醫(yī)院感染標本的采集與結果判斷李芳芳講師醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!病例１：某院胸外科在一個星期內分別送來三份不同病人的標本（痰標本、切口分泌物標本、血標本），經檢測均檢出了金黃色葡萄球菌，PCR結果相同，耐藥譜結果相同：耐藥：頭孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢三嗪、青霉素Ｇ、氨芐青霉素、羧芐青霉素，敏感：萬古霉素。？What？How耐甲氧西林金黃色葡萄球菌爆發(fā)醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!臨床標本檢驗對病人及帶菌者進行監(jiān)測配合醫(yī)院感染爆發(fā)的調查配合抗生素合理使用的管理醫(yī)院環(huán)境的細菌學監(jiān)測研究與教育臨床微生物學實驗室的任務醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!臨床需要――醫(yī)生選擇合適的方法、開醫(yī)囑、填寫申請單――護士備物、采集標本（正確的用物、時間、方法）――衛(wèi)勤中心運送標本――微生物實驗室檢驗――出報告、指導臨床用藥標本采集及檢驗－一般程序您認為在標本采集和檢驗時要注意什么？醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!Lipsky和Plorde將標本按存在部位的深淺分為三層深層標本：循環(huán)血液、胸液、腹腔液、關節(jié)液深層標本但與外界相通：子宮內膜、膀胱、瘺管嚴重污染有正常菌群的標本：皮膚或糞便等醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!三、各類標本的采集和檢驗血標本尿標本呼吸道標本糞標本腦脊液標本膿及傷口標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!血標本采樣方法消毒抽?。ǜ稍?、滅菌的針筒）更換針頭注入培養(yǎng)基混合周圍血推片量：培養(yǎng)基的1/10成人：5-10mL（SBE10-20ml）嬰兒及兒童：1-2mL醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!血標本抽血至培養(yǎng)瓶（需氧或厭氧）35℃普通孵育置全自動血培養(yǎng)儀每日觀察儀器陽性報警無細菌生長第5、7天作盲目移種第7天作盲目移種陰性報告無細菌生長檢驗方法醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!結果分析有意義菌：類桿菌、腸桿菌科細菌、銅綠假單胞菌、嗜血流感桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌無病原學意義菌：非溶血性鏈球菌（D族除外）、類白喉桿菌、芽胞桿菌血標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!其它采樣方法恥骨上膀胱穿刺抽吸采樣：膀胱充盈時，19號或20號針頭及針筒，穿刺點----臍與恥骨聯(lián)合中點連線的下1/3處長期導尿者：消毒尿管與引流管接頭，無菌空針抽取膀胱鏡檢、導尿管導尿、逆行腎盂造影術：術中采取輸尿管膀胱梗阻：分段采集數份，分別培養(yǎng)尿標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!1份標本－10個油鏡視野，每個視野細菌數：1-10個------每1mL尿液有104-105個細菌

污染或特殊情況100-1000個------每1mL尿液有106-108個細菌

尿路感染

常見病原菌：大腸埃希菌、葡萄球菌、鏈球菌、變形桿菌、傷寒沙門菌等臨床意義尿標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!（三）呼吸道標本標本采集采集時間----晨痰采集方法：咽拭子：灌注活性炭粉的棉拭、Stuart運輸培養(yǎng)基痰標本：清晨咳痰法、小兒取痰法、導管取痰法、氣管穿刺吸痰法、氣管切開者深入透氣孔中取痰、纖維支氣管鏡采取痰標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!痰標本檢查方法直接鏡檢:標本是否合格、區(qū)分正常部分和病變部分結核菌檢查：抗酸染色、羅氏培養(yǎng)基----鑒定----藥敏試驗分離培養(yǎng)（巧克力平板、血平板）：菌落觀察---鑒定呼吸道標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!檢驗報告直接鏡檢報告（約2h）：標本是否合格、有無膿細胞、柱狀上皮細胞、扁平上皮細胞的數量、陽性球菌？陰性球菌？培養(yǎng)檢查結果報告：5%血平板、中國蘭平板、藥敏試驗結果呼吸道標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!（四）糞標本采集：量----0.5～2g，保存液，4oC<24h檢驗的方法：直接涂片鏡檢：只用于懷疑霍亂弧菌感染或偽膜性結腸炎、葡萄球菌小腸結腸炎、白色念珠菌病培養(yǎng)檢查：與臨床微生物實驗室常規(guī)方法相同醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!（六）膿及傷口標本采集：膿腫未破口、深部膿腫：局部消毒，以無菌法抽取，隔絕空氣送檢膿腫已破口：應用針頭抽取深部膿液，放入Stuart運送培養(yǎng)基送檢開放傷口、潰瘍、瘺管：清洗、消毒，刮取或切取燒傷創(chuàng)面：痂下變黑或變形的不健康區(qū)邊緣醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!四、檢驗結果分析直接涂片染色及鏡檢結果分析鏡檢陰性培養(yǎng)結果陽性鏡檢陽性無臨床表現(xiàn)與培養(yǎng)結果相同培養(yǎng)陰性醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!最低抑菌濃度（Minimalinhibitoryconcentration,MIC）最低殺菌濃度（Minimalbactericidalconcentration,MBC）藥物敏感試驗醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!抑菌試驗醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!尿培養(yǎng)報告單金黃色葡萄球菌敏感：萬古霉素中介：氧氟沙星（諾氟沙星）耐藥：青霉素Ｇ、頭孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢三嗪、氨芐青霉素、羧芐青霉素報告單結果分析醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!醫(yī)院感染標本采集及檢驗標本采集、檢驗的一般程序醫(yī)院感染標本采集的一般標準標本的運送與處理各類醫(yī)院感染標本的采集和檢驗醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!標本采集的一般標準標本容器的要求：無菌干燥、寬口棉拭要求：不同部位的標本采集：眼、耳、鼻、喉、創(chuàng)面、膿腫、組織標本、痰、腦脊液標本及化驗單：病人姓名、采集時間及日期、病區(qū)、床號、標本名、采集部位、臨床診斷、檢驗項目與抗生素使用的時間關系存在正常菌群部位：消毒或繞道醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!標本的運送與處理標本采集后應盡快送檢采集與培養(yǎng)有時間間隔收到標本后的處理：

檢查----肉眼觀察---處理---涂片檢查---電話通知

立即處理的標本：腦脊液、眼分泌物，洗胃液肺組織(查結核分支桿菌)

可暫緩處理的標本：創(chuàng)面拭子、痰、糞便（冷藏2-3小時）、尿（冷藏24小時）醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!（一）血標本采樣時機：菌血癥出現(xiàn)于發(fā)熱或寒戰(zhàn)前1h內細菌性心內膜炎3次血培養(yǎng)（24h內3次,次間隔>1h）間歇性菌血癥3次/24-48h內、不同部位已接受抗生素治療的病人4-6次，吸收或中和血中的抗生素醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!血標本抽血至培養(yǎng)瓶（需氧或厭氧）35℃普通孵育置全自動血培養(yǎng)儀藥敏試驗獲得純菌菌種鑒定（生化鑒定：傳統(tǒng)或自動化）二級報告，微生物學檢驗報告單每日觀察儀器陽性報警涂片革蘭染色一級報告，通知臨床血平板、巧克力平板、麥康凱平板分離培養(yǎng)檢驗方法醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!血標本檢驗方法醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!（二）尿標本中段尿采樣女性：清潔----清洗----無菌紗布擦干----分開陰唇----置棉花于陰道口----留取中段尿10ml（滅菌容器）男性：清洗----沖洗----留取中段尿老年人和兒童：清潔外生殖器及肛門部位，用清潔的尿盆或燒瓶接取醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!檢查方法濕片鏡檢----指導培養(yǎng)離心----沉淀----涂片----染色分離培養(yǎng)----菌落觀察---涂片----鏡檢純培養(yǎng)結核桿菌檢查----抗酸染色培養(yǎng)（羅氏培養(yǎng)基）尿標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!尿快速檢驗報告（24h報告）無細菌生長或尿液含菌數≦103cfu/ml尿液含菌數>105cfu/ml,確定為大腸桿菌或糞鏈球菌,直接藥敏試驗結果滿意，作最后報告尿液含菌數>105cfu/ml，但鑒定結果不典型，24小時預報，第二天作細菌鑒定和純菌的藥敏試驗，爭取48小時最后報告尿標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!痰標本的處理取可疑部分（膿、血）接種及涂片涂片三張：1張革蘭染色、1張抗酸染色、1張備用接種5%血平板1個：分離全部細菌中國蘭平板1個：直接藥敏試驗呼吸道標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!不合格標本：標本中平均每個視野內扁平上皮細胞多于25個，找不到病變部分。合格標本：標本中可見白細胞（膿細胞）、柱狀上皮細胞集中，有時還可見到不少黏液絲（標本來自氣管或支氣管內分泌物）。鏡下觀察醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!上呼吸道正常寄生菌：草綠色鏈球菌常見病原菌：肺炎鏈球菌、A族鏈球菌、金黃色葡萄球菌、卡他布蘭漢菌、白喉棒狀桿菌、結核分支桿菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、腸桿菌和軍團菌等臨床意義呼吸道標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!（五）腦脊液標本采集時間：立即送檢采集方法：備物腰椎穿刺分裝處理：直接涂片分離培養(yǎng)（注意保溫）抗生素敏感試驗（立即報告）醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!檢驗及報告直接涂片：分離培養(yǎng)：厭氧培養(yǎng)、需氧培養(yǎng)抗生素藥敏實驗：只有一種、足夠數量----直接藥敏試驗多種細菌----分離出純菌后----藥敏試驗報告：直接涂片2h內，分離培養(yǎng)順利者24h,需補充試驗者24h預告，48h出最后報告一般可在72h報告有無厭氧菌，爭取4天出最后報告膿及傷口標本醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!尿培養(yǎng)報告單金黃色葡萄球菌敏感：萬古霉素中介：氧氟沙星（諾氟沙星）耐藥：青霉素Ｇ、頭孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢三嗪、氨芐青霉素、羧芐青霉素報告單結果分析醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!用于測定抗菌藥物體外抑制細菌生長的效能。定性測試的擴散法（diffusiontest）定量測定的稀釋法（dilutiontest）臨床常用由Bauer和Kirby建立的紙片瓊脂擴散法，即Kirby－Bauer法。抑菌試驗（bacteriostatictest）醫(yī)院感染學-標本采集和判斷共38頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!敏感（susceptible，S）：所測