一、標本的采集種類和要求1

、推薦采集的呼吸道標本種類疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒采樣液，并立即用冰塊或冰排保存或置于4℃（冰箱），并馬上送至實驗室。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。）采樣同時填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單。（附表1）

一、標本的采集種類和要求11）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。

2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。

3）咽喉擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒從口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上顎扁桃的發(fā)紅部位為中心，摩擦數(shù)次，采集粘膜表皮。采集時，要注意不要觸碰到唾液。（采樣視頻網(wǎng)址

1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，2甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件3甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件4甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件5甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件62、拭子的選擇

標本應使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維），用鋁或塑料做柄。不推薦棉拭子和木柄。標本采集管應包含3毫升病毒采樣液（含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，阻止細菌和真菌生長的抗生素，緩沖液）

2、拭子的選擇

標本應使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚7填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單3、臨床標本儲存要求

保存在4℃（不能超過4天）或者-70℃或-70℃以下。※選項：參照傳染病報告卡。遵循生物安全三級個人防護。三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單如有不適，應立即向上級報告。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。采集時，要注意不要觸碰到唾液。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：3、臨床標本儲存要求

保存在4℃（不能超過4天）或者-70℃或-70℃以下。有條件的實驗室均應保存在-70℃或-70℃以下。不應保存在-20℃。

填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。3、84、標本的分裝處理

標本送至實驗室后，立即進行處理，避免反復凍融。將原始標本分為三份，一份用于核酸檢測，一份用于病毒分離，一份保存待復核。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）

4、標本的分裝處理

標本送至實驗室后，立即進行處理，避免反復95、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。

5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A10二、核酸檢測

基于PCR原理的核酸檢測方法是一種快速有效的診斷方法，在突發(fā)傳染病應急工作中發(fā)揮了巨大作用。

1、基于real-timeRT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物和探針序列為美國CDC設(shè)計）：

4月29日WHO網(wǎng)站上公布了美國CDC設(shè)計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探針，此實驗用于檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建議首先篩選甲型流感病毒并排除季節(jié)性流感病毒和H5N1禽流感病毒。real-timeRT-PCR方法參考。

2、基于RT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物序列為國家流感中心設(shè)計）：

目前國家流感中心設(shè)計了RT-PCR方法檢測新的甲型H1N1流感病毒

二、核酸檢測

11三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。具備相應條件的網(wǎng)絡(luò)實驗室在收到標本后24h內(nèi)進行病毒接種。

三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病12四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。遵循生物安全三級個人防護。

2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。

四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一13（二）健康監(jiān)測

1、所有人員均應自測發(fā)熱及其他癥狀。

2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。如有不適，應立即向上級報告。

3、如有人員在無防護情況下暴露于甲型H1N1流感確診病例的臨床標本或活病毒，應考慮在暴露后的7天時間里使用奧司他韋或扎那米韋進行抗病毒藥物預防。

（二）健康監(jiān)測

1、所有人員均應自測發(fā)熱及其他癥狀。14五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單

五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采15

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量（g或ml)采集日期備注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單16※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：

※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻17附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量*

（g或ml)采集日期備注附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單

姓名性18※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）*標本量：如果同一份標本有多個包裝請注明。

填表人員：送樣時間：單位（蓋章

)※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽19

謝謝！甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件20一、標本的采集種類和要求1

、推薦采集的呼吸道標本種類疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒采樣液，并立即用冰塊或冰排保存或置于4℃（冰箱），并馬上送至實驗室。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。）采樣同時填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單。（附表1）

一、標本的采集種類和要求212）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中?！x項：參照傳染病報告卡。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。具備相應條件的網(wǎng)絡(luò)實驗室在收到標本后24h內(nèi)進行病毒接種。3、臨床標本儲存要求

保存在4℃（不能超過4天）或者-70℃或-70℃以下。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。2、拭子的選擇

標本應使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維），用鋁或塑料做柄。四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。標本量*

（g或ml)四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行?！x項：參照傳染病報告卡。目前國家流感中心設(shè)計了RT-PCR方法檢測新的甲型H1N1流感病毒5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。real-timeRT-PCR方法參考。2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦22四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。遵循生物安全三級個人防護。

2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。

四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一23

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量（g或ml)采集日期備注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單24※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：

※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻25#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：將原始標本分為三份，一份用于核酸檢測，一份用于病毒分離，一份保存待復核。一、標本的采集種類和要求※選項：參照傳染病報告卡。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。real-timeRT-PCR方法參考。2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單4、標本的分裝處理

標本送至實驗室后，立即進行處理，避免反復凍融。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單4月29日WHO網(wǎng)站上公布了美國CDC設(shè)計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探針，此實驗用于檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建議首先篩選甲型流感病毒并排除季節(jié)性流感病毒和H5N1禽流感病毒。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。具備相應條件的網(wǎng)絡(luò)實驗室在收到標本后24h內(nèi)進行病毒接種。填表人員：送樣時間：單位（蓋章)遵循生物安全三級個人防護。疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液?！x項：參照傳染病報告卡。如有不適，應立即向上級報告。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）4月29日WHO網(wǎng)站上公布了美國CDC設(shè)計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探針，此實驗用于檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建議首先篩選甲型流感病毒并排除季節(jié)性流感病毒和H5N1禽流感病毒。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。標本量*

（g或ml)填表人員：送樣時間：單位（蓋章)#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。采集時，要注意不要觸碰到唾液。遵循生物安全三級個人防護。real-timeRT-PCR方法參考。2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。1、基于real-timeRT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物和探針序列為美國CDC設(shè)計）：（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）※選項：參照傳染病報告卡。有條件的實驗室均應保存在-70℃或-70℃以下?！x項：參照傳染病報告卡?；赑CR原理的核酸檢測方法是一種快速有效的診斷方法，在突發(fā)傳染病應急工作中發(fā)揮了巨大作用。疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。如有不適，應立即向上級報告。1、基于real-timeRT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物和探針序列為美國CDC設(shè)計）：氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：3）咽喉擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒從口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上顎扁桃的發(fā)紅部位為中心，摩擦數(shù)次，采集粘膜表皮。2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。）采樣同時填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：如有不適，應立即向上級報告。一、標本的采集種類和要求1、基于real-timeRT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物和探針序列為美國CDC設(shè)計）：填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。遵循生物安全三級個人防護。5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。real-timeRT-PCR方法參考。遵循生物安全三級個人防護。5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量*

（g或ml)采集日期備注#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取26一、標本的采集種類和要求1

、推薦采集的呼吸道標本種類疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒采樣液，并立即用冰塊或冰排保存或置于4℃（冰箱），并馬上送至實驗室。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。）采樣同時填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單。（附表1）

一、標本的采集種類和要求271）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。

2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。

3）咽喉擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒從口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上顎扁桃的發(fā)紅部位為中心，摩擦數(shù)次，采集粘膜表皮。采集時，要注意不要觸碰到唾液。（采樣視頻網(wǎng)址

1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，28甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件29甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件30甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件31甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件322、拭子的選擇

標本應使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維），用鋁或塑料做柄。不推薦棉拭子和木柄。標本采集管應包含3毫升病毒采樣液（含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，阻止細菌和真菌生長的抗生素，緩沖液）

2、拭子的選擇

標本應使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚33填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單3、臨床標本儲存要求

保存在4℃（不能超過4天）或者-70℃或-70℃以下。※選項：參照傳染病報告卡。遵循生物安全三級個人防護。三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單如有不適，應立即向上級報告。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。采集時，要注意不要觸碰到唾液。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：3、臨床標本儲存要求

保存在4℃（不能超過4天）或者-70℃或-70℃以下。有條件的實驗室均應保存在-70℃或-70℃以下。不應保存在-20℃。

填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。3、344、標本的分裝處理

標本送至實驗室后，立即進行處理，避免反復凍融。將原始標本分為三份，一份用于核酸檢測，一份用于病毒分離，一份保存待復核。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）

4、標本的分裝處理

標本送至實驗室后，立即進行處理，避免反復355、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。

5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A36二、核酸檢測

基于PCR原理的核酸檢測方法是一種快速有效的診斷方法，在突發(fā)傳染病應急工作中發(fā)揮了巨大作用。

1、基于real-timeRT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物和探針序列為美國CDC設(shè)計）：

4月29日WHO網(wǎng)站上公布了美國CDC設(shè)計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探針，此實驗用于檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建議首先篩選甲型流感病毒并排除季節(jié)性流感病毒和H5N1禽流感病毒。real-timeRT-PCR方法參考。

2、基于RT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒（引物序列為國家流感中心設(shè)計）：

目前國家流感中心設(shè)計了RT-PCR方法檢測新的甲型H1N1流感病毒

二、核酸檢測

37三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。具備相應條件的網(wǎng)絡(luò)實驗室在收到標本后24h內(nèi)進行病毒接種。

三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病38四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。遵循生物安全三級個人防護。

2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。

四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一39（二）健康監(jiān)測

1、所有人員均應自測發(fā)熱及其他癥狀。

2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。如有不適，應立即向上級報告。

3、如有人員在無防護情況下暴露于甲型H1N1流感確診病例的臨床標本或活病毒，應考慮在暴露后的7天時間里使用奧司他韋或扎那米韋進行抗病毒藥物預防。

（二）健康監(jiān)測

1、所有人員均應自測發(fā)熱及其他癥狀。40五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單

五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采41

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量（g或ml)采集日期備注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單42※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：

※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻43附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量*

（g或ml)采集日期備注附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單

姓名性44※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）*標本量：如果同一份標本有多個包裝請注明。

填表人員：送樣時間：單位（蓋章

)※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽45

謝謝！甲型HN流感病毒樣品采集運送及檢驗技術(shù)課件46一、標本的采集種類和要求1

、推薦采集的呼吸道標本種類疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒采樣液，并立即用冰塊或冰排保存或置于4℃（冰箱），并馬上送至實驗室。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。）采樣同時填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單。（附表1）

一、標本的采集種類和要求472）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中?！x項：參照傳染病報告卡。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲數(shù)次，采集粘膜表皮。具備相應條件的網(wǎng)絡(luò)實驗室在收到標本后24h內(nèi)進行病毒接種。3、臨床標本儲存要求

保存在4℃（不能超過4天）或者-70℃或-70℃以下。#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。2、拭子的選擇

標本應使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維），用鋁或塑料做柄。四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。標本量*

（g或ml)四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行?！x項：參照傳染病報告卡。目前國家流感中心設(shè)計了RT-PCR方法檢測新的甲型H1N1流感病毒5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。real-timeRT-PCR方法參考。2）鼻腔擦拭液的采集方法

將滅菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦48四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）實驗室級別及個人防護

1、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL-2實驗室內(nèi)進行。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。遵循生物安全三級個人防護。

2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。

四、適用于實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一49

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單

姓名性別年齡職業(yè)※

現(xiàn)住址發(fā)病日期標本(#)種類標本量（g或ml)采集日期備注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單50※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：

※選項：參照傳染病報告卡。

#選項：A鼻咽拭子、B鼻51#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：將原始標本分為三份，一份用于核酸檢測，一份用于病毒分離，一份保存待復核。一、標本的采集種類和要求※選項：參照傳染病報告卡。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。real-timeRT-PCR方法參考。2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級個人防護。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單4、標本的分裝處理

標本送至實驗室后，立即進行處理，避免反復凍融。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子連接在抽吸泵上，另一端的管子從外鼻孔完全插入鼻腔，啟動抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單4月29日WHO網(wǎng)站上公布了美國CDC設(shè)計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探針，此實驗用于檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建議首先篩選甲型流感病毒并排除季節(jié)性流感病毒和H5N1禽流感病毒。（臨床樣品采集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關(guān)文件。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。具備相應條件的網(wǎng)絡(luò)實驗室在收到標本后24h內(nèi)進行病毒接種。填表人員：送樣時間：單位（蓋章)遵循生物安全三級個人防護。疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液?！x項：參照傳染病報告卡。如有不適，應立即向上級報告。（實際操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采樣液中，其目的為了增加陽性檢出率）4月29日WHO網(wǎng)站上公布了美國CDC設(shè)計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探針，此實驗用于檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建議首先篩選甲型流感病毒并排除季節(jié)性流感病毒和H5N1禽流感病毒。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單（附表2）。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。標本量*

（g或ml)填表人員：送樣時間：單位（蓋章)#選項：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他（如為其他，請在表格中注明）

采集人員：采集單位（蓋章）：疾病發(fā)病后應盡快采集如下標本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。5、標本的運輸

疑似人感染甲型H1N1感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。三、病毒分離鑒定

可采用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。采集時，要注意不要觸碰到唾液。遵循生物安全三級個人防護。real-timeRT-PCR方法參考。2、感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。2、對采集自屬于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養(yǎng)工作，應在BSL-3實驗室內(nèi)進行，并遵循生物安全三級