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本文格式為Word版,下載可任意編輯——番茄OFP基因家族生物信息學分析α-螺旋占比,其余OFP蛋白二級結構中都是α-螺旋占比>延伸鏈占比,并且所有蛋白的二級結構中,α-螺旋和無規(guī)矩卷曲占據(jù)主體部分。因此可以判斷,α-螺旋和無規(guī)矩卷曲是番茄OFP蛋白的主要組成成分,β-轉角和延伸鏈散布于整個蛋白序列中,起輔助修飾作用。
2.7番茄OFP基因家族蛋白三維結構模擬
為了解析番茄OFP基因家族的三維構象,采用同源建模法,利用Swiss-Modle在線軟件進行同源建模。結果說明,SlOFP4、SlOFP6、SlOFP10、SlOFP14、SlOFP16、SlOFP17、SlOFP20、SlOFP22和SlOFP24蛋白的三級結構相像;SlOFP2和SlOFP21蛋白的三級結構相像;SlOFP5和SlOFP19蛋白的三級結構也相像(圖5)。說明番茄OFP基因家族蛋白之間既存在保守性又存在差異性。
2.8番茄OFP基因家族基因啟動子區(qū)域順式作用元件分析
通過SGN數(shù)據(jù)庫獲取番茄OFP基因家族成員起始密碼子ATG上游3000bp的序列,接著利用PlantCARE網(wǎng)站對其進行啟動子順式作用元件分析,結果(圖6)顯示,番茄OFP基因家族成員起始密碼子上游存在著光響應順式元件(G-Box、ACE、GT1-motif)、激素響應應答元件(CGTCA-motif、P-box、ABRE、TCA-element、AuxRR-core)以及逆境脅迫響應順式元件(ARE、TC-richrepeats、LTR、MBS、DRE)。此外,胚乳表達元件(GCN4_motif)、種子特異性調(diào)控(RY-element)以及分生組織表達元件(CAT-box)在番茄OFP基因家族成員啟動子上也很常見。僅有SlOFP27基因啟動子上存在干旱、低溫及鹽脅迫響應元件(DRE),猜測該基因可能參與多個逆境脅迫響應過程;SlOFP23、SlOFP26、SlOFP27等3個基因啟動子上存在黃酮類生物合成基因調(diào)控元件(MBSI),預計這3個基因可能參與黃酮類生物合成過程。
2.9番茄OFP基因家族成員轉錄表達模式分析
為了更好地探究番茄OFP基因家族在番茄生長發(fā)育過程中的生物學功能,本研究利用3萬多差異基因表達的番茄RNA-seq數(shù)據(jù)分析了番茄OFP基因在10個番茄組織中的表達水平。結果說明,OVATE和SlOFP82個基因在番茄花和果實中大量表達,SlOFP14和SlOFP292個基因主要在青果時期大量表達,SlOFP20基因則主要在番茄花和根中大量表達(圖7)。
3探討與結論
番茄是全球消費量最大的蔬菜作物之一,兼具豐富的營養(yǎng)價值和巨大的商業(yè)價值[1]。OFP基因家族是植物特有的轉錄因子家族之一,通過赤霉素[8,17]、油菜素內(nèi)酯[18-19]、乙烯[20]以及生長素[2]等多種激素途徑,參與調(diào)控植物生長發(fā)育和非生物脅迫響應的多個方面。近年來,隨著高等植物基因組測序的不斷發(fā)展,研究人員在馬鈴薯、葡萄、擬南芥、水稻、玉米等13種陸地植物中檢測出OFP基因[5]。但僅有少部分OFP基因的功能已被鑒定。因此,本研究利用生物信息學方法,對番茄中31個OFP基因進行對比全面的生物信息學分析,為探究番茄OFP基因的生物學功能提供參考價值。
本研究通過對番茄OFP蛋白的基本理化性質(zhì)進行分析發(fā)現(xiàn),番茄OFP蛋白均為親水性蛋白,且大部分蛋白不穩(wěn)定,這說明番茄OFP蛋白成員之間存在保守性。此外,通過對番茄OFP蛋白的二級結構進行分析發(fā)現(xiàn),α-螺旋和無規(guī)矩卷曲結構是主要的二級結構成分,少量延伸鏈和β-轉角散布于蛋白序列中,起一定輔助修飾的作用。番茄OFP蛋白的三維構象則更為直觀的表達出α-螺旋和無規(guī)矩卷曲是番茄OFP蛋白的主要組成部分。
在組織特異性表達方面,OVATE、SlOFP8、SlOFP14、SlOFP20以及SlOFP29基因在果實中大量表達。另外,OVATE、SlOFP3、SlOFP8、SlOFP10、SlOFP11、SlOFP12、SlOFP18、SlOFP19及SlOFP20基因在花中表達量對比高,這說明大部分番茄OFP基因可能參與調(diào)控番茄花和果實的生長發(fā)育。然而這些番茄OFP基因具體的功能如何還需后續(xù)研究鑒定。
綜上,本研究利用各種生物信息學分析網(wǎng)站和軟件對番茄OFP基因家族進行了全面的生物信息學分
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