2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效；在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)生物變異的敘述，錯(cuò)誤的是A．基因上堿基對(duì)的改變不一定引起遺傳性狀的改變B．姐妹染色單體同一位置上出現(xiàn)不同基因一定是基因重組導(dǎo)致的C．三倍體無(wú)子西瓜屬于可遺傳的變異D．染色體變異可在有絲分裂和減數(shù)分裂過(guò)程中發(fā)生2．研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)機(jī)體糖類物質(zhì)利用受阻或長(zhǎng)期不能進(jìn)食時(shí)，機(jī)體會(huì)動(dòng)用大量脂肪分解供能，脂肪分解后會(huì)生成酮體。當(dāng)人體內(nèi)的酮體濃度超過(guò)肝外組織所能利用的限度后，血液中酮體堆積，就會(huì)導(dǎo)致人體患酮血癥。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．酮血癥患者體內(nèi)可能胰島素分泌不足或細(xì)胞缺乏胰島素受體B．人長(zhǎng)期不補(bǔ)充糖類食物，除會(huì)患酮血癥外，尿氮含量也可能會(huì)增加C．患有糖尿病的酮血癥患者的組織細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取和利用率較高D．某患有酮血癥的個(gè)體出現(xiàn)頭昏、心慌和四肢無(wú)力，其可能患有低血糖病3．“引來(lái)繁花綴滿枝，瓜熟蒂落也有時(shí)”是多種激素相互作用的結(jié)果，下列說(shuō)法正確的是（）A．“瓜熟蒂落”的過(guò)程體現(xiàn)了乙烯和脫落酸的兩重性B．上述現(xiàn)象說(shuō)明植物激素控制植物的所有生命活動(dòng)C．噴灑高濃度植物激素2，4-D能延長(zhǎng)“繁花綴滿枝”的時(shí)間D．光、溫度等環(huán)境因子的變化可對(duì)基因組的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)4．下列有關(guān)利用生物技術(shù)培育作物新品種的相關(guān)操作敘述，正確的是（）A．用限制酶識(shí)別目的基因并與載體連接 B．用光學(xué)顯微鏡觀察目的基因是否導(dǎo)入C．培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基 D．利用平板劃線法在培養(yǎng)基上接種外植體5．圖為某種由常染色體上一對(duì)等位基因控制的隱性遺傳病系譜圖（深色代表的個(gè)體是該遺傳病患者，其余為表現(xiàn)型正常個(gè)體）。已知Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4都是純合子，下列推斷正確的是A．Ⅰ－2和Ⅰ－4一定都是純合子B．Ⅱ－3和Ⅱ－4為雜合子的概率不同C．Ⅳ－1和Ⅳ－2基因型相同的概率為7/12D．Ⅳ－1和Ⅳ－2結(jié)婚，后代患病的概率是1/646．下列關(guān)于細(xì)胞中基因表達(dá)的敘述，錯(cuò)誤的（）A．轉(zhuǎn)錄時(shí)，RNA聚合酶與DNA上的起始密碼相結(jié)合B．基因表達(dá)的產(chǎn)物內(nèi)部可能存在堿基互補(bǔ)配對(duì)的部分C．合成多肽的過(guò)程需要mRNA、tRNA和rRNA參與D．一DNA分子轉(zhuǎn)錄一次，可形成一個(gè)或多個(gè)合成多肽鏈的模板7．鹽堿地中生活的某種鹽生植物，其細(xì)胞的液泡膜上有一種載體蛋白，能將細(xì)胞質(zhì)中的Na+逆濃度梯度運(yùn)入液泡，減輕Na+對(duì)細(xì)胞質(zhì)中酶的傷害。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．Na+進(jìn)入液泡的過(guò)程體現(xiàn)了液泡膜的選擇透過(guò)性B．該載體蛋白作用的結(jié)果不利于增強(qiáng)細(xì)胞吸水能力C．鹽生植物通過(guò)調(diào)節(jié)Na+在細(xì)胞中的區(qū)域化作用等生理途徑，抵消或降低鹽分脅迫的作用D．鹽生植物的耐鹽性是長(zhǎng)期自然選擇的結(jié)果8．（10分）miRNA是人體的一類內(nèi)源性非編碼RNA，長(zhǎng)度為19-25個(gè)核苷酸。某miRNA能抑制W基因控制的W蛋白的合成，其形成和發(fā)揮作用的過(guò)程如下圖。敘述正確的是（）A．miRNA指導(dǎo)合成的肽鏈最多含8個(gè)氨基酸B．圖中①和②過(guò)程都只能發(fā)生A與U配對(duì)，不能發(fā)生T與A配對(duì)C．若miRNA不發(fā)揮作用，W基因mRNA同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體合成多條相同肽鏈D．miRNA通過(guò)抑制W基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而抑制W蛋白的合成二、非選擇題9．（10分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動(dòng)其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對(duì)“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見(jiàn)圖1、幾種常用限制酶名稱及識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)見(jiàn)圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計(jì)含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物，通過(guò)____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為_(kāi)___________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過(guò)處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。（4）將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時(shí)間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測(cè)細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”。研究中還會(huì)有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。10．（14分）甘露聚糖酶是分解纖維素的重要酶。該酶大量存在于土壤纖維素分解菌中。現(xiàn)采用基因工程方法將甘露聚糖酶基因?qū)雱?dòng)物腸道酵母菌中，以幫助動(dòng)物消化纖維素。請(qǐng)回答：（1）從土壤纖維素分解菌中獲得甘露聚糖酶，通過(guò)分析該酶的__________序列，優(yōu)先選擇酵母菌偏愛(ài)的密碼子，找到相對(duì)應(yīng)的__________序列，通過(guò)__________（填方法名稱）法合成甘露聚糖酶基因。（2）甘露聚糖酶基因與質(zhì)粒進(jìn)行連接構(gòu)建表達(dá)載體，表達(dá)載體中甘露聚糖酶基因應(yīng)位于_________之間才能表達(dá)，表達(dá)載體還需加入一些調(diào)控元件，將該工程的表達(dá)載體構(gòu)建為分泌型表達(dá)載體而非胞內(nèi)型表達(dá)載體，目的是__________。（3）通過(guò)電擊方法將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到處于_______的酵母細(xì)胞，經(jīng)檢測(cè)轉(zhuǎn)化成功的酵母細(xì)胞不存在環(huán)狀DNA，可初步推測(cè)導(dǎo)入的表達(dá)載體已整合到酵母細(xì)胞的__________上。（4）獲得的甘露聚糖酶需要與天然的甘露聚糖酶進(jìn)行__________比較。11．（14分）科學(xué)家以布氏田鼠為材料展開(kāi)相關(guān)研宄，研究發(fā)現(xiàn)：在寒冷刺激下，支配褐色脂肪細(xì)胞（重要的產(chǎn)熱細(xì)胞）的交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素，激活褐色脂肪細(xì)胞中的蛋白激酶A信號(hào)通路，誘導(dǎo)線粒體內(nèi)膜上的產(chǎn)熱蛋白表達(dá)，使產(chǎn)熱增加。同時(shí)，寒冷改變腸道內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)，菌群產(chǎn)生的短鏈脂肪酸增加，也能刺激褐色脂肪細(xì)胞產(chǎn)熱，而機(jī)體產(chǎn)熱反過(guò)來(lái)又影響腸道菌群結(jié)構(gòu)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)請(qǐng)依據(jù)題干信息進(jìn)行推斷：去甲腎上腺素是作為_(kāi)____(填“神經(jīng)遞質(zhì)”或“激素”）影響了褐色脂肪細(xì)胞的產(chǎn)熱，去甲腎上腺素主要影響有氧呼吸的第______階段，產(chǎn)熱蛋白通過(guò)抑制該階段________，使有機(jī)物釋放的能量全部轉(zhuǎn)化為熱能。(2)布氏田鼠體溫調(diào)節(jié)中樞位于____，布氏田鼠機(jī)體產(chǎn)熱與腸道菌群存在_____調(diào)節(jié)機(jī)制。(3)白色脂肪組織的主要功能是儲(chǔ)存過(guò)剩的能量，而褐色脂肪組織的主要功能則是產(chǎn)熱（它的產(chǎn)熱能力是肝臟的60倍）。另有研究表明，將寒冷環(huán)境下小鼠的腸道菌群移植到無(wú)菌小鼠中，無(wú)菌小鼠發(fā)生了白色脂肪組織的褐變，從而加快了脂肪燃燒。上述研究，為解決現(xiàn)代人非常關(guān)注的“肥胖”問(wèn)題提供了的新的可能，這種新的可能措施是_____。12．為研究低氧脅迫對(duì)青瓜品種根系細(xì)胞呼吸的影響，某研究小組用A、B兩個(gè)青瓜品種進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。圖示結(jié)果為一周后測(cè)得的根系中乙醇的含量?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）由圖中信息可推出，正常通氣情況下，青瓜品種A、B的根系細(xì)胞呼吸作用產(chǎn)生的來(lái)自于________（填細(xì)胞結(jié)構(gòu)的名稱）。（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，青瓜品種________對(duì)氧氣濃度的變化較為敏感，直接原因是該品種根系細(xì)胞中與無(wú)氧呼吸有關(guān)的酶含量較高，根本原因是________。（3）根系長(zhǎng)期處于低氧環(huán)境中，青瓜吸收無(wú)機(jī)鹽的能力會(huì)下降，根系可能變黑、腐爛，原因分別是________、________。

參考答案（含詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【答案解析】

本題考查可遺傳變異的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記能力和通過(guò)比較、分析理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)的能力?！绢}目詳解】A、由于密碼子的簡(jiǎn)并性等原因，基因上堿基對(duì)的改變不一定引起遺傳性狀的改變，A正確；B、姐妹染色單體的同一位置上出現(xiàn)不同基因也可能是基因突變引起的，B錯(cuò)誤；C、三倍體無(wú)子西瓜的體細(xì)胞中的染色體（DNA）數(shù)目發(fā)生改變，因此屬于可遺傳的變異，C正確；D、有絲分裂和減數(shù)分裂過(guò)程中都可以發(fā)生染色體變異，D正確；故選B?！敬鸢更c(diǎn)睛】密碼子的簡(jiǎn)并性使得基因表達(dá)過(guò)程中具有了較強(qiáng)的容錯(cuò)性，有利于遺傳的穩(wěn)定性；染色體上的DNA復(fù)制形成的兩個(gè)子代DNA位于姐妹染色單體上，復(fù)制時(shí)的基因突變可以造成姐妹染色體單體上出現(xiàn)等位基因。2、C【答案解析】

由題干可知，脂肪分解生成酮體。酮體的濃度超過(guò)一定限度，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體患酮血癥。脂肪過(guò)多分解的原因主要由兩種：一種是糖尿病患者，另一種是長(zhǎng)時(shí)間不補(bǔ)充糖類食物，導(dǎo)致肌肉以脂肪為呼吸底物?！绢}目詳解】多數(shù)患有酮血癥的患者都患有糖尿病，糖尿病產(chǎn)生的原因是體內(nèi)胰島素分泌不足或細(xì)胞缺乏胰島素受體，A正確；當(dāng)機(jī)體長(zhǎng)期不補(bǔ)充糖類食物時(shí)，機(jī)體會(huì)以脂肪和蛋白質(zhì)為底物進(jìn)行氧化分解供能，故該機(jī)體除患酮血癥外，尿氮含量還可能會(huì)增加，B正確；含有糖尿病的酮血癥患者，組織細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取、利用效率低，從而導(dǎo)致血糖濃度高，C錯(cuò)誤；某患有酮血癥的個(gè)體出現(xiàn)頭暈心慌和四肢無(wú)力，可能是因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間不補(bǔ)充糖類物質(zhì)而導(dǎo)致低血糖，D正確；因此，本題答案選C?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是看清題干中相關(guān)信息“研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)機(jī)體糖類物質(zhì)利用受阻或長(zhǎng)期不能進(jìn)食時(shí)，機(jī)體會(huì)動(dòng)用大量脂肪分解供能，脂肪分解后會(huì)生成酮體”，再根據(jù)題意作答。3、D【答案解析】

植物的生命活動(dòng)受多種激素相互作用共同調(diào)節(jié)，但是激素不能控制植物的所有生命活動(dòng)。以此相關(guān)知識(shí)做出判斷。【題目詳解】A.乙烯和脫落酸不具有調(diào)節(jié)作用的兩重性，A錯(cuò)誤。B.植物激素對(duì)植物的生命活動(dòng)有調(diào)節(jié)作用，B錯(cuò)誤。C.噴灑高濃度植物激素2，4-D會(huì)疏花疏果，所以不能延長(zhǎng)“繁花綴滿枝”的時(shí)間，C錯(cuò)誤。D.光、溫度等環(huán)境因子的變化可對(duì)基因組的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)，D正確。故選D?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題文需識(shí)記生長(zhǎng)素具有兩重性，乙烯和脫落酸等激素沒(méi)有兩重性。4、C【答案解析】

1、關(guān)于限制酶，考生可以從以下幾方面把握：（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)。（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。2、目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】A、限制酶可識(shí)別目的基因，但是目的基因與載體連接需要DNA連接酶，A錯(cuò)誤；B、光學(xué)顯微鏡無(wú)法觀察基因，可用標(biāo)記基因檢測(cè)，B錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，C正確；D、平板劃線法是用來(lái)接種微生物的，外植體接種不需要平板劃線，D錯(cuò)誤。故選C。5、C【答案解析】

分析系譜圖，圖示為某種單基因常染色體隱性遺傳病的系譜圖（用A、a表示），則Ⅰ-1和Ⅰ-3的基因型均為aa，Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的基因型均為Aa，Ⅲ-3的基因型及概率為1/3AA、2/3Aa。【題目詳解】Ⅰ－2和Ⅰ－4都可能是純合子AA或雜合子Aa，A錯(cuò)誤；由于父親是患者aa，所以Ⅱ－3和Ⅱ－4都肯定為雜合子Aa，B錯(cuò)誤；已知Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4都是純合子AA，且Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4的基因型均為Aa，Ⅲ-3的基因型及概率為1/3AA、2/3Aa，則Ⅳ－1是雜合子Aa的概率=1/2×1/2=1/4，Ⅳ－2是雜合子Aa的概率=2/3×1/2=1/3，因此Ⅳ－1和Ⅳ－2基因型相同的概率=1/4×1/3+3/4×2/3=7/12，C正確；Ⅳ－1和Ⅳ－2結(jié)婚，后代患病的概率=1/4×1/3×1/4=1/48，D錯(cuò)誤?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的分離定律及其實(shí)質(zhì)，能夠根據(jù)遺傳方式和表現(xiàn)型寫出遺傳圖譜中相關(guān)個(gè)體的基因型，并結(jié)合題干要求進(jìn)行相關(guān)的計(jì)算。6、A【答案解析】

基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程，轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成mRNA分子的過(guò)程，主要發(fā)生在細(xì)胞核中，以核糖核苷酸為原料；翻譯是以mRNA為模板，以氨基酸為原料模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，發(fā)生在核糖體上?！绢}目詳解】A、起始密碼在mRNA上，不在DNA上，轉(zhuǎn)錄時(shí)，RNA聚合酶與DNA上的啟動(dòng)子相結(jié)合，A錯(cuò)誤；B、基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程，其中轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物中的tRNA分子的內(nèi)部存在部分堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象，B正確；C、合成多肽的過(guò)程需要mRNA作為模板、tRNA運(yùn)輸氨基酸、核糖體作為場(chǎng)所，而rRNA是核糖體的組成成分，C正確；D、一個(gè)DNA分子轉(zhuǎn)錄一次，可形成一個(gè)或多個(gè)合成多肽鏈的模板，D正確。故選A。7、B【答案解析】

題中指出“細(xì)胞的液泡膜上有一種載體蛋白，能將細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的Na+逆濃度梯度運(yùn)入液泡”，這符合主動(dòng)運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn)，增大了細(xì)胞液的濃度，使植物細(xì)胞的吸水能力增強(qiáng)，而適應(yīng)鹽堿環(huán)境?！绢}目詳解】A、細(xì)胞的液泡膜上的載體蛋白能逆濃度運(yùn)輸Na+，說(shuō)明Na+運(yùn)輸方式是主動(dòng)運(yùn)輸，體現(xiàn)了液泡膜的選擇透過(guò)性，A正確；B、該載體蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)Na+進(jìn)入細(xì)胞液后，提高了細(xì)胞液的濃度，增強(qiáng)細(xì)胞的吸水能力，使植物更好地在鹽堿地生活，B錯(cuò)誤；C、生長(zhǎng)在鹽漬環(huán)境中該鹽生植物，通過(guò)滲透調(diào)節(jié)、鹽離子在細(xì)胞中的區(qū)域化作用等生理途徑，抵消或降低鹽分脅迫的作用，以維護(hù)其正常生理活動(dòng)的抗鹽性能，C正確；D、鹽生植物的耐鹽性是植物生活在特定環(huán)境中經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的自然選擇形成的，D正確。故選B?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題考查了物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式的有關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生掌握不同物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式的特點(diǎn)，能夠結(jié)合題干信息判斷物質(zhì)的運(yùn)輸方式。8、C【答案解析】

當(dāng)RNA聚合酶與DNA分子的某一啟動(dòng)部位結(jié)合后，啟動(dòng)DNA轉(zhuǎn)錄形成RNA。根據(jù)題圖可知，miRNA基因在核內(nèi)轉(zhuǎn)錄成mRNA后，經(jīng)過(guò)初步加工，然后通過(guò)核孔到達(dá)細(xì)胞質(zhì)中，在細(xì)胞質(zhì)中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成miRNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體，該復(fù)合體與W基因的mRNA結(jié)合，從而導(dǎo)致W基因mRNA翻譯過(guò)程受阻。【題目詳解】A、miRNA是非編碼RNA，即不會(huì)編碼蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、①過(guò)程為轉(zhuǎn)錄，能發(fā)生A-U配對(duì)，也能發(fā)生T-A配對(duì)，②為翻譯，只能發(fā)生A-U配對(duì)，B錯(cuò)誤；C、mRNA上同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體，其模板為同一條mRNA，合成的多條肽鏈相同，C正確；D、miRNA蛋白質(zhì)復(fù)合物作用到了W基因的mRNA上，只能抑制X基因的翻譯，不會(huì)抑制W基因的轉(zhuǎn)錄，D錯(cuò)誤。故選C?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題考查學(xué)生對(duì)遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解決此類問(wèn)題需要學(xué)生熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)，系統(tǒng)、全面地構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，據(jù)此從圖示中提取信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。二、非選擇題9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對(duì)照【答案解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)（cDNA）。其中基因組文庫(kù)包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫(kù)只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時(shí)間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識(shí)別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識(shí)別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識(shí)別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達(dá)載體?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過(guò)Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時(shí)間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，可以檢測(cè)細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細(xì)胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”。為了增加實(shí)驗(yàn)的可信度，還需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，因?yàn)椴缓琍D-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”不會(huì)阻斷?！敬鸢更c(diǎn)睛】題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)在新的情景材料下分析運(yùn)用。10、氨基酸脫氧核苷酸人工化學(xué)合成法啟動(dòng)子和終止子使轉(zhuǎn)基因的酵母細(xì)胞合成的甘露聚糖酶能夠分泌到動(dòng)物腸道中感受態(tài)染色體功能活性【答案解析】

基因工程的基本操作程序：1、目的基因的獲取方法：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲??；②人工合成（反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法）；③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的轉(zhuǎn)化方法：常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射技術(shù)、Ca2+處理法。4、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)：【題目詳解】（1）甘露聚糖酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，所以需要分析酶的氨基酸序列，找到可相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，通過(guò)人工化學(xué)合成法合成目基因。（2）目的基因應(yīng)位于啟動(dòng)子和終止子之間才能表達(dá)；該基因工程改造的是動(dòng)物腸道的酵母菌，讓轉(zhuǎn)基因的酵母菌能夠分泌甘露聚糖酶幫助動(dòng)物消化纖維素，所以為了使轉(zhuǎn)基因的酵母細(xì)胞合成的甘露聚糖酶能夠分泌到動(dòng)物腸道，必須構(gòu)建為分泌型表達(dá)載體。（3）將目的基因?qū)胛⑸?，微生物必須處于易于接受周圍DNA的狀態(tài)（感受態(tài)），如果化成功的酵母細(xì)胞不存在環(huán)狀DNA，可初步推測(cè)導(dǎo)入的表達(dá)載體已整合到酵母細(xì)胞的染色體上。（4）有的基因工程產(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的功能活性是否與天然產(chǎn)品相同?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)，本題的（2）需要結(jié)合蛋白質(zhì)發(fā)揮作用的場(chǎng)所進(jìn)行推斷。11、神經(jīng)遞質(zhì)