dsDNA使用TBK1-IRF3信號(hào)通路與ZBP-11.DsDNA使用TBK1-IRF3信號(hào)通路IRF作為轉(zhuǎn)錄因子不僅僅在許多細(xì)胞類型中調(diào)控IFN的表達(dá),更是一類重要的多功的轉(zhuǎn)錄因子。IRF-3在非感染細(xì)胞中存在于胞質(zhì)中,在胞質(zhì)中不與其他蛋白質(zhì)結(jié)合，以單體非活化形式存在。一旦受到上游信號(hào)轉(zhuǎn)的刺激，IRF-3

被磷酸化激活，分子內(nèi)部的自我抑制域被打開，形成同二聚體或與

IRF-7形成異二聚體后進(jìn)入細(xì)胞核，與共同活化因子

CBP/p300

結(jié)合發(fā)揮轉(zhuǎn)錄活性。磷酸化后的

IRF-3與

b-干擾素啟動(dòng)子結(jié)合，可顯著增高病毒介導(dǎo)的

I型

IFN的表達(dá)。IRF-3磷酸化受多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及相關(guān)分子的調(diào)控。病毒入侵后,模式識(shí)別受體通過識(shí)別病原相關(guān)分子模式，經(jīng)線粒體抗病毒信號(hào)傳送蛋白(MAVS)等接頭蛋白傳遞信號(hào)，激活下游激酶復(fù)合體(如

IKKβ-IKKa-IKKγ和TBK1/IKKε)，通過不同機(jī)制活化轉(zhuǎn)錄因子IRF-3，引起I型IFN及抗病毒細(xì)胞因子表達(dá)，IFN進(jìn)一步激活

IFN信號(hào)通路,刺激數(shù)百個(gè)

IFN

刺激基因（ISG)表達(dá),并由ISG啟動(dòng)抗病毒效應(yīng)。在病毒感染的早期，組成型表達(dá)的IRF-3被磷酸化后入核,激活I(lǐng)FN-β的少量表達(dá)，IFN-β結(jié)合型IFN受體(IFNR)，通過干擾素刺激基因因子3(ISGF3)復(fù)合體結(jié)合在IRF-7啟動(dòng)子上誘導(dǎo)其大量表達(dá);在感染的晚期IRF-7被磷酸化入核，誘導(dǎo)IFN-α、IFN-β的大量表達(dá)，從而激活抗病毒基因的表達(dá)，起到抗病毒的作用。23(2)TBK1-IRF3信號(hào)軸對(duì)于由胞漿B-DNA刺激誘導(dǎo)IFN-Ⅰ是至關(guān)重要的

我們把我們的注意力轉(zhuǎn)向TBK1，之前發(fā)現(xiàn)對(duì)于在感染期間通過病毒的dsRNA誘導(dǎo)IFN-Ⅰ是必需的。TBK1是非經(jīng)典的IκB激酶和IKKα以及IKKβ相關(guān)，是NF-κB活化的調(diào)節(jié)者。它在NF-κB活動(dòng)和IFN-Ⅰ反應(yīng)中起中介作用由TLR依賴和非依賴途徑觸發(fā)。TBK1也已證明對(duì)于當(dāng)用CpGDNA刺激時(shí)類胞漿樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生IFN-α是非必需的。和那個(gè)觀察形成對(duì)比，我們表明IFNβ和其他的由B-DNA轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)的趨化因子反應(yīng)在TBK1-/-

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞是完全沒有的。TBK1對(duì)于IRF3的二聚化是必須的，由B-DNA所誘導(dǎo)，但B-DNA誘導(dǎo)NF-κB激活是多余的。因此TBK1-IRF3信號(hào)軸對(duì)于由胞漿B-DNA刺激誘導(dǎo)IFN-Ⅰ是至關(guān)重要的。(3)大多數(shù)的上調(diào)基因是干擾素誘導(dǎo)基因也是抗病毒相關(guān)基因大多數(shù)的上調(diào)基因是干擾素誘導(dǎo)基因也是抗病毒相關(guān)基因如MX1和QASL2。因?yàn)檫@個(gè)原因，當(dāng)用dsDNA預(yù)培養(yǎng)時(shí)，WTMEFs,而非TBK1-/-MEFs，能更好地免受水皰口炎病毒的威脅。除了越來越多的抗病毒反應(yīng)外，TBK1依賴的通過DNA誘導(dǎo)IFN-Ⅰ的反應(yīng)也被發(fā)現(xiàn)對(duì)DNA疫苗的功效至關(guān)重要。缺乏TBK1的小鼠不能誘導(dǎo)抗原特異性的CD4和CD8T細(xì)胞以及產(chǎn)生IFNγ脾細(xì)胞的增加頻率，當(dāng)用流行性感冒病毒DNA免疫時(shí)。(4)TBK1和IKKεTBK1和IKKε激酶的激活觸發(fā)了一連串的信號(hào)通過轉(zhuǎn)錄因子包括IRF的成員及標(biāo)準(zhǔn)的NF-κB家族的磷酸化。最近的發(fā)現(xiàn)表明TBK1和IKKε在細(xì)胞中RAS誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)化中起作用。TBK1由RalB-Sec5效應(yīng)物復(fù)合物募集和激活，這對(duì)RAS起中介作用的轉(zhuǎn)化是必需的。TBK1對(duì)于抑制細(xì)胞凋亡是必需的在應(yīng)答RAS激活時(shí)，可能通過參與v-akt小鼠胸腺瘤病毒致癌基因同系物（AKT）存活途徑。相似的，IKKε也被鑒定為磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-AKT通路的效應(yīng)器，和MAP激酶-ERK激酶（MEK）合作去促進(jìn)轉(zhuǎn)化。通過siRNA抑制增值，黏附和一些腫瘤細(xì)胞系侵襲可以損害IKKε表達(dá)。在前列腺癌疾病模型中，觀察到IKKε表達(dá)水平和惡性腫瘤存在相關(guān)。3

Z-DNA結(jié)合蛋白-1（ZBP-1）ZBP-1，也被認(rèn)為是DNA依賴的干擾素調(diào)節(jié)因子（DAI）和DLM-1的激活物，是繼TLR9之后最早被發(fā)現(xiàn)的胞漿DNA感受器。在被發(fā)現(xiàn)是胞漿DNA感受器之前，ZBP-1被認(rèn)為在調(diào)節(jié)mRNA代謝中起作用并且作為腫瘤相關(guān)的蛋白參與主體對(duì)抗細(xì)胞壓力反應(yīng)。這是一個(gè)IFN-可誘導(dǎo)的基因產(chǎn)物最初被報(bào)道通過兩個(gè)結(jié)合域結(jié)合Z-DNA。

(2)ZBP-1利用TBK1-IRF3信號(hào)通路誘導(dǎo)IFN-Ⅰ產(chǎn)生它被表明在B-DNA刺激后誘導(dǎo)IRF3的二聚化。此外，TBK1和IRF3被證明和ZBP-1有生理上的聯(lián)系，當(dāng)用B-DNA刺激并用免疫共沉淀分析后。當(dāng)ZBP-1,IRF3和TBK1之間的這種聯(lián)系發(fā)生時(shí)，ZBP-1需要在絲氨酸352和353位置磷酸化。ZBP-1也可以通過B-DNA誘導(dǎo)介導(dǎo)NF-κB激活。詳細(xì)的試驗(yàn)揭示ZBP-1包含兩個(gè)受體相互作用蛋白（