抗體藥物現(xiàn)狀與產(chǎn)業(yè)發(fā)展前景陳志南國(guó)家“863”計(jì)劃生物工程主題專家組抗體系指機(jī)體在抗原性物質(zhì)的刺激下所產(chǎn)生的一種免疫球蛋白(主要由淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生)，因其能與細(xì)菌、病毒或毒素等異源性物質(zhì)結(jié)合而發(fā)揮預(yù)防、治療疾病作用。近年，抗體類藥物以其高特異性、有效性和安全性正在發(fā)展成為國(guó)際藥品市場(chǎng)上一大類新型診斷和治療劑。1.抗體藥物的發(fā)展歷程抗體作為藥物用于人類疾病的治療擁有很長(zhǎng)歷史。但整個(gè)抗體藥物的發(fā)展卻并非一帆風(fēng)順，而是在曲折中前進(jìn)（圖1）。第一代抗體藥物源于動(dòng)物多價(jià)抗血清，主要用于一些細(xì)菌感染性疾病的早期被動(dòng)免疫治療。雖然具有一定的療效，但異源性蛋白引起的較強(qiáng)的人體免疫反應(yīng)限制了這類藥物的應(yīng)用，因而逐漸被抗生素類藥物所代替。第二代抗體藥物是利用雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗體及其衍生物。單克隆抗體由于具有良好的均一性和高度的特異性，因而在實(shí)驗(yàn)研究和疾病診斷中得到了廣泛應(yīng)用。單抗最早被用于疾病治療是在1982年，美國(guó)斯坦福醫(yī)學(xué)中心Levy等人利用制備的抗獨(dú)特型單抗治療B細(xì)胞淋巴瘤，治療后患者病情緩解，瘤體消失，這使人們對(duì)抗體藥物產(chǎn)生了極大的期望。1986年，美國(guó)FDA批準(zhǔn)了世界上第一個(gè)單抗治療性藥物——抗CD3單抗OKT3進(jìn)入市場(chǎng)，用于器官移植時(shí)的抗排斥反應(yīng)。此時(shí)抗體藥物的研制和應(yīng)用達(dá)到了頂點(diǎn)。隨著使用單抗進(jìn)行治療的病例數(shù)的增加，鼠單抗用于人體的毒副作用也越來(lái)越明顯。同時(shí)一些抗腫瘤單抗未顯示出理想效果。人們的熱情開(kāi)始下降。到20世紀(jì)90年代初，抗內(nèi)毒素單抗用于治療膿毒敗血癥失敗使得抗體藥物的研究進(jìn)入低谷。由于大多數(shù)單抗均為鼠源性，在人體內(nèi)反復(fù)應(yīng)用會(huì)引起人抗鼠抗體（HAMA）反應(yīng)，從而降低療效，甚至可引起過(guò)敏反應(yīng)。因此，一方面在給藥途徑上改進(jìn)，如使用片段抗體、交聯(lián)同位素、局部用藥等使鼠源性抗體用量減少，也增強(qiáng)了療效；另一方面，積極發(fā)展基因工程抗體和人源抗體。近年來(lái)，隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及抗體基因結(jié)構(gòu)的闡明，DNA重組技術(shù)開(kāi)始用于抗體的改造，人們可以根據(jù)需要對(duì)以往的鼠抗體進(jìn)行相應(yīng)的改造以消除抗體應(yīng)用不利性狀或增加新的生物學(xué)功能，還可用新的技術(shù)重新制備各種形式的重組抗體。抗體藥物的研發(fā)進(jìn)入了第三代，即基因工程抗體時(shí)代。與第二代單抗相比，基因工程抗體具有如下優(yōu)點(diǎn)：①通過(guò)基因工程技術(shù)的改造，可以降低甚至消除人體對(duì)抗體的排斥反應(yīng)；②基因工程抗體的分子量較小，可以部分降低抗體的鼠源性，更有利于穿透血管壁，進(jìn)入病灶的核心部位；③根據(jù)治療的需要，制備新型抗體；④可以采用原核細(xì)胞、真核細(xì)胞和植物等多種表達(dá)形式，大量表達(dá)抗體分子，大大降低了生產(chǎn)成本。自從1984年第一個(gè)基因工程抗體人－鼠嵌合抗體誕生以來(lái)，新型基因工程抗體不斷出現(xiàn)，如人源化抗體、單價(jià)小分子抗體（Fab、單鏈抗體、單域抗體、超變區(qū)多肽等）、多價(jià)小分子抗體（雙鏈抗體，三鏈抗體，微型抗體）、某些特殊類型抗體（雙特異抗體、抗原化抗體、細(xì)胞內(nèi)抗體、催化抗體、免疫脂質(zhì)體）及抗體融合蛋白（免疫毒素、免疫粘連素）等。另外，用于制備新型抗體的噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)成為繼雜交瘤技術(shù)之后生命科學(xué)研究中又一突破性進(jìn)展。采用噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)篩選抗體不必進(jìn)行動(dòng)物免疫，易于制備稀有抗原的抗體、篩選全人源性抗體和高親和力抗體。同時(shí)也將抗體工程的研究推向了一個(gè)新的高潮。在噬菌體抗體庫(kù)基礎(chǔ)上，近幾年又發(fā)展了核糖體展示抗體庫(kù)技術(shù)。利用核糖體展示技術(shù)篩選抗體的整個(gè)過(guò)程均在體外進(jìn)行，不經(jīng)過(guò)大腸桿菌轉(zhuǎn)化的步驟，因此可以構(gòu)建高容量、高質(zhì)量的抗體庫(kù)，更易于篩選高親和力抗體和采用體外進(jìn)化的方法對(duì)抗體性質(zhì)進(jìn)行改造。核糖體展示抗體庫(kù)技術(shù)代表了抗體工程的未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)。各種形式基因工程抗體的成功制備和應(yīng)用將抗體藥物的研制帶入一個(gè)快速發(fā)展的新時(shí)期。到目前為止，美國(guó)FDA已經(jīng)批準(zhǔn)了16個(gè)抗體治療藥物，其中12個(gè)均為基因工程抗體(見(jiàn)表1)。圖1.治療性抗體發(fā)展歷程和事件1.單克隆抗體-雜交瘤技術(shù)宣告誕生 2.應(yīng)用抗體治療淋巴瘤取得成功3.OKT3單抗被美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市 4.單抗用于腫瘤治療效果不佳5.抗內(nèi)毒素單抗試用于治療敗血癥性休克失敗6.抗17-1A和ReoPro上市7.FDA批準(zhǔn)21個(gè)治療性單抗上市表1.美國(guó)FDA批準(zhǔn)的抗體藥物（TherapeuticmonoclonalantibodiesapprovedbytheUSFDA）學(xué)名（Genericname）商品名（Tradename）生產(chǎn)廠家（Sponsorcompany）抗體類型（Type）批準(zhǔn)日期(Approvaldate)Muromonab-CD3OrthocloneOrthoBiotech鼠源（Murine）1986MurineMab(B72.3)OncoScintCYTOGEN鼠源（Murine）1992AbciximabReoProCentocor嵌合（Chimeric）1994MurineMAb(PMSA)ProstaScintCYTOGEN鼠源（Murine）1996MurineFab′fragment(Anti-CEA)CEA-ScanImmunomedics鼠源（Murine）1996T99nofetumomabmerpentanMurineMAbVerlumaDuPontMerck鼠源（Murine）1996RituximabRituxanGenentech嵌合（Chimeric）1997DaclizumabZenapaxHoffman-LaRoche人源化（Humanized）1997BasiliximabSimulectNovartis嵌合（Chimeric）1998PalivizumabSynagisMedlmmune人源化（Humanized）1998InfliximabRemicadeCentocor嵌合（Chimeric）1998TrastuzumabHerceptinGenentech人源化（Humanized）1998GemtuzumabMylotargWyeth-Ayerst人源化（Humanized）2000AlemtuzumabCampathMillennium/ILEX人源化（Humanized）200190Y-IbritumomabZevalinIDEC鼠源（Murine）2002InfliximabRemicadeCentocor嵌合（Chimeric）2002AdalimumabHumiraAbbotLaboratories人源化（Humanized）2002LFA-3/IgG1LFA-3mAbBiogen人源化（Humanized）2003TositumomabandIodineI131TositumomabBexxarCorixa鼠源（Murine）2003omalizumabXolairNovartis人源化（Humanized）2003cetuximabErbituxImclone嵌合（Chimeric）2004bevacizumabAvastinGenentech人源化（Humanized）20042.抗體藥物的應(yīng)用進(jìn)展抗體分子是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用途最為廣泛的蛋白分子。以腫瘤特異性抗原或腫瘤相關(guān)抗原、抗體獨(dú)特型決定簇、細(xì)胞因子及其受體、激素及一些癌基因產(chǎn)物等作為靶分子，利用傳統(tǒng)的免疫方法或通過(guò)細(xì)胞工程、基因工程等技術(shù)制備的多克隆抗體、單克隆抗體、基因工程抗體廣泛應(yīng)用在疾病診斷、治療及科學(xué)研究等領(lǐng)域。根據(jù)美國(guó)藥物研究和生產(chǎn)者協(xié)會(huì)（PhRMA）的調(diào)查報(bào)告，目前正在進(jìn)行開(kāi)發(fā)和已經(jīng)投入市場(chǎng)的抗體藥物主要有以下幾種用途：1．器官移植排斥反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)；2．腫瘤免疫診斷；3．腫瘤免疫顯像；4．腫瘤導(dǎo)向治療；5．哮喘、牛皮癬、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡、急性心梗、膿毒癥、多發(fā)性硬化癥及其他自身免疫性疾?。?．抗獨(dú)特型抗體作為分子瘤苗治療腫瘤；7．多功能抗體（雙特異抗體、三特異抗體、抗體細(xì)胞因子融合蛋白、抗體酶等）的特殊用途。癌癥是威脅人類健康的主要疾病之一，預(yù)防和治療癌癥也是研究和開(kāi)發(fā)抗體藥物的主要目標(biāo)之一。最初抗體主要被用于腫瘤體外免疫診斷和體內(nèi)免疫顯像，隨著抗體工程技術(shù)的不斷進(jìn)步，近年來(lái)人們將更多的目光集中在治療腫瘤的抗體藥物開(kāi)發(fā)上。第一個(gè)被美國(guó)批準(zhǔn)用于人腫瘤治療的基因工程抗體——Rituxan最初被用于非何杰金氏淋巴瘤，總有效率達(dá)60%，現(xiàn)在正在探索用于治療抗體病相關(guān)淋巴瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤。目前在臨床中使用的腫瘤治療藥物多數(shù)存在“敵我不分”的問(wèn)題，即在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也破壞了人體正常細(xì)胞?！吧飳?dǎo)彈”為解決這個(gè)難題提供了一個(gè)理想的思路。“生物導(dǎo)彈”，即將各種毒素、放射性同位素、化療藥物與識(shí)別腫瘤特異抗原或腫瘤相關(guān)抗原的抗體偶聯(lián)后，能夠特異殺傷腫瘤細(xì)胞的一類藥物。這種藥物經(jīng)由靜脈注入人體內(nèi)，藥效分子集中作用于腫瘤細(xì)胞，既增強(qiáng)療效又減少對(duì)機(jī)體的毒副作用。放射性同位素與抗體的偶聯(lián)物在體內(nèi)能將前者運(yùn)至藥靶部位，并通過(guò)其放射性活性殺傷靶細(xì)胞，還可通過(guò)X射線照相機(jī)拍攝核素放射線圖像，用于體內(nèi)治療和定位診斷?？贵w與化療藥物分子的偶聯(lián)方法一般采用化學(xué)法。這些偶聯(lián)物對(duì)結(jié)腸癌、肝癌和胃癌等多種腫瘤均有一定的抗癌效應(yīng)。抗體與生物毒素交聯(lián)制備的偶聯(lián)物稱為免疫毒素。免疫毒素基于抗體部分對(duì)相應(yīng)抗原的特異識(shí)別作用及毒素部分具有的細(xì)胞毒作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有殺傷效應(yīng)，是很有潛力的免疫治療方法。抗腫瘤血管生成抗體治療腫瘤的研究最近也取得了很大的進(jìn)展。在動(dòng)物模型中用抗血管生成因子（FGF、VEGF）抗體封閉血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子取得了抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，此法仍有待于臨床驗(yàn)證；而抗erbB-2癌基因產(chǎn)物抗體——Herceptin作為生物技術(shù)藥品已經(jīng)在美國(guó)上市，配合化療用于乳腺癌和卵巢癌的治療，獲得較好療效。治療腫瘤的雙特異抗體、三特異抗體及抗體細(xì)胞因子融合蛋白的研制開(kāi)發(fā)正在各國(guó)緊張進(jìn)行，相信在不久的將來(lái)，第一個(gè)同類新藥將會(huì)面市。在進(jìn)行器官移植時(shí)，可以采用某些抗體類藥物來(lái)逆轉(zhuǎn)器官移植引起的排斥反應(yīng)。如最早批準(zhǔn)（1986年）進(jìn)入美國(guó)市場(chǎng)的治療性抗體類藥物——抗CD3單抗即被用于腎、心臟、肝臟移植排斥的逆轉(zhuǎn)。抗體酶是具有酶活性的抗體分子，具有酶的生物催化活性和抗體的高度特異性，是抗體工程技術(shù)與現(xiàn)代酶工程技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。由于酶的作用范圍非常廣泛，所以抗體酶藥物具有非常好的發(fā)展前景。總之，隨著抗體工程技術(shù)的不斷進(jìn)步，越來(lái)越多的新型抗體分子將被推出。3.國(guó)際抗體藥物的研究和產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀21世紀(jì)，生物技術(shù)將與信息技術(shù)一起為全球經(jīng)濟(jì)發(fā)展提供強(qiáng)大的動(dòng)力，成為全社會(huì)最重要并可能改變未來(lái)工業(yè)和經(jīng)濟(jì)格局的技術(shù)?？贵w工程技術(shù)隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展而不斷完善，并且是生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的主力軍，尤其在生物技術(shù)制藥領(lǐng)域占有重要地位。單克隆抗體由于可精確的攻擊靶分子，且具有較少的毒副作用而成為人們期望中的理想藥物。經(jīng)過(guò)一段曲折的發(fā)展歷程之后，于二十世紀(jì)九十年代進(jìn)入了一個(gè)新的快速成長(zhǎng)期。Pharmaproject的一份統(tǒng)計(jì)資料顯示，截止2001年為止，全球共有11個(gè)抗體藥物被批準(zhǔn)上市；截至2004年已達(dá)22個(gè)，其中以人源化和嵌合抗體為主。進(jìn)入臨床研究的共有123件，其中23件已進(jìn)入Ⅲ期臨床或新藥申報(bào)階段。而這些藥物所用的抗體均以人源化抗體為主，約占39%，其次是完全人源的抗體和鼠源性抗體。具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表2表2全球2001年抗體藥物的發(fā)展現(xiàn)狀階段來(lái)源嵌合人源化人鼠其他合計(jì)上市6907022新藥申請(qǐng)011103Ⅲ期1838020Ⅱ期627145860Ⅰ期511681040合計(jì)16522424181341997年和1998年FDA批準(zhǔn)了6個(gè)抗體藥物上市，使抗體藥物市場(chǎng)自1998年起快速成長(zhǎng)。目前，全球有超過(guò)225家公司正在研發(fā)臨床治療用單克隆抗體，預(yù)估有335個(gè)產(chǎn)品正在研發(fā)中，其中64%進(jìn)入臨床前研究，臨床應(yīng)用以癌癥最多，占50%，自體免疫疾病占18%，感染占13%，心血管疾病占6%，器官移植引起的排斥占5%，其它疾病占8%，2002至2004年又有5個(gè)新的抗體藥物被批準(zhǔn)上市，使抗體產(chǎn)品總數(shù)達(dá)到16個(gè)。2000年銷售額達(dá)21億美元。2001年總的銷售額已達(dá)29億美元。2002年接近40億美元，平均年增長(zhǎng)率為30%。參見(jiàn)圖2和表3。預(yù)估2005年將有45個(gè)產(chǎn)品上市，達(dá)到產(chǎn)品上市的高峰期，到2008年將有近70個(gè)產(chǎn)品上市，預(yù)估市場(chǎng)銷售將達(dá)140億美元。隨者臨床治療用單抗大量上市，未來(lái)臨床治療用單抗制造的需求也相當(dāng)可觀。圖2抗體藥物的銷售趨勢(shì)銷售額（銷售額（百萬(wàn)美元）表3.上市的治療用抗體2000年銷售概況百萬(wàn)美元產(chǎn)品名/公司適應(yīng)癥上市年代2000年銷售額OthoClone/J＆JReoPro/Centocor(J&J)Rituxan/IDEC(Genentech)Simulect/NovartisRemicade/Centocor(J&J)Zenapax/Roche(PDL)Synagis/MedImmuneHerceptin/GenentechMylotarg/A.H.P.(Celltech)治療腎臟移植引起的急性排斥治療急性冠狀動(dòng)脈癥候群治療復(fù)發(fā)性非何杰金氏淋巴瘤治療腎臟移植引起的排斥治療克隆氏病及風(fēng)濕性心臟病治療腎臟移植引起的排斥預(yù)防呼吸道融合細(xì)胞病毒感染治療HER2陽(yáng)性移轉(zhuǎn)性乳癌治療急性骨髓性白血病19861994199719971998&19991997199819982000<5418512303702042727620但是，單克隆抗體藥物的陸續(xù)上市也引發(fā)了全球生產(chǎn)能力的不足。目前，全球哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能力估計(jì)在40～50萬(wàn)升之間，主要控制在Genentech，BoehringerIngelheim和LonzaBiologics三家公司手中，生產(chǎn)能力已趨飽和。由于許多生物技術(shù)公司長(zhǎng)期處于臨床研究延遲的實(shí)驗(yàn)室研究階段，面對(duì)突然間取得的成功估計(jì)不足，造成了生產(chǎn)能力的不足。Datamonitor指出，2002年有近160個(gè)單克隆抗體產(chǎn)品正在進(jìn)行臨床研究，吸引了制藥行業(yè)和生物行業(yè)的廣泛投資，截至2004年已有22個(gè)產(chǎn)品上市，超過(guò)35個(gè)產(chǎn)品進(jìn)入了Ⅱ期臨床研究階段。2006年，當(dāng)越來(lái)越多產(chǎn)品進(jìn)入到臨床研究后期及上市階段時(shí)，治療性蛋白的生產(chǎn)能力需要在現(xiàn)有基礎(chǔ)上增加5倍，由于生產(chǎn)廠房的建設(shè)需要4～5年時(shí)間，5億美元以上的資本投入，到2005年時(shí)的生產(chǎn)能力最多也只能增加3.5倍，達(dá)到130～140萬(wàn)升，尚無(wú)法滿足。顯而易見(jiàn)，對(duì)大多數(shù)生物技術(shù)公司和生物制藥公司來(lái)說(shuō)要自己擁有生產(chǎn)能力是非常困難的，這些公司缺少用于投資生產(chǎn)設(shè)施的資金。解決這個(gè)難題最有效的辦法是與其他合同加工企業(yè)或制藥公司建立長(zhǎng)期的戰(zhàn)略合作伙伴關(guān)系，這種方式對(duì)小型的生物技術(shù)公司很有效。通常，他們會(huì)在上市拓展階段尋找合作伙伴，通過(guò)合作解決生產(chǎn)加工難題。當(dāng)然，在開(kāi)發(fā)抗體藥物產(chǎn)品方面美國(guó)憑借其先進(jìn)的生物工程技術(shù)和雄厚的財(cái)力與人力資源早已“一騎絕塵”，領(lǐng)先于世界各國(guó)。據(jù)統(tǒng)計(jì)目前世界市場(chǎng)上銷售的MAbs產(chǎn)品中大約有90%為美國(guó)公司開(kāi)發(fā)上市，而其它國(guó)家僅占10%左右，至于第三世界國(guó)家所開(kāi)發(fā)生產(chǎn)的MAbs產(chǎn)品在市場(chǎng)上可能不到1%份額。單克隆抗體迄今為止主要用于診斷試劑以及治療藥。近幾年來(lái)，國(guó)外在用單抗制作“生物導(dǎo)彈”的技術(shù)方面又有重大進(jìn)展(主要是單抗與抗腫瘤劑的整合技術(shù))。如據(jù)國(guó)外最新報(bào)道，美國(guó)已有數(shù)家公司在“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體/放射性同位素整合技術(shù)方面取得了成功，這些公司包括美國(guó)ImmunoGen，西雅圖市的Genetics和ImmunomedicsCo.等。可以斷言，隨著嶄新的單克隆抗體“生物導(dǎo)彈”抗癌新制劑在今后幾年內(nèi)的不斷上市，必將為眾多癌癥患者帶來(lái)福音。另?yè)?jù)最新報(bào)道，國(guó)外已開(kāi)始利用轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物(如番茄、土豆、香蕉、煙草)生產(chǎn)一系列的抗體產(chǎn)品。如抗麻疹抗體、乙型肝炎抗體、霍亂抗體和流感抗體等等。尤其值得一提的是，這類植物抗體不用提取，可隨植物一起進(jìn)入人體。它們可經(jīng)受烹調(diào)時(shí)的高溫不被破壞。今后吃一份土豆泥，喝一碗番茄湯即可起到(免疫)防病作用，這將不再是神話或幻想(據(jù)了解土豆抗體與番茄抗體正在臨床試驗(yàn)階段)。展望二十一世紀(jì)，植物來(lái)源的抗體將成為醫(yī)藥市場(chǎng)上一大類全新醫(yī)藥產(chǎn)品，其價(jià)格低廉，可為廣大低收入病人所接受。4.我國(guó)抗體藥物的研究和產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀早在20世紀(jì)八十年代初，我國(guó)科學(xué)家就利用雜交瘤技術(shù)成功開(kāi)展了單克隆抗體的研制工作，截止目前已經(jīng)獲得了一大批針對(duì)各種抗原的鼠源性單克隆抗體。這些抗原主要有：(1)細(xì)胞表面抗原，如血型抗原、白細(xì)胞分化抗原、組織相容性抗原、膜受體等。(2)腫瘤相關(guān)抗原，如胃癌、肝癌、大腸癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌等。(3)病原微生物：如流感病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒等病毒抗原；痢疾桿菌脂多糖，沙門氏菌等細(xì)菌抗原；惡性瘧原蟲(chóng)、血吸蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)抗原；大腸桿菌內(nèi)毒素、破傷風(fēng)類毒素等微生物毒原抗原。(4)其它抗原，如細(xì)胞因子、酶、血漿原蛋白、免疫球蛋白、補(bǔ)體、激素等。針對(duì)上述抗原的鼠單抗大部分被用于實(shí)驗(yàn)研究，如抗原分類、鑒定和功能研究、抗原基因克隆、蛋白分離純化等，有一部分抗體用于檢驗(yàn)、疾病診斷、預(yù)后判斷等，少部分鼠單抗也被用于人類疾病治療研究。1987年，“863”計(jì)劃生物技術(shù)領(lǐng)域?qū)⒖贵w導(dǎo)向藥物作為一個(gè)專題，開(kāi)展了針對(duì)肝癌、肺癌、胃癌、白血病的導(dǎo)向藥物研究。經(jīng)過(guò)十幾年的努力，在實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物模型上評(píng)價(jià)了以鼠抗體為載體的同位素—抗體、藥物—抗體和毒素—抗體等導(dǎo)向藥物的治療作用，并逐步從實(shí)驗(yàn)室走向臨床。如抗T細(xì)胞免疫毒素經(jīng)SFDA批準(zhǔn)后用于異基因骨髓移植時(shí)清除供體骨髓中成熟T細(xì)胞，以預(yù)防移植物抗宿主病(GVHD)；99mTc標(biāo)記人小細(xì)胞肺癌單抗2F7的F(ab’)2片段放射免疫診斷試劑盒已經(jīng)過(guò)國(guó)家SFDA批準(zhǔn)進(jìn)入臨床研究。從20世紀(jì)八十年代中期開(kāi)始，我國(guó)的科學(xué)家緊跟世界抗體工程研究的最新研究動(dòng)向，開(kāi)始了基因工程抗體的研制。首先，開(kāi)展人-鼠嵌合抗體的研究，成功地獲得了抗CD3人-鼠嵌合抗體。以后，又利用CDR區(qū)移植的方法獲得抗CD3改形抗體（或稱重構(gòu)抗體）。隨著基因操作技術(shù)的發(fā)展和普及，許多實(shí)驗(yàn)室成功地獲得針對(duì)各種抗原，如VEGF、CEA、TNFa等的人-鼠嵌合抗體和各種單鏈抗體。九十年代后又開(kāi)始了雙特異性抗體和其它小分子抗體的研制，如SZ-51Hu-scuPA雙特異性抗體，它兼有抗人活化血小板特性和纖溶酶原激活劑特性的雙重功能，成為導(dǎo)向溶栓劑，與單獨(dú)的uPA進(jìn)行比較，溶栓效率提高4倍。其它的雙功能抗體有抗Her2/neuFab-IL-2，抗Her2/neu-抗CD16等。完成了Diabody和Minibody等小分抗體的研究，如CD20/CD3Diabody隨著基因工程抗體技術(shù)的發(fā)展，在我國(guó)有些實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始了噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建。用抗體庫(kù)技術(shù)直接制備人源抗體，例如利用被病原微生物感染的病人外周血細(xì)胞制備噬菌體抗體庫(kù)，用特定抗原進(jìn)行篩選，獲得抗乙肝表面抗原、甲肝病毒的人源抗體?？贵w庫(kù)技術(shù)也被用于抗體性能改良。例如：用鏈替換（ChainShuffling）方法，以親本抗體的一條鏈（輕鏈）與另一條鏈（重鏈）的文庫(kù)組合，構(gòu)建抗體庫(kù)，篩選高親和力的克隆，再固定重鏈，用同樣方法選擇具有高親和力的輕鏈。一些特異性好，有應(yīng)用前景的鼠抗體，利用抗原表位定向選擇（epitopeguidedselection,EGS）方法，以鼠單抗可變區(qū)為模板，經(jīng)噬菌體展示技術(shù)，通過(guò)抗原導(dǎo)向，篩選能夠模擬鼠單抗可變區(qū)，結(jié)合相同抗原決定簇的人抗體，經(jīng)這一方法獲得人源抗體。國(guó)內(nèi)也有實(shí)驗(yàn)室采用計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)下，將鼠抗體表面氨基酸殘基“人源化”，主要將鼠Fv段表面暴露的骨架區(qū)殘基中與人Fv不同者改為人源性，使Fv的表面人源化，但仍保留其與抗原結(jié)合的特性。目前，我國(guó)已批準(zhǔn)的診斷性單抗有31個(gè)，已有7個(gè)治療性單抗產(chǎn)品獲準(zhǔn)在我國(guó)上市應(yīng)用。其中5個(gè)為國(guó)外進(jìn)口產(chǎn)品。分別是：鼠源性抗人T淋巴細(xì)胞CD3單抗——莫羅莫那-CD3(Muromonab-CD3)，是最早從國(guó)外引進(jìn)的單抗，用于抑制排斥反應(yīng)。羅氏（Roche）公司的利妥昔單抗注射液（Rituximab），用于治療非何杰金淋巴瘤，和曲妥珠單抗Herceptin3(Trastuzumab)，用于治療乳腺癌。諾華制藥的巴利昔單抗注射液，用于臨床各種器官移植的抗排斥治療，尤其在對(duì)腎移植后急性排斥反應(yīng)的治療。3個(gè)批準(zhǔn)上市的治療性抗體藥物為我國(guó)自行開(kāi)發(fā)的單抗。分別是：武漢生物制品研究所抗腎移植單抗OKT3（注射用鼠源性抗人T淋巴細(xì)胞CD3抗原單克隆抗體），也是最早批準(zhǔn)上市的國(guó)內(nèi)自行研制的抗體，具有免疫抑制作用，可逆轉(zhuǎn)對(duì)移植器官的排斥反應(yīng)；東莞宏遠(yuǎn)逸士生物技術(shù)藥業(yè)有限公司的抗人IL-8單克隆抗體乳膏，用于牛皮癬的治療；上海美恩生物技術(shù)有限公司開(kāi)發(fā)的碘［131I］人鼠嵌合型腫瘤細(xì)胞核單克隆抗體注射液（131I-chTNT），用于多種實(shí)體瘤，該藥物為國(guó)家Ⅰ類新藥，它的批準(zhǔn)上市標(biāo)志著我國(guó)抗體藥物的研究已經(jīng)進(jìn)入全新發(fā)展階段?，F(xiàn)在有7個(gè)治療性產(chǎn)品處在臨床研究階段，包括：濟(jì)南天康生物制品有限公司的注射用鼠抗人T淋巴細(xì)胞CD3表面抗原單克隆抗體，用于抗移植排斥；武漢生物制品所與第四軍醫(yī)大學(xué)合作研制的注射用抗腎病綜合癥出血熱病毒單克隆抗體（I型），用于出血熱的治療；第四軍醫(yī)大學(xué)細(xì)胞工程研究中心研制的國(guó)家Ⅰ類新藥碘［131I］肝癌片段抗體注射液，用于原發(fā)性肝癌的靶向治療，已完成臨床研究，臨床有效率（CR+PR+MR）為27.40%，臨床獲益率(CR+PR+MR+SD)達(dá)86.30%，21個(gè)月的生存率為44.54%，適用于各期肝癌的治療，有望2004年上市。該抗體藥物的中試生產(chǎn)下游工藝經(jīng)不斷優(yōu)化，通過(guò)使用SREAMLINE擴(kuò)張柱床吸附技術(shù)再配合疏水層析，取得了比傳統(tǒng)工藝更為理想的結(jié)果；北京百泰生物藥業(yè)公司的人源化單克隆抗體藥物H-R3也已經(jīng)進(jìn)入Ⅱ期臨床，有望于明年投產(chǎn)，該產(chǎn)品具有大批量發(fā)酵和規(guī)模生產(chǎn)的特點(diǎn)。H-R3是繼用于治療結(jié)腸癌淋巴轉(zhuǎn)移患者的PANOREX和用于治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的HERCTPTIN之后，又一個(gè)面世的單克隆抗體實(shí)體瘤治療藥物，比美國(guó)的同類藥物Erbitux人源化程度更高；中科院細(xì)胞所的抗人肝癌單抗、北京生物制品所與第四軍醫(yī)大學(xué)合作研制的抗乙型腦炎單抗和最近新批準(zhǔn)的注射用重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白也進(jìn)入了臨床研究階段。另外，多個(gè)抗體藥物正處于臨床前研究階段，其中包括：抗CEA嵌合抗體（北京賽科藥業(yè)），用于治療結(jié)腸癌；抗破傷風(fēng)抗體（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院），用于預(yù)防破傷風(fēng)；抗FabC1027（醫(yī)科院醫(yī)生所），用于治療肝癌。（見(jiàn)表4）表4中國(guó)SFDA批準(zhǔn)上市和進(jìn)入臨床的抗體藥物抗體名稱商品名廠家抗體類型研發(fā)階段Muromonab-CD3Orthoclone奧多生物技術(shù)公司（OrthoBiotech）鼠源批準(zhǔn)上市Rituximab利妥昔羅氏（Roche）公司嵌合批準(zhǔn)上市Trastuzumab和曲妥珠羅氏（Roche）公司人源化批準(zhǔn)上市Basiliximab巴利昔諾華制藥（Novartis）嵌合批準(zhǔn)上市Trastuzumab賀塞汀基因工程技術(shù)公司（Genentech）人源化批準(zhǔn)上市注射用鼠源性抗人T淋巴細(xì)胞CD3抗原單克隆抗體武漢生物制品研究所鼠源批準(zhǔn)上市抗人IL-8單克隆抗體乳膏東莞宏遠(yuǎn)逸士生物技術(shù)藥業(yè)有限公司鼠源批準(zhǔn)上市碘［131I］人鼠嵌合型腫瘤細(xì)胞核單克隆抗體注射液（131I-chTNT）上海美恩生物技術(shù)有限公司嵌合批準(zhǔn)上市碘［131I］美妥昔單抗注射液第四軍醫(yī)大學(xué)成都華神集團(tuán)鼠源完成臨床待批上市H-R3北京百泰生物藥業(yè)公司人源化Ⅱ期臨床注射用鼠抗人T淋巴細(xì)胞CD3表面抗原單克隆抗體濟(jì)南天康生物制品有限公司鼠源臨床研究注射用抗腎病綜合癥出血熱病毒單克隆抗體（I型）武漢生物制品所第四軍醫(yī)大學(xué)鼠源臨床研究抗人肝癌單抗Hepama1中科院細(xì)胞所鼠源臨床研究抗乙型腦炎單抗北京生物制品第四軍醫(yī)大學(xué)鼠源臨床研究注射用重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白上海美恩生物技術(shù)有限公司嵌合臨床研究二十多年來(lái)，我國(guó)抗體研究領(lǐng)域初步形成了北京、上海和西安三個(gè)研發(fā)中心，北京以軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院、中科院遺傳所、醫(yī)科院腫瘤所、預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒所和北京義莊國(guó)家“863”抗體工程基地等為主體，主要在抗體上游及中游技術(shù)方面（如抗體的基因克隆、人源化改造、高效表達(dá)以及噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)）建立了多個(gè)平臺(tái)，取得了較大的進(jìn)展。上海主要是以上海生命科學(xué)院、第二軍醫(yī)大學(xué)腫瘤研究所和張江高新區(qū)的眾多抗體公司為主，在抗體的引進(jìn)、仿制、下游制備和產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)方面形成了較大的合力。如上海單抗制藥技術(shù)有限公司，該公司的HumyTechTM技術(shù)平臺(tái)是以酵母為基礎(chǔ)用以高效篩選人源單抗。該公司在開(kāi)發(fā)以抗非典病毒抗體為基礎(chǔ)的診斷、預(yù)防和治療產(chǎn)品方面已取得重大突破，現(xiàn)已申報(bào)一項(xiàng)美國(guó)專利和一項(xiàng)中國(guó)專利。上海美恩生物技術(shù)有限公司及前身從1995年開(kāi)始致力于人鼠嵌合腫瘤細(xì)胞核單抗（TNT）的研制，在工程細(xì)胞構(gòu)建、細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)、蛋白質(zhì)純化等方面進(jìn)行了大量的研究，并于1997年獲得衛(wèi)生部藥政管理局的批準(zhǔn)（97XL-77號(hào)）進(jìn)入臨床試驗(yàn)，于2003年6月獲得新藥證書(shū)。目前正在研發(fā)的主要產(chǎn)品有：131I人鼠嵌合腫瘤細(xì)胞核單抗注射液（131I-chTNT）治療腦膠質(zhì)瘤（臨床）、131I惡性淋巴瘤特異性單克隆抗體注射液（131I-chLym-1）和重組人腫瘤壞死單抗白介素2融合蛋白rhTNT-IL-2（將于近期申報(bào)臨床）。西安主要以第四軍醫(yī)大學(xué)為依托，聯(lián)合協(xié)興集團(tuán)共建國(guó)家細(xì)胞工程中試基地，在腫瘤、抗炎和抗病毒抗體藥物方面進(jìn)入了較快速的研發(fā)階段，現(xiàn)已有3項(xiàng)抗體藥物進(jìn)入臨床研究，其中碘［131I］美妥昔單抗注射液，現(xiàn)已完成臨床，申報(bào)新藥證書(shū)；并已完成哺乳動(dòng)物細(xì)胞500L無(wú)血清流加大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)工藝，形成抗體的大規(guī)模制備技術(shù)平臺(tái)，包括動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)品大規(guī)模高效培養(yǎng)技術(shù)和目標(biāo)產(chǎn)品的交聯(lián)、制備、純化、質(zhì)控和產(chǎn)業(yè)化；西安交通大學(xué)、西北大學(xué)、西北農(nóng)林科技大學(xué)、陜西力邦制藥集團(tuán)等也正在進(jìn)行此類項(xiàng)目的研發(fā)；盡管我國(guó)在抗體藥物的研制和產(chǎn)業(yè)化方面取得了有目共睹的成績(jī)，但整體水平與西方先進(jìn)國(guó)家相比還有很大的差距。主要表現(xiàn)在：(1)現(xiàn)有的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)項(xiàng)目多數(shù)原始創(chuàng)新性不夠，治療用抗體只有少數(shù)進(jìn)入臨床試驗(yàn)。（2）盡管我們已經(jīng)擁有一批接近或已經(jīng)達(dá)到世界先進(jìn)水平的研究項(xiàng)目，但基本處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，距產(chǎn)業(yè)化還有相當(dāng)?shù)木嚯x；（3）與國(guó)外相比，在我國(guó)的3700多家制藥公司和300家生物技術(shù)公司中，雖然也有公司在研究生產(chǎn)單克隆抗體藥物，但是規(guī)模遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。(4)工程抗體表達(dá)量較低。治療用抗體除個(gè)別抗體（如Fab）用大腸桿菌表達(dá)外，大部分（如全抗體或二價(jià)diabody或minibody）需要在CHO等哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)。國(guó)內(nèi)很多實(shí)驗(yàn)室，真核細(xì)胞中抗體表達(dá)量在1mg/L以下，很難用于生產(chǎn)。僅個(gè)別實(shí)驗(yàn)室在對(duì)載體進(jìn)行改造后，抗體表達(dá)量達(dá)到60-100mg/L；(5)動(dòng)物細(xì)胞規(guī)模化培養(yǎng)技術(shù)與國(guó)外相比存在很大差距。由于技術(shù)和經(jīng)費(fèi)等原因，我國(guó)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模普遍在80L以下，個(gè)別抗體及疫苗生產(chǎn)達(dá)到500L，培養(yǎng)方式大多采用微載體培養(yǎng)，連續(xù)灌流和流加培養(yǎng)產(chǎn)業(yè)化工藝尚在形成之中。上述抗體開(kāi)發(fā)中存在的問(wèn)題阻礙了我國(guó)抗體藥物開(kāi)發(fā)和產(chǎn)業(yè)化，因此國(guó)家科技重大專項(xiàng)和863“十五”計(jì)劃中列入了“動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)品的大規(guī)模高效培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)”等專題，希望經(jīng)過(guò)3-5年我國(guó)自主的抗體藥物產(chǎn)業(yè)能跟上國(guó)際同類先進(jìn)水平。另外，還應(yīng)進(jìn)一步改善科研、開(kāi)發(fā)體制，在加強(qiáng)國(guó)家投入的同時(shí)，拓寬投資渠道，加快基礎(chǔ)研究和產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)進(jìn)程。近幾年來(lái)，國(guó)內(nèi)生物工程產(chǎn)業(yè)逐漸形成規(guī)模。據(jù)國(guó)內(nèi)醫(yī)藥信息刊物報(bào)道，我國(guó)正處在實(shí)驗(yàn)室研究階段的單克隆抗體產(chǎn)品至少有數(shù)十種，這類產(chǎn)品一旦上市無(wú)疑將有巨大的市場(chǎng)需求。相信隨著我國(guó)生物工程技術(shù)的不斷發(fā)展,更多的國(guó)產(chǎn)新型抗體藥物產(chǎn)品將會(huì)投放市場(chǎng)從而造福于社會(huì)和人類。5.抗體藥物的前景展望毫無(wú)疑問(wèn)，人類基因組的解碼將已經(jīng)蓬勃發(fā)展的生物產(chǎn)業(yè)又推上一個(gè)新的高峰。人類對(duì)生命的認(rèn)識(shí)正在轉(zhuǎn)化為具體的社會(huì)效益，一代代生物藥品的推出，不僅為病人帶來(lái)了新的生命之光，同時(shí)也為投資者創(chuàng)造了豐厚的回報(bào)。自1975年單克隆抗體技術(shù)問(wèn)世以來(lái)，到1986年的第一個(gè)單克隆抗體藥物的上市，再到1998年的單克隆抗體藥物的起飛，科學(xué)家的夢(mèng)想正在一步步變成現(xiàn)實(shí)。今天，已有22個(gè)治療性抗體藥品通過(guò)了美國(guó)FDA的批準(zhǔn)進(jìn)入市場(chǎng)，100多個(gè)單克隆抗體藥品進(jìn)入臨床研究，500多個(gè)單克隆抗體藥品進(jìn)入臨床前研究。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在生物制藥中，單克隆抗體藥物占了31%?？贵w藥物憑借其獨(dú)特的療效在市場(chǎng)上廣受歡迎。治療乳腺癌的單克隆抗體藥物Herceptin，250mg/支的價(jià)格為15000元左右；治療淋巴瘤的單克隆抗體藥物Rituxan，400mg/支的價(jià)格為21000元左右，盡管其價(jià)格可謂天價(jià)，但在市場(chǎng)上卻供不應(yīng)求。美國(guó)治療淋巴癌的單克隆抗體藥物中，每年單品的銷售額就在10億美元以上。2002年單克隆抗體藥品的銷售額已達(dá)40億美元，美國(guó)的一家投資公司分析預(yù)測(cè)2010年其銷售額可達(dá)200億美元，這個(gè)數(shù)字意味著其市場(chǎng)空間將要擴(kuò)大5倍。單克隆抗體藥物所帶來(lái)的巨大的經(jīng)濟(jì)效益，促使上百家生物技術(shù)公司全力投入單克隆抗體藥品的研發(fā)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，現(xiàn)在全世界所有的大型制藥公司和100多個(gè)中小生物技術(shù)公司，無(wú)一不涉足單克隆抗體藥物的研究與開(kāi)發(fā)。單克隆抗體現(xiàn)已成為世界生物工程制藥業(yè)的支柱產(chǎn)品。目前國(guó)際市場(chǎng)上銷售的抗體藥物按其用途的不同，大體可分成3大類，即治療劑、診斷用試劑和“生物導(dǎo)彈”。單克隆抗體具有其它藥物所無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn)，簡(jiǎn)而言之，一是抗體本來(lái)就是人體內(nèi)固有的生理物質(zhì)，故抗體在體內(nèi)不會(huì)產(chǎn)生類似化學(xué)合成藥那樣的毒副作用?？茖W(xué)家不過(guò)是借用現(xiàn)代制藥手段(重組DNA技術(shù))使其成為工業(yè)化產(chǎn)品。二是單克隆抗體品種多，用途廣。三是隨著世界各國(guó)科學(xué)家協(xié)力進(jìn)行的“人類基因組順序解析”工程計(jì)劃的圓滿完成，今后各國(guó)科學(xué)家可望從中直接受益，即根據(jù)某一基因組中的蛋白質(zhì)/氨基酸順序開(kāi)發(fā)出相應(yīng)的單克隆抗體類治療新藥。隨著生物工程技術(shù)的日臻完善以及生物工程制藥業(yè)的高速發(fā)展，西方生物工程公司已陸續(xù)開(kāi)發(fā)上市了一大批市場(chǎng)熱銷的抗體新產(chǎn)品。抗體類藥物在生物工程制藥業(yè)中的地位逐漸突出，開(kāi)發(fā)速度加快。其中有巨大市場(chǎng)潛力的新型抗體類藥物(指年銷售額在3—5億美元的大品種)至少有10—20種。單克隆抗體即將進(jìn)入第二輪開(kāi)發(fā)高潮。由于抗體的生產(chǎn)技術(shù)已趨成熟。除傳統(tǒng)的“嵌合體法”和“人源化法”兩大技術(shù)外，美國(guó)公司已開(kāi)發(fā)出利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物與轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)人用單克隆抗體的新技術(shù)，從而大大拓展了抗體的新來(lái)源并為產(chǎn)品的降價(jià)奠定基礎(chǔ)。據(jù)樂(lè)觀的估計(jì)，在今后幾年內(nèi)隨著單抗“生物導(dǎo)彈”技術(shù)的成熟及相關(guān)產(chǎn)品的上市，來(lái)自抗癌藥市場(chǎng)的巨大需求量將使抗體產(chǎn)品市場(chǎng)總值上升為200億美元或更高。這一切均預(yù)示著新的“抗體藥物時(shí)代”即將到來(lái)。研發(fā)單克隆抗體藥物都需要哪些條件呢？有關(guān)專家認(rèn)為以下四個(gè)條件是必要的：一是多領(lǐng)域生物技術(shù)專家的合作，即一個(gè)良好的創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)；二是多學(xué)科和交叉的技術(shù)，特別是高效的人源化技術(shù)和親合力技術(shù)；三是要有先進(jìn)復(fù)雜的生產(chǎn)基地和設(shè)施；四是需要較大規(guī)模的投資。事實(shí)上，對(duì)于我國(guó)的生物制藥公司來(lái)說(shuō)，研發(fā)單克隆抗體藥物較之開(kāi)發(fā)傳統(tǒng)的化學(xué)藥物具有一定的有利條件。有關(guān)專家分析認(rèn)為，目前絕大多數(shù)的單克隆抗體藥物的靶標(biāo)沒(méi)有專利保護(hù)或者專利已經(jīng)過(guò)了有效保護(hù)期。更為重要的是，單克隆抗體藥物的研發(fā)具有自己的特點(diǎn)，即多家開(kāi)發(fā)公司可以針對(duì)同一靶標(biāo)研發(fā)單克隆抗體藥物，雖然藥物的效果作用相同，但抗體的表位卻可以有很多不同的選擇，因此可以生產(chǎn)出許多療效相同但又不侵犯他人專利的單克隆抗體藥物。最后，加快我國(guó)開(kāi)發(fā)單克隆抗體藥物的步伐，最大的受益者當(dāng)然是病人，同時(shí)也將有力推動(dòng)我國(guó)的生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)，使我國(guó)在生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)上能夠與世界先進(jìn)國(guó)家展開(kāi)強(qiáng)有力的競(jìng)爭(zhēng)?？偠灾?，單克隆抗體市場(chǎng)前景廣闊無(wú)限。加強(qiáng)