臨床微生物質(zhì)量控制

臨床微生物檢驗(yàn)是對(duì)人體的各種物質(zhì)進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)，整個(gè)檢驗(yàn)過程包括病人樣品的采集、運(yùn)送、處理，樣品中致病微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定，藥物敏感試驗(yàn)，出具檢驗(yàn)報(bào)告。臨床微生物檢驗(yàn)，在感染性疾病及相關(guān)病患的診斷治療預(yù)防及研究工作中起著越來越重要的作用，為了保障檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，日常工作中要注意開展質(zhì)量控制。臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)控工作的特點(diǎn)環(huán)節(jié)多涉及的知識(shí)面廣復(fù)雜性高、需要超強(qiáng)的責(zé)任心臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制的有關(guān)概念細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量結(jié)果真實(shí)顯示標(biāo)本中存在的病原菌及其生化特征和抗藥性細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量控制制定細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量水平，并采取監(jiān)測手段，這一過程稱為細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。質(zhì)量保證為達(dá)到應(yīng)有的質(zhì)量水平而采取的措施質(zhì)量評(píng)價(jià)用一個(gè)客觀的公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)來評(píng)定一個(gè)實(shí)驗(yàn)室或?qū)嶒?yàn)室中某項(xiàng)試驗(yàn)是否達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)的過程室間質(zhì)量控制室間質(zhì)量控制是各地實(shí)驗(yàn)室之間進(jìn)行質(zhì)量控制的一種方式，也是上一級(jí)實(shí)驗(yàn)室對(duì)各實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量管理的手段。參加由省臨床檢驗(yàn)中心或衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心組織的室間質(zhì)控，會(huì)遇見一些平時(shí)罕見或未見過的菌株，通過質(zhì)控檢驗(yàn)對(duì)它們的生長條件、菌落形態(tài)、染色、鏡下形態(tài)等有了較深的感性認(rèn)識(shí)。日后工作中倘若再遇見這些菌將不再會(huì)漏檢。

室內(nèi)質(zhì)量控制

做好室內(nèi)質(zhì)控直接關(guān)系到日常檢驗(yàn)工作的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控主要包括幾個(gè)方面：實(shí)驗(yàn)室前的質(zhì)量控制、標(biāo)本接種前的質(zhì)量控制、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制、試劑質(zhì)量控制、常用儀器的質(zhì)量控制、藥敏實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制、及發(fā)報(bào)告前的質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室前的質(zhì)量控制

要想獲得可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，首先要取得一份合格的標(biāo)本，所以實(shí)驗(yàn)室前的質(zhì)量控制是保障檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。包括標(biāo)本采集時(shí)間（時(shí)機(jī)）、采集方法與運(yùn)送等。血液細(xì)菌培養(yǎng)

臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血流感染的患者，需做血液細(xì)菌培養(yǎng)以明確病原。及時(shí)、準(zhǔn)確地從患者血液中分離出病原菌，才能正確實(shí)施有效地抗菌治療，從而有助于提高治愈率和降低醫(yī)療費(fèi)用。1.采血時(shí)機(jī)

應(yīng)在用抗菌素治療前,最好在患者發(fā)冷發(fā)熱前半小時(shí)采血為宜。2.采血次數(shù)與間隔急性感染患者

從兩臂分別采2份血樣。感染性心內(nèi)膜炎患者

24h內(nèi)采血3次,每次間隔不少于30分鐘。發(fā)熱原因不明患者

24～48h后可再采血2次,間隔不少于60分鐘。呼吸道標(biāo)標(biāo)本細(xì)菌菌培養(yǎng)標(biāo)本留取取質(zhì)量的的好壞直直接影響響到對(duì)下下呼吸道病原原學(xué)的診診斷標(biāo)本的采采集要盡盡量減少少上呼吸吸道正常常菌群干擾應(yīng)在用藥藥前或停停藥1天天后留取取標(biāo)本。。泌尿道標(biāo)標(biāo)本細(xì)菌菌培養(yǎng)應(yīng)在用藥藥前或停停藥5天天后留取取標(biāo)本,并使使尿液在在膀胱內(nèi)內(nèi)停留6～8h以上。。盡量避免免或減少少尿道口口正常菌菌群干擾擾。采集中段段尿尿量不宜宜太多，，試管塞塞子與尿尿液不應(yīng)應(yīng)直接接接觸留取導(dǎo)尿尿管尿要要排空導(dǎo)導(dǎo)尿管內(nèi)內(nèi)陳舊尿尿液，倘倘留置尿尿管超過過三天應(yīng)應(yīng)避免采采用。糞便標(biāo)本本的采集集應(yīng)在發(fā)病病早期并并且盡量量在用抗抗生素治治療前采采集，稀稀便不少少于1ml，固固體便不不少于1克，無無便患者者可用直直腸拭子子采集標(biāo)標(biāo)本。要挑取含含膿、黏黏液、血血等病理理改變或或水樣糞糞便送檢檢。直腸腸拭子采采樣量要要足夠，，拭子上上肉眼應(yīng)應(yīng)可見糞糞便。膿液標(biāo)本本要盡量避避免病灶灶表面細(xì)細(xì)菌污染染。開放放性膿腫腫，采樣樣前無菌菌鹽水沖沖洗傷口口，拭去去表面污污染膿液液，挑取取病灶深深部膿液液；封閉閉性膿液液，嚴(yán)格格病灶皮皮膚或黏黏膜表面面的消毒毒后用無無菌干燥燥注射器器穿刺抽抽取，置置無菌試試管內(nèi)送送檢，或或切開排排膿時(shí)用用無菌拭拭子采集集深部膿膿液。標(biāo)本接種種前質(zhì)量量控制各種臨床床標(biāo)本送送到實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室后，，大致檢檢查其是是否合格格。不合合格的標(biāo)標(biāo)本不應(yīng)應(yīng)進(jìn)行檢檢驗(yàn)。痰外觀觀分為膿痰痰（P））、粘液液（M））、血（（B）、、唾液（（S）、、水樣（（W）五五個(gè)級(jí)別別，以P、M、、B級(jí)別別適合細(xì)細(xì)菌培養(yǎng)養(yǎng)。痰標(biāo)本顯顯微鏡檢檢查的分分類分類白細(xì)胞上皮細(xì)胞5>25<104>2510~25

3>25>25210~25>251<10>251～3類類為不合合格標(biāo)本本,不不做培養(yǎng)養(yǎng)。4～5類類為合格格標(biāo)本。。油鏡下觀觀察并記記錄可能能的病原原菌，尤尤其是白白細(xì)胞內(nèi)內(nèi)吞噬的的細(xì)菌首先用滅滅菌生理理鹽水將將痰液洗洗3次，，然后將將痰塊打打碎，或或加入等等量10g/L的胰蛋蛋白酶將將痰塊消消化后再再接種。。培養(yǎng)基的的質(zhì)量控控制一般性狀狀無菌試驗(yàn)驗(yàn)細(xì)菌生長長試驗(yàn)１、一般般性狀外觀透明、清清亮、無無混濁、、無沉淀淀，顏色色符合要要求，表表面濕潤潤但無水水汽、平平整、光光潔無凹凹坑和氣氣泡。整整塊平板板厚薄均均勻。厚度一般厚度度在3mm，但MH平板厚度度不得小小于4mm。斜面的的長度不不得超過過試管長長度的2/3。pH是細(xì)菌生生長的重重要條件件之一，，合格培培養(yǎng)基的的pH應(yīng)在規(guī)定定值上下下0.2的范圍內(nèi)內(nèi)。2、無菌菌試驗(yàn)新制備的的培養(yǎng)基基要隨機(jī)機(jī)抽取一一定數(shù)量量的樣品品作無菌菌試驗(yàn)。。對(duì)于壓壓力蒸氣氣滅菌后后傾注的的固體培培養(yǎng)基，，抽樣后后放35℃±1℃溫箱箱培養(yǎng)24～～48h；滅菌菌后經(jīng)無無菌操作作分裝的的液體培培養(yǎng)基要要全部放放入35℃±1℃溫箱箱內(nèi)培養(yǎng)養(yǎng)24h；對(duì)有有些無需需高壓滅滅菌只需需煮沸消消毒的選選擇性培培養(yǎng)基要要取部分分瓊脂，，放入無無菌肉湯湯管培養(yǎng)養(yǎng)24h。上述述試驗(yàn)證證實(shí)無細(xì)細(xì)菌生長長時(shí)才算算合格。。若有細(xì)細(xì)菌生長長，說明明培養(yǎng)基基制備過過程中已已受雜菌菌污染，，除了尋尋找原因因外，應(yīng)應(yīng)不再使使用。３、細(xì)菌菌生長試試驗(yàn)所有的培培養(yǎng)基在在使用前前除了做做無菌試試驗(yàn)外還還必須用用已知的的標(biāo)準(zhǔn)菌菌株做細(xì)細(xì)菌生長長試驗(yàn)以以測定培培養(yǎng)基性性能是否否符合要要求。標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)菌株株分2種：：一種是是已知的的可在某某種培養(yǎng)養(yǎng)基上生生長并產(chǎn)產(chǎn)生典型型生物學(xué)學(xué)性狀的的，對(duì)培培養(yǎng)基中中的某種種物質(zhì)產(chǎn)產(chǎn)生陽性性反應(yīng)的的菌株；；另一種種是用已已知的不不能在某某種培養(yǎng)養(yǎng)基上生生長或?qū)?duì)培養(yǎng)基基中的某某種物質(zhì)質(zhì)產(chǎn)生陰陰性生化化反應(yīng)的的菌株。。試劑質(zhì)控控臨床微生生物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室常用用的試劑劑包括染染色液、、診斷血血清以及及各種生生化反應(yīng)應(yīng)試劑等等。染色液及及染色方方法質(zhì)量量控制染色液的的配置必必須按標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)方法法與分量量，過濾濾后使用用，每次次記錄配配置量與與操作者者。還要要進(jìn)行染染色步驟驟質(zhì)控。。如革蘭蘭染色在在一張玻玻片上同同時(shí)涂有有金葡菌菌和大腸腸桿菌。。以保證證染色性性判斷準(zhǔn)準(zhǔn)確無誤誤。常用生化化試劑的的質(zhì)控隨著細(xì)菌菌鑒定儀儀和快速速微量生生化鑒定定板條的的普及，，臨床微微生物檢檢驗(yàn)常用用的生化化試劑種種類日趨趨減少，，應(yīng)注意意在用試試劑在貯貯存時(shí)的的避光、、冷藏等等要求，，保證試試劑的穩(wěn)穩(wěn)定性。。不要使使用過期期的試劑劑。診斷血清清的質(zhì)控控診斷血清清是一種種重要的的細(xì)菌鑒鑒定的試試劑，應(yīng)應(yīng)從有資資質(zhì)的生生產(chǎn)單位位購買。。驗(yàn)收時(shí)時(shí)必須看看清生產(chǎn)產(chǎn)批號(hào)、、血清效效價(jià)、透透明度與與色澤。。試驗(yàn)中中應(yīng)注意意無菌操操作，避避免細(xì)菌菌污染。。要經(jīng)常常檢查貯貯存在4℃冰箱箱中的各各種血清清，若發(fā)發(fā)現(xiàn)混濁濁，出現(xiàn)現(xiàn)絮狀，，應(yīng)停止止使用。。為保證證血清凝凝集反應(yīng)應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)準(zhǔn)確，應(yīng)應(yīng)每3個(gè)個(gè)月對(duì)血血清進(jìn)行行一次質(zhì)質(zhì)控。不不要使用用過期的的血清。。儀器設(shè)備備的質(zhì)控控包括對(duì)冰冰箱、二二氧化碳碳孵箱、、普通孵孵箱、水水浴箱等等基本設(shè)設(shè)備的每每日溫度度、氣體體濃度的的監(jiān)控記記錄；顯顯微鏡、、細(xì)菌鑒鑒定儀等等儀器的的使用、、保養(yǎng)、、維修記記錄。以以保障實(shí)實(shí)驗(yàn)室各各種設(shè)備備、儀器器的正常常運(yùn)轉(zhuǎn)。。藥物敏感感試驗(yàn)的的質(zhì)控藥物敏感感試驗(yàn)是是臨床微微生物檢檢驗(yàn)的重重要步驟驟之一，，其結(jié)果果正確與與否涉及及治療效效果的好好壞。影響藥敏敏試驗(yàn)的的因素菌懸液濃濃度藥敏紙片片的質(zhì)量量MH培培養(yǎng)基的的質(zhì)量孵育的時(shí)時(shí)間、溫溫度、氣氣體操作人員員的技術(shù)術(shù)藥敏質(zhì)控控系統(tǒng)經(jīng)過正規(guī)規(guī)培訓(xùn)，，掌握藥藥敏試驗(yàn)驗(yàn)操作方方法的人人員有標(biāo)準(zhǔn)操操作規(guī)程程，包括括藥敏試試驗(yàn)方法法、標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)菌株種種類及應(yīng)應(yīng)用、藥藥敏試驗(yàn)驗(yàn)的質(zhì)控控方法及及允許范范圍、藥藥物種類類選擇與與判斷標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)等有試驗(yàn)所所需的質(zhì)質(zhì)控菌株株使用質(zhì)量量合格的的消耗性性檢驗(yàn)材材料儀器設(shè)備備運(yùn)轉(zhuǎn)正正常，控控制標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)在允許許范圍內(nèi)內(nèi)紙片藥藥敏試試驗(yàn)的的室內(nèi)內(nèi)質(zhì)控控基礎(chǔ)質(zhì)質(zhì)控：：連續(xù)續(xù)做30天天，如如失控控超過過3次次還需需繼續(xù)續(xù)，如如失控控低于于3次次可改改為每每周1次。。糾控：：每周周質(zhì)控控中發(fā)發(fā)生失失控應(yīng)應(yīng)糾控控，方方法：：連續(xù)續(xù)5天天，每每天1次，，每次次重復(fù)復(fù)5個(gè)個(gè)紙片片，如如找到到明確確失控控原因因，可可立即即改為為每周周1次次，否否則繼繼續(xù)。。發(fā)報(bào)告告前的的質(zhì)量量控制制核實(shí)病病原菌菌鑒定定結(jié)果果被鑒定定的細(xì)細(xì)菌菌菌落形形態(tài)、、生化化特征征等與與鑒定定出來來的菌菌種是是否相相吻合合被鑒定定菌是是否真真的需需要或或值得得鑒定定與報(bào)報(bào)告核實(shí)藥藥敏結(jié)結(jié)果抑菌圈圈測量量是否否準(zhǔn)確確特殊的的藥敏敏現(xiàn)象象有無無遺漏漏是否符符合耐耐藥規(guī)規(guī)則最后的的質(zhì)控控是前前面所所有質(zhì)質(zhì)控效效果的的總體體表現(xiàn)現(xiàn)