微生物消毒與滅菌微生物消毒與滅菌第一節(jié)物理消毒滅菌法

第一節(jié)物理消毒滅菌法物理因素對(duì)微生物的影響物理因素溫度輻射干燥超聲波微波濾過除菌高溫低溫物理因素對(duì)微生物的影響物理因素溫度輻射干燥超聲波一、熱力滅菌法高溫對(duì)微生物雖具有明顯的致死作用，但不同種類的微生物對(duì)熱的敏感性有明顯的的差異，細(xì)菌繁殖體最為敏感，其次是真菌和病毒，細(xì)菌的芽孢對(duì)熱有很強(qiáng)的抵抗力。一、熱力滅菌法高溫對(duì)微生物雖具有明顯的致死作用，但不同種類的熱力滅菌的原理——破壞菌體蛋白質(zhì)、核酸和酶系統(tǒng)而致死微生物。熱力使蛋白質(zhì)中的氫鍵破壞使之變性或凝固，使雙股DNA分開為單股，受熱活化的核酸酶使單股的DNA斷裂，導(dǎo)致細(xì)菌死亡影響高溫滅菌的因素：細(xì)菌對(duì)高溫的耐受性與細(xì)菌種類、發(fā)育時(shí)期、菌體濃度及細(xì)菌所處介質(zhì)有關(guān)。熱力滅菌的原理——破壞菌體蛋白質(zhì)、核酸和酶系統(tǒng)而致死微生物。熱力滅菌法分類：干熱滅菌和濕熱滅菌兩種方法。二者比較：在同一溫度下，后者效力比前者為大。原因：（1）濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固；（2）濕熱的穿透力比干熱大；（3）濕熱的蒸汽有潛熱存在。熱力滅菌法分類：干熱滅菌和濕熱滅菌兩種方法。

熱力滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼（火焰滅菌法）----直接用火焰滅菌方法干烤（熱空氣滅菌法、干熱滅菌法）----

加熱160-180℃2小時(shí)干熱滅菌法紅外線

熱力滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼（(2)火焰滅菌法:火焰直接燒灼，用于接種環(huán)(針)和試管口或瓶口的滅菌。。(1)焚燒法：用火焚燒，是一種徹底的滅菌方法，僅適用于廢棄的污染物品和有傳染性的動(dòng)物尸體等。(2)火焰滅菌法:火焰直接燒灼，用于接種環(huán)(針)和試管口或(3)干烤（熱空氣滅菌法、干熱滅菌法）滅菌對(duì)象：為玻璃器皿、金屬器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。方法——160℃（160－170℃），1－2h（180℃紙、棉塞就可燒焦）(3)干烤（熱空氣滅菌法、干熱滅菌法）滅菌對(duì)象：為玻璃器皿、缺點(diǎn)——穿透力差，故需高溫、長時(shí)間（繁殖體100℃，1.5h殺滅；芽孢140℃，2h可殺滅）——160－170℃，1－2h可殺死繁殖體和芽孢。①降到室溫（60℃）后再取物品注意事項(xiàng)②溫度不能超過170℃③物品不宜包、放過緊過厚、帖壁缺點(diǎn)——穿透力差，故需高溫、長時(shí)間（繁殖體100℃，1.5h電熱干燥箱電熱干燥箱濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~30分鐘煮沸消毒法水煮100℃5分鐘(繁殖體)~2小時(shí)(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100℃15~30分鐘(繁殖體)反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61℃30分鐘）殺滅致病菌濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~方法：溫度在100℃左右，煮沸10～20min可殺死所有細(xì)菌的繁殖體，芽胞常需煮沸1～2h才被殺死。若在水中加入2-5%酚，則10-15min可殺滅芽胞；若在水中加入1-2%Na2CO3，可提高沸點(diǎn)既可促進(jìn)芽胞的摧毀，亦可防止金屬器械生銹。應(yīng)用：滅菌對(duì)象:飲水、玻璃器皿、外科器械(1)煮沸滅菌:方法：溫度在100℃左右，煮沸10～20min可殺死所有細(xì)煮沸消毒器煮沸消毒器

(2)巴氏消毒法：以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物，而又不致嚴(yán)重?fù)p害其營養(yǎng)成分和風(fēng)味的消毒方法。

①低溫維持巴氏消毒法63～65℃30min

②高溫瞬時(shí)巴氏消毒法71～72℃15s；迅速冷卻10℃以下（冷擊法）

③超高溫巴氏消毒法132℃管道1～2s

；迅速冷卻——常溫保存半年。(2)巴氏消毒法：以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定

(3)流通蒸汽消毒法：又叫常壓蒸汽消毒法，用普通蒸籠或阿諾氏（Arnold）流通蒸汽滅菌器，在1個(gè)大氣壓下，用100℃左右的水蒸汽，30min，可殺滅繁殖體。不殺芽孢和霉菌的孢子。用于食品、食具及不耐用高溫的物品消毒。如敷料、糖培養(yǎng)基、半乳糖培養(yǎng)基(3)流通蒸汽消毒法：又叫常壓蒸汽消毒法，用普通蒸籠或(4)間歇滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）利用連續(xù)3次的流通蒸汽消毒法，達(dá)到徹底滅菌的目的。即將待滅菌物品放入蒸籠（滅菌器）內(nèi)，加熱（約100℃）15-30min，取出置室溫(或37℃)24h，次日重復(fù)滅菌。連續(xù)3次。用于一些不宜100℃以上溫度滅菌物質(zhì)，以達(dá)到殺滅芽胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培養(yǎng)基的滅菌。(4)間歇滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）（5）高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌器：15磅（0.105MPa），/平方英寸，121.3℃溫度下維持15～20min。應(yīng)用此法滅菌，一定要充分排除滅菌器內(nèi)原有的冷空氣。用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、耐熱藥品、手術(shù)敷料等。（5）高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌器：15磅（0.105MPa高壓蒸汽滅菌器手提式立式高壓蒸汽滅菌器手提式立式微生物消毒與滅菌課件

二、輻射滅菌法輻射－－是能量通過空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。能量可借波動(dòng)或粒子高速運(yùn)行而傳播。用于滅菌的輻射可分為兩種。電離輻射－－α、β、γ、x射線及高能中子、質(zhì)子等。非電離輻射－－可見光、日光、紫外線等。輻射的殺菌作用－－隨波長的降低而增強(qiáng)。①紫外、x、γ－－殺菌增強(qiáng)②可見光、紅外線－－作用弱紫宇宙線γx可見紅外無線電波二、輻射滅菌法輻射－－是能量通過空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。（二）理想消毒劑的條件主要用于陶瓷、耐熱玻璃容器和塑料器皿，金屬器皿忌用。光感作用原生動(dòng)物、細(xì)菌、病毒、噬菌體等均有滅活作用。化學(xué)治療劑對(duì)于宿主和病原微生物的作用具有選擇性，它們使其生命活動(dòng)受到抑制或使其死亡，而對(duì)宿主細(xì)胞毒副作用甚小。2%～5%的碘酊用于手術(shù)部位、注射部位干燥－－缺水－－生化反應(yīng)受阻－－新陳代謝障礙－－死亡。05%溶液用于食品廠、奶牛場的設(shè)備、用具消毒。②射線：電離輻射強(qiáng)，穿透力強(qiáng)(4)間歇滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）（一）影響消毒劑作用的因素可見光線是指在紅外線和紫外線之間肉眼可見的光線，其波長400－800nm。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)的抗生素達(dá)2500多種，但其大多數(shù)對(duì)人和動(dòng)物有毒性，臨床上最常用的抗生素只有幾十種。(一）非電離輻射

1.可見光線可見光線是指在紅外線和紫外線之間肉眼可見的光線，其波長400－800nm。可見光線對(duì)微生物一般無多大影響，但長時(shí)間作用也能妨礙微生物的新陳代謝與繁殖，故培養(yǎng)細(xì)菌和保存菌種，均應(yīng)置于陰暗之處。光感作用（photosensitization）－－某些染料（結(jié)晶紫、美藍(lán)、伊紅、汞溴紅、沙黃等）加入培養(yǎng)基中，能增強(qiáng)可見光的殺菌作用。光感作用原生動(dòng)物、細(xì)菌、病毒、噬菌體等均有滅活作用。G＋菌對(duì)光感作用比G－菌敏感，美藍(lán)、伊紅、汞溴紅因作用于G＋菌，而沙黃作用于G－菌。（二）理想消毒劑的條件(一）非電離輻射

1.可見光線可見光線2.陽光直射日光有強(qiáng)烈的殺菌作用，日光是天然殺菌因素細(xì)菌日光直射－－30min—數(shù)小時(shí)死亡。碳疽芽孢－－直射－－20h死亡影響日光殺菌的因素（煙塵、玻璃、有機(jī)物、空氣中的水分、溫度），日光的殺菌效力因地、因時(shí)及微生物所處環(huán)境不同而異。2.陽光直射日光有強(qiáng)烈的殺菌作用，3.紫外線殺菌原理－－波長為100－400nm，以254nm殺菌力最強(qiáng)，短波紫外線燈為253.7nm。①殺菌作用－－細(xì)菌DNA對(duì)紫外線的吸收高峰在265－266nm之間，O2O3O–氧化能力強(qiáng)的氧原子--殺菌②誘發(fā)變異－－使DNA分子結(jié)構(gòu)改變而誘發(fā)變異（影響核酸同鏈上的胸腺嘧啶共價(jià)鍵結(jié)合形成胸腺嘧啶二聚體，從而干擾了DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄）方法－－紫外線燈－－照射－－殺菌應(yīng)用－－手術(shù)室、病房、無菌室、實(shí)驗(yàn)室消毒（G-、G+）3.紫外線殺菌原理－－波長為100－400nm，以254nm光復(fù)活現(xiàn)象：微生物經(jīng)致死量的紫外線照射后，若在3h內(nèi)在遇到可見光照射，部分微生物可以恢復(fù)其活力，這種現(xiàn)象稱之。影響因素－－時(shí)間、強(qiáng)度、距離（一般要求距地面2m，時(shí)間1－2h，1W／m2）紫外線作用的特點(diǎn)：①穿透力弱，只能用于房間空氣、物體表面消毒；

②對(duì)眼睛角膜和皮膚有損傷作用，工作人員切勿在紫外線燈照射下進(jìn)行操作。

③殺菌效果與照射時(shí)間，距離和強(qiáng)度有關(guān)；光復(fù)活現(xiàn)象：微生物經(jīng)致死量的紫外線照射后，若在3h內(nèi)在遇到可(二）電離輻射具有較高的能量和穿透能力－產(chǎn)生極強(qiáng)的致死效應(yīng)。

①射線：電離輻射強(qiáng)，穿透力差（缺乏穿透力，不實(shí)用）②射線：電離輻射強(qiáng)，穿透力強(qiáng)

③射線：電離輻射弱，穿透力強(qiáng)，僅有抑菌作用和微弱的殺菌作用。④X射線：殺菌力不如紫外線，穿透力強(qiáng)(二）電離輻射具有較高的能量和穿透能力－產(chǎn)生極強(qiáng)的致死效應(yīng)。用途：忌熱塑料制品物品（注射器、試管、吸管等）的滅菌消毒、食品保藏和育種等方面殺菌機(jī)制：射線使水電離為H＋和OH－，這些游離基是強(qiáng)烈的還原劑和氧化劑，可直接作用于細(xì)菌本身。用途：忌熱塑料制品物品（注射器、試管、吸管等）的滅菌消毒、食（三）紅外線利用紅外線烤箱滅菌，紅外線是波長為0.77-1000μm的電磁波，尤以1-10μm波長的熱效應(yīng)最高。多用于醫(yī)療器械的滅菌（三）紅外線利用紅外線烤箱滅菌，紅外線是波長為0.77-10（四）微波從幾百兆赫至幾十萬兆赫頻率的無線電波稱為微波。微波滅菌，主要是利用微波的加熱作用完成。滅菌物品放在微波照射的交變電場中時(shí)，物品內(nèi)部的分子隨著電場的變化而相應(yīng)的旋轉(zhuǎn)振動(dòng)起來，電場變化快，分子振動(dòng)也就跟著快；由于分子間的相互作用力即產(chǎn)生摩擦力，因此分子克服其摩擦力而產(chǎn)生熱量，使整個(gè)物品則熱起來，起到了摩擦加熱滅菌的作用。這種滅菌法，所需時(shí)間短、加熱均勻是其顯著的優(yōu)點(diǎn)。主要用于陶瓷、耐熱玻璃容器和塑料器皿，金屬器皿忌用。（四）微波從幾百兆赫至幾十萬兆赫頻率的無線電波稱為微波。三、超聲波殺菌法頻率在20000～200000Hz聲波稱為超聲波。超聲波雖可使菌體裂解死亡，但往往有殘存者，又因超聲波費(fèi)用頗大，故未應(yīng)用于消毒滅菌。目前主要用于裂解細(xì)胞，提取細(xì)胞組分，研究其抗原、酶類、細(xì)胞壁的化學(xué)性質(zhì)以及從組織內(nèi)提取病毒等。三、超聲波殺菌法頻率在20000～200000Hz聲波稱為超超聲波主要通過四方面的作用達(dá)到殺菌目的：震蕩：使微生物細(xì)胞內(nèi)含物強(qiáng)烈震蕩而被破壞氧化殺菌：因在水溶液中超聲波能產(chǎn)生過氧化氫產(chǎn)生熱效應(yīng)：破壞細(xì)胞的酶系統(tǒng)；空（腔）化作用：即在液體中形成許多真空狀態(tài)的小空腔，空腔崩破產(chǎn)生的巨大壓力使細(xì)胞裂解。超聲波主要通過四方面的作用達(dá)到殺菌目的：四、過濾除菌法濾過除菌:通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微生物除去的方法。但濾過除菌常不能除去病毒、霉形體以及細(xì)菌L型等小顆粒。應(yīng)用：①細(xì)菌濾器－－不耐熱物品的滅菌（如不耐高溫的營養(yǎng)液、血清、毒素、抗生素、V、酶、維生素等）②空氣除菌－－超凈工作臺(tái)；SPF動(dòng)物的飼養(yǎng)；GMP廠房的潔凈度（四級(jí)）四、過濾除菌法濾過除菌:通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣中的細(xì)微生物消毒與滅菌課件濾菌過程濾菌過程微生物消毒與滅菌課件五、干燥及低溫抑菌法1.干燥干燥可致微生物死亡干燥－－缺水－－生化反應(yīng)受阻－－新陳代謝障礙－－死亡。甚至引起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。各種微生物對(duì)干燥的耐受性差異很大巴氏桿菌、淋球菌、鼻疽桿菌－－幾天破傷風(fēng)、碳疽芽孢－－幾年、幾十年霉菌孢子－－抵抗力很強(qiáng)應(yīng)用：主要用于菌種和食品的保藏。五、干燥及低溫抑菌法1.干燥2.低溫對(duì)微生物的影響

細(xì)菌對(duì)寒冷的抵抗力較強(qiáng)。因此，低溫不能用于滅菌。(1)微生物對(duì)低溫有較強(qiáng)的抵抗力：微生物低溫

代謝活動(dòng)降低，生長繁殖停止，可長期維持生命T升高到適宜

蘇醒——生長繁殖2.低溫對(duì)微生物的影響細(xì)菌對(duì)寒冷的抵抗力較強(qiáng)。因此，①低溫常用于保存菌種。但是，反復(fù)凍融對(duì)微生物不宜。各種細(xì)菌對(duì)低溫的抵抗力亦不同。（細(xì)菌、酵母菌、霉菌0－4℃；病毒、某些細(xì)菌－20－－70℃，最好在液氮中（－196℃）可長期保存；但是巴氏桿菌、腦膜炎雙球菌等低溫敏感，低溫比在室溫中死亡更快。）②冷凍保存食品——細(xì)菌生長繁殖停止應(yīng)用①低溫常用于保存菌種。但是，反復(fù)凍融對(duì)微生物不宜。各種細(xì)（2）冷凍真空干燥法

①方法——低溫（-40℃）——迅速凍結(jié)，抽出空氣，真空狀態(tài)下迅速脫水干燥—可維持生命達(dá)數(shù)年②加保護(hù)劑——脫脂奶粉或不含相應(yīng)抗體的血漿或血清（10－50％）③注意事項(xiàng)——細(xì)菌、真菌不宜長期冰凍保存——尤其是反復(fù)凍融對(duì)任何微生物都有很大的破壞力。（2）冷凍真空干燥法

①方法——低溫（-40℃）——迅速凍在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷凍真空干燥法：在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷凍真空干燥法：冷凍干燥機(jī)冷凍干燥機(jī)第二節(jié)化學(xué)消毒法防腐消毒劑：許多化學(xué)藥物能夠抑制或殺死微生物，已廣泛用于消毒、防腐，統(tǒng)稱為防腐消毒劑。消毒劑它在殺滅病原微生物的同時(shí)，對(duì)動(dòng)物體的組織細(xì)胞也有損害作用。消毒劑（disinfectant）：用于殺滅物體上病原體的化學(xué)藥品防腐劑（antiseptic）：用于抑制微生物生長繁殖的化學(xué)藥品或稱抑菌劑。消毒劑和防腐劑區(qū)別：無嚴(yán)格的界限第二節(jié)化學(xué)消毒法防腐消毒劑：許多化學(xué)藥物能夠抑制或殺死微生化學(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥物稱為化學(xué)治療劑?；瘜W(xué)治療劑對(duì)于宿主和病原微生物的作用具有選擇性，它們使其生命活動(dòng)受到抑制或使其死亡，而對(duì)宿主細(xì)胞毒副作用甚小。消毒劑與治療劑的區(qū)別：對(duì)宿主組織細(xì)胞的作用。消毒劑特點(diǎn)：在殺滅病原微生物的同時(shí)，對(duì)肌體的組織細(xì)胞也有損害作用。因此，只用于局部（少數(shù)不被吸收可由于消化道）、器械、環(huán)境。治療劑特點(diǎn)：對(duì)宿主和病原微生物作用有選擇性，對(duì)宿主細(xì)胞副作用很小。可全身用藥化學(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥物一、消毒劑的種類及應(yīng)用一、消毒劑的種類及應(yīng)用(一)常用消毒劑種類

種類繁多－－消毒目的、對(duì)象、特點(diǎn)進(jìn)行選擇

酸類消毒劑堿類消毒劑其它消毒劑H+OH--SH醇脫水Hg(一)常用消毒劑種類

種類繁多－－消毒目的、對(duì)象、特點(diǎn)進(jìn)行選1、酸類消毒劑無機(jī)酸（三大強(qiáng)酸）：具有腐蝕性。但硼酸腐蝕性較?。⒕σ嗳酰Ｓ?-2%硼酸用粘膜消毒。有機(jī)酸：如甲酸，醋酸，乳酸等均有殺菌作用，常用乳酸水蒸氣或溶液殺滅細(xì)菌或病毒。1、酸類消毒劑無機(jī)酸（三大強(qiáng)酸）：具有腐蝕性。但硼酸腐蝕性較

2、堿類消毒劑堿類消毒劑對(duì)所有細(xì)菌及芽胞和病毒都有殺滅作用。尤其常用于病毒的消毒：

10-20%石灰乳

20-30%草木灰水

1-3%NaOH2、堿類消毒劑3、其它常用消毒劑0.1%升汞用于非金屬器械消毒0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和創(chuàng)傷消毒70－75%乙醇用于體表和體溫表的消毒1－3%碘液用于皮膚、粘膜消毒5－10%碘液可殺滅放線菌3、其它常用消毒劑0.1%升汞用于非金屬器械消毒0.2－0.5%過氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纖維消毒及皮膚消毒。

3－5%酚、3-5%來蘇兒用于環(huán)境消毒或空氣消毒。甲醛殺菌力較強(qiáng)，常用于器械消毒。40%甲醛溶液用于烈性傳染病的消毒，4－10%甲醛溶液浸泡30min可殺滅繁殖體及真菌。20%甲醛溶液浸泡6h以上，可殺滅芽胞體。消毒房間：15－25ml福爾馬林/m3加等量水薰蒸或加入KMnO4。要求濕度60－80％；

KMnO421g（15）＋甲醛42ml（30），24h。0.2－0.5%過氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纖維消毒及皮膚消（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度類別作用原理消毒劑名稱方法與濃度酸與堿以H+、OH-的解離作用妨礙菌體代謝，殺菌力與濃度成正比醋酸乳酸燒堿生石灰草木灰5～10ml/m3加等量水蒸發(fā)，空間消毒。蒸汽熏蒸或2%溶液噴霧，用于空氣消毒2%～5%的苛性鈉溶液（60～70℃）消毒廄舍、飼槽、用具、車輛等。用10%乳劑消毒廄舍、運(yùn)動(dòng)場等。用10%草木灰水煮沸2h，過濾，再加2～4倍水，消毒廄舍、運(yùn)動(dòng)場等。鹵族元素以氯化作用、氧化作用破壞-SH基，使酶活性受到抑制產(chǎn)生殺菌效果漂白粉碘酊用5%～20%的混懸液消毒畜禽舍、飼槽、車輛等；以0.3～0.4g/kg的劑量消毒飲水。2%～5%的碘酊用于手術(shù)部位、注射部位酚類使菌體蛋白變性或凝固石炭酸3%～5%用于器械、排泄物消毒。（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度類別作用原理消毒劑名稱方（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)醇類使菌體蛋白變性沉淀乙醇用70%～75%的乙醇作皮膚消毒，也用于體溫計(jì)、器械等消毒。醛類能與菌體蛋白的氨基酸結(jié)合，起到還原作用福爾馬林1%～5%甲醛溶液或福爾馬林氣體熏蒸法消毒畜舍、禽舍、孵化器等用具和皮毛等。重金屬鹽類能與菌體蛋白質(zhì)（酶）的-SH基結(jié)合，使其失去活性；重金屬離子易使菌體蛋白變性升汞硫柳汞0.01%水溶液用于消毒手和皮膚；0.05%～0.1%用于非金屬器皿消毒。0.1%溶液可作皮膚消毒；0.01%適于作生物制品的防腐劑。氧化劑使菌體酶類發(fā)生氧化而失去活性過氧乙酸用3%～10%溶液熏蒸或噴霧，一般按每平方米空間0.25～0.5ml用量，適于畜禽舍空氣消毒。烷化劑能與菌體蛋白發(fā)生烷化環(huán)氧乙烷在密閉條件下，每平方米用700～900mg,消毒24h，適于皮毛、裘皮、電動(dòng)和光學(xué)儀器及醫(yī)用膠手套等消毒。（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)醇類使菌體蛋白變（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)表面活性劑陽離子表面活性劑能改變細(xì)菌胞漿膜的通透性，甚至使其崩解，使菌體內(nèi)的物質(zhì)外滲而產(chǎn)生殺菌作用；或以薄層包圍胞漿膜，干擾其吸收作用新潔爾滅(溴芐烷銨)0.5%的水溶液用于皮膚和手的消毒；0.1%用于玻璃器皿、手術(shù)器械、橡用品的消毒；0.15%～2%用于禽舍空噴霧消毒；0.1%可用于種蛋消毒(40～43℃

3min)。度米芬(消毒寧)對(duì)污染的表面用0.1%～0.5%噴灑，作用10～60min；浸泡金屬器械可在其中加入0.5%亞硝酸鈉防銹；0.05%溶液用于食品廠、奶牛場的設(shè)備、用具消毒。洗必泰（雙氯苯雙胍乙烷）0.02%水溶液可消毒手；0.05%溶液沖洗創(chuàng)面，也可消毒禽舍、手術(shù)室、用具等；0.1%用于手術(shù)器械的消毒、食品廠器具、設(shè)備的消毒。消毒凈0.05%～0.1%水溶液用于皮膚和手的消毒，也可用于玻璃器皿、手術(shù)器械、橡膠用品等的消毒，一般浸泡10min即可（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)陽離子表面新潔爾（二）理想消毒劑的條件種類很多，其殺菌作用亦不相同，一般可根據(jù)用途與消毒劑特點(diǎn)選擇使用。最理想的消毒劑應(yīng)是殺菌力強(qiáng)、價(jià)格低、無腐蝕性、能長期保存、對(duì)動(dòng)物無毒性或毒性較小、無殘留或?qū)Νh(huán)境無污染的化學(xué)藥物。（二）理想消毒劑的條件種類很多，其殺菌作用亦不相同，一般可（三）消毒劑的殺菌機(jī)制復(fù)雜而多樣，根據(jù)對(duì)菌體的作用大致可分為:①使菌體蛋白變性、凝固及水解。藥物與菌體蛋白質(zhì)結(jié)合－－變性（金屬離子＋、蛋白質(zhì)－）－－變性或沉淀--（金屬鹽、醇類）與蛋白質(zhì)的氨基酸結(jié)合－－蛋白質(zhì)脫水凝固變形（醛類）使菌體蛋白質(zhì)水解－－中和蛋白質(zhì)電荷--破壞其膠體穩(wěn)定性而沉淀（堿或酸類）改變DNA分子結(jié)構(gòu)－－染料類（結(jié)晶紫）（三）消毒劑的殺菌機(jī)制復(fù)雜而多樣，根據(jù)對(duì)菌體的作用大致可分為②損傷胞漿膜降低菌細(xì)胞的表面張力，使胞漿膜通透性增加，菌體破裂溶解。表面活性劑和酚（石炭酸、來蘇兒、醇類等脂溶劑）③干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝（與菌體內(nèi)的酶類結(jié)合，影響細(xì)胞代謝或酶喪失活性）。使酶蛋白中的－SH改變二硫鍵，使酶失去活性－－氧化劑（高錳酸鉀、過氧化氫、碘酊、漂白粉）、金屬鹽類（汞、銀）②損傷胞漿膜④改變核酸的功能如：染料龍膽紫可嵌入菌細(xì)胞雙股DNA鄰近堿基對(duì)中，改變DNA分子結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌生長繁殖受到抑制或死亡。④改變核酸的功能二、影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度作用時(shí)間細(xì)菌菌齡種類

環(huán)境有機(jī)物溫度酸堿度二、影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度作用時(shí)間細(xì)菌菌齡種類（一）影響消毒劑作用的因素1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間2.環(huán)境中的有機(jī)物的存在（對(duì)細(xì)菌有保護(hù)作用、與消毒劑發(fā)生反應(yīng)）意義：3.微生物的種類和特性－－廣譜、交替（G+、繁殖體、幼齡菌）清創(chuàng)、清掃－最好的預(yù)防藥物（一）影響消毒劑作用的因素1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間清4.溫度與酸堿度的影響溫度：升高18－20℃；石炭酸升高10℃，殺菌效果提高5－8倍PH值：一般為電離的分子較易通過C膜，殺菌效果好。堿性溶液中，陽離子去污劑殺菌力強(qiáng)；酸性溶液中，陰離子去污劑殺菌力強(qiáng)。例如戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，當(dāng)加入碳酸氫鈉后才發(fā)揮殺菌作用。新潔爾滅的殺菌作用是pH愈低所需殺菌濃度愈高，如在pH3時(shí)，其所需殺菌濃度較pH9時(shí)要高10倍左右。4.溫度與酸堿度的影響5.消毒劑的相互頡頏：

陰離子清潔劑肥皂與陽離子清潔劑苯扎溴銨共用6.影響消毒效果的其他因素 還有濕度、穿透力、表面張力及頡抗物質(zhì)等。5.消毒劑的相互頡頏：第三節(jié)抗生素和細(xì)菌素的殺菌作用

自然界中各種微生物之間，或是在微生物與高等動(dòng)植物之間，經(jīng)常呈現(xiàn)相互影響的作用，如寄生、共生和頡抗現(xiàn)象等。導(dǎo)致頡抗的物質(zhì)基礎(chǔ)是抗生素、細(xì)菌素等細(xì)菌的代謝產(chǎn)物。此外植物中也存在殺菌物質(zhì)如黃連素(小蘗堿)，噬菌體則是可殺滅細(xì)菌的活的微生物。第三節(jié)抗生素和細(xì)菌素的殺菌作用自然界中1、抗生素(antibiotics)

某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死另一些微生物的物質(zhì)稱為抗生素。主要來源:放線菌(如鏈霉菌)，少數(shù)來源于某些霉菌(如青霉菌等)和細(xì)菌(如多黏菌素)，有些亦能用化學(xué)方法合成或半合成。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)的抗生素達(dá)2500多種，但其大多數(shù)對(duì)人和動(dòng)物有毒性，臨床上最常用的抗生素只有幾十種。1、抗生素(antibiotics)某些微生物在代謝過程抗生素的作用原理①抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成。如青霉素、頭孢類②影響細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性。多粘菌素、桿菌肽③抑制菌體蛋白質(zhì)的合成。如氯、四、糖苷類④抑制細(xì)菌核酸合成。如灰黃霉素、利福平?？股氐淖饔迷恝僖种萍?xì)菌細(xì)胞壁的合成。如青霉素、頭孢類微生物消毒與滅菌課件藥敏試驗(yàn)結(jié)果及觀察藥敏試驗(yàn)結(jié)果及觀察2.細(xì)菌素（bacteriocin）細(xì)菌素是某種細(xì)菌產(chǎn)生的一種具有殺菌作用的蛋白質(zhì)。只能對(duì)同種細(xì)菌不同菌株產(chǎn)生作用。作用：殺菌范圍較窄，有一定的特異性－－只作用于同種菌株的細(xì)菌以及與它相近的細(xì)菌。特點(diǎn)：作用類似抗生素。但不裂解菌體，也不能在菌體內(nèi)繁殖（不同噬菌體）。種類：大腸桿菌素（某些大腸桿菌；志賀氏桿菌）；弧菌素；綠膿桿菌素；葡萄球菌素2.細(xì)菌素（bacteriocin）細(xì)菌素是某種細(xì)菌產(chǎn)生的一3.植物殺菌素(phytocidin)植物殺菌素：某些植物中存在有殺菌物質(zhì)，這種殺菌物質(zhì)一般稱植物殺菌素。中草藥：如黃連、黃柏、黃芩、大蒜、金銀花、連翹、魚腥草、穿心蓮、馬齒莧、板藍(lán)根等都含有殺菌物質(zhì)，其中有的已制成注射液或其他制劑的藥品。3.植物殺菌素(phytocidin)植物殺菌素：某些植物中第四節(jié)獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全第四節(jié)獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全一、生物安全的概念和一般要求實(shí)驗(yàn)室的生物安全有三層含義：其一主要是指防止病原微生物等及其他有害生物或物質(zhì)傳入實(shí)驗(yàn)室，此種生物安全英文稱“biosecurity”其二主要是指防止病原微生物等傳出實(shí)驗(yàn)室，此種生物安全英文為“biosafety”。其三是指實(shí)驗(yàn)室人員的自身安全防護(hù)，biosecurity及biosafety都包括此義。

一、生物安全的概念和一般要求實(shí)驗(yàn)室的生物安全有三層含義：

獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室主要從事病原微生物的檢驗(yàn)及相關(guān)研究，我國政府對(duì)必病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全頒布了管理?xiàng)l例(中華人民共和國國務(wù)院令第424號(hào)，2004)。參驗(yàn)照國外同行的經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合我國的有關(guān)規(guī)定，獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的安全要點(diǎn)主要包括以下幾方面:獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室主要從事病原微生物的檢驗(yàn)及相關(guān)生物安全的潛在危險(xiǎn)在于處理臨床樣本，樣本的氣溶膠往往最易污染實(shí)驗(yàn)室并造成人員舍感染。所有送檢樣本都應(yīng)視為有傳染性并做相應(yīng)處理。不允許用嘴吸取液體，應(yīng)采用相應(yīng)器械。涉及有害物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室的人員應(yīng)具備防范生物危害的知識(shí)，人員的數(shù)量及流動(dòng)應(yīng)予控制。實(shí)驗(yàn)室人員必須穿戴全套防護(hù)服，甚至面罩、防護(hù)眼鏡等。這些用品用后應(yīng)做滅菌處理。要有良好的衛(wèi)生習(xí)慣，尤其要注意洗手。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不允許吃、喝、涂抹化妝品及裝隱形眼鏡。實(shí)驗(yàn)室工作人員必須接種有關(guān)疫苗。生物安全的潛在危險(xiǎn)在于處理臨床樣本，樣本的氣溶膠往往最易污染對(duì)所有污染材料及水，包括樣本、試驗(yàn)器材、動(dòng)物等必須規(guī)定明確的消毒程序，并予實(shí)施。推薦使用含氯5.25%的消毒劑或其他消毒劑。最主要的防護(hù)并非設(shè)施，而是工作人員本身，造成事故的最常見原因主要是由于工作人員缺乏有關(guān)知識(shí)、訓(xùn)練和粗心大意。只有經(jīng)培訓(xùn)的人員才能處理動(dòng)物，操作時(shí)動(dòng)物應(yīng)予麻醉或鎮(zhèn)靜，避免傷害人及動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)室中處理的微生物提取物，特別是DNA，亦可造成污染，必須注意。對(duì)所有污染材料及水，包括樣本、試驗(yàn)器材、動(dòng)物等必須規(guī)定明確的二、獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分類

凡涉及微生物及其提取物或基因工程產(chǎn)物操作的實(shí)驗(yàn)室，根據(jù)對(duì)病原微生物不同種類的生物安全要求，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)、設(shè)施也有所不同。目前國際公認(rèn)的微生物實(shí)驗(yàn)室分為生物安全(biosafetylevel，BSL)1至4級(jí)。其中BSL-1最低，BSL-4最高。二、獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分類凡涉BSL-1實(shí)驗(yàn)室可從事已知不會(huì)對(duì)健康成人造成危害、但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境可能有微弱危害的、有明確特征的微生物的實(shí)驗(yàn)工作。實(shí)驗(yàn)室與建筑物中的一般通道不隔開，一般在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作，不要求使用或經(jīng)常使用專用封閉設(shè)備。BSL-1實(shí)驗(yàn)室可從事已知不會(huì)對(duì)健康成人造成危害、但對(duì)實(shí)BSL-2實(shí)驗(yàn)室與BSL-1相似，適用于那些對(duì)人及環(huán)境有中度可能危害的微生物實(shí)驗(yàn)工作。不同點(diǎn):①工作人員要經(jīng)過操作病原因子的專門培訓(xùn)，②由專業(yè)人員進(jìn)行指導(dǎo)和管理;③工作時(shí)限制外人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室;某些產(chǎn)生傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的工作要在生物安全柜或其他封閉設(shè)備內(nèi)進(jìn)行;對(duì)污染的銳器采取高度防護(hù)措施。凡從事微生物基因的操作，均需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。BSL-2實(shí)驗(yàn)室與BSL-1相似，適用于那些對(duì)人及環(huán)境有中度微生物消毒與滅菌課件BSL-3實(shí)驗(yàn)室供處理危險(xiǎn)病原體使用，適用于可以通過吸人途徑引起嚴(yán)重的或致死性疾病的病原體的實(shí)驗(yàn)工作，例如從事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或檢測的實(shí)驗(yàn)室。BSL-3實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員在處理病原體方面要經(jīng)專門培訓(xùn)，并由有關(guān)專家進(jìn)行監(jiān)督管理。傳染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防護(hù)設(shè)施內(nèi)進(jìn)行，工作人員要穿適宜的防護(hù)服和裝備。

BSL-3實(shí)驗(yàn)室要經(jīng)過專業(yè)的設(shè)計(jì)和建造。BSL-3實(shí)驗(yàn)室供處理危險(xiǎn)病原體使用，適用于可以通過吸人途BSL-4實(shí)驗(yàn)室有造成氣溶膠感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的實(shí)驗(yàn)室，必須達(dá)到BSL-4的安全水平。BSL-4實(shí)驗(yàn)室對(duì)防止微生物擴(kuò)散到環(huán)境中有特殊的工程和設(shè)計(jì)要求。每一名實(shí)驗(yàn)室工作人員在處理病原微生物方面均要有特殊的和全面的培訓(xùn)；要具有法定資格的科學(xué)家監(jiān)督管理。實(shí)驗(yàn)室主任要嚴(yán)格控制進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)是獨(dú)立的建筑物或是建筑物內(nèi)的隔離區(qū)。要實(shí)施特殊的實(shí)驗(yàn)室安全工作細(xì)則。在此種實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)內(nèi)，所有的工作都要限制在E級(jí)生物安全柜內(nèi)或者是安全柜與一套由生命維持系統(tǒng)供氣的正壓個(gè)人工作服聯(lián)合使用。BSL-4實(shí)驗(yàn)室有造成氣溶膠感染和危及生命的病原微生物，如三、動(dòng)物病原微生物的分類

根據(jù)病原微生物的傳染性、感染人和(或)動(dòng)物的危害程度，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將動(dòng)物病原分為1至4類。其中1類動(dòng)物病原為可導(dǎo)致地方性流行、但不列入官方控制計(jì)劃的病原微生物。2類動(dòng)物病原為外來的或?qū)е碌胤叫粤餍械?、并列入官方控制?jì)劃但實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)低的致病微生物。3類動(dòng)物病原為外來的或?qū)е碌胤叫粤餍械摹⒉⒘腥牍俜娇刂朴?jì)劃的、實(shí)驗(yàn)室釋放有中等危險(xiǎn)的病原微生物。4類動(dòng)物病原為外來的或?qū)е碌胤叫粤餍械?、并列入官方控制的、?shí)驗(yàn)室釋放存在高危險(xiǎn)性的病原微生物。三、動(dòng)物病原微生物的分類根據(jù)病原微生物的傳染

我國農(nóng)業(yè)部于2005年頒布了動(dòng)物病原微生物分類名錄，其中一類病原微生物危害最大，依此類推，四類最小。有少數(shù)寄生蟲也列在名單之中。我國農(nóng)業(yè)部于2005年頒布了動(dòng)物病原微生物分類一類動(dòng)物病原微生物口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、豬水瘤病病毒、非洲豬瘟病毒、非洲馬瘟病毒、牛瘟病毒、小反魚獸瘟病毒、牛傳染性胸膜肺炎絲狀支原體、牛海綿狀腦病病原、癢病病原。一類動(dòng)物病原微生物口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、豬水瘤二類動(dòng)物病原微生物豬瘟病毒、雞新城疫病毒、狂犬病病毒、綿羊痘/山羊痘病毒、藍(lán)舌病病毒、兔出血癥病毒、炭疽芽胞桿菌、布氏桿菌。二類動(dòng)物病原微生物豬瘟病毒、雞新城疫病毒、狂犬病病毒、綿三類動(dòng)物病原微生物多種動(dòng)物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、偽狂犬病病毒、破傷風(fēng)梭菌、氣腫疽梭菌、結(jié)核分枝桿菌、副結(jié)核分枝桿菌、致病性大腸桿菌、沙門菌、巴氏桿菌、致病性鏈球菌、李氏桿菌、產(chǎn)氣英膜梭菌、嗜水氣單胞菌、肉毒梭狀芽胞桿菌、腐敗梭菌和其他致病性梭菌、鸚鵡熱衣原體、放線菌、鉤端螺旋體。三類動(dòng)物病原微生物多種動(dòng)物共患病病原微生物：低致病性流感病毒牛病病原微生物：牛惡性卡他熱病毒、牛白血病病毒、牛流行熱病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒、牛病毒腹瀉/黏膜病病毒、胎兒彎曲菌性病亞種(牛生殖器彎曲菌)、日本血吸蟲。綿羊和山羊病病原微生物：山羊關(guān)節(jié)炎/腦脊髓炎病毒、維士納/梅迪病毒、傳染性服瘤皮炎(羊口瘡)病毒。豬病病原微生物：日本腦炎病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬細(xì)小病毒、豬圓環(huán)病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬丹毒桿菌、豬支氣管敗血波氏桿菌、豬胸膜肺炎放線桿菌、副豬嗜血桿菌、豬肺炎支原體、豬短螺旋體(豬密螺旋體)。牛病病原微生物：牛惡性卡他熱病毒、牛白血病病毒、牛流行熱病毒馬病病原微生物：馬傳染性貧血病毒、馬動(dòng)脈炎病毒、馬病毒性流產(chǎn)病毒、馬鼻炎病毒、鼻疽桿菌、類鼻疽桿菌、假皮疽組織胞漿菌、潰殤性淋巴管炎假結(jié)核棒狀桿菌。禽病病原微生物：鴨瘟病毒、鴨病毒性肝炎病毒、小鵝瘟病毒、雞傳染性囊病病毒、雞馬立克病病毒、禽白血病/肉瘤病毒、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒、雞傳染性貧血病毒、雞傳染性喉氣管炎病毒、雞傳染性支氣管炎病毒、雞減蛋綜合征病毒、禽痘病毒、雞病毒性關(guān)節(jié)炎病毒、禽傳染性腦脊髓炎病毒、副雞嗜血桿菌、雞毒支原體、雞球蟲。兔病病原微生物：兔黏液瘤病病毒、野兔熱土拉桿菌、兔支氣管敗血波氏桿菌、兔球蟲。馬病病原微生物：馬傳染性貧血病毒、馬動(dòng)脈炎病毒、馬病毒性流產(chǎn)生生動(dòng)物病病原微生物：蜜蜂病病原微生物：其他動(dòng)物病病原微生物：犬瘟熱病毒、犬細(xì)小病毒、犬腺病毒、犬冠狀病毒、犬副流感病毒、貓泛白細(xì)胞減少癥病毒、水貂阿留申病病毒、水貂病毒性腸炎病病毒。四類動(dòng)物病原微生物是指危害小、低致病力、實(shí)驗(yàn)室感染機(jī)會(huì)小的獸用生物制品、疫苗生產(chǎn)用的各種弱毒病原微生物以及不屬于一、二、三類的各種低毒力的病原微生物。生生動(dòng)物病病原微生物：

復(fù)習(xí)重點(diǎn)1.滅菌、消毒、防腐、無菌的概念。2.物理消毒滅菌方法主要有哪些？如何合理選用這些消毒方法？復(fù)習(xí)重點(diǎn)1.滅菌、消毒、防腐、無菌的概念。身體健康，學(xué)習(xí)進(jìn)步！身體健康，學(xué)習(xí)進(jìn)步！微生物消毒與滅菌微生物消毒與滅菌第一節(jié)物理消毒滅菌法

第一節(jié)物理消毒滅菌法物理因素對(duì)微生物的影響物理因素溫度輻射干燥超聲波微波濾過除菌高溫低溫物理因素對(duì)微生物的影響物理因素溫度輻射干燥超聲波一、熱力滅菌法高溫對(duì)微生物雖具有明顯的致死作用，但不同種類的微生物對(duì)熱的敏感性有明顯的的差異，細(xì)菌繁殖體最為敏感，其次是真菌和病毒，細(xì)菌的芽孢對(duì)熱有很強(qiáng)的抵抗力。一、熱力滅菌法高溫對(duì)微生物雖具有明顯的致死作用，但不同種類的熱力滅菌的原理——破壞菌體蛋白質(zhì)、核酸和酶系統(tǒng)而致死微生物。熱力使蛋白質(zhì)中的氫鍵破壞使之變性或凝固，使雙股DNA分開為單股，受熱活化的核酸酶使單股的DNA斷裂，導(dǎo)致細(xì)菌死亡影響高溫滅菌的因素：細(xì)菌對(duì)高溫的耐受性與細(xì)菌種類、發(fā)育時(shí)期、菌體濃度及細(xì)菌所處介質(zhì)有關(guān)。熱力滅菌的原理——破壞菌體蛋白質(zhì)、核酸和酶系統(tǒng)而致死微生物。熱力滅菌法分類：干熱滅菌和濕熱滅菌兩種方法。二者比較：在同一溫度下，后者效力比前者為大。原因：（1）濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固；（2）濕熱的穿透力比干熱大；（3）濕熱的蒸汽有潛熱存在。熱力滅菌法分類：干熱滅菌和濕熱滅菌兩種方法。

熱力滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼（火焰滅菌法）----直接用火焰滅菌方法干烤（熱空氣滅菌法、干熱滅菌法）----

加熱160-180℃2小時(shí)干熱滅菌法紅外線

熱力滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼（(2)火焰滅菌法:火焰直接燒灼，用于接種環(huán)(針)和試管口或瓶口的滅菌。。(1)焚燒法：用火焚燒，是一種徹底的滅菌方法，僅適用于廢棄的污染物品和有傳染性的動(dòng)物尸體等。(2)火焰滅菌法:火焰直接燒灼，用于接種環(huán)(針)和試管口或(3)干烤（熱空氣滅菌法、干熱滅菌法）滅菌對(duì)象：為玻璃器皿、金屬器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。方法——160℃（160－170℃），1－2h（180℃紙、棉塞就可燒焦）(3)干烤（熱空氣滅菌法、干熱滅菌法）滅菌對(duì)象：為玻璃器皿、缺點(diǎn)——穿透力差，故需高溫、長時(shí)間（繁殖體100℃，1.5h殺滅；芽孢140℃，2h可殺滅）——160－170℃，1－2h可殺死繁殖體和芽孢。①降到室溫（60℃）后再取物品注意事項(xiàng)②溫度不能超過170℃③物品不宜包、放過緊過厚、帖壁缺點(diǎn)——穿透力差，故需高溫、長時(shí)間（繁殖體100℃，1.5h電熱干燥箱電熱干燥箱濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~30分鐘煮沸消毒法水煮100℃5分鐘(繁殖體)~2小時(shí)(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100℃15~30分鐘(繁殖體)反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61℃30分鐘）殺滅致病菌濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~方法：溫度在100℃左右，煮沸10～20min可殺死所有細(xì)菌的繁殖體，芽胞常需煮沸1～2h才被殺死。若在水中加入2-5%酚，則10-15min可殺滅芽胞；若在水中加入1-2%Na2CO3，可提高沸點(diǎn)既可促進(jìn)芽胞的摧毀，亦可防止金屬器械生銹。應(yīng)用：滅菌對(duì)象:飲水、玻璃器皿、外科器械(1)煮沸滅菌:方法：溫度在100℃左右，煮沸10～20min可殺死所有細(xì)煮沸消毒器煮沸消毒器

(2)巴氏消毒法：以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物，而又不致嚴(yán)重?fù)p害其營養(yǎng)成分和風(fēng)味的消毒方法。

①低溫維持巴氏消毒法63～65℃30min

②高溫瞬時(shí)巴氏消毒法71～72℃15s；迅速冷卻10℃以下（冷擊法）

③超高溫巴氏消毒法132℃管道1～2s

；迅速冷卻——常溫保存半年。(2)巴氏消毒法：以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定

(3)流通蒸汽消毒法：又叫常壓蒸汽消毒法，用普通蒸籠或阿諾氏（Arnold）流通蒸汽滅菌器，在1個(gè)大氣壓下，用100℃左右的水蒸汽，30min，可殺滅繁殖體。不殺芽孢和霉菌的孢子。用于食品、食具及不耐用高溫的物品消毒。如敷料、糖培養(yǎng)基、半乳糖培養(yǎng)基(3)流通蒸汽消毒法：又叫常壓蒸汽消毒法，用普通蒸籠或(4)間歇滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）利用連續(xù)3次的流通蒸汽消毒法，達(dá)到徹底滅菌的目的。即將待滅菌物品放入蒸籠（滅菌器）內(nèi)，加熱（約100℃）15-30min，取出置室溫(或37℃)24h，次日重復(fù)滅菌。連續(xù)3次。用于一些不宜100℃以上溫度滅菌物質(zhì)，以達(dá)到殺滅芽胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培養(yǎng)基的滅菌。(4)間歇滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）（5）高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌器：15磅（0.105MPa），/平方英寸，121.3℃溫度下維持15～20min。應(yīng)用此法滅菌，一定要充分排除滅菌器內(nèi)原有的冷空氣。用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、耐熱藥品、手術(shù)敷料等。（5）高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌器：15磅（0.105MPa高壓蒸汽滅菌器手提式立式高壓蒸汽滅菌器手提式立式微生物消毒與滅菌課件

二、輻射滅菌法輻射－－是能量通過空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。能量可借波動(dòng)或粒子高速運(yùn)行而傳播。用于滅菌的輻射可分為兩種。電離輻射－－α、β、γ、x射線及高能中子、質(zhì)子等。非電離輻射－－可見光、日光、紫外線等。輻射的殺菌作用－－隨波長的降低而增強(qiáng)。①紫外、x、γ－－殺菌增強(qiáng)②可見光、紅外線－－作用弱紫宇宙線γx可見紅外無線電波二、輻射滅菌法輻射－－是能量通過空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。（二）理想消毒劑的條件主要用于陶瓷、耐熱玻璃容器和塑料器皿，金屬器皿忌用。光感作用原生動(dòng)物、細(xì)菌、病毒、噬菌體等均有滅活作用?；瘜W(xué)治療劑對(duì)于宿主和病原微生物的作用具有選擇性，它們使其生命活動(dòng)受到抑制或使其死亡，而對(duì)宿主細(xì)胞毒副作用甚小。2%～5%的碘酊用于手術(shù)部位、注射部位干燥－－缺水－－生化反應(yīng)受阻－－新陳代謝障礙－－死亡。05%溶液用于食品廠、奶牛場的設(shè)備、用具消毒。②射線：電離輻射強(qiáng)，穿透力強(qiáng)(4)間歇滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）（一）影響消毒劑作用的因素可見光線是指在紅外線和紫外線之間肉眼可見的光線，其波長400－800nm。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)的抗生素達(dá)2500多種，但其大多數(shù)對(duì)人和動(dòng)物有毒性，臨床上最常用的抗生素只有幾十種。(一）非電離輻射

1.可見光線可見光線是指在紅外線和紫外線之間肉眼可見的光線，其波長400－800nm。可見光線對(duì)微生物一般無多大影響，但長時(shí)間作用也能妨礙微生物的新陳代謝與繁殖，故培養(yǎng)細(xì)菌和保存菌種，均應(yīng)置于陰暗之處。光感作用（photosensitization）－－某些染料（結(jié)晶紫、美藍(lán)、伊紅、汞溴紅、沙黃等）加入培養(yǎng)基中，能增強(qiáng)可見光的殺菌作用。光感作用原生動(dòng)物、細(xì)菌、病毒、噬菌體等均有滅活作用。G＋菌對(duì)光感作用比G－菌敏感，美藍(lán)、伊紅、汞溴紅因作用于G＋菌，而沙黃作用于G－菌。（二）理想消毒劑的條件(一）非電離輻射

1.可見光線可見光線2.陽光直射日光有強(qiáng)烈的殺菌作用，日光是天然殺菌因素細(xì)菌日光直射－－30min—數(shù)小時(shí)死亡。碳疽芽孢－－直射－－20h死亡影響日光殺菌的因素（煙塵、玻璃、有機(jī)物、空氣中的水分、溫度），日光的殺菌效力因地、因時(shí)及微生物所處環(huán)境不同而異。2.陽光直射日光有強(qiáng)烈的殺菌作用，3.紫外線殺菌原理－－波長為100－400nm，以254nm殺菌力最強(qiáng)，短波紫外線燈為253.7nm。①殺菌作用－－細(xì)菌DNA對(duì)紫外線的吸收高峰在265－266nm之間，O2O3O–氧化能力強(qiáng)的氧原子--殺菌②誘發(fā)變異－－使DNA分子結(jié)構(gòu)改變而誘發(fā)變異（影響核酸同鏈上的胸腺嘧啶共價(jià)鍵結(jié)合形成胸腺嘧啶二聚體，從而干擾了DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄）方法－－紫外線燈－－照射－－殺菌應(yīng)用－－手術(shù)室、病房、無菌室、實(shí)驗(yàn)室消毒（G-、G+）3.紫外線殺菌原理－－波長為100－400nm，以254nm光復(fù)活現(xiàn)象：微生物經(jīng)致死量的紫外線照射后，若在3h內(nèi)在遇到可見光照射，部分微生物可以恢復(fù)其活力，這種現(xiàn)象稱之。影響因素－－時(shí)間、強(qiáng)度、距離（一般要求距地面2m，時(shí)間1－2h，1W／m2）紫外線作用的特點(diǎn)：①穿透力弱，只能用于房間空氣、物體表面消毒；

②對(duì)眼睛角膜和皮膚有損傷作用，工作人員切勿在紫外線燈照射下進(jìn)行操作。

③殺菌效果與照射時(shí)間，距離和強(qiáng)度有關(guān)；光復(fù)活現(xiàn)象：微生物經(jīng)致死量的紫外線照射后，若在3h內(nèi)在遇到可(二）電離輻射具有較高的能量和穿透能力－產(chǎn)生極強(qiáng)的致死效應(yīng)。

①射線：電離輻射強(qiáng)，穿透力差（缺乏穿透力，不實(shí)用）②射線：電離輻射強(qiáng)，穿透力強(qiáng)

③射線：電離輻射弱，穿透力強(qiáng)，僅有抑菌作用和微弱的殺菌作用。④X射線：殺菌力不如紫外線，穿透力強(qiáng)(二）電離輻射具有較高的能量和穿透能力－產(chǎn)生極強(qiáng)的致死效應(yīng)。用途：忌熱塑料制品物品（注射器、試管、吸管等）的滅菌消毒、食品保藏和育種等方面殺菌機(jī)制：射線使水電離為H＋和OH－，這些游離基是強(qiáng)烈的還原劑和氧化劑，可直接作用于細(xì)菌本身。用途：忌熱塑料制品物品（注射器、試管、吸管等）的滅菌消毒、食（三）紅外線利用紅外線烤箱滅菌，紅外線是波長為0.77-1000μm的電磁波，尤以1-10μm波長的熱效應(yīng)最高。多用于醫(yī)療器械的滅菌（三）紅外線利用紅外線烤箱滅菌，紅外線是波長為0.77-10（四）微波從幾百兆赫至幾十萬兆赫頻率的無線電波稱為微波。微波滅菌，主要是利用微波的加熱作用完成。滅菌物品放在微波照射的交變電場中時(shí)，物品內(nèi)部的分子隨著電場的變化而相應(yīng)的旋轉(zhuǎn)振動(dòng)起來，電場變化快，分子振動(dòng)也就跟著快；由于分子間的相互作用力即產(chǎn)生摩擦力，因此分子克服其摩擦力而產(chǎn)生熱量，使整個(gè)物品則熱起來，起到了摩擦加熱滅菌的作用。這種滅菌法，所需時(shí)間短、加熱均勻是其顯著的優(yōu)點(diǎn)。主要用于陶瓷、耐熱玻璃容器和塑料器皿，金屬器皿忌用。（四）微波從幾百兆赫至幾十萬兆赫頻率的無線電波稱為微波。三、超聲波殺菌法頻率在20000～200000Hz聲波稱為超聲波。超聲波雖可使菌體裂解死亡，但往往有殘存者，又因超聲波費(fèi)用頗大，故未應(yīng)用于消毒滅菌。目前主要用于裂解細(xì)胞，提取細(xì)胞組分，研究其抗原、酶類、細(xì)胞壁的化學(xué)性質(zhì)以及從組織內(nèi)提取病毒等。三、超聲波殺菌法頻率在20000～200000Hz聲波稱為超超聲波主要通過四方面的作用達(dá)到殺菌目的：震蕩：使微生物細(xì)胞內(nèi)含物強(qiáng)烈震蕩而被破壞氧化殺菌：因在水溶液中超聲波能產(chǎn)生過氧化氫產(chǎn)生熱效應(yīng)：破壞細(xì)胞的酶系統(tǒng)；空（腔）化作用：即在液體中形成許多真空狀態(tài)的小空腔，空腔崩破產(chǎn)生的巨大壓力使細(xì)胞裂解。超聲波主要通過四方面的作用達(dá)到殺菌目的：四、過濾除菌法濾過除菌:通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微生物除去的方法。但濾過除菌常不能除去病毒、霉形體以及細(xì)菌L型等小顆粒。應(yīng)用：①細(xì)菌濾器－－不耐熱物品的滅菌（如不耐高溫的營養(yǎng)液、血清、毒素、抗生素、V、酶、維生素等）②空氣除菌－－超凈工作臺(tái)；SPF動(dòng)物的飼養(yǎng)；GMP廠房的潔凈度（四級(jí)）四、過濾除菌法濾過除菌:通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣中的細(xì)微生物消毒與滅菌課件濾菌過程濾菌過程微生物消毒與滅菌課件五、干燥及低溫抑菌法1.干燥干燥可致微生物死亡干燥－－缺水－－生化反應(yīng)受阻－－新陳代謝障礙－－死亡。甚至引起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。各種微生物對(duì)干燥的耐受性差異很大巴氏桿菌、淋球菌、鼻疽桿菌－－幾天破傷風(fēng)、碳疽芽孢－－幾年、幾十年霉菌孢子－－抵抗力很強(qiáng)應(yīng)用：主要用于菌種和食品的保藏。五、干燥及低溫抑菌法1.干燥2.低溫對(duì)微生物的影響

細(xì)菌對(duì)寒冷的抵抗力較強(qiáng)。因此，低溫不能用于滅菌。(1)微生物對(duì)低溫有較強(qiáng)的抵抗力：微生物低溫

代謝活動(dòng)降低，生長繁殖停止，可長期維持生命T升高到適宜

蘇醒——生長繁殖2.低溫對(duì)微生物的影響細(xì)菌對(duì)寒冷的抵抗力較強(qiáng)。因此，①低溫常用于保存菌種。但是，反復(fù)凍融對(duì)微生物不宜。各種細(xì)菌對(duì)低溫的抵抗力亦不同。（細(xì)菌、酵母菌、霉菌0－4℃；病毒、某些細(xì)菌－20－－70℃，最好在液氮中（－196℃）可長期保存；但是巴氏桿菌、腦膜炎雙球菌等低溫敏感，低溫比在室溫中死亡更快。）②冷凍保存食品——細(xì)菌生長繁殖停止應(yīng)用①低溫常用于保存菌種。但是，反復(fù)凍融對(duì)微生物不宜。各種細(xì)（2）冷凍真空干燥法

①方法——低溫（-40℃）——迅速凍結(jié)，抽出空氣，真空狀態(tài)下迅速脫水干燥—可維持生命達(dá)數(shù)年②加保護(hù)劑——脫脂奶粉或不含相應(yīng)抗體的血漿或血清（10－50％）③注意事項(xiàng)——細(xì)菌、真菌不宜長期冰凍保存——尤其是反復(fù)凍融對(duì)任何微生物都有很大的破壞力。（2）冷凍真空干燥法

①方法——低溫（-40℃）——迅速凍在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷凍真空干燥法：在低溫狀態(tài)下真空抽去水分用途：保存菌種冷凍真空干燥法：冷凍干燥機(jī)冷凍干燥機(jī)第二節(jié)化學(xué)消毒法防腐消毒劑：許多化學(xué)藥物能夠抑制或殺死微生物，已廣泛用于消毒、防腐，統(tǒng)稱為防腐消毒劑。消毒劑它在殺滅病原微生物的同時(shí)，對(duì)動(dòng)物體的組織細(xì)胞也有損害作用。消毒劑（disinfectant）：用于殺滅物體上病原體的化學(xué)藥品防腐劑（antiseptic）：用于抑制微生物生長繁殖的化學(xué)藥品或稱抑菌劑。消毒劑和防腐劑區(qū)別：無嚴(yán)格的界限第二節(jié)化學(xué)消毒法防腐消毒劑：許多化學(xué)藥物能夠抑制或殺死微生化學(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥物稱為化學(xué)治療劑?；瘜W(xué)治療劑對(duì)于宿主和病原微生物的作用具有選擇性，它們使其生命活動(dòng)受到抑制或使其死亡，而對(duì)宿主細(xì)胞毒副作用甚小。消毒劑與治療劑的區(qū)別：對(duì)宿主組織細(xì)胞的作用。消毒劑特點(diǎn)：在殺滅病原微生物的同時(shí)，對(duì)肌體的組織細(xì)胞也有損害作用。因此，只用于局部（少數(shù)不被吸收可由于消化道）、器械、環(huán)境。治療劑特點(diǎn)：對(duì)宿主和病原微生物作用有選擇性，對(duì)宿主細(xì)胞副作用很小。可全身用藥化學(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥物一、消毒劑的種類及應(yīng)用一、消毒劑的種類及應(yīng)用(一)常用消毒劑種類

種類繁多－－消毒目的、對(duì)象、特點(diǎn)進(jìn)行選擇

酸類消毒劑堿類消毒劑其它消毒劑H+OH--SH醇脫水Hg(一)常用消毒劑種類

種類繁多－－消毒目的、對(duì)象、特點(diǎn)進(jìn)行選1、酸類消毒劑無機(jī)酸（三大強(qiáng)酸）：具有腐蝕性。但硼酸腐蝕性較?。⒕σ嗳酰?，常用1-2%硼酸用粘膜消毒。有機(jī)酸：如甲酸，醋酸，乳酸等均有殺菌作用，常用乳酸水蒸氣或溶液殺滅細(xì)菌或病毒。1、酸類消毒劑無機(jī)酸（三大強(qiáng)酸）：具有腐蝕性。但硼酸腐蝕性較

2、堿類消毒劑堿類消毒劑對(duì)所有細(xì)菌及芽胞和病毒都有殺滅作用。尤其常用于病毒的消毒：

10-20%石灰乳

20-30%草木灰水

1-3%NaOH2、堿類消毒劑3、其它常用消毒劑0.1%升汞用于非金屬器械消毒0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和創(chuàng)傷消毒70－75%乙醇用于體表和體溫表的消毒1－3%碘液用于皮膚、粘膜消毒5－10%碘液可殺滅放線菌3、其它常用消毒劑0.1%升汞用于非金屬器械消毒0.2－0.5%過氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纖維消毒及皮膚消毒。

3－5%酚、3-5%來蘇兒用于環(huán)境消毒或空氣消毒。甲醛殺菌力較強(qiáng)，常用于器械消毒。40%甲醛溶液用于烈性傳染病的消毒，4－10%甲醛溶液浸泡30min可殺滅繁殖體及真菌。20%甲醛溶液浸泡6h以上，可殺滅芽胞體。消毒房間：15－25ml福爾馬林/m3加等量水薰蒸或加入KMnO4。要求濕度60－80％；

KMnO421g（15）＋甲醛42ml（30），24h。0.2－0.5%過氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纖維消毒及皮膚消（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度類別作用原理消毒劑名稱方法與濃度酸與堿以H+、OH-的解離作用妨礙菌體代謝，殺菌力與濃度成正比醋酸乳酸燒堿生石灰草木灰5～10ml/m3加等量水蒸發(fā)，空間消毒。蒸汽熏蒸或2%溶液噴霧，用于空氣消毒2%～5%的苛性鈉溶液（60～70℃）消毒廄舍、飼槽、用具、車輛等。用10%乳劑消毒廄舍、運(yùn)動(dòng)場等。用10%草木灰水煮沸2h，過濾，再加2～4倍水，消毒廄舍、運(yùn)動(dòng)場等。鹵族元素以氯化作用、氧化作用破壞-SH基，使酶活性受到抑制產(chǎn)生殺菌效果漂白粉碘酊用5%～20%的混懸液消毒畜禽舍、飼槽、車輛等；以0.3～0.4g/kg的劑量消毒飲水。2%～5%的碘酊用于手術(shù)部位、注射部位酚類使菌體蛋白變性或凝固石炭酸3%～5%用于器械、排泄物消毒。（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度類別作用原理消毒劑名稱方（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)醇類使菌體蛋白變性沉淀乙醇用70%～75%的乙醇作皮膚消毒，也用于體溫計(jì)、器械等消毒。醛類能與菌體蛋白的氨基酸結(jié)合，起到還原作用福爾馬林1%～5%甲醛溶液或福爾馬林氣體熏蒸法消毒畜舍、禽舍、孵化器等用具和皮毛等。重金屬鹽類能與菌體蛋白質(zhì)（酶）的-SH基結(jié)合，使其失去活性；重金屬離子易使菌體蛋白變性升汞硫柳汞0.01%水溶液用于消毒手和皮膚；0.05%～0.1%用于非金屬器皿消毒。0.1%溶液可作皮膚消毒；0.01%適于作生物制品的防腐劑。氧化劑使菌體酶類發(fā)生氧化而失去活性過氧乙酸用3%～10%溶液熏蒸或噴霧，一般按每平方米空間0.25～0.5ml用量，適于畜禽舍空氣消毒。烷化劑能與菌體蛋白發(fā)生烷化環(huán)氧乙烷在密閉條件下，每平方米用700～900mg,消毒24h，適于皮毛、裘皮、電動(dòng)和光學(xué)儀器及醫(yī)用膠手套等消毒。（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)醇類使菌體蛋白變（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)表面活性劑陽離子表面活性劑能改變細(xì)菌胞漿膜的通透性，甚至使其崩解，使菌體內(nèi)的物質(zhì)外滲而產(chǎn)生殺菌作用；或以薄層包圍胞漿膜，干擾其吸收作用新潔爾滅(溴芐烷銨)0.5%的水溶液用于皮膚和手的消毒；0.1%用于玻璃器皿、手術(shù)器械、橡用品的消毒；0.15%～2%用于禽舍空噴霧消毒；0.1%可用于種蛋消毒(40～43℃

3min)。度米芬(消毒寧)對(duì)污染的表面用0.1%～0.5%噴灑，作用10～60min；浸泡金屬器械可在其中加入0.5%亞硝酸鈉防銹；0.05%溶液用于食品廠、奶牛場的設(shè)備、用具消毒。洗必泰（雙氯苯雙胍乙烷）0.02%水溶液可消毒手；0.05%溶液沖洗創(chuàng)面，也可消毒禽舍、手術(shù)室、用具等；0.1%用于手術(shù)器械的消毒、食品廠器具、設(shè)備的消毒。消毒凈0.05%～0.1%水溶液用于皮膚和手的消毒，也可用于玻璃器皿、手術(shù)器械、橡膠用品等的消毒，一般浸泡10min即可（二）常用的消毒劑使用方法及常用濃度續(xù)陽離子表面新潔爾（二）理想消毒劑的條件種類很多，其殺菌作用亦不相同，一般可根據(jù)用途與消毒劑特點(diǎn)選擇使用。最理想的消毒劑應(yīng)是殺菌力強(qiáng)、價(jià)格低、無腐蝕性、能長期保存、對(duì)動(dòng)物無毒性或毒性較小、無殘留或?qū)Νh(huán)境無污染的化學(xué)藥物。（二）理想消毒劑的條件種類很多，其殺菌作用亦不相同，一般可（三）消毒劑的殺菌機(jī)制復(fù)雜而多樣，根據(jù)對(duì)菌體的作用大致可分為:①使菌體蛋白變性、凝固及水解。藥物與菌體蛋白質(zhì)結(jié)合－－變性（金屬離子＋、蛋白質(zhì)－）－－變性或沉淀--（金屬鹽、醇類）與蛋白質(zhì)的氨基酸結(jié)合－－蛋白質(zhì)脫水凝固變形（醛類）使菌體蛋白質(zhì)水解－－中和蛋白質(zhì)電荷--破壞其膠體穩(wěn)定性而沉淀（堿或酸類）改變DNA分子結(jié)構(gòu)－－染料類（結(jié)晶紫）（三）消毒劑的殺菌機(jī)制復(fù)雜而多樣，根據(jù)對(duì)菌體的作用大致可分為②損傷胞漿膜降低菌細(xì)胞的表面張力，使胞漿膜通透性增加，菌體破裂溶解。表面活性劑和酚（石炭酸、來蘇兒、醇類等脂溶劑）③干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝（與菌體內(nèi)的酶類結(jié)合，影響細(xì)胞代謝或酶喪失活性）。使酶蛋白中的－SH改變二硫鍵，使酶失去活性－－氧化劑（高錳酸鉀、過氧化氫、碘酊、漂白粉）、金屬鹽類（汞、銀）②損傷胞漿膜④改變核酸的功能如：染料龍膽紫可嵌入菌細(xì)胞雙股DNA鄰近堿基對(duì)中，改變DNA分子結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌生長繁殖受到抑制或死亡。④改變核酸的功能二、影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度作用時(shí)間細(xì)菌菌齡種類

環(huán)境有機(jī)物溫度酸堿度二、影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度作用時(shí)間細(xì)菌菌齡種類（一）影響消毒劑作用的因素1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間2.環(huán)境中的有機(jī)物的存在（對(duì)細(xì)菌有保護(hù)作用、與消毒劑發(fā)生反應(yīng)）意義：3.微生物的種類和特性－－廣譜、交替（G+、繁殖體、幼齡菌）清創(chuàng)、清掃－最好的預(yù)防藥物（一）影響消毒劑作用的因素1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間清4.溫度與酸堿度的影響溫度：升高18－20℃；石炭酸升高10℃，殺菌效果提高5－8倍PH值：一般為電離的分子較易通過C膜，殺菌效果好。堿性溶液中，陽離子去污劑殺菌力強(qiáng)；酸性溶液中，陰離子去污劑殺菌力強(qiáng)。例如戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，當(dāng)加入碳酸氫鈉后才發(fā)揮殺菌作用。新潔爾滅的殺菌作用是pH愈低所需殺菌濃度愈高，如在pH3時(shí)，其所需殺菌濃度較pH9時(shí)要高10倍左右。4.溫度與酸堿度的影響5.消毒劑的相互頡頏：

陰離子清潔劑肥皂與陽離子清潔劑苯扎溴銨共用6.影響消毒效果的其他因素 還有濕度、穿透力、表面張力及頡抗物質(zhì)等。5.消毒劑的相互頡頏：第三節(jié)抗生素和細(xì)菌素的殺菌作用

自然界中各種微生物之間，或是在微生物與高等動(dòng)植物之間，經(jīng)常呈現(xiàn)相互影響的作用，如寄生、共生和頡抗現(xiàn)象等。導(dǎo)致頡抗的物質(zhì)基礎(chǔ)是抗生素、細(xì)菌素等細(xì)菌的代謝產(chǎn)物。此外植物中也存在殺菌物質(zhì)如黃連素(小蘗堿)，噬菌體則是可殺滅細(xì)菌的活的微生物。第三節(jié)抗生素和細(xì)菌素的殺菌作用自然界中1、抗生素(antibiotics)

某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死另一些微生物的物質(zhì)稱為抗生素。主要來源:放線菌(如鏈霉菌)，少數(shù)來源于某些霉菌(如青霉菌等)和細(xì)菌(如多黏菌素)，有些亦能用化學(xué)方法合成或半合成。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)的抗生素達(dá)2500多種，但其大多數(shù)對(duì)人和動(dòng)物有毒性，臨床上最常用的抗生素只有幾十種。1、抗生素(antibiotics)某些微生物在代謝過程抗生素的作用原理①抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成。如青霉素、頭孢類②影響細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性。多粘菌素、桿菌肽③抑制菌體蛋白質(zhì)的合成。如氯、四、糖苷類④抑制細(xì)菌核酸合成。如灰黃霉素、利福平?？股氐淖饔迷恝僖种萍?xì)菌細(xì)胞壁的合成。如青霉素、頭孢類微生物消毒與滅菌課件藥敏試驗(yàn)結(jié)果及觀察藥敏試驗(yàn)結(jié)果及觀察2.細(xì)菌素（bacteriocin）細(xì)菌素是某種細(xì)菌產(chǎn)生的一種具有殺菌作用的蛋白質(zhì)。只能對(duì)同種細(xì)菌不同菌株產(chǎn)生作用。作用：殺菌范圍較窄，有一定的特異性－－只作用于同種菌株的細(xì)菌以及與它相近的細(xì)菌。特點(diǎn)：作用類似抗生素。但不裂解菌體，也不能在菌體內(nèi)繁殖（不同噬菌體）。種類：大腸桿菌素（某些大腸桿菌；志賀氏桿菌）；弧菌素；綠膿桿菌素；葡萄球菌素2.細(xì)菌素（bacteriocin）細(xì)菌素是某種細(xì)菌產(chǎn)生的一3.植物殺菌素(phytocidin)植物殺菌素：某些植物中存在有殺菌物質(zhì)，這種殺菌物質(zhì)一般稱植物殺菌素。中草藥：如黃連、黃柏、黃芩、大蒜、金銀花、連翹、魚腥草、穿心蓮、馬齒莧、板藍(lán)根等都含有殺菌物質(zhì)，其中有的已制成注射液或其他制劑的藥品。3.植物殺菌素(phytocidin)植物殺菌素：某些植物中第四節(jié)獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全第四節(jié)獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全一、生物安全的概念和一般要求實(shí)驗(yàn)室的生物安全有三層含義：其一主要是指防止病原微生物等及其他有害生物或物質(zhì)傳入實(shí)驗(yàn)室，此種生物安全英文稱“biosecurity”其二主要是指防止病原微生物等傳出實(shí)驗(yàn)室，此種生物安全英文為“biosafety”。其三是指實(shí)驗(yàn)室人員的自身安全防護(hù)，biosecurity及biosafety都包括此義。

一、生物安全的概念和一般要求實(shí)驗(yàn)室的生物安全有三層含義：

獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室主要從事病原微生物的檢驗(yàn)及相關(guān)研究，我國政府對(duì)必病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全頒布了管理?xiàng)l例(中華人民共和國國務(wù)院令第424號(hào)，2004)。參驗(yàn)照國外同行的經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合我國的有關(guān)規(guī)定，獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的安全要點(diǎn)主要包括以下幾方面:獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室主要從事病原微生物的檢驗(yàn)及相關(guān)生物安全的潛在危險(xiǎn)在于處理臨床樣本，樣本的氣溶膠往往最易污染實(shí)驗(yàn)室并造成人員舍感染。所有送檢樣本都應(yīng)視為有傳染性并做相應(yīng)處理。不允許用嘴吸取液體，應(yīng)采用相應(yīng)器械。涉及有害物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室的人員應(yīng)具備防范生物危害的知識(shí)，人員的數(shù)量及流動(dòng)應(yīng)予控制。實(shí)驗(yàn)室人員必須穿戴全套防護(hù)服，甚至面罩、防護(hù)眼鏡等。這些用品用后應(yīng)做滅菌處理。要有良好的衛(wèi)生習(xí)慣，尤其要注意洗手。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不允許吃、喝、涂抹化妝品及裝隱形眼鏡。實(shí)驗(yàn)室工作人員必須接種有關(guān)疫苗。生物安全的潛在危險(xiǎn)在于處理臨床樣本，樣本的氣溶膠往往最易污染對(duì)所有污染材料及水，包括樣本、試驗(yàn)器材、動(dòng)物等必須規(guī)定明確的消毒程序，并予實(shí)施。推薦使用含氯5.25%的消毒劑或其他消毒劑。最主要的防護(hù)并非設(shè)施，而是工作人員本身，造成事故的最常見原因主要是由于工作人員