過敏原血清學(xué)檢測(cè)過敏原血清學(xué)檢測(cè)目錄一.過敏原概述二.過敏原常見方法學(xué)比較三.歐蒙過敏原產(chǎn)品特性及印跡法的特點(diǎn)四.過敏原體外檢測(cè)常見問題及解答目錄一.過敏原概述一、過敏原概述1906年vonPiguet提出了allergy一詞。其概念為：機(jī)體對(duì)抗原刺激產(chǎn)生的一種“改變了反應(yīng)性”的狀態(tài)。這種狀態(tài)可能是保護(hù)性的，即產(chǎn)生了免疫力；也可能是破壞性的，即產(chǎn)生了超敏反應(yīng)。超敏反應(yīng)是機(jī)體對(duì)某抗原初次應(yīng)答后，再次接受相同抗原刺激時(shí)，發(fā)生的一種以機(jī)體生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的特異性免疫應(yīng)答。一、過敏原概述1906年vonPiguet提出了aller過敏原

吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原空氣中的吸入過敏原(例如.植物花粉,動(dòng)物毛發(fā),室內(nèi)灰塵或蟲螨等)過敏原吸入過敏原空氣中的吸入過敏原(例如.植物花粉,過敏原通過胃腸道吸收(例如.魚、肉、蛋、

堅(jiān)果和蔬菜等)吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原過敏原通過胃腸道吸收(例如.魚、肉、蛋、堅(jiān)果和蔬菜等過敏原

皮膚接觸（例如：金屬飾品、化妝品和生活日用品等）吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原過敏原皮膚接觸（例如：金屬飾品、化妝品和生活日用品等）吸入過敏原直接輸入體內(nèi)(例如：昆蟲或動(dòng)物的毒液,注射類藥品等)吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原過敏原直接輸入體內(nèi)(例如：昆蟲或動(dòng)物的毒液,注射類藥品過敏的損害過敏是以損害粘膜為主要表現(xiàn)的過敏性結(jié)膜炎（眼粘膜）過敏性鼻炎（鼻粘膜）過敏性哮喘（氣管粘膜）過敏性紫癜（皮膚粘膜）過敏性腸絞痛（腸粘膜）過敏性紫癜腎炎（腎內(nèi)粘膜）心臟有粘膜組織，心臟是肯定會(huì)受到損

。心肌酶升高，特別是特異性的CK-MB（肌酸激酶同工酶）。CK-MB分布在心肌和結(jié)締組織。心電圖表現(xiàn)主要是心肌膜的損害，表現(xiàn)為傳導(dǎo)阻滯。過敏的損害過敏是以損害粘膜為主要表現(xiàn)的

1.皮膚科（30％）：急慢性蕁麻疹、異位性皮炎等 2.耳鼻咽喉科（30％）：以過敏性鼻炎為主 3.內(nèi)科（25％）：以哮喘、過敏性肺泡炎為主 4.小兒科（15％）：兒童變態(tài)反應(yīng)病的診治 5.變態(tài)反應(yīng)?？疲?lt;1％）：僅在少數(shù)大型3甲醫(yī)院設(shè)置了變態(tài)反應(yīng)科室，從事變態(tài)反應(yīng)病的研究，并承擔(dān)某些罕見病、疑難病的臨床診治。應(yīng)用科室 應(yīng)用科室過敏原II

相關(guān)過敏原~5%無關(guān)成分~95%過敏原II相關(guān)過敏原過敏原II

過敏原的命名:

對(duì)于純化過敏原:拉丁文縮寫+序號(hào)

例如.樺木花粉(betulaverrucosa)

:Betv1;Bet

v2...蛋白或糖蛋白小分子量物質(zhì),15–20kDa過敏原過敏原II過敏原的命名:蛋白或糖蛋白過敏原過敏原II

過敏原提取物為包含與過敏反應(yīng)無關(guān)的其它成分的混合物純化天然相關(guān)過敏原通常不太可能實(shí)現(xiàn)目前尚無有關(guān)過敏原的國際標(biāo)準(zhǔn)Mark1215μl5μl1μl614223136556697116kDa

HPLC+-

SDS

WB過敏原II過敏原提取物為包含與過敏反應(yīng)無關(guān)的其它成分的混提取過程緩沖液系統(tǒng)溫度純化儲(chǔ)存...過敏原II

影響因素過敏原II

影響因素過敏原II

影響因素原材料:例如.樺樹花粉:除了植物品種個(gè)體特征外，樹齡、生長環(huán)境和過敏原采集時(shí)間和方法等多種因素均會(huì)影響到過敏原的質(zhì)量。過敏原II

影響因素原材料:過敏原應(yīng)用過敏原提取物進(jìn)行診斷所有的試劑生產(chǎn)商通常都檢測(cè)特異性IgE在檢測(cè)方法上存在差異結(jié)果通常不能避免非特異性反應(yīng)所有的試劑生產(chǎn)商通常都檢測(cè)特異性IgE

來源:

由歐蒙生化和分子生物學(xué)生產(chǎn)部負(fù)責(zé)生產(chǎn)

從著名的過敏原生產(chǎn)廠商購買商品化的產(chǎn)品

質(zhì)量控制:

通過電泳分離的方法檢測(cè)過敏原成分

通過免疫印跡的方法檢測(cè)其過敏原反應(yīng)性

在膜條上完成功能測(cè)試過敏原生產(chǎn)和質(zhì)量控制 來源:免疫反應(yīng)過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件4種過敏反應(yīng)類型(超敏反應(yīng))

byCoombsundGell(1963)TypeITypeII TypeIII TypeIV早期反應(yīng)IgE-介導(dǎo)肥大細(xì)胞脫核Platzhalter

數(shù)分鐘內(nèi)花粉熱細(xì)胞毒反應(yīng)IgG/IgM介導(dǎo)血細(xì)胞的破壞數(shù)小時(shí)到一天藥物過敏

免疫復(fù)合物形成持續(xù)產(chǎn)生IgG/IgM免疫復(fù)合物

Platzhalter

數(shù)小時(shí)到一天farmerslungs細(xì)胞免疫反應(yīng)T-細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)12小時(shí)到數(shù)周接觸過敏反應(yīng)(Ni)4種過敏反應(yīng)類型(超敏反應(yīng))

byCoombsund過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)I型過敏反應(yīng)

Betv1Betv2確認(rèn)對(duì)樺樹花粉過敏的患者……個(gè)體分別與不同的樺樹花粉過敏原反應(yīng)，如：Betv1...Betv8Betv3Betv7Betv1Betv4Betv2Betv6Betv8I型過敏反應(yīng) Betv1確認(rèn)對(duì)樺樹花粉過敏的患者……個(gè)體分過敏原診斷與治療診斷方面即往病史皮試實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)激發(fā)實(shí)驗(yàn)治療方面特異性免疫治療

成功率低于100%過敏原診斷與治療診斷方面過敏原血清學(xué)檢測(cè)過敏原血清學(xué)檢測(cè)檢測(cè)IgE步驟1: 總IgEELISA步驟2: 特異性IgEEUROLINE步驟1: 總IgE步驟2: 特異性IgE總IgEELISA標(biāo)準(zhǔn)品500IU/ml100IU/ml10IU/ml0IU/mlWHO75/5024點(diǎn)定標(biāo)Exampleforastandardcurve00,511,520100200300400500600IgE[IU/ml]Extinction總IgEELISA標(biāo)準(zhǔn)品4點(diǎn)定標(biāo)Examplefor總IgEELISA:參考范圍> 參考范圍 可能存在過敏反應(yīng)< 參考范圍 一般無過敏反應(yīng)年齡

最高參考上限

新生兒

1.2IU/ml

1-6月

7.2IU/ml

7-12月

12.7IU/ml

1-5歲

60IU/ml

6-9歲

155IU/ml

10-15歲

199IU/ml

>16歲

100IU/ml

總IgEELISA:參考范圍> 參考范圍 可能存在總IgEELISA:結(jié)果解釋

總IgE超出參考范圍大多數(shù)是由于過敏反應(yīng)導(dǎo)致例外:寄生蟲病;免疫抑制;HIV;重度燒傷

臨床相關(guān)特異性IgE結(jié)果與總IgE相關(guān)的特異性IgE濃度越高，患者臨床過敏反應(yīng)的可能性就越大.總IgEELISA:結(jié)果解釋總IgE超出參考范圍大多總IgEELISA:結(jié)果解釋舉例特異性IgE

總IgE特異性IgE 5IU/ml(kU/l)總IgE 200IU/ml患者1特異性IgE 5IU/ml(kU/l)總IgE 25IU/ml患者2總IgEELISA:結(jié)果解釋舉例特異性IgE 總IgE總IgEELISA:總結(jié)簡(jiǎn)單和快捷的實(shí)驗(yàn)操作低檢出限(1IU/ml)高重復(fù)性(批內(nèi)實(shí)驗(yàn):5%)通過4份標(biāo)準(zhǔn)品計(jì)算定量結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品采用WHO標(biāo)準(zhǔn)通過ELISA工作站實(shí)現(xiàn)自動(dòng)分析

總IgEELISA:總結(jié)簡(jiǎn)單和快捷的實(shí)驗(yàn)操作特異性IgEEUROLINEALLERCOATTM6DP3713E－吸入性及食物性過敏原DP3713E－吸入性及食物性過敏原特異性IgEEUROLINE簡(jiǎn)便和快捷的實(shí)驗(yàn)操作僅需少量樣本(過夜溫育)結(jié)果基于廣泛應(yīng)用的EAST分級(jí)系統(tǒng)與PharmaciaCAP具有良好的相關(guān)性自動(dòng)溫育通過EUROLineScan程序?qū)崿F(xiàn)結(jié)果的自動(dòng)判讀簡(jiǎn)便和快捷的實(shí)驗(yàn)操作類別濃度[kU/l]sIgE水平臨床意義0<0.35未檢出不過敏10.35-0.7低較敏感20.7-3.5中有臨床癥狀33.5-17.5高重417.5-50很高（+）很重550-100特高（++）特重6>100特高（+++）特重特異性IgE分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及臨床意義類別濃度[kU/l]sIgE水平臨床意義0<0.35未檢出不特異性IgEEUROLINE血清溫育顏色反應(yīng)色原底物膜條抗原提取物溫育60min二抗反應(yīng)10min底物溫育AP標(biāo)記二抗AKP

清洗3x5min

清洗3x5min自動(dòng)化判讀或肉眼觀察60min未稀釋過夜1:11稀釋顏色反應(yīng)色原底物膜條抗原提取物溫育60min二抗反應(yīng)10EUROLINE檢測(cè)系統(tǒng)過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件結(jié)果判讀:EUROLineScan 特異性IgE歐蒙印跡法自動(dòng)化結(jié)果判讀:EUROLineScan 過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件歐蒙印跡法過敏原譜中歐吸入兒童吸入食物特應(yīng)性交叉反應(yīng)兒童昆蟲毒液亞洲中國吸入中國食物中國特應(yīng)性韓國吸入1+2韓國食物1+2東南亞吸入東南亞食物地中海中東地中海吸入中東吸入中東食物Inhal.ScreenAEFoodScreenAE海灣吸入海灣食物歐蒙印跡法過敏原譜中歐亞洲地中海特異性IgE歐蒙印跡法各種組合

為不同過敏原組合提供可能:

在一條膜條上包被36種以上過敏原

大約170種以上過敏原

滿足新過敏原組合的需要:

市場(chǎng)信息反饋

目標(biāo)過敏原的定位和其它參數(shù)確認(rèn)

提供特殊過敏原的原材料

提供陽性血清為不同過敏原組合提供可能:二、過敏原常見方法學(xué)比較既往病史皮試: 刺試,抓試,皮外試,皮內(nèi)試實(shí)驗(yàn)室檢查: IgE檢測(cè) CAST(細(xì)胞抗原刺激實(shí)驗(yàn))激發(fā)試驗(yàn):(金標(biāo)準(zhǔn))-鼻腔激發(fā)試驗(yàn)-雙盲穩(wěn)定劑控制的食物刺激試驗(yàn)(DBPCFC) 二、過敏原常見方法學(xué)比較既往病史二、過敏原常見方法學(xué)比較過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件二、過敏原常見方法學(xué)比較類別方法特點(diǎn)體內(nèi)皮膚針刺試驗(yàn)強(qiáng)烈反應(yīng)時(shí)容易互相混淆結(jié)果（皮內(nèi)試驗(yàn)點(diǎn)、刺試驗(yàn)或價(jià)格便宜、快速，但對(duì)過敏原的質(zhì)量控制有嚴(yán)格要求，患者痛苦，刺痕試驗(yàn)）

無法避免對(duì)于高過敏體質(zhì)患者具有一定生命危險(xiǎn)性的問題同時(shí)試驗(yàn)多種抗原時(shí)，容易不同的抗原液交叉混合斑貼試驗(yàn)斑貼試驗(yàn)主要是檢測(cè)Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)，敏感程度不太高。鼻粘膜激發(fā)試驗(yàn)（SNPT）患者試驗(yàn)過程較痛苦無法避免對(duì)于高過敏體質(zhì)患者具有一定生命危險(xiǎn)性的問題操作等較繁瑣食物激發(fā)試驗(yàn)食物過敏檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)（DBPCFC）對(duì)于食物過敏反應(yīng)嚴(yán)重的患者較危險(xiǎn)操作麻煩，需要病床觀察患者試驗(yàn)過程較痛苦體外血清學(xué)檢驗(yàn)對(duì)患者來說使用安全，適合兒童，可避免強(qiáng)烈的皮膚反應(yīng)避免其它皮膚病造成的誤判使用方面，少量血清一次即可完成數(shù)十種種過敏原的檢測(cè)適用于對(duì)食物過敏的患者，效應(yīng)器官不在皮膚適用于用抗組胺類或激素類治療而不能停藥者生物共振無創(chuàng)、快速、檢測(cè)范圍廣、無創(chuàng)傷性、但該技術(shù)缺乏科學(xué)依據(jù)，

容易受到人為信號(hào)的干擾，難以建立嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)類別方法特點(diǎn)體內(nèi)皮膚針刺試驗(yàn)強(qiáng)烈反應(yīng)時(shí)容易互相混淆結(jié)果（皮體外診斷的優(yōu)勢(shì)

對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)

尤其適合5歲以下兒童，可避免強(qiáng)烈的皮膚反應(yīng)

與其它皮膚病區(qū)別

不需附加其它藥物

適合無法進(jìn)行皮試的食物過敏原的檢查對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)二、歐蒙過敏原產(chǎn)品特性及印跡法特點(diǎn)同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多不添加任何增效劑針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的過敏原對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)不需停止服用抗組胺藥物獨(dú)家包被有CCD指示帶，解釋交叉反應(yīng)的假陽性結(jié)果所有廠家中樣本使用體積最?。?00ul）快速測(cè)試過敏原，整個(gè)實(shí)驗(yàn)完成僅需要2.5-3小時(shí)歐蒙過敏原體外診斷的優(yōu)勢(shì)同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多歐蒙過敏原體外診斷的優(yōu)勢(shì)同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多可一次檢測(cè)20大項(xiàng)，30小項(xiàng)過敏原同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多可一次檢測(cè)20大項(xiàng)，30小不添加任何增效劑

現(xiàn)在有些產(chǎn)品為了增大反應(yīng)強(qiáng)度，在產(chǎn)品中添加增效劑，加大了反應(yīng)強(qiáng)度。導(dǎo)致了判定結(jié)果與臨床有不符現(xiàn)象。歐蒙產(chǎn)品不添加任何增效劑，本著科學(xué)、實(shí)事求是的精神真實(shí)、準(zhǔn)確的判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果。不添加任何增效劑

現(xiàn)在有些產(chǎn)品為了增大反應(yīng)強(qiáng)度，在產(chǎn)品中添加針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的過敏原

過敏原采集于中國，提高特異性檢出率DP3713-1601E（中國組合）針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的組合針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的過敏原

過敏原采集于中國，提高特異性檢出率對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)無痛檢測(cè)：通過血清中IgE抗體與過敏原結(jié)合，測(cè)試過敏反應(yīng)避免了人體與過敏原直接反應(yīng)導(dǎo)致的風(fēng)險(xiǎn)用點(diǎn)刺針穿過液滴，輕輕刺入皮內(nèi)

將可疑致敏物質(zhì)敷貼于患者皮膚上斑貼試驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)無痛檢測(cè)：通過血清中IgE抗體與過敏原結(jié)不需停止服用抗組胺藥物以往過敏原檢測(cè)需要患者體檢停止服用抗組胺藥物。以便提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。歐蒙過敏原檢測(cè)試劑無需患者停止服用抗組胺藥物。（常用的有苯海拉明、異丙臻、撲爾敏、賽庚啶、息斯敏、特非拉丁等）不需停止服用抗組胺藥物

獨(dú)家包被有CCD指示帶獨(dú)家包被有CCD指示帶，解釋交叉反應(yīng)的假陽性結(jié)果CCD是“交叉反應(yīng)性碳水化合物決定因子”CCD存在于多種植物性或動(dòng)物源性的過敏原中，由于結(jié)果相似性導(dǎo)致一些獨(dú)特的交叉反應(yīng)出現(xiàn)CCD的檢測(cè)對(duì)于患者提示：雖然對(duì)于某些過敏原沒有臨床癥狀，但是在過敏進(jìn)程中對(duì)有些具有交叉反應(yīng)的過敏原可能會(huì)有改變，所以對(duì)于患者又針對(duì)性的預(yù)防交叉過敏反應(yīng)，有著重要的臨床指導(dǎo)意義。

獨(dú)家包被有CCD指示帶獨(dú)家包被有CCD指示帶，解釋交叉反應(yīng)歐蒙印跡法的特點(diǎn)? 一次可以檢測(cè)多項(xiàng)過敏原? 8-20項(xiàng)，常見食物及吸入組合，如葎草，艾蒿，豚草，常見樹花粉，霉菌，塵螨，貓毛，狗毛，蟑螂，雞蛋，牛奶，魚，蝦，蟹，花生，大豆等。? 適合體檢篩查。? 采血量少? 100-1000微升血清可以檢測(cè)多項(xiàng)，特別適合兒童患者。? 性價(jià)比高? 一次可得到多種過敏原信息譜。? 適合各類人群? 一定范圍內(nèi)脂血、溶血、黃疸血清或血漿樣本對(duì)檢測(cè)結(jié)果無影響。歐蒙印跡法的特點(diǎn)? 一次可以檢測(cè)多項(xiàng)過敏原? 有配套儀器軟件可以省時(shí)省力? 全自動(dòng)操作，判讀軟件，2.5h出結(jié)果。? 無需暗室孵育。? 半定量可以直接獲得結(jié)果? 可以直接用肉眼判讀，也可以用歐蒙配套軟件判讀。? EAST分級(jí)并有數(shù)字及單位結(jié)果。? 易于保存原始數(shù)據(jù)? 結(jié)果樣式可靈活設(shè)計(jì)。? 結(jié)果可轉(zhuǎn)為excel表，方便科研。歐蒙印跡法的特點(diǎn)? 有配套儀器軟件可以省時(shí)省力歐蒙印跡法的特點(diǎn)四、過敏原體外檢測(cè)常見問題及解答四、過敏原體外檢測(cè)常見問題及解答Q1:為何患者sIgE結(jié)果陽性與臨床表現(xiàn)不符Q1:過敏原-特異性IgEEUROLINE產(chǎn)品調(diào)整提供CCD檢測(cè)指標(biāo)過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件何謂CCDs?

CCD是“CrossreactiveCarbohydrateDeterminants（交叉反應(yīng)性碳水化合物決定子）”的英文縮寫.該結(jié)構(gòu)為結(jié)合于糖蛋白N末端的多聚糖。依據(jù)糖基化作用的不同而產(chǎn)生不同的結(jié)構(gòu)。舉例:MMXF(Manα1-6(Manα1-3)(Xylβ1-2)Manβ1-4GlcNAcβ1-4(Fucα1-3)GlcNAc)何謂CCDs? CCD是“CrossreactiveCCCDs在自然界中的存在?

CCDs存在于多種植物性或動(dòng)物源性的過敏原中。由于結(jié)構(gòu)的相似性導(dǎo)致一些獨(dú)特的交叉反應(yīng)出現(xiàn)。典型含CCD結(jié)構(gòu)的過敏原:

植物花粉

植物性食物

植物乳膠

昆蟲毒液CCDs在自然界中的存在? CCDs存在于多種植物性或動(dòng)抗CCDIgE結(jié)果的臨床價(jià)值?大部分糖蛋白僅含有一個(gè)IgE結(jié)合的多聚糖，因此無法促進(jìn)結(jié)合有IgE抗體的肥大細(xì)胞表面受體形成二聚體化，進(jìn)而無法活化肥大細(xì)胞發(fā)生脫核及釋放組胺的作用，因此對(duì)于僅為抗CCDIgE抗體陽性的患者而言往往無臨床癥狀的表現(xiàn)?？笴CDIgE結(jié)果的臨床價(jià)值?大部分糖蛋在何種情況下應(yīng)排除抗CCDIgE的干擾?當(dāng)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床癥狀或皮試結(jié)果不符的情況下.當(dāng)某一患者出現(xiàn)多個(gè)特異性IgE結(jié)果陽性時(shí)舉例:

花生:特異性IgE陽性但并不表現(xiàn)出臨床癥狀出現(xiàn)多個(gè)食物相關(guān)的陽性結(jié)果但缺乏臨床癥狀表現(xiàn).植物乳膠:針對(duì)花粉敏感的患者抗植物乳膠陽性，但無相關(guān)接觸史。? 昆蟲毒液:針對(duì)蜜蜂和馬蜂特異性IgE陽性的患者可能存在交叉反應(yīng)。在何種情況下應(yīng)排除抗CCDIgE的干擾?當(dāng)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果與Q2:如何解釋總IgE結(jié)果與sIgE結(jié)果不符Q2:解釋1:總IgE濃度與sIgE水平并不存在必然相關(guān)性約20-30%超敏疾病患者特異性IgE可能較高，但總IgE可維持正常，甚至低于幾何均值。如患者僅對(duì)牛奶高度過敏，其特異性IgE為18kU/L。對(duì)于特異性IgE而言，該結(jié)果已屬于嚴(yán)重過敏（IV級(jí)）的范疇。從理論上講，該患者的總IgE也應(yīng)該為18kU/L。而對(duì)于總IgE來說，這個(gè)結(jié)果是很低的；總IgE升高并不一定是超敏反應(yīng)，而過敏患者總IgE也不總是一定升高。這一要點(diǎn)在評(píng)價(jià)總IgE檢測(cè)結(jié)果時(shí)非常重要。解釋1:約20-30%超敏疾病患者特異性IgE可能較高，但總結(jié)果解釋1、不同批號(hào)產(chǎn)品所使用過敏原提取物的成分可能不同；2、針對(duì)過敏原檢測(cè)陽性結(jié)果若臨床存在明顯過敏癥狀，則應(yīng)明確判斷陽性；

Q3:針對(duì)同一過敏原檢測(cè)，為何出現(xiàn)吸入和食物組合結(jié)果差異結(jié)果解釋Q3:針對(duì)同一過敏原檢測(cè)，為何出現(xiàn)吸入和食物組合結(jié)Q4:未溫育膜條為何出現(xiàn)淺色條帶Q4:血清溫育前血清溫育前，在膜條特定過敏原區(qū)域出現(xiàn)淺色條帶血清溫育前，在膜條特定過敏原區(qū)域出現(xiàn)淺色條帶血清溫育后血清溫育后，淺色條帶消失結(jié)果解釋：1、溫育前淺色條帶是由于過敏原天然提取物含少量色素；2、溫育后，淺色條帶即可消失3、淺色條帶不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果血清溫育后血清溫育后，淺色條帶消失謝謝！謝謝！過敏原血清學(xué)檢測(cè)過敏原血清學(xué)檢測(cè)目錄一.過敏原概述二.過敏原常見方法學(xué)比較三.歐蒙過敏原產(chǎn)品特性及印跡法的特點(diǎn)四.過敏原體外檢測(cè)常見問題及解答目錄一.過敏原概述一、過敏原概述1906年vonPiguet提出了allergy一詞。其概念為：機(jī)體對(duì)抗原刺激產(chǎn)生的一種“改變了反應(yīng)性”的狀態(tài)。這種狀態(tài)可能是保護(hù)性的，即產(chǎn)生了免疫力；也可能是破壞性的，即產(chǎn)生了超敏反應(yīng)。超敏反應(yīng)是機(jī)體對(duì)某抗原初次應(yīng)答后，再次接受相同抗原刺激時(shí)，發(fā)生的一種以機(jī)體生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的特異性免疫應(yīng)答。一、過敏原概述1906年vonPiguet提出了aller過敏原

吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原空氣中的吸入過敏原(例如.植物花粉,動(dòng)物毛發(fā),室內(nèi)灰塵或蟲螨等)過敏原吸入過敏原空氣中的吸入過敏原(例如.植物花粉,過敏原通過胃腸道吸收(例如.魚、肉、蛋、

堅(jiān)果和蔬菜等)吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原過敏原通過胃腸道吸收(例如.魚、肉、蛋、堅(jiān)果和蔬菜等過敏原

皮膚接觸（例如：金屬飾品、化妝品和生活日用品等）吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原過敏原皮膚接觸（例如：金屬飾品、化妝品和生活日用品等）吸入過敏原直接輸入體內(nèi)(例如：昆蟲或動(dòng)物的毒液,注射類藥品等)吸入過敏原食物過敏原接觸過敏原輸注過敏原過敏原直接輸入體內(nèi)(例如：昆蟲或動(dòng)物的毒液,注射類藥品過敏的損害過敏是以損害粘膜為主要表現(xiàn)的過敏性結(jié)膜炎（眼粘膜）過敏性鼻炎（鼻粘膜）過敏性哮喘（氣管粘膜）過敏性紫癜（皮膚粘膜）過敏性腸絞痛（腸粘膜）過敏性紫癜腎炎（腎內(nèi)粘膜）心臟有粘膜組織，心臟是肯定會(huì)受到損

。心肌酶升高，特別是特異性的CK-MB（肌酸激酶同工酶）。CK-MB分布在心肌和結(jié)締組織。心電圖表現(xiàn)主要是心肌膜的損害，表現(xiàn)為傳導(dǎo)阻滯。過敏的損害過敏是以損害粘膜為主要表現(xiàn)的

1.皮膚科（30％）：急慢性蕁麻疹、異位性皮炎等 2.耳鼻咽喉科（30％）：以過敏性鼻炎為主 3.內(nèi)科（25％）：以哮喘、過敏性肺泡炎為主 4.小兒科（15％）：兒童變態(tài)反應(yīng)病的診治 5.變態(tài)反應(yīng)?？疲?lt;1％）：僅在少數(shù)大型3甲醫(yī)院設(shè)置了變態(tài)反應(yīng)科室，從事變態(tài)反應(yīng)病的研究，并承擔(dān)某些罕見病、疑難病的臨床診治。應(yīng)用科室 應(yīng)用科室過敏原II

相關(guān)過敏原~5%無關(guān)成分~95%過敏原II相關(guān)過敏原過敏原II

過敏原的命名:

對(duì)于純化過敏原:拉丁文縮寫+序號(hào)

例如.樺木花粉(betulaverrucosa)

:Betv1;Bet

v2...蛋白或糖蛋白小分子量物質(zhì),15–20kDa過敏原過敏原II過敏原的命名:蛋白或糖蛋白過敏原過敏原II

過敏原提取物為包含與過敏反應(yīng)無關(guān)的其它成分的混合物純化天然相關(guān)過敏原通常不太可能實(shí)現(xiàn)目前尚無有關(guān)過敏原的國際標(biāo)準(zhǔn)Mark1215μl5μl1μl614223136556697116kDa

HPLC+-

SDS

WB過敏原II過敏原提取物為包含與過敏反應(yīng)無關(guān)的其它成分的混提取過程緩沖液系統(tǒng)溫度純化儲(chǔ)存...過敏原II

影響因素過敏原II

影響因素過敏原II

影響因素原材料:例如.樺樹花粉:除了植物品種個(gè)體特征外，樹齡、生長環(huán)境和過敏原采集時(shí)間和方法等多種因素均會(huì)影響到過敏原的質(zhì)量。過敏原II

影響因素原材料:過敏原應(yīng)用過敏原提取物進(jìn)行診斷所有的試劑生產(chǎn)商通常都檢測(cè)特異性IgE在檢測(cè)方法上存在差異結(jié)果通常不能避免非特異性反應(yīng)所有的試劑生產(chǎn)商通常都檢測(cè)特異性IgE

來源:

由歐蒙生化和分子生物學(xué)生產(chǎn)部負(fù)責(zé)生產(chǎn)

從著名的過敏原生產(chǎn)廠商購買商品化的產(chǎn)品

質(zhì)量控制:

通過電泳分離的方法檢測(cè)過敏原成分

通過免疫印跡的方法檢測(cè)其過敏原反應(yīng)性

在膜條上完成功能測(cè)試過敏原生產(chǎn)和質(zhì)量控制 來源:免疫反應(yīng)過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件4種過敏反應(yīng)類型(超敏反應(yīng))

byCoombsundGell(1963)TypeITypeII TypeIII TypeIV早期反應(yīng)IgE-介導(dǎo)肥大細(xì)胞脫核Platzhalter

數(shù)分鐘內(nèi)花粉熱細(xì)胞毒反應(yīng)IgG/IgM介導(dǎo)血細(xì)胞的破壞數(shù)小時(shí)到一天藥物過敏

免疫復(fù)合物形成持續(xù)產(chǎn)生IgG/IgM免疫復(fù)合物

Platzhalter

數(shù)小時(shí)到一天farmerslungs細(xì)胞免疫反應(yīng)T-細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)12小時(shí)到數(shù)周接觸過敏反應(yīng)(Ni)4種過敏反應(yīng)類型(超敏反應(yīng))

byCoombsund過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)I型過敏反應(yīng)

Betv1Betv2確認(rèn)對(duì)樺樹花粉過敏的患者……個(gè)體分別與不同的樺樹花粉過敏原反應(yīng)，如：Betv1...Betv8Betv3Betv7Betv1Betv4Betv2Betv6Betv8I型過敏反應(yīng) Betv1確認(rèn)對(duì)樺樹花粉過敏的患者……個(gè)體分過敏原診斷與治療診斷方面即往病史皮試實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)激發(fā)實(shí)驗(yàn)治療方面特異性免疫治療

成功率低于100%過敏原診斷與治療診斷方面過敏原血清學(xué)檢測(cè)過敏原血清學(xué)檢測(cè)檢測(cè)IgE步驟1: 總IgEELISA步驟2: 特異性IgEEUROLINE步驟1: 總IgE步驟2: 特異性IgE總IgEELISA標(biāo)準(zhǔn)品500IU/ml100IU/ml10IU/ml0IU/mlWHO75/5024點(diǎn)定標(biāo)Exampleforastandardcurve00,511,520100200300400500600IgE[IU/ml]Extinction總IgEELISA標(biāo)準(zhǔn)品4點(diǎn)定標(biāo)Examplefor總IgEELISA:參考范圍> 參考范圍 可能存在過敏反應(yīng)< 參考范圍 一般無過敏反應(yīng)年齡

最高參考上限

新生兒

1.2IU/ml

1-6月

7.2IU/ml

7-12月

12.7IU/ml

1-5歲

60IU/ml

6-9歲

155IU/ml

10-15歲

199IU/ml

>16歲

100IU/ml

總IgEELISA:參考范圍> 參考范圍 可能存在總IgEELISA:結(jié)果解釋

總IgE超出參考范圍大多數(shù)是由于過敏反應(yīng)導(dǎo)致例外:寄生蟲病;免疫抑制;HIV;重度燒傷

臨床相關(guān)特異性IgE結(jié)果與總IgE相關(guān)的特異性IgE濃度越高，患者臨床過敏反應(yīng)的可能性就越大.總IgEELISA:結(jié)果解釋總IgE超出參考范圍大多總IgEELISA:結(jié)果解釋舉例特異性IgE

總IgE特異性IgE 5IU/ml(kU/l)總IgE 200IU/ml患者1特異性IgE 5IU/ml(kU/l)總IgE 25IU/ml患者2總IgEELISA:結(jié)果解釋舉例特異性IgE 總IgE總IgEELISA:總結(jié)簡(jiǎn)單和快捷的實(shí)驗(yàn)操作低檢出限(1IU/ml)高重復(fù)性(批內(nèi)實(shí)驗(yàn):5%)通過4份標(biāo)準(zhǔn)品計(jì)算定量結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品采用WHO標(biāo)準(zhǔn)通過ELISA工作站實(shí)現(xiàn)自動(dòng)分析

總IgEELISA:總結(jié)簡(jiǎn)單和快捷的實(shí)驗(yàn)操作特異性IgEEUROLINEALLERCOATTM6DP3713E－吸入性及食物性過敏原DP3713E－吸入性及食物性過敏原特異性IgEEUROLINE簡(jiǎn)便和快捷的實(shí)驗(yàn)操作僅需少量樣本(過夜溫育)結(jié)果基于廣泛應(yīng)用的EAST分級(jí)系統(tǒng)與PharmaciaCAP具有良好的相關(guān)性自動(dòng)溫育通過EUROLineScan程序?qū)崿F(xiàn)結(jié)果的自動(dòng)判讀簡(jiǎn)便和快捷的實(shí)驗(yàn)操作類別濃度[kU/l]sIgE水平臨床意義0<0.35未檢出不過敏10.35-0.7低較敏感20.7-3.5中有臨床癥狀33.5-17.5高重417.5-50很高（+）很重550-100特高（++）特重6>100特高（+++）特重特異性IgE分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及臨床意義類別濃度[kU/l]sIgE水平臨床意義0<0.35未檢出不特異性IgEEUROLINE血清溫育顏色反應(yīng)色原底物膜條抗原提取物溫育60min二抗反應(yīng)10min底物溫育AP標(biāo)記二抗AKP

清洗3x5min

清洗3x5min自動(dòng)化判讀或肉眼觀察60min未稀釋過夜1:11稀釋顏色反應(yīng)色原底物膜條抗原提取物溫育60min二抗反應(yīng)10EUROLINE檢測(cè)系統(tǒng)過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件結(jié)果判讀:EUROLineScan 特異性IgE歐蒙印跡法自動(dòng)化結(jié)果判讀:EUROLineScan 過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件歐蒙印跡法過敏原譜中歐吸入兒童吸入食物特應(yīng)性交叉反應(yīng)兒童昆蟲毒液亞洲中國吸入中國食物中國特應(yīng)性韓國吸入1+2韓國食物1+2東南亞吸入東南亞食物地中海中東地中海吸入中東吸入中東食物Inhal.ScreenAEFoodScreenAE海灣吸入海灣食物歐蒙印跡法過敏原譜中歐亞洲地中海特異性IgE歐蒙印跡法各種組合

為不同過敏原組合提供可能:

在一條膜條上包被36種以上過敏原

大約170種以上過敏原

滿足新過敏原組合的需要:

市場(chǎng)信息反饋

目標(biāo)過敏原的定位和其它參數(shù)確認(rèn)

提供特殊過敏原的原材料

提供陽性血清為不同過敏原組合提供可能:二、過敏原常見方法學(xué)比較既往病史皮試: 刺試,抓試,皮外試,皮內(nèi)試實(shí)驗(yàn)室檢查: IgE檢測(cè) CAST(細(xì)胞抗原刺激實(shí)驗(yàn))激發(fā)試驗(yàn):(金標(biāo)準(zhǔn))-鼻腔激發(fā)試驗(yàn)-雙盲穩(wěn)定劑控制的食物刺激試驗(yàn)(DBPCFC) 二、過敏原常見方法學(xué)比較既往病史二、過敏原常見方法學(xué)比較過敏原血清學(xué)檢測(cè)課件二、過敏原常見方法學(xué)比較類別方法特點(diǎn)體內(nèi)皮膚針刺試驗(yàn)強(qiáng)烈反應(yīng)時(shí)容易互相混淆結(jié)果（皮內(nèi)試驗(yàn)點(diǎn)、刺試驗(yàn)或價(jià)格便宜、快速，但對(duì)過敏原的質(zhì)量控制有嚴(yán)格要求，患者痛苦，刺痕試驗(yàn)）

無法避免對(duì)于高過敏體質(zhì)患者具有一定生命危險(xiǎn)性的問題同時(shí)試驗(yàn)多種抗原時(shí)，容易不同的抗原液交叉混合斑貼試驗(yàn)斑貼試驗(yàn)主要是檢測(cè)Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)，敏感程度不太高。鼻粘膜激發(fā)試驗(yàn)（SNPT）患者試驗(yàn)過程較痛苦無法避免對(duì)于高過敏體質(zhì)患者具有一定生命危險(xiǎn)性的問題操作等較繁瑣食物激發(fā)試驗(yàn)食物過敏檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)（DBPCFC）對(duì)于食物過敏反應(yīng)嚴(yán)重的患者較危險(xiǎn)操作麻煩，需要病床觀察患者試驗(yàn)過程較痛苦體外血清學(xué)檢驗(yàn)對(duì)患者來說使用安全，適合兒童，可避免強(qiáng)烈的皮膚反應(yīng)避免其它皮膚病造成的誤判使用方面，少量血清一次即可完成數(shù)十種種過敏原的檢測(cè)適用于對(duì)食物過敏的患者，效應(yīng)器官不在皮膚適用于用抗組胺類或激素類治療而不能停藥者生物共振無創(chuàng)、快速、檢測(cè)范圍廣、無創(chuàng)傷性、但該技術(shù)缺乏科學(xué)依據(jù)，

容易受到人為信號(hào)的干擾，難以建立嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)類別方法特點(diǎn)體內(nèi)皮膚針刺試驗(yàn)強(qiáng)烈反應(yīng)時(shí)容易互相混淆結(jié)果（皮體外診斷的優(yōu)勢(shì)

對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)

尤其適合5歲以下兒童，可避免強(qiáng)烈的皮膚反應(yīng)

與其它皮膚病區(qū)別

不需附加其它藥物

適合無法進(jìn)行皮試的食物過敏原的檢查對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)二、歐蒙過敏原產(chǎn)品特性及印跡法特點(diǎn)同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多不添加任何增效劑針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的過敏原對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)不需停止服用抗組胺藥物獨(dú)家包被有CCD指示帶，解釋交叉反應(yīng)的假陽性結(jié)果所有廠家中樣本使用體積最?。?00ul）快速測(cè)試過敏原，整個(gè)實(shí)驗(yàn)完成僅需要2.5-3小時(shí)歐蒙過敏原體外診斷的優(yōu)勢(shì)同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多歐蒙過敏原體外診斷的優(yōu)勢(shì)同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多可一次檢測(cè)20大項(xiàng)，30小項(xiàng)過敏原同類產(chǎn)品中單一膜條內(nèi)過敏原數(shù)量最多可一次檢測(cè)20大項(xiàng)，30小不添加任何增效劑

現(xiàn)在有些產(chǎn)品為了增大反應(yīng)強(qiáng)度，在產(chǎn)品中添加增效劑，加大了反應(yīng)強(qiáng)度。導(dǎo)致了判定結(jié)果與臨床有不符現(xiàn)象。歐蒙產(chǎn)品不添加任何增效劑，本著科學(xué)、實(shí)事求是的精神真實(shí)、準(zhǔn)確的判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果。不添加任何增效劑

現(xiàn)在有些產(chǎn)品為了增大反應(yīng)強(qiáng)度，在產(chǎn)品中添加針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的過敏原

過敏原采集于中國，提高特異性檢出率DP3713-1601E（中國組合）針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的組合針對(duì)中國人設(shè)計(jì)的過敏原

過敏原采集于中國，提高特異性檢出率對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)無痛檢測(cè)：通過血清中IgE抗體與過敏原結(jié)合，測(cè)試過敏反應(yīng)避免了人體與過敏原直接反應(yīng)導(dǎo)致的風(fēng)險(xiǎn)用點(diǎn)刺針穿過液滴，輕輕刺入皮內(nèi)

將可疑致敏物質(zhì)敷貼于患者皮膚上斑貼試驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)對(duì)患者來說不存在風(fēng)險(xiǎn)無痛檢測(cè)：通過血清中IgE抗體與過敏原結(jié)不需停止服用抗組胺藥物以往過敏原檢測(cè)需要患者體檢停止服用抗組胺藥物。以便提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。歐蒙過敏原檢測(cè)試劑無需患者停止服用抗組胺藥物。（常用的有苯海拉明、異丙臻、撲爾敏、賽庚啶、息斯敏、特非拉丁等）不需停止服用抗組胺藥物

獨(dú)家包被有CCD指示帶獨(dú)家包被有CCD指示帶，解釋交叉反應(yīng)的假陽性結(jié)果CCD是“交叉反應(yīng)性碳水化合物決定因子”CCD存在于多種植物性或動(dòng)物源性的過敏原中，由于結(jié)果相似性導(dǎo)致一些獨(dú)特的交叉反應(yīng)出現(xiàn)CCD的檢測(cè)對(duì)于患者提示：雖然對(duì)于某些過敏原沒有臨床癥狀，但是在過敏進(jìn)程中對(duì)有些具有交叉反應(yīng)的過敏原可能會(huì)有改變，所以對(duì)于患者又針對(duì)性的預(yù)防交叉過敏反應(yīng)，有著重要的臨床指導(dǎo)意義。

獨(dú)家包被有CCD指示帶獨(dú)家包被有CCD指示帶，解釋交叉反應(yīng)歐蒙印跡法的特點(diǎn)? 一次可以檢測(cè)多項(xiàng)過敏原? 8-20項(xiàng)，常見食物及吸入組合，如葎草，艾蒿，豚草，常見樹花粉，霉菌，塵螨，貓毛，狗毛，蟑螂，雞蛋，牛奶，魚，蝦，蟹，花生，大豆等。? 適合體檢篩查。? 采血量少? 100-1000微升血清可以檢測(cè)多項(xiàng)，特別適合兒童患者。? 性價(jià)比高? 一次可得到多種過敏原信息譜。? 適合各類人群? 一定范圍內(nèi)脂血、溶血、黃疸血清或血漿樣本對(duì)檢測(cè)結(jié)果無影響。歐蒙印跡法的特點(diǎn)? 一次可以檢測(cè)多項(xiàng)過敏原? 有配套儀器軟件可以省時(shí)省力? 全自動(dòng)操作，判讀軟件，2.5h出結(jié)果。? 無需暗室孵育。? 半定量可以