KpnIKpnIGNA■BsaBIXlioI（2022年重難點(diǎn)）生物技術(shù)與工程（解析版）（2021?北京東城?二模）為了獲得抗蜥蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗寬凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結(jié)合，然后導(dǎo)入棉花細(xì)胞。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南麓娴氖牵?）卡那霉素

抗性基因pBI121重組載體A.用限制酷BsaBI和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.與只用KpnI相比，KpnI和XhoI處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細(xì)胞接種在含氨葦青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細(xì)胞D.用PCR技術(shù)可檢測GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中【答案】C【分析】1、基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞,以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品?；蚬こ碳夹g(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。2、基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測和表達(dá)?！驹斀狻緼、雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗寬凝集素基因（ACA）均有BsaBI酶切位點(diǎn)，所以用限制酶BsaBI和DNA連接酸處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因，A不符合題意：B、圖中質(zhì)粒與ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位點(diǎn)，與只用Kpnl相比，Kpnl和XhoI處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確，B不符合題意；C、由于重組質(zhì)粒含有卡那霉素的抗性基因，故將棉花細(xì)胞接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，C符合題意；D、根據(jù)GNA-ACA融合基因的兩端序列設(shè)計(jì)合適的引物，可以利用PCR技術(shù)檢測GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中，D不符合題意。

故選Co（2021?北京房山?二模）在長期進(jìn)化過程中，生物細(xì)胞形成了一套DNA損傷的修復(fù)機(jī)制，通過多種酶系統(tǒng)和其他物理化學(xué)方法，來修復(fù)和糾正偶然發(fā)生的DNA損傷。細(xì)胞的修復(fù)系統(tǒng)是DNA的一種安全保障體系。下圖所示為一種切除修復(fù)的方式，下列相關(guān)說法不生碰的是（酶和UvrB的打開缺口TH而⑨NC廠j閭脫科I的①合成缺失于平所用繪一刃眄"”心q的7r酶②補(bǔ)齊缺口?Tq ”d引cj：J勺「“（b） 恢復(fù)正常A.UvrC酸和UvrB酶切開的是磷酸二酯鍵B.修復(fù)性合成過程遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則C.酶①為DNA聚合醐催化DNA子鏈向3,端延伸D.酶②為DNA連接酶催化形成氫鍵【答案】D【分析】分析題圖：圖示為“DNA修復(fù)機(jī)制”中切除修復(fù)過程的示意圖，首先切除其中的二聚體，其次填補(bǔ)缺口，該過程需要遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，最后封閉缺口，該過程需要多種酣的參與?！驹斀狻緼、脫氧核甘酸之間通過磷酸二酯鍵連接，UvrC酶和UvrB酶作用的過程是將DNA片段切除，有磷酸二酯鍵的斷裂，UvrC酶和UvrB酶切開的是磷酸二酯鍵，A正確；B、DNA分子的雙鏈之間堿基對(duì)通過形成氫鍵連接，堿基之間是互補(bǔ)配對(duì)的，所以修復(fù)性合成過程遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，B正確；C、酶①為DNA聚合醐，子鏈DNA的合成方向是由5'-3,方向延伸的，C正確：D、酶②為DNA連接醐，其催化形成的是磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。故選D。（2021?北京朝陽?二模）菜籽粕含有35%?45%蛋白質(zhì)，是畜禽飼料的重要原料，但其中的單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子限制了菜籽粕的應(yīng)用。研究者將不同菌種接種到菜籽粕與萩皮制成的固體培養(yǎng)基中發(fā)酵48h,測定菜籽粕中單寧的含量，結(jié)果如下圖。

6-5■436-5■43-210-對(duì)照H：黑曲霉菌N：釀酒酵母菌因K：枯草芽胞桿菌下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）A.菜籽粕與秋皮為微生物提供碳源和氮源B.接種后需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.黑曲霉菌對(duì)單寧的去除效果最為理想D.對(duì)照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基【答案】B【分析】制備培養(yǎng)基的基本過程為：計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌。圖中不同菌種接種到菜籽粕與秋皮制成的固體培養(yǎng)基中發(fā)酵48h后，發(fā)酵菜籽粕中單寧含量都發(fā)生了不同程度的減少，說明微生物發(fā)酵可去除單寧?！驹斀狻緼、菜籽粕含有35%?45%蛋白質(zhì)，數(shù)皮富含纖維素，菜籽粕與秋皮可為微生物提供碳源和氮源，A正確;B、對(duì)培養(yǎng)基滅菌應(yīng)在接種前，接種后再滅菌，菌種將被全部殺死，B錯(cuò)誤；C、據(jù)圖可知，與對(duì)照組相比，黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中單寧含量最低，說明黑曲霉菌對(duì)單寧的去除效果最為理想，C正確；D、對(duì)照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基，目的是作為對(duì)照，說明微生物去除單寧的作用，D正確。故選Bo（2021?北京朝陽?二模）棉蛇是棉花的主要害蟲之一。雪花蓮凝集素（GNA）與尾穗寬凝集素（ACA）具有良好抗妨蟲效果。研究人員將GNA基因與ACA基因連接成融合基因GA,并構(gòu)建雙抗蟲基因的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)入棉花，過程如下圖。下列敘述不正確的是（ ）A.構(gòu)建植物表達(dá)載體，應(yīng)選用BsaBI、Kpnl和Xhol酶切B.KpnLXhol雙酶切可確保融合基因與載體的正確連接C.用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因轉(zhuǎn)入棉花愈傷組織需無菌操作D.可用DNA分子雜交或抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)【答案】D【分析】分析題圖，用Kpnl與BsaBl酶切可獲得GNA基因，用BsaBl與Xhol酶切可獲得ACA基因；GNA基因與ACA基因都具有BsaBI酶切產(chǎn)生的相同末端，二者可用同一種DNA連接酶連接成融合基因GA；運(yùn)載體與融合基因GA都具有Xhol醐切產(chǎn)生的相同末端及Kpnl醐切產(chǎn)生的相同末端，可用相應(yīng)的DNA連接酶連接融合基因GA與運(yùn)載體以構(gòu)建植物表達(dá)載體?！驹斀狻緼、由分析可知，構(gòu)建植物表達(dá)載體過程中要選用BsaBI、Kpnl和Xhol進(jìn)行酶切，A正確；B、Kpnl、Xhol雙酶切可使確保融合基因與載體產(chǎn)生相同的末端以確保二者的正確連接，B正確：C、用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因轉(zhuǎn)入棉花愈傷組織需無菌操作以防止雜菌污染干擾實(shí)驗(yàn)，C正確：D、用DNA分子雜交技術(shù)檢測是否插入了目的基因，抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選D。（2021?北京昌平?二模）研究者以二倍體金冠蘋果種子為材料，利用秋水仙素處理成熟胚（2n）,再通過離體培養(yǎng)獲得品質(zhì)改良的四倍體蘋果。下列敘述不無砸的是（ ）A.利用低溫誘導(dǎo)也可獲得四倍體B.秋水仙素能夠抑制紡錘體的形成C.用高壓蒸汽滅菌法處理外植體和培養(yǎng)基D.二倍體經(jīng)花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株【答案】C【分析】1、由題意分析可知，四倍體蘋果的獲得是多倍體育種，原理是秋水仙素處理成熟胚，當(dāng)秋水仙素作用于正在分裂的細(xì)胞時(shí)，能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目

加倍。2、植物組織培養(yǎng)中外植體的消毒：在超凈工作臺(tái)（或接種箱）上將外植體用酒精溶液消毒30s后，立即用無菌水清洗2—3次，再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無菌水清洗2~3次?！驹斀狻緼、用低溫處理植物正在分裂的細(xì)胞，能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞，使植物細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生變化，所以利用低溫誘導(dǎo)也可獲得四倍體，A正確：B、秋水仙素能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍，B正確；C、培養(yǎng)基的滅菌方法為用高壓蒸汽滅菌法，外植體只需消毒，用高壓蒸汽滅菌法處理外植體會(huì)使其失活,C錯(cuò)誤：D、二倍體經(jīng)花藥產(chǎn)生的是配子，配子經(jīng)離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，D正確。故選C。（2021.北京東城?二模）將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗過程中，下列不雇于必需條件的是（ ）A.外植體細(xì)胞處于未分化狀態(tài) B.細(xì)胞處于離體狀態(tài)C.細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核 D.營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素【答案】A【分析】1、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其具體過程：外植體脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，進(jìn)而形成新植體，其中脫分化過程要避光，而再分化過程需光。2、植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）。②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）?！驹斀狻緼B、將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗，利用了植物細(xì)胞的全能性，植物細(xì)胞全能性的體現(xiàn)是高度分化的植物細(xì)胞只有處于離體狀態(tài)時(shí)才具有，A符合題意；B不符合題意；C、細(xì)胞核是遺傳和代謝的控制中心，是遺傳信息庫，故將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗過程中植物細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核，C不符合題意；D、將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗過程中需要一定的條件，如營養(yǎng)物質(zhì)和生長素、細(xì)胞分裂素等植物激素、適宜的溫度、pH等，D不符合題意。故選Ao（2021?北京房山?一模）基因編輯CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和人工設(shè)計(jì)的gRNA構(gòu)成。在gRNA引導(dǎo)下，Cas9與靶序列結(jié)合并將DNA雙鏈切斷。通過在Cas9基因中引入突變，獲得了只有切割一條鏈活性的nCas9,可以實(shí)現(xiàn)C-T（C-A）或A-G（T-C）的堿基替換。下列相關(guān)說法不正確的是（ ）

胞喀咤脫氨葩mu_——胞喀咤脫氨葩mu_——nCas9^■^gRNA聯(lián)基錯(cuò)配修復(fù)DNA復(fù)制IIIIlAjIIIIIIA.gRNA與靶序列特異性結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則B.利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以使靶基因發(fā)生定點(diǎn)突變C.可設(shè)計(jì)gRNA與靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域互補(bǔ)、從而抑制靶基因復(fù)制D.將CRISPR/Cas9技術(shù)應(yīng)用人類疾病治療時(shí)，需注意安全性及倫理問題【答案】C【分析】題圖分析：CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和人工設(shè)計(jì)的gRNA構(gòu)成。在gRNA引導(dǎo)下，Cas9與靶序列結(jié)合并將DNA雙鏈切斷。通過在Cas9基因中引入突變，獲得了只有切割一條鏈活性的nCas9。將nCas9與胞嚅臟脫氨酶或腺噂吟脫氨酶融合，通過單堿基編輯技術(shù)，能夠?qū)Π形稽c(diǎn)進(jìn)行精準(zhǔn)的堿基編輯，最終可以分別實(shí)現(xiàn)CtT(G-A)或AtG(T—C)的堿基替換?！驹斀狻緼、由圖示分析可知，gRNA與靶序列特異性結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配時(shí)原則，引導(dǎo)Cas9蛋白進(jìn)行切割，A正確；B、利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以使靶基因?qū)崿F(xiàn)堿基替換，從而發(fā)生定點(diǎn)突變，B正確；C、啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始，故可設(shè)計(jì)gRNA與靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域互補(bǔ)、從而抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄過程，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)題意分析可知，CR1SPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是利用該基因表達(dá)系統(tǒng)中的引導(dǎo)RNA能識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA,最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列也含有與引導(dǎo)RNA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成引導(dǎo)RNA錯(cuò)誤結(jié)合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)象，故將CRISPR/Cas9技術(shù)應(yīng)用于人類疾病治療時(shí)，特別要注意安全性和倫理方面的問題，D正確。故選C。(2021?北京豐臺(tái)?二模)20世紀(jì)70年代，F(xiàn)redsanger發(fā)明了雙脫氧終止法對(duì)DNA進(jìn)行測序。其原理如圖，在4個(gè)試管中分別加入4種脫氧核甘三磷酸(dNTP)和1種雙脫氧核昔三磷酸(ddNTP)；ddNTP可以與dNTP競爭核甘酸鏈延長位點(diǎn)，并終止DNA片段的延伸。在4個(gè)試管中DNA鏈將會(huì)分別在A、G、C及T位置中止，并形成不同長度的DNA片段。這些片段隨后可被電泳分開并顯示出來。下列說法中正確的是( )5,（ 13： 3匚二H未知序列++ddATP+ddCTPHldGTP+ddTTPdATP,dGTP,dCTP,dTTP11A3AGTCGAGCTTAG+ddATP+ddCTPHldGTP+ddTTPdATP,dGTP,dCTP,dTTP11A3AGTCGAGCTTAGA.這種測序方法需要引物和耐高溫的DNA連接酶B.電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥喋吟結(jié)尾C.測得未知DNA的序列為5'-GATTCGAGCTGA-3'D.ddNTP與dNTP競爭的延長位點(diǎn)是核甘酸鏈的5,末端【答案】B【分析】PCR技術(shù)：I、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；2、原理：DNA復(fù)制；3、前提條件：要有一段已知目的基因的核甘酸序列以便合成一對(duì)引物；4,條件：模板DNA、四種脫氧核苜酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！驹斀狻緼、這種測序方法需要引物和耐高溫的DNA聚合防，A錯(cuò)誤：B、電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥喋吟結(jié)尾，B正確；C、測得未知DNA的序列為5、TCAGCTCGAATC-3，，C錯(cuò)誤；D、ddNTP與dNTP競爭的延長位點(diǎn)是核甘酸鏈的3,末端，D錯(cuò)誤。故選Bo（2021?北京房山?一模）為有效防范由各類生物因子、生物技術(shù)誤用濫用等引起的生物性危害，生物安全已納入國家安全體系。以下選項(xiàng)中會(huì)給我國帶來生物安全風(fēng)險(xiǎn)的是（ ）A.將新冠患者的血漿采集后注射到危重患者體內(nèi)B.試管嬰兒通過基因篩查技術(shù)阻斷遺傳疾病的遺傳C.利用生物技術(shù)改造的工程菌獲得大量的抗生素D.克隆技術(shù)可應(yīng)用到器官移植但不能進(jìn)行人體克隆【答案】A【分析】.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。.試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)?！驹斀狻緼、新冠患者的血漿中可能含有病毒，采集后是不可以直接輸入到任何人身體里的，輸入到危重患者身體里存在安全隱患，與題意相符，A正確。B、試管嬰兒可以通過基因篩選技術(shù)來阻斷遺傳疾病的遺傳，因此經(jīng)過一定的技術(shù)手段可以避免安全風(fēng)險(xiǎn),與題意不符，B錯(cuò)誤；C、利用生物技術(shù)改造的工程菌獲得大量的抗生素已經(jīng)投入生產(chǎn)，一般不會(huì)帶來生物安全風(fēng)險(xiǎn)，與題意不符，C錯(cuò)誤；D、克隆技術(shù)可以克隆器官，但是不可以進(jìn)行人體克隆，這樣可以避免影響倫理道德，與題意不符，D錯(cuò)誤。故選Ao10.（2021?北京房山?一模）杜氏肌營養(yǎng)不良是一種表現(xiàn)為進(jìn)行性肌無力、肌肉萎縮的伴性遺傳病，經(jīng)過對(duì)患者進(jìn)行家系調(diào)查，結(jié)果如圖1所示，同時(shí)對(duì)致病基因MDM（小于500bp）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果如圖2所示。下列說法不無頤.（ ）圖1 圖2A.杜氏肌營養(yǎng)不良為伴X染色體隱性遺傳病B.對(duì)MDM基因進(jìn)行PCR時(shí)需加入4種脫氧核昔酸lb生育過健康孩子，再次懷孕時(shí)仍需做產(chǎn)前診斷?3與正常男性婚配，所生女兒患病概率為1/2【答案】D【分析】I、基因的分離定律的實(shí)質(zhì)：在雜合子的細(xì)胞中，位于一對(duì)同源染色體上的等位基因，具有一定的獨(dú)立性;在減數(shù)分裂形成配子的過程中，等位基因會(huì)隨同源染色體的分開而分離，分別進(jìn)入到兩個(gè)配子中，獨(dú)立地隨配子遺傳給后代。2、分析圖形：1|、12正常，而112患病，說明為隱性遺傳病，又因?yàn)轭}干說明為伴性遺傳病，故杜氏肌營養(yǎng)不良屬于X染色體上的隱性遺傳病?！驹斀狻緼、由1|、12正常，而H2患病，可知為“無中生有為隱性”，故杜氏肌營養(yǎng)不良為伴染色體隱性遺傳病，A正確；B、基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段，對(duì)MDM基因進(jìn)行PCR時(shí)需加入4種脫氧核仃酸作原料，B正確;C、1【3生育過健康孩子，因其母親12為攜帶者，則U3可能攜帶致病基因，故再次懷孕時(shí)仍需做產(chǎn)前診斷,C正確；D、杜氏肌營養(yǎng)不良為伴X染色體隱性遺傳病，“3與正常男性（XAY）婚配，所生女兒基因型為XAX1患病概率為0,D錯(cuò)誤。故選D。（2021?北京房山?一模）為培育抗旱性強(qiáng)、可溶性糖含量高的甘薯KT1,研究者設(shè)計(jì)如下流程。相關(guān)敘述不足般的是（ ）甘薯甘薯A原生質(zhì)體、、融合的至■照鳥普、一松1植株① 一原生質(zhì)體 細(xì)胞植彳甘薯8二甘薯B原生質(zhì)體/A.該過程不需要考慮甘薯A、B的親緣關(guān)系遠(yuǎn)近B.過程①需要通過酶解法處理后進(jìn)行減數(shù)分裂C.過程②需要高爾基體參與再生出新的細(xì)胞壁D.過程③需要控制生長素和細(xì)胞分裂素的比例【答案】B【分析】植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。題圖分析：圖中①表示去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞：③表示采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成雜種植株。【詳解】

A、植物體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，所以該過程不需要考慮甘薯A、B的親緣關(guān)系遠(yuǎn)近，A正確：B、過程①需要通過酶解法處理后去除細(xì)胞壁，不進(jìn)行減數(shù)分裂，B錯(cuò)誤；C、雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁，高爾基體與植物細(xì)胞壁的形成有關(guān)，所以過程②需要高爾基體參與再生出新的細(xì)胞壁，C正確；D、過程③包括脫分化和再分化過程，需要控制生長素和細(xì)胞分裂素的比例，該比例不同會(huì)使愈傷組織向不同的方向分化，D正確。故選Bo（2021.北京通州?一模）使用現(xiàn)代生物科技手段達(dá)到所需目的的物質(zhì)或過程，與生物體內(nèi)有差異的是（）A.植物組織培養(yǎng)過程中形成的愈傷組織B.PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)使用的DNA聚合酶C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞正常分裂的代數(shù)是有限的D.構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄【答案】B【分析】1、轉(zhuǎn)錄過程需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)。2,PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核甘酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。3、正常動(dòng)物細(xì)胞的分裂能力是有限的，傳代次數(shù)也是有限的?！驹斀狻緼、植物組織培養(yǎng)過程中通過脫分化形成愈傷組織的過程進(jìn)行有絲分裂，細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)不變，與生物體無差異，A錯(cuò)誤；B,PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)使用的DNA聚合酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，而體內(nèi)DNA復(fù)制所用的酶不能耐高溫，這與題意相符，B正確；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞正常分裂的代數(shù)是有限的，體內(nèi)細(xì)胞分裂的代數(shù)也是有限的，與題意不符，C錯(cuò)誤；D、構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄，體內(nèi)轉(zhuǎn)錄過程也需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)，與題意不符，D錯(cuò)誤。故選B。（2021?北京通州?一模）DNA指紋是利用特定的人源小衛(wèi)星DNA作探針，與樣本DNA的酶切片段進(jìn)行雜交獲得的DNA片段長度不等的雜交帶圖紋。這些圖紋具有高度的變異性和穩(wěn)定的遺傳性。DNA指紋技術(shù)應(yīng)用廣泛，下圖是某機(jī)構(gòu)采用該技術(shù)為某家庭進(jìn)行親子鑒定的結(jié)果，以下分析不足硬的說法是（）

母親父親女兒1女兒2兒子1兒子2A.DNA在親子代之間傳遞時(shí)，因發(fā)生突變或重組產(chǎn)生遺傳多樣性B.樣本DNA片段通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與探針結(jié)合形成雜交帶C.雜交帶的不同顯示出家庭成員之間DNA分子中堿基排列順序的差異D.由各家庭成員的檢測結(jié)果分析，女兒1和兒子1為該夫婦的親生孩子【答案】C【分析】DNA指紋技術(shù)利用了DNA分子的特異性和堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。每個(gè)人的DNA攜帶的遺傳信息是不同的,其中的堿基排列順序也不完全相同，利用相關(guān)的酶將DNA分子切割成不同的片段，然后利用特定的人源小衛(wèi)星DNA作探針，進(jìn)行雜交獲得不同的雜交帶圖紋，根據(jù)圖紋進(jìn)行對(duì)比，從而確定不同個(gè)體的親緣關(guān)系?！驹斀狻緼、突變或重組可導(dǎo)致DNA分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，隨配子遺傳后代，導(dǎo)致遺傳的多樣性，A正確：B、樣本DNA的堿基與探針DNA的堿基通過堿基互補(bǔ)配對(duì)形成堿基對(duì)產(chǎn)生雜交帶，B正確：C、DNA指紋技術(shù)通過對(duì)比不同個(gè)體DNA之間的相似性來確定親緣關(guān)系，因此雜交帶的不同顯示出家庭成員之間DNA分子中堿基排列順序的多樣性和特異性，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)各家庭成員的檢測結(jié)果分析，女兒1、兒子1與母親和父親雜交帶相似，女兒2、兒子2與母親和父親的差異較大，故女兒1和兒子1為該夫婦的親生孩子，D正確。故選C。（2021?北京門頭溝?一模）多巴胺（DA）是神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)鍵的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛調(diào)節(jié)多種脊椎動(dòng)物的許多復(fù)雜生理功能。為了實(shí)時(shí)監(jiān)測體內(nèi)多巴胺濃度的動(dòng)態(tài)變化情況，我國科研人員開發(fā)出了一種新型DA熒光探針，通過將對(duì)結(jié)構(gòu)變化敏感的熒光蛋白（cpEGFP）嵌入人源多巴胺受體，使多巴胺這一化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為熒光信號(hào)，再結(jié)合現(xiàn)有的成像技術(shù)即可實(shí)現(xiàn)。這一成果解決了如何在擁有數(shù)十億個(gè)神經(jīng)細(xì)胞、數(shù)萬億個(gè)突觸連接的大腦中精確檢測神經(jīng)遞質(zhì)釋放的一個(gè)難題。結(jié)合以上信息和所學(xué)知識(shí)判斷，以下說法塔誤的是（ ）A.神經(jīng)遞質(zhì)是一類在細(xì)胞間充當(dāng)信息分子的特殊物質(zhì)DA與DA受體結(jié)合后會(huì)引起后者空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化DA探針與基因診斷中的基因探針的化學(xué)本質(zhì)相同DA探針熒光強(qiáng)度的變化能夠反映出DA濃度的變化【答案】D

【分析】神經(jīng)遞質(zhì)是指由突觸前神經(jīng)元合成并在末梢處釋放，經(jīng)突觸間隙擴(kuò)散，特異性地作用于突觸后神經(jīng)元或效應(yīng)器細(xì)胞上的受體，引致信號(hào)從突觸前遞質(zhì)到突觸后的一些化學(xué)物質(zhì)【詳解】A、神經(jīng)遞質(zhì)是一類充當(dāng)信息分子的特殊物質(zhì)，能引發(fā)突觸后膜興奮（傳遞興奮，如乙酰膽堿）或抑制，A正確；B、神經(jīng)遞質(zhì)需要與突觸后膜的特異性受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用，DA與DA受體結(jié)合后會(huì)引起后者空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而使DA發(fā)揮作用，B正確；C、DA探針與基因診斷中的基因探針都是一段帶有檢測標(biāo)記，且順序已知的，與目的基因互補(bǔ)的脫氧核昔酸鏈，C正確；D、DA熒光探針只是使多巴胺這一化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為熒光信號(hào)，是定性檢測而非定量檢測，DA探針熒光強(qiáng)度的變化不能夠反映出DA濃度的變化，D錯(cuò)誤。故選D。（2021?北京東城?二模）離心是生物學(xué)研究中常用的技術(shù)手段，下列相關(guān)敘述不正頌的是（ ）A.用不同的離心速度對(duì)細(xì)胞勻漿進(jìn)行離心，可將大小不同的細(xì)胞器分開B.噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心可將DNA和蛋白質(zhì)分開，以便分別研究各自的作用C.證明DNA分子半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)中，離心后兩條鏈均被UN標(biāo)記的DNA位于最下方D.在細(xì)胞工程的操作中，利用離心可以誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合【答案】B【分析】差速離心主要是采取逐漸提高離心機(jī)轉(zhuǎn)速分離不同大小顆粒的方法。分離細(xì)胞器常用差速離心法?！驹斀狻緼、用不同的離心機(jī)轉(zhuǎn)速對(duì)細(xì)胞勻漿進(jìn)行離心，即差速離心法，可將大小不同的細(xì)胞器分開，A正確；B、噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是讓上清液中析出質(zhì)量較輕的T2噬菌體顆粒，而離心管的沉淀物中留下被侵染的大腸桿菌，B錯(cuò)誤：C、證明DNA分子半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)含UN的DNA比含的DNA密度大，故離心后兩條鏈均被”N標(biāo)記的DNA位于最下方，C正確；D、在細(xì)胞工程的操作中，誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有物理法和化學(xué)法，其中物理法包括電融合法、離心法等，D正確。故選Bo（2021?北京朝陽?二模）中華稱猴桃原產(chǎn)我國長江中下游，抗寒能力弱：狗棗舜猴桃原產(chǎn)俄羅斯，耐低溫，但果實(shí)小。將兩種駢猴桃原生質(zhì)體進(jìn)行融合，得到果大且抗寒的雜種植株。以下分析錯(cuò)誤的是（ ）A.此項(xiàng)技術(shù)體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性B.使用的植物激素濃度和比例應(yīng)保持不變C.用PEG促進(jìn)兩個(gè)親本的原生質(zhì)體融合

D.雜種植株和兩個(gè)親本可能存在生殖隔離【答案】B【分析】I、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。2、過程：（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等，化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑：（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成：（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束：（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。【詳解】A、細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，兩種掰猴桃細(xì)胞原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞經(jīng)過脫分化和再分化獲得雜種植株，這體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性，A正確；B、生長素和細(xì)胞分裂素的濃度和比例可以調(diào)控植物組織培養(yǎng)過程中細(xì)胞的脫分化和再分化，故雜種植株培養(yǎng)過程中，不同階段使用的植物激素濃度和比例不同，B錯(cuò)誤；C、植物體細(xì)胞雜交，去除細(xì)胞壁以后，可以用PEG促進(jìn)兩個(gè)親本的原生質(zhì)體融合，C正確：D、雜種植株是兩種舜猴桃經(jīng)過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育的新物種，不同物種之間一般是不能相互交配的,故雜種植株和兩個(gè)親本可能存在生殖隔離，D正確。故選B。（2021.北京海淀?二模）下列關(guān)于果酒、果醋及腐乳制作的相關(guān)敘述，不氐玻的是（ ）A.制作果酒過程中應(yīng)適時(shí)放氣B.果醋制作可以在獲得果酒后進(jìn)行，也可利用葡萄糖直接制得C.制作果酒、果醋和腐乳的主要微生物都屬于真核生物D.控制好溫度和pH既有利于目的菌繁殖，又可抑制雜菌生長【答案】C【分析】1、在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18C?25℃,pH最好是弱酸性。2、醋酸菌好氧性細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃?35℃?！驹斀狻緼、制作果酒過程中應(yīng)適時(shí)放氣，目的是排出酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的二氧化碳，A正確；B、果醋制作可以在獲得果酒后進(jìn)行，也可以在糖和氧氣充足時(shí)，利用葡萄糖直接制得，B正確；C、參與果酒制作的酵母菌是一種真菌，屬于真核生物：參與腐乳發(fā)酵的毛霉是一種真菌，屬于真核生物:參與果醋制作的醋酸菌是一種細(xì)菌，屬于原核生物，C錯(cuò)誤；D、不同的菌種對(duì)于pH、溫度等環(huán)境條件的要求不同，控制好溫度和pH既有利于目的菌繁殖，又可抑制雜菌生長，D正確。故選C。（2021?北京西城?二模）獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的技術(shù)流程如下圖。相關(guān)敘述正確的是（ ）A.玉米DNA聚合酶可識(shí)別報(bào)告基因啟動(dòng)子B.轉(zhuǎn)化愈傷組織時(shí)需用氯化鈣處理愈傷組織C.需用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選愈傷組織D.將A自交可得到抗除草劑玉米純合子【答案】D【分析】基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因等。I、啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始。2、終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。3、標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。4、雙子葉植物受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞分泌大量酚類化合物會(huì)吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞。農(nóng)桿菌一般難以感染小麥等單子葉植物，若想提高農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化小麥的成功率，可采取的方法是在小麥傷口處加入酚類化合物?！驹斀狻緼、啟動(dòng)了是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，故玉米DNA聚合酶不能識(shí)別報(bào)告基因啟動(dòng)子，A錯(cuò)誤；B、農(nóng)桿菌一般難以感染玉米等單子葉植物，若想提高農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米的成功率，可采取的方法是在玉米傷口處加入酚類化合物，故轉(zhuǎn)化愈傷組織時(shí)需用酚類化合物處理愈傷組織，B錯(cuò)誤；C、需使用含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選出轉(zhuǎn)化的愈傷組織，再誘導(dǎo)愈傷組織再生出抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米，C錯(cuò)誤；D、組織培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株（核DNA中可能僅插入一個(gè)抗除草劑基因）進(jìn)行自交，在子代含抗除草劑基因的植株中，不一定都是純合子，繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合自交系A(chǔ),故將A自交可得到抗除草劑玉米純合子，D正確。故選D。（2021?北京通州?一模）下列實(shí)驗(yàn)操作中，“先后”順序正確的是（ ）A.檢測細(xì)胞含有脂肪的實(shí)驗(yàn)時(shí)，染色后要先用酒精洗去浮色，再觀察B.制作植物根尖細(xì)胞有絲分裂臨時(shí)裝片時(shí)，解離后要先染色，再漂洗

C.PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，設(shè)置的溫度要逐步提高（55℃-72℃t94℃）D.提取光合色素時(shí)，加SiCh磨碎葉片后，再加無水乙醇和CaCCh溶解色素【答案】A【分析】PCR復(fù)制過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。提取色素時(shí)需要加入無水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨更充分）和碳酸鈣（防止色素被破壞）?！驹斀狻緼、脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)中經(jīng)蘇丹H1染液染色后需要先加50%酒精洗掉浮色，然后再觀察，A正確：B、制作植物根尖細(xì)胞有絲分裂臨時(shí)裝片時(shí)，步驟為解離—漂洗-染色一制片，B錯(cuò)誤；C、標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸三大步驟，故設(shè)置的實(shí)驗(yàn)溫度順序?yàn)?4℃t55'Ct72C,C錯(cuò)誤：D、提取光合色素磨碎葉片時(shí)應(yīng)同時(shí)加入SiCh、CaCCh和無水乙醉，D錯(cuò)誤。故選A。（2021.北京房山?一模）下列物質(zhì)結(jié)構(gòu)關(guān)系對(duì)成不正硬的是（ ）A.性激素一內(nèi)質(zhì)網(wǎng)一自由擴(kuò)散 B.抗體—核糖體一結(jié)合病原體C.ATP—線粒體一直接能源物質(zhì) D.RNA—質(zhì)粒一外源基因載體【答案】D【分析】I、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間2、核糖體：合成蛋白質(zhì)的場所。3、線粒體：有氧呼吸的主要場所。4、ATP是生物體的直接能源物質(zhì)，ATP在細(xì)胞內(nèi)數(shù)量不多，可以由ADP迅速轉(zhuǎn)化形成。人和動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生ATP的生理過程只有呼吸作用，高等植物體內(nèi)產(chǎn)生ATP的生理過程有光合作用和細(xì)胞呼吸，ATP中的能量可用于各種生命活動(dòng)，可以轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽?、化學(xué)能等，但形成ATP的能量來自于呼吸作用釋放的能量或植物光合作用固定的光能?！驹斀狻緼、性激素的化學(xué)本質(zhì)是脂質(zhì)，合成場所是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，運(yùn)輸方式是自由擴(kuò)散，A正確；B、抗體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，合成場所是核糖體，功能是與病原體（抗原）特異性結(jié)合，B正確；C、ATP是直接能源物質(zhì)，合成場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體和葉綠體，C正確；D、質(zhì)粒可作為外源基因載體，其化學(xué)本質(zhì)是雙鏈環(huán)狀的DNA,D錯(cuò)誤。故選D。（2021?北京延慶?一模）育種工作者發(fā)現(xiàn)一株雄性不育玉米突變體F,該突變體花粉粒數(shù)目減少，部分花粉粒敗育。為研究突變基因的遺傳特點(diǎn)和分子機(jī)制，科研人員進(jìn)行了如下研究。

雜交編號(hào)雜交組合Fi表現(xiàn)型F2表現(xiàn)型雜交I突變體F6x野生型？野生型野生型73突變型24雜交II突變體F2x野生型6野生型野生型69突變型22(1)據(jù)上表結(jié)果判斷， 為顯性性狀。突變基因于染色體上，依據(jù)是.該突變性狀的遺傳符合定律.SSR是DNA分子中的簡單重復(fù)序列，非同源染色體上的SSR重復(fù)單位不同，不同品種的同源染色體的SSR重復(fù)次數(shù)不同，因此常用于染色體特異性標(biāo)記。研究者利用玉米3號(hào)、4號(hào)染色體上特異的SSR進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對(duì)野生型和突變體F雜交后代的SSR分析結(jié)果如下圖所示。|3號(hào)染色體|3號(hào)染色體SSR|4號(hào)染色體SSR]突變型親本野生型親本耳F,突變體12*3456■■■■■■■■■■■■■■據(jù)圖判斷，突變基因位于3號(hào)染色體上，依據(jù)是；推測Fz中突變體的4號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果應(yīng)有種，且比例為。(3)研究發(fā)現(xiàn)，突變體F的zm16基因起始密碼子ATG上游30bp處有1494bp序列插入，zml6基因啟動(dòng)子序列中存在低溫響應(yīng)元件及大量光響應(yīng)元件(“響應(yīng)元件''是啟動(dòng)子內(nèi)的一段DNA序列，與特異的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄)，這說明其表達(dá)可能受溫度和光照等環(huán)境因素的影響。請(qǐng)推測突變體F花粉數(shù)目減少，部分花粉敗育的原因?！敬鸢浮恳吧统ｋs交I、II親本正反交后代(Fi)結(jié)果相同基因分離定律F2突變型個(gè)體的3號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果與親本突變型3號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果相同，與親本突變型4號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果不同3 1：2：1或(2：1：1)或(1：1：2)(3)突變體F的zml6基因突變，在花藥發(fā)育的特定階段，在特定低溫和光照影響下，RAN聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合的情況發(fā)生異常，zml6基因表達(dá)量異常，導(dǎo)致部分花粉敗育，花粉粒數(shù)目減少【分析】基因突變是指基因中堿基對(duì)增添、缺失或替換而引起基因結(jié)構(gòu)改變，基因突變后，轉(zhuǎn)錄形成的mRNA上的密碼子發(fā)生改變，可能會(huì)使翻譯形成的蛋白質(zhì)的如基酸序列改變，進(jìn)而引起生物性狀改變。根據(jù)表格數(shù)據(jù)，突變體和野生型雜交，正反交結(jié)果都是野生型，說明野生型是顯性性狀。從表格中可以看出，不管是正交還是反交，R都是野生型，且自交結(jié)果F2中野生型：突變型=3：1,說明野生型是顯性性狀，且位于常染色體上：該突變性狀的遺傳符合基因分離定律。(2)由題圖可知Fa突變型個(gè)體的3號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果與親本突變型3號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果相同，與親本突變型4號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果不同，所以突變基因位于3號(hào)染色體上：由于Fi中個(gè)體的4號(hào)染色體一條來自父方、一條來自母方，自交后，F(xiàn)?中4號(hào)染色體的類型有2條都來自父本、一條來自父本另一條來自母本、2條來自母本，比例是1：2：1,因此F2中4號(hào)染色體SSR擴(kuò)增結(jié)果有3種，理論上比例為1：2：1。根據(jù)題干信息”突變體F的zm16基因起始密碼子ATG上游30bp處有1494bp序列插入”，由于有這段序列的插入，將影響基因的表達(dá)；“zml6基因啟動(dòng)子序列中存在低溫響應(yīng)元件及大量光響應(yīng)元件“，說明其基因表達(dá)受到溫度的影響。所以由于這段序列的插入，突變體F的zml6基因突變，在花藥發(fā)育的特定階段，在特定低溫和光照影響下，RAN聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合的情況發(fā)生異常，zml6基因表達(dá)量異常，導(dǎo)致部分花粉敗育，花粉粒數(shù)目減少?！军c(diǎn)睛】本題主要從分子水平上考查基因突變后對(duì)生物性狀的影響，考生要熟悉各種電泳條帶，掌握基因表達(dá)的過程。22.(2021?北京延慶?一模)研究低溫條件下番茄細(xì)胞WHY1基因?qū)夂献饔玫挠绊?，?duì)于溫度敏感型蔬菜作物的栽培具有重要的實(shí)踐意義。(1)簡述野生型番茄(W)光合作用中物質(zhì)與能量的變化是。(2)研究人員利用PCR技術(shù)，將從番茄中克隆的WHY1基因與外源高效啟動(dòng)子連接，導(dǎo)入番茄基因組中構(gòu)建WHY1基因的過表達(dá)植株(W+),如下圖所示。：M4內(nèi)源。3——1_|啟動(dòng)于而用T-Y■.;②④;八注：①、②、③、④表示引物) :——————————————————————————————————————————————————————-J為檢測獲得的轉(zhuǎn)基因番茄苗中是否含有導(dǎo)入的WHY1基因，同時(shí)避免內(nèi)源WHYI基因的干擾,在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)選擇的引物組合是A.①+③ B.①+② C.③+② D.③+④(3)研究人員將WHY1基因的沉默植株(W)與W植株、W+植株置于低溫(4℃)環(huán)境中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示。(注：室溫25c時(shí)，三類植株的測定結(jié)果無明顯差異)分組葉綠素a含量(mgg')葉綠素b含量(mgg1)葉綠素a+b含量(mggT)最大凈光合速率(“molCO2m-2s-')w+植株1.730.852.5822.32W植株1.520.842.3621.67W-植株 0.72 0.47 1.19 11.13用作為溶劑提取葉片中的色素，然后測定葉綠素的含量。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，低溫條件下W+植株葉肉細(xì)胞中的含量明顯增加，推測這一變化有利于葉片光能，提高光反應(yīng)速率。(4)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，番茄細(xì)胞WHY1基因影響光反應(yīng)階段D1蛋白(捕捉光能)的含量。科研人員用特定抗體檢測D1蛋白在葉綠體內(nèi)的分布，結(jié)果如下圖所示。251 41W*WW-W*WW-D1 OI0MM ——對(duì)比三種番茄的D1蛋白含量可知，在25c條件下,在4℃條件下(5)綜合上述研究，請(qǐng)解釋在低溫(4℃)條件下，WHY1基因過表達(dá)植株的凈光合速率提高的原因【答案】(1)物質(zhì)變化：二氧化碳和水轉(zhuǎn)化成有機(jī)物(或“淀粉、糖類”)，釋放氧氣；能量變化：將光能轉(zhuǎn)化為有機(jī)物中穩(wěn)定的化學(xué)能B無水乙醇 葉綠素a 吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化(吸收和利用)WHY1基因?qū)1蛋白合成無影響 WHY1基因促進(jìn)DI蛋白的合成(5)低溫時(shí)，WHY1基因的過表達(dá)可以促進(jìn)葉綠素和D1蛋白的含量增加，能夠捕獲更多光能，進(jìn)而促進(jìn)光反應(yīng)的增加，為暗反應(yīng)提供更多的NADPH和ATP,進(jìn)而促進(jìn)光合作用的增強(qiáng)，從而抵抗低溫條件【分析】光合作用的光反應(yīng)階段(場所是葉綠體的類囊體膜上)：水的光解產(chǎn)生［H］與氧氣，以及ATP的形成：光合作用的暗反應(yīng)階段(場所是葉綠體的基質(zhì)中)：COz被C5固定形成C3,C3在光反應(yīng)提供的ATP和［H］的作用下還原生成糖類等有機(jī)物。分析表格中的數(shù)據(jù)，在4C條件下，W+植株的葉綠素a含量明顯增加，所以其最大凈光合作用速率增加。光合作用是將CO2和水轉(zhuǎn)變成有機(jī)物并釋放氧氣，將太陽能固定成穩(wěn)定的化學(xué)能，所以物質(zhì)變化：二氧化碳和水轉(zhuǎn)化成有機(jī)物(或“淀粉、糖類”)，釋放氧氣；能量變化：將光能轉(zhuǎn)化為有機(jī)物中穩(wěn)定的化學(xué)能。圖示中克隆的WHY1基因與外源高效啟動(dòng)子連接，導(dǎo)入番茄基因組中，若要檢測獲得的轉(zhuǎn)基因番茄苗中是否含有導(dǎo)入的WHY1基因和高效啟動(dòng)子，需要檢測是否含有高效啟動(dòng)子序列和WHY1基因序列，應(yīng)選擇的引物組合是①+②。故選Bo

色素溶于有機(jī)溶劑，所以可以用無水乙醇作為溶劑提取葉片中的色素：根據(jù)表格中的數(shù)據(jù)w+植株葉肉細(xì)胞中的葉綠素a含量為1.73,含量明顯增加；葉綠素a可以吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化光能，所以這一變化有利于葉片吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化光能，提高光合作用速率。根據(jù)下圖的條帶顏色深淺，在25'C條件下D1蛋白無明顯變化，說明WHY1基因?qū)1蛋白合成無影響；在4℃條件下，W+D1蛋白顏色更深，說明含量更高，因此WHY1基因促進(jìn)D1蛋白的合成。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果和分析，低溫時(shí)(4*0,WHYI基因的過表達(dá)可以促進(jìn)葉綠素和DI蛋白的含量增加，能夠捕獲更多光能，進(jìn)而促進(jìn)光反應(yīng)的增加，為暗反應(yīng)提供更多的NADPH和ATP,進(jìn)而促進(jìn)光合作用的增強(qiáng)，從而抵抗低溫條件?！军c(diǎn)睛】本題以轉(zhuǎn)基因?yàn)轭}材考查影響光合作用的內(nèi)容，主要考查光合作用的影響因素，考生需要結(jié)合表格中的數(shù)據(jù)和題干給出的轉(zhuǎn)基因的條件進(jìn)行分析解答。(2021.北京.人大附中三模)疫苗接種是當(dāng)前新冠肺炎疫情防控工作的一項(xiàng)重要舉措，我國科學(xué)家研發(fā)了多種新冠疫苗，其中重組腺病毒疫苗研發(fā)策略是：將新冠病毒的S蛋白基因整合到腺病毒DNA中，形成表達(dá)S蛋白的重組腺病毒，注射到健康人體內(nèi)，腺病毒可侵染人體細(xì)胞，達(dá)到預(yù)防新冠病毒感染的效果。(1)與直接將S蛋白注射到體內(nèi)作為疫苗相比，重組腺病毒疫苗的優(yōu)點(diǎn)是可以引起人體產(chǎn)生 免疫，更有效清除病毒。(2)為了構(gòu)建重組腺病毒DNA,需要將S蛋白基因插入腺病毒DNA中，由于腺病毒DNA分子較大，傳統(tǒng)的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理效率較低，所以采取如圖1所示方法獲得重組腺病毒DNA。重組緋件元件左臂X重組緋件元件左臂XS基因右臂DN?注:質(zhì)粒1和質(zhì)粒2的左臂和右臂之間的片段互換圖1將質(zhì)粒1和質(zhì)粒2共同導(dǎo)入受體細(xì)胞中，據(jù)圖推測，最終重組線性DNA分子上，X所示的原件應(yīng)該為

（3）生產(chǎn)疫苗的過程是將上述重組線性DNA分子（不編碼病毒復(fù)制必需的E1蛋白）導(dǎo)入到293細(xì)胞系（該細(xì)胞系可表達(dá)人體細(xì)胞沒有的E1蛋白），最終包裝成完整的腺病毒。這種方式生產(chǎn)的疫苗由于重組腺病毒.從而提高了疫苗的安全性.（4）為了檢測疫苗的效果，科學(xué)家用不同方式給雪貂接種重組腺病毒疫苗后，感染新冠病毒，一段時(shí)間后檢測新冠病毒含量，結(jié)果如圖2,說明重組腺病毒疫苗,且效果最好的免疫方式是新冠病毒相對(duì)含量4 ?■JL2- 新冠病毒相對(duì)含量4 ?■JL2- .obnlLnfl2 4?滴鼻和口服?肌肉注射，對(duì)照向nnn6 10新冠病毒免疫后時(shí)間（天）（5）作為年滿18歲的學(xué)生，你可以采取哪些行動(dòng)響應(yīng)國家疫苗接種的政策（兩方面）？【答案】細(xì)胞 Kan抗性基因 無法在人體宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制 不論是滴鼻和口服還是肌肉注射都能夠使機(jī)體產(chǎn)生新冠病毒的免疫能力 滴鼻和口服 主動(dòng)申請(qǐng)疫苗接種、鼓勵(lì)符合接種條件的家人一同申請(qǐng)接種疫苗【分析】DNA疫苗是指將編碼抗原蛋白的基因插入到適宜的質(zhì)粒中得到的重組DNA分子，將DNA疫苗接種到人體內(nèi)可表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的抗原，引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，進(jìn)而達(dá)到預(yù)防特定的微生物感染的目的?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意可知，腺病毒可侵入人體細(xì)胞，達(dá)到預(yù)防新冠病毒感染的效果，故可知重組腺病毒疫苗可以以引起人體的細(xì)胞免疫，更有效地清除病毒；（2）根據(jù)題圖可知，獲得重組線性DNA分子是通過質(zhì)粒1與質(zhì)粒2的左臂和右臂之間的片段互換實(shí)現(xiàn)的,故可知質(zhì)粒2的左臂與右臂之間含S基因的片段代替了質(zhì)粒1左臂與右臂之間的Amp抗性基因，故對(duì)應(yīng)重組線性DNA分子中的X為Kan抗性基因。（3）根據(jù)題意可知，重組線性DNA分子中不含病毒復(fù)制必需的Ei蛋白，人體細(xì)胞中也不含有Ei蛋白，而作為載體的293細(xì)胞系中能夠表達(dá)E,蛋白，故將這樣獲得的重組腺病毒疫苗，能夠在載體中進(jìn)行復(fù)制,誘導(dǎo)刺激人體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，但無法在人體的宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，提高了疫苗的安全性：（4）分析題圖可知，通過滴鼻和口服、肌肉注射兩種方式接種重組腺病毒疫苗的雪貂對(duì)比對(duì)照組，均能夠使雪貂產(chǎn)生對(duì)新冠病毒的免疫能力；題圖中顯示，滴鼻和口服組的新冠病毒相對(duì)含量始終最低，說明該

免疫方式效果最好。(5)作為年滿18歲的學(xué)生，我們應(yīng)該主動(dòng)申請(qǐng)接種疫苗、鼓勵(lì)符合接種條件的家人一同申請(qǐng)接種疫苗，以響應(yīng)國家疫苗接種的政策?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理，掌握基因工程的操作工具及操作步驟，注意各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干中的信息回答，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。(2021?北京市海淀區(qū)精華培訓(xùn)學(xué)校模擬預(yù)測)結(jié)核病是由結(jié)核桿菌引起的人畜共患病。結(jié)核桿菌通常以氣溶膠形式傳播，氣溶膠顆粒被肺泡吞噬細(xì)胞吞噬，吞噬細(xì)胞破裂導(dǎo)致結(jié)核桿菌在機(jī)體內(nèi)進(jìn)一步傳播。羊癢病是由正常細(xì)胞的非致病性骯蛋白異構(gòu)化為癢病骯蛋白所致。為研制既能抗結(jié)核病又能抗羊癢病的雙抗羊，科學(xué)家進(jìn)行了如下操作。組1組2 組3圖1(1)將山羊吞噬細(xì)胞特異性啟動(dòng)子MRS與小鼠SP110基因形成融合基因，用將融合基因與質(zhì)粒構(gòu)建成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入山羊肺泡吞噬細(xì)胞(組2)。以(組3)和轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞為對(duì)照組(組1)。分別接種等量的結(jié)核桿菌，72h后加入使吞噬細(xì)胞破裂，取裂解液進(jìn)行涂布培養(yǎng)，結(jié)果如圖1。由圖可知小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制，依據(jù)是.(2)非致病性骯蛋白是由山羊13號(hào)染色體上的PRNP基因的第三外顯子控制合成的，PRNP基因的結(jié)構(gòu)如圖2. TCAACCTAGGACCAA 5，R1序列圖2注：限制酶Bamlll的識(shí)別序列為GGATCC以L和Ri為識(shí)別位點(diǎn)設(shè)計(jì)TALEN敲除載體，對(duì)山羊成纖維細(xì)胞L與Ri之間的序列實(shí)施定點(diǎn)敲除。請(qǐng)根據(jù)上述信息，寫出檢測敲除是否成功的思路，并描述敲除成功的實(shí)驗(yàn)結(jié)果.(3)將TALEN敲除載體與供體DNA載體共轉(zhuǎn)化幼羊成纖維細(xì)胞，可將SP110基因定點(diǎn)敲入PRNP基因的第三外顯子中，原理如圖3。請(qǐng)指出圖4中的數(shù)字分別代表的結(jié)構(gòu)。

染色體,,靶標(biāo)位點(diǎn)染色體,,供體l）、A同源區(qū)I 染色體,,靶標(biāo)位點(diǎn)染色體,,供體l）、A同源區(qū)I 同源區(qū)2成功敲入??敲除靶標(biāo)基因敲人目的基因圖4供體DNA表達(dá)載體圖3基因敲人的原理1234經(jīng)檢測，成纖維細(xì)胞的SP110基因表達(dá)量明顯下降。（4）欲用上述細(xì)胞獲得雙抗羊，需要用到的技術(shù)有.【答案】限制酶和DNA連接酶轉(zhuǎn)入廣泛表達(dá)小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞蒸儲(chǔ)水組2的吞噬細(xì)胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1提取成纖維細(xì)胞DNA,根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR,并對(duì)PCR產(chǎn)物用BamHI進(jìn)行切割，電泳，若僅有一條帶，則敲除成功。（或提取成纖維細(xì)胞DNA,根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR,并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序,若不存在GGATCC序列，則敲除成功。）U序列MRS啟動(dòng)子終止子Ri序列抗原抗體雜交技術(shù)核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法：將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，然后用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接，形成重組質(zhì)粒，組2是實(shí)驗(yàn)組，導(dǎo)入了重組