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文檔簡介
醫(yī)學微生物學實驗室規(guī)則:學生進微生物實驗室必須穿好工作服,離室需脫下反折,要經常清洗消毒;進實驗室時隨帶書包、衣物等與實驗無關物品一律存放指定的儲物柜內;嚴禁在實驗室進食、飲水和抽煙;手拿培養(yǎng)物后或出實驗室前要洗手,必要時用消毒液泡手;實驗過程中避免一切不良的個人習慣;操作中產生的垃圾不得隨意拋擲,要扔在指定的桶內細菌
形態(tài)學檢查新鄉(xiāng)醫(yī)學院基礎醫(yī)學院科教科3029945
主講:馬玉龍
Email:形態(tài)學檢查分類一、不染色標本檢查(活體)
懸滴法壓滴法二、染色標本檢查
單染法:簡單染色,一種染料(美蘭染色)復染法:復雜染色,兩種以上染料(革蘭染色、抗酸染色)革蘭染色(Gramstain)1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立革蘭染色是最常用的一種染色方法,可以將細菌初步分為革蘭染色陽性菌和革蘭染色陰性菌,在臨床上具有非常重要的意義一、目的1、掌握細菌涂片的制備及革蘭染色的方法2、了解革蘭染色的原理和臨床意義
1、通透性學說2、等電點學說3、化學學說二、原理
通透性學說G+菌細胞壁結構致密,肽聚糖層厚且交聯(lián)度高,脂質含量少,乙醇不易進入G-菌細胞壁結構疏松,肽聚糖層薄且交聯(lián)度低,含大量脂質,乙醇易滲入?;瘜W學說G+菌菌體內含有大量核糖核酸鎂鹽,可與碘、結晶紫等染料牢固結合,使已著色的細菌不易被乙醇脫色G-菌菌體內含核糖核酸鎂鹽很少,故易被脫色沖洗染色完成之后,在涂片區(qū)滴上香柏油使用油鏡觀察實驗結果四、方法與步驟
1min1min30s30s沖洗沖洗沖洗1、細菌涂片的制備
涂片干燥固定
2、染色
初染(結晶紫)媒染(盧戈氏碘液)脫色(95%乙醇)復染(稀釋石碳酸復紅)
吸水紙吸干
一一半半G+菌G-菌結晶紫盧戈氏碘液95%乙醇石碳酸復紅初染
媒染
脫色復染六、結果圖一圖二七、臨床意義1、鑒別細菌2、研究與致病性的關系3、指導臨床用藥G+G-G+致病外毒素G-致病內毒素G+青霉素、頭孢菌素等G-鏈霉素、慶大霉素等細菌的特殊結構(示教)
(二毛莢一胞)從細胞質的基礎顆粒長出,伸到細胞外面的細長呈波狀彎曲的絲狀物。功能:鞭毛運動可鑒定、與致病性有關、具有抗原性(H抗原)菌發(fā)出比鞭毛更更細、短、直、硬和多的絲狀蛋白附屬物,與運動無關,菌毛中空,可分為普通菌毛和性菌毛功能:普通菌毛附黏膜,性菌毛傳遞遺傳物質菌體內部物質縮水(60%)形成圓或卵圓形小體。功能:芽胞形態(tài)辨細菌,滅菌標準抗力強。
實驗報告一、目的二、原理(主要)三、材料四、方法五、結果(2+3幅圖)六、意義七、注意事項
透鏡折光率油1.5151.0空氣玻1.52璃
空氣
油鏡原理示意圖物鏡工作距離(mm)低倍目鏡10×5.40高倍目鏡40×0.39油鏡頭100×0.11調試觀察:觀察目鏡,并慢慢轉動細調節(jié)器至物象清晰為止。[如果不出現(xiàn)物象或者目標不理想要重新尋找,在加油區(qū)之外重找時應按:低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內重找應按:低倍→油鏡程序,不得經高倍鏡,以免油沾污鏡頭。]清洗鏡頭:油鏡使用完畢,先用擦鏡紙擦去鏡頭上和標本上的香柏油,再用擦鏡紙沾少許二甲苯(或乙醚)擦去殘余的香柏油,最后再用干擦鏡紙擦干凈。油鏡的使用方法革蘭染色臨床意義臨床意義1、鑒別細菌2、研究與致病性的關系3、指
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