薄層色譜儀分離鑒定食品中的黃酮類化合物一實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^薄層色譜儀分離食品中的黃酮類化合物粗提物的實(shí)驗(yàn)，了解薄層色譜分離方法的原理及薄層色譜儀的結(jié)構(gòu)；掌握薄層色譜儀及其相關(guān)軟件的使用方法。二實(shí)驗(yàn)原理薄層色譜法（TLC）是把吸附劑或支持劑鋪在玻璃板或鋁板上，將樣品點(diǎn)在其上，然后用溶劑展開，使樣品中各個(gè)組分相互分離的方法。具有技術(shù)簡(jiǎn)單、操作容易、分析速度快、高分辨能力、結(jié)果直觀等特點(diǎn)。應(yīng)用范圍非常廣泛。有機(jī)混合物中各組分對(duì)吸附劑的吸附能力不同，當(dāng)展開劑流經(jīng)吸附劑時(shí)，有機(jī)物各組分會(huì)發(fā)生無數(shù)次吸附和解吸過程，吸附力弱的組分隨流動(dòng)相迅速向前，而吸附力弱的組分則滯后，由于各組分不同的移動(dòng)速度而使得它們得以分離。物質(zhì)被分離后在圖譜上的位置，常用比移值Rf表示。

三實(shí)驗(yàn)儀器與材料儀器：瑞士卡瑪(CAMAG,Switzerland)構(gòu)造如下(本實(shí)驗(yàn)室薄層色譜儀包含除6之外的所有部件)。抿告4構(gòu)造如下(本實(shí)驗(yàn)室薄層色譜儀包含除6之外的所有部件)。抿告4T材料：實(shí)驗(yàn)室提取離食品中的黃酮類化合物粗提物、商品化硅膠板試劑：石油醚、乙酸乙酯、甲酸等實(shí)驗(yàn)方法及過程薄層板使用前先活化,如有特殊要求,還應(yīng)預(yù)洗?；罨椒ǎ簩⒆灾乒枘z板或商品化硅膠板移入烘箱，緩慢升溫至105-110°C恒溫活化半小時(shí),取出放入干燥器中備用。注意：移動(dòng)硅膠板時(shí)，手指、手掌勿碰觸板內(nèi)硅膠層，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2.點(diǎn)樣點(diǎn)樣是平面色譜中最重要的步驟，點(diǎn)樣過程中產(chǎn)生的誤差無法通過色譜展開和計(jì)算來校正。本設(shè)備采用噴霧點(diǎn)樣，條帶狀等多種方式點(diǎn)樣。其中條帶狀點(diǎn)樣適合中藥成分分析。本實(shí)驗(yàn)使用半自動(dòng)點(diǎn)樣裝置進(jìn)行點(diǎn)樣。《中國(guó)藥典薄層圖譜集》對(duì)點(diǎn)樣的要求■—般■—般K&■點(diǎn)狀點(diǎn)樣，肓徑一HS個(gè)XT^mro<ilu;口采用接觸式時(shí)盡量不要損傷薄層板■定量點(diǎn)樣，提高樣品色譜和對(duì)照藥材色譜可比|?點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注贏選擇適宜的溶劑口樣品的溶解度溶液粘度methanolnJhexanetoluerw3.展開展開式薄層色譜中受影響因素最多的步驟，展開劑的選擇、不同展開方式、溫度、展開距離對(duì)成分分離的影響。其中展開濕度的影響值得重視且較難控制。本實(shí)驗(yàn)使用展開劑為：石油醚:乙酸乙酯:甲酸=5.5:3.5:0.1本實(shí)驗(yàn)室使用的為全自動(dòng)展開系統(tǒng)色譜后衍生化本實(shí)驗(yàn)室使用的薄層色譜儀器帶熱激發(fā)反應(yīng)，可短時(shí)間內(nèi)將展開板進(jìn)行烘干。圖譜記錄和評(píng)價(jià)軟件使用及操作步驟打開所需使用儀器部件開關(guān)；打開電腦，雙擊卡瑪薄層色譜儀軟件winCATS；檢測(cè)電腦是否與薄層色譜儀連接；新建實(shí)驗(yàn)（命名，基本描述等）；選擇實(shí)驗(yàn)所需使用儀器部件，如半自動(dòng)點(diǎn)樣裝置、自動(dòng)展開器、觀察拍照等設(shè)置參數(shù)點(diǎn)擊軟件中“開始鍵”；將所需前處理的硅膠板經(jīng)處理后，放入半自動(dòng)點(diǎn)樣裝置內(nèi)；手動(dòng)上樣（注射器內(nèi)總樣品體積要大于設(shè)置中點(diǎn)樣總體積，否則機(jī)器報(bào)錯(cuò)），打開氣閥，點(diǎn)樣針下方墊4-8層吸水紙，用于吸走排出的樣品；點(diǎn)樣結(jié)束后，將硅膠板放入展開器內(nèi)（硅膠面朝里）；分別倒入展開劑及飽和劑，展開結(jié)束后，展開器內(nèi)會(huì)自動(dòng)烘干硅膠板；11.顯色觀察拍照，或選擇所用光（254nm,366nm,白光等）進(jìn)行觀察拍照；利用鋪板器械手動(dòng)制作硅膠板利用展開過程