考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)部分氨基酸紙層析氨基酸紙層析重點(diǎn)：氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)難點(diǎn)：紙層析法的基本原理溶劑前層析點(diǎn)原點(diǎn)溶劑前沿亮苯丙纈脯賴氨基酸紙層析重點(diǎn)：氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)溶劑前層相對(duì)遷移率Rf=X/Y

相對(duì)遷移率Rf=X/Y考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度重點(diǎn)：考馬斯亮藍(lán)法定量測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理和方法考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度重點(diǎn)：考馬斯亮藍(lán)法定量實(shí)驗(yàn)原理考馬斯亮藍(lán)能與蛋白質(zhì)的疏水微區(qū)相結(jié)合，這種結(jié)合具有高敏感性?？捡R斯亮藍(lán)G250的磷酸溶液呈棕紅色，最大吸收峰在465nm。當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物時(shí)呈藍(lán)色，其最大吸收峰改變?yōu)?95nm，考馬斯亮藍(lán)G250－蛋白質(zhì)復(fù)合物的高消光效應(yīng)導(dǎo)致了蛋白質(zhì)定量測(cè)定的高敏度。在一定范圍內(nèi)，考馬斯亮藍(lán)G250－蛋白質(zhì)復(fù)合物呈色后，在595nm下，吸光度與蛋白質(zhì)含量呈線性關(guān)系，其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無關(guān)，因此被廣泛地應(yīng)用。CoomassiebrilliantblueG-250在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，未知樣品的溶液與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液同時(shí)反應(yīng)，并于595nm下比色，可以通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線求出未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。實(shí)驗(yàn)原理考馬斯亮藍(lán)能與蛋白質(zhì)的疏水微區(qū)相結(jié)合，這種結(jié)合具有高SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量重點(diǎn)掌握：實(shí)驗(yàn)原理、整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的設(shè)計(jì)與操作，如標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的選擇、分離膠與濃縮膠濃度的確定與制備、灌膠、樣品的處理、上樣量及方法的選擇。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量重點(diǎn)掌握：電泳過程中有3種物理效應(yīng)：樣品的濃度效應(yīng)；對(duì)被分離分子的篩選效應(yīng)；電荷效應(yīng)。遷移率大?。悍肿哟笮》肿有螤顑綦姾桑ê少|(zhì)比）電泳過程中有3種物理效應(yīng)：測(cè)定方法用幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值對(duì)它們的遷移率作圖。測(cè)出待測(cè)樣品的遷移率。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品的相對(duì)分子質(zhì)量。測(cè)定方法測(cè)定方法用幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值對(duì)它們的遷移率作謝謝謝謝蛋白質(zhì)總結(jié)課件蛋白質(zhì)總結(jié)課件愛是什么？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓?！?/p>

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了?！?/p>

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子。”

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能。”

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能?！睈凼鞘裁?？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛。”

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓?！?/p>

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了。”

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水。”

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子。”

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能。”

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能?！睈凼鞘裁矗?/p>

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

愛是什么？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓。”

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了?！?/p>

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子?！?/p>

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能。”

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能?！睈凼鞘裁矗?/p>

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓。”

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了?！?/p>

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子。”

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能。”

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能?！睈凼鞘裁?？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

其實(shí)，世上最溫暖的語言，“不是我愛你，而是在一起?！?/p>

所以懂得才是最美的相遇！只有彼此以誠(chéng)相待，彼此尊重，相互包容，相互懂得，才能走的更遠(yuǎn)。相遇是緣，相守是愛。緣是多么的妙不可言，而懂得又是多么的難能可貴。否則就會(huì)錯(cuò)過一時(shí)，錯(cuò)過一世！擇一人深愛，陪一人到老。一路相扶相持，一路心手相牽，一路笑對(duì)風(fēng)雨。在平凡的世界，不求愛的轟轟烈烈；不求誓言多么美麗；唯愿簡(jiǎn)單的相處，真心地付出，平淡地相守，才不負(fù)最美的人生；不負(fù)善良的自己。人海茫茫，不求人人都能刻骨銘心，但求對(duì)人對(duì)己?jiǎn)栃臒o愧，無怨無悔足矣。大千世界，與萬千人中遇見，只是相識(shí)的開始，只有彼此真心付出，以心交心，以情換情，相知相惜，才能相伴美好的一生，一路同行。然而，生活不僅是詩(shī)和遠(yuǎn)方，更要面對(duì)現(xiàn)實(shí)。如果曾經(jīng)的擁有，不能天長(zhǎng)地久，那么就要學(xué)會(huì)華麗地轉(zhuǎn)身，學(xué)會(huì)忘記。忘記該忘記的人，忘記該忘記的事兒，忘記苦樂年華的悲喜交集。人有悲歡離合，月有陰晴圓缺。對(duì)于離開的人，不必折磨自己脆弱的生命，虛度了美好的朝夕；不必讓心靈痛苦不堪，弄丟了快樂的自己。擦汗眼淚，告訴自己，日子還得繼續(xù)，誰都不是誰的唯一，相信最美的風(fēng)景一直在路上。人生，就是一場(chǎng)修行。你路過我，我忘記你；你有情，他無意。誰都希望在正確的時(shí)間遇見對(duì)的人，然而事與愿違時(shí)，你越渴望的東西，也許越是無情無義地棄你而去。所以美好的愿望，就會(huì)像肥皂泡一樣破滅，只能在錯(cuò)誤的時(shí)間遇到錯(cuò)的人。歲月匆匆像一陣風(fēng)，有多少故事留下感動(dòng)。愿曾經(jīng)的相遇，無論是錦上添花，還是追悔莫及；無論是青澀年華的懵懂賞識(shí)，還是成長(zhǎng)歲月無法躲避的經(jīng)歷……愿曾經(jīng)的過往，依然如花芬芳四溢，永遠(yuǎn)無悔歲月賜予的美好相遇。其實(shí)，人生之路的每一段相遇，都是一筆財(cái)富，尤其親情、友情和愛情。在漫長(zhǎng)的旅途上，他們都會(huì)豐富你的生命，使你的生命更充實(shí)，更真實(shí)；豐盈你的內(nèi)心，使你的內(nèi)心更慈悲，更善良。所以生活的美好，緣于一顆善良的心，愿我們都能善待自己和他人。一路走來，愿相親相愛的人，相濡以沫，同甘共苦，百年好合。愿有情有意的人，不離不棄，相惜相守，共度人生的每一個(gè)朝夕……直到老得哪也去不了，依然是彼此手心里的寶，感恩一路有你！其實(shí)，世上最溫暖的語言，“不是我愛你，而是在一起。”

蛋白質(zhì)總結(jié)課件蛋白質(zhì)總結(jié)氨基酸蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)構(gòu)和三維結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)的分離、純化和表征重要實(shí)驗(yàn)生工081班蛋白質(zhì)總結(jié)氨基酸生工081班蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與相關(guān)功能1.肌紅蛋白2.紅蛋白3.免疫球蛋白4.輔基血紅素（可與氧、一氧化碳、氫離子結(jié)合）5.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系：取決于以一級(jí)結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象

a.一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一級(jí)結(jié)構(gòu)的變異與分子病（鐮刀狀細(xì)胞貧血?。┮患?jí)結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化（細(xì)胞色素）b.空間結(jié)構(gòu)與生物功能——蛋白質(zhì)的變構(gòu)現(xiàn)象（血紅蛋白）6.血紅蛋白與肌紅蛋白的比較蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與相關(guān)功能1.肌紅蛋白膠原蛋白（膠原）膠原蛋白類型：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、·····Ⅶ。屬結(jié)構(gòu)糖蛋白。每股肽鏈為左手螺旋，多由Gly-Pro-Y序列重復(fù)而成，含三種不常見的氨基酸（5－羥賴氨酸、4－羥脯氨酸和3－羥脯氨酸）肌球蛋白（掌握結(jié)構(gòu)）由兩條相同的重鏈和兩對(duì)不同的輕鏈組成。頭部有ATP結(jié)合位點(diǎn)（具ATP酶活性）和肌動(dòng)蛋白結(jié)合位點(diǎn)。裝配成骨骼肌的粗絲。肌動(dòng)蛋白：球狀單體，組成骨骼肌的細(xì)絲膠原蛋白（膠原）膠原蛋白類型：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、·····Ⅶ。屬結(jié)三維結(jié)構(gòu)輔基血紅素（與氧結(jié)合部位）氨基酸殘基數(shù)與氧結(jié)合構(gòu)象改變與氧親和力與氧結(jié)合曲線肌紅蛋白一條多肽鏈1個(gè)153Fe(II)原子以第六個(gè)配價(jià)鍵與氧進(jìn)行可逆氧合作用鐵卟啉位移呈圓頂狀平面狀大血紅蛋白4個(gè)多肽亞基4個(gè)α2(141)β2(146)Fe(II)原子以第六個(gè)配價(jià)鍵與氧進(jìn)行可逆氧合作用去氧血紅蛋白（T態(tài)）和氧合血紅蛋白（R態(tài)）小K三維結(jié)構(gòu)輔基血紅素（與氧結(jié)合部位）氨基酸殘基數(shù)與氧結(jié)合構(gòu)象改蛋白質(zhì)的性質(zhì)和分離、純化

1、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)

等電點(diǎn)與它所含的酸堿氨基酸數(shù)目比例有關(guān)等離子點(diǎn)蛋白質(zhì)的一個(gè)特征常數(shù)2蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)維持蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)穩(wěn)定的因素（3點(diǎn)）3蛋白質(zhì)沉淀的方法等電點(diǎn)沉淀法（ 可逆、不變性)

鹽析法 （可逆、不變性） 有機(jī)溶劑沉淀法（可逆或不可逆） 重金屬鹽沉淀法 （變性） 生物堿試劑 （變性） 加熱沉淀法（變性）強(qiáng)酸堿沉淀（不可逆）4蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性（溫和條件、變性因素、常用變性劑）蛋白質(zhì)的性質(zhì)和分離、純化1、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì) 5蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)5蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)6、蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定

a.根據(jù)化學(xué)組成測(cè)定最低相對(duì)分子質(zhì)量b.滲透壓法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量c.沉降分析法（超速離心法）d.※凝膠過濾法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量（分子篩層析）此法比較簡(jiǎn)單，不要求復(fù)雜的儀器，就能精確地測(cè)出Mre.※SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量6、蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定a.根據(jù)化學(xué)組成測(cè)定最低相對(duì)根據(jù)分子大小不同的方法 透析和超過濾利用溶解度差別的純化方法（實(shí)踐最常用的方法a鹽析b有機(jī)溶劑分級(jí)分離）根據(jù)電荷不同的純化方法（PAGE、醋酸纖維素薄膜電泳、離子交換層析）利用選擇性吸附的純化方法利用對(duì)配體的特異生物學(xué)親和層析:一步處理即親和力的純化方法可分離所需蛋白質(zhì)，純度很高

7蛋分離純化白質(zhì)的根據(jù)分子大小不同的方法 透析和超過濾7蛋分離純化白質(zhì)的（一）蛋白質(zhì)的含量測(cè)定①凱氏定氮法②雙縮尿法③

Folin-酚試劑法④紫外吸收法⑤考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法靈敏度高，重復(fù)好⑥膠體金測(cè)定法 靈敏度最高（二）蛋白質(zhì)的純度測(cè)定電泳、沉降、HPLC和溶解度分析等。8蛋白質(zhì)的含量測(cè)定和純度鑒定（一）蛋白質(zhì)的含量測(cè)定8蛋白質(zhì)的含量測(cè)定和純度鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)部分氨基酸紙層析考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)部分氨基酸紙層析氨基酸紙層析重點(diǎn)：氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)難點(diǎn)：紙層析法的基本原理溶劑前層析點(diǎn)原點(diǎn)溶劑前沿亮苯丙纈脯賴氨基酸紙層析重點(diǎn)：氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)溶劑前層相對(duì)遷移率Rf=X/Y

相對(duì)遷移率Rf=X/Y考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度重點(diǎn)：考馬斯亮藍(lán)法定量測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理和方法考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度重點(diǎn)：考馬斯亮藍(lán)法定量實(shí)驗(yàn)原理考馬斯亮藍(lán)能與蛋白質(zhì)的疏水微區(qū)相結(jié)合，這種結(jié)合具有高敏感性?？捡R斯亮藍(lán)G250的磷酸溶液呈棕紅色，最大吸收峰在465nm。當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物時(shí)呈藍(lán)色，其最大吸收峰改變?yōu)?95nm，考馬斯亮藍(lán)G250－蛋白質(zhì)復(fù)合物的高消光效應(yīng)導(dǎo)致了蛋白質(zhì)定量測(cè)定的高敏度。在一定范圍內(nèi)，考馬斯亮藍(lán)G250－蛋白質(zhì)復(fù)合物呈色后，在595nm下，吸光度與蛋白質(zhì)含量呈線性關(guān)系，其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無關(guān)，因此被廣泛地應(yīng)用。CoomassiebrilliantblueG-250在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，未知樣品的溶液與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液同時(shí)反應(yīng)，并于595nm下比色，可以通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線求出未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。實(shí)驗(yàn)原理考馬斯亮藍(lán)能與蛋白質(zhì)的疏水微區(qū)相結(jié)合，這種結(jié)合具有高SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量重點(diǎn)掌握：實(shí)驗(yàn)原理、整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的設(shè)計(jì)與操作，如標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的選擇、分離膠與濃縮膠濃度的確定與制備、灌膠、樣品的處理、上樣量及方法的選擇。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量重點(diǎn)掌握：電泳過程中有3種物理效應(yīng)：樣品的濃度效應(yīng)；對(duì)被分離分子的篩選效應(yīng)；電荷效應(yīng)。遷移率大?。悍肿哟笮》肿有螤顑綦姾桑ê少|(zhì)比）電泳過程中有3種物理效應(yīng)：測(cè)定方法用幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值對(duì)它們的遷移率作圖。測(cè)出待測(cè)樣品的遷移率。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品的相對(duì)分子質(zhì)量。測(cè)定方法測(cè)定方法用幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值對(duì)它們的遷移率作謝謝謝謝蛋白質(zhì)總結(jié)課件蛋白質(zhì)總結(jié)課件愛是什么？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓。”

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了?！?/p>

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子?！?/p>

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能。”

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能。”愛是什么？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓。”

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了。”

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子?！?/p>

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能?！?/p>

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能?！睈凼鞘裁?？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

愛是什么？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓。”

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了?！?/p>

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子?！?/p>

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”

“不能?！?/p>

“它能滋潤(rùn)你的干渴？”

“不能?！睈凼鞘裁?？

一個(gè)精靈坐在碧綠的枝葉間沉思。

風(fēng)兒若有若無。

一只鳥兒飛過來，停在枝上，望著遠(yuǎn)處將要成熟的稻田。

精靈取出一束黃澄澄的稻谷問道：“你愛這稻谷嗎？”

“愛?！?/p>

“為什么？”

“它驅(qū)趕我的饑餓?！?/p>

鳥兒啄完稻谷，輕輕梳理著光潤(rùn)的羽毛。

“現(xiàn)在你愛這稻谷嗎？”精靈又取出一束黃澄澄的稻谷。

鳥兒抬頭望著遠(yuǎn)處的一灣泉水回答：“現(xiàn)在我愛那一灣泉水，我有點(diǎn)渴了?！?/p>

精靈摘下一片樹葉，里面盛了一汪泉水。

鳥兒喝完泉水，準(zhǔn)備振翅飛去。

“請(qǐng)?jiān)倩卮鹞乙粋€(gè)問題，”精靈伸出指尖，鳥兒停在上面。

“你要去做什么更重要的事嗎？我這里又稻谷也有泉水?！?/p>

“我要去那片開著風(fēng)信子的山谷，去看那朵風(fēng)信子。”

“為什么？它能驅(qū)趕你的饑餓？”