犐犆犛１１．１００

犆４４

中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

犢犢／犜０６８８．１—２００８

臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和體外診斷系統(tǒng)

感染病原體敏感性試驗(yàn)與抗菌劑敏感性

試驗(yàn)設(shè)備的性能評(píng)價(jià)第１部分：抗菌劑

對(duì)感染性疾病相關(guān)的快速生長(zhǎng)需氧菌的

體外活性檢測(cè)的參考方法

犆犾犻狀犻犮犪犾犾犪犫狅狉犪狋狅狉狔狋犲狊狋犻狀犵犪狀犱犻狀狏犻狋狉狅犱犻犪犵狀狅狊狋犻犮狋犲狊狋狊狔狊狋犲犿狊—

犛狌狊犮犲狆狋犻犫犻犾犻狋狔狋犲狊狋犻狀犵狅犳犻狀犳犲犮狋犻狅狌狊犪犵犲狀狋狊犪狀犱犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳

狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲狅犳犪狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾狊狌狊犮犲狆狋犻犫犻犾犻狋狔犱犲狏犻犮犲狊—

犘犪狉狋１：犚犲犳犲狉犲狀犮犲犿犲狋犺狅犱犳狅狉狋犲狊狋犻狀犵狋犺犲犻狀狏犻狋狉狅犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳

犪狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾犪犵犲狀狋狊犪犵犪犻狀狊狋狉犪狆犻犱犾狔

犵狉狅狑犻狀犵犪犲狉狅犫犻犮犫犪犮狋犲狉犻犪犻狀狏狅犾狏犲犱犻狀犻狀犳犲犮狋犻狅狌狊犱犻狊犲犪狊犲狊

（ＩＳＯ２０７７６１：２００６，ＭＯＤ）

２００８１０１７發(fā)布２０１００１０１實(shí)施

國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布

書(shū)

犢犢／犜０６８８．１—２００８

目次

前言!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!Ⅲ

引言!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!Ⅳ

１范圍!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!１

２術(shù)語(yǔ)及定義!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!１

３試驗(yàn)程序!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!３

３．１概述!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!３

３．２培養(yǎng)基!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!３

３．３抗菌劑!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!３

３．４接種菌液的制備!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!９

３．５微量稀釋盤(pán)的接種!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!１０

３．６微量稀釋盤(pán)的孵育!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!１０

３．７結(jié)果的判讀!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!１０

３．８ＭＩＣ結(jié)果可能不能反映抗菌劑真實(shí)活性的特殊情況及其處理!!!!!!!!!!!!!１１

４質(zhì)量控制!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!１２

附錄Ａ（規(guī)范性附錄）對(duì)于ＭｕｅｌｌｅｒＨｉｎｔｏｎ肉湯的要求!!!!!!!!!!!!!!!!!１８

參考文獻(xiàn)!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!２０

Ⅰ

書(shū)

犢犢／犜０６８８．１—２００８

前言

ＹＹ／Ｔ０６８８的本部分修改采用ＩＳＯ２０７７６１：２００６《臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和體外診斷系統(tǒng)感染病原體

敏感性試驗(yàn)與抗菌劑敏感性試驗(yàn)設(shè)備的性能評(píng)價(jià)第１部分：抗菌劑對(duì)感染性疾病相關(guān)的快速生長(zhǎng)需

氧菌的體外活性檢測(cè)的參考方法》。

本部分與ＩＳＯ２０７７６１：２００６，差異如下：

ａ）在引言添加“注：已知對(duì)某抗菌劑固有耐藥的細(xì)菌不做敏感性試驗(yàn)”的說(shuō)明。

ｂ）將原文中的“ｎｏｎｓｅｌｅｃｔｉｖｅｎｕｔｒｉｔｉｖｅａｇａｒｍｅｄｉｕｍ”譯成“非選擇性瓊脂培養(yǎng)基”（在臨床檢驗(yàn)實(shí)

際工作中，非選擇性培養(yǎng)基與營(yíng)養(yǎng)瓊脂是兩種截然不同的培養(yǎng)基，而試驗(yàn)菌株從儲(chǔ)存培養(yǎng)物

到工作培養(yǎng)物的所有傳代培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基均建議使用前者。如此翻譯是為了避免與營(yíng)養(yǎng)

瓊脂相混淆）。

ｃ）將“４質(zhì)量控制……質(zhì)控菌株的工作培養(yǎng)物可通過(guò)儲(chǔ)存菌株在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上再培養(yǎng)

獲得?！敝械摹霸倥囵B(yǎng)”改為“連續(xù)傳代培養(yǎng)兩次”；“儲(chǔ)存菌株”改為“參考菌株的儲(chǔ)存培養(yǎng)

物”（結(jié)合臨床檢驗(yàn)工作的實(shí)際，并嚴(yán)格遵守ＣＬＳＩ在Ｍ７Ａ６中對(duì)菌株儲(chǔ)存培養(yǎng)物連續(xù)傳代培

養(yǎng)次數(shù)的規(guī)定）。

ｄ）將“４質(zhì)量控制……進(jìn)一步的傳代培養(yǎng)只能用第一次工作培養(yǎng)物（不能超過(guò)一周）進(jìn)行?！?/p>

改為“４質(zhì)量控制……工作培養(yǎng)物只能再傳代一次，且使用時(shí)間不能超過(guò)一周。……”（結(jié)合

臨床檢驗(yàn)工作的實(shí)際，并嚴(yán)格遵守ＣＬＳＩ在Ｍ７Ａ６中對(duì)菌株工作培養(yǎng)物的使用時(shí)間及傳代培

養(yǎng)次數(shù)的規(guī)定）。

為便于使用，本標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)于國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)原文還做了下列編輯性修改：

ａ）將“本國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)”一詞改為“本部分”；

ｂ）用小數(shù)點(diǎn)“．”代替作為小數(shù)點(diǎn)的逗號(hào)“，”；

ｃ）刪除國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)原文中的前言。

本部分的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本部分由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局提出。

本部分由全國(guó)醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（ＳＡＣ／ＴＣ１３６）歸口。

本部分主要起草單位：北京市醫(yī)療器械檢驗(yàn)所、南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院。

本部分主要起草人：童明慶、王輝。

Ⅲ

犢犢／犜０６８８．１—２００８

引言

抗菌劑體外敏感性試驗(yàn)通常是針對(duì)于可能導(dǎo)致疾病的微生物，尤其是那些被認(rèn)為對(duì)頻繁使用的抗

菌劑呈現(xiàn)耐藥性的微生物種屬１）。除此之外，該試驗(yàn)在細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)及其流行病學(xué)研究以及新抗菌

劑與現(xiàn)有抗菌劑之間的比較等方面也很重要。

稀釋法常被用來(lái)測(cè)定抗菌劑的最小抑菌濃度（ＭＩＣｓ，ｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ），是抗菌

劑敏感性試驗(yàn)的參考方法。ＭＩＣ法通常用于細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)、新抗菌劑與現(xiàn)有抗菌劑之間的比較，該

法也用于常規(guī)方法所得結(jié)果不可靠或臨床需要定量結(jié)果的微生物的敏感性試驗(yàn)。對(duì)于稀釋法測(cè)試，某

抗菌劑對(duì)于特定微生物的ＭＩＣ值是通過(guò)觀察微生物分別在含有系列稀釋濃度的該抗菌劑的一系列瓊

脂平板（瓊脂稀釋法）上或肉湯（肉湯稀釋法）中的可見(jiàn)的生長(zhǎng)能力來(lái)確定的。

抗菌劑的最小抑菌濃度（ＭＩＣ值）是指在規(guī)定的體外條件下，規(guī)定的孵育時(shí)間內(nèi)，能抑制某特定微

生物出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)生長(zhǎng)的抗菌劑的最低濃度（以ｍｇ／Ｌ為單位）。ＭＩＣ值有助于臨床醫(yī)師了解微生物

對(duì)抗菌劑的敏感性從而幫助他們制定合理的用藥方案。由于所用方法可能顯著地影響試驗(yàn)結(jié)果，為了

確保室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性和室間試驗(yàn)結(jié)果的可比性，實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制及試驗(yàn)程序

的標(biāo)準(zhǔn)化。通常情況下，對(duì)于給定的抗菌劑和試驗(yàn)菌株，肉湯稀釋法的檢測(cè)結(jié)果（ＭＩＣ值）在ＭＩＣ實(shí)際

值±１個(gè)倍比稀釋度的范圍內(nèi)是可以被接受的。

肉湯稀釋法：是一種向一系列相同體積的含抗菌劑的肉湯培養(yǎng)基（其中所含某抗菌劑的濃度通常是

以幾何級(jí)數(shù)遞增的）中接種已知固定量某微生物以確定該微生物對(duì)該抗菌劑的ＭＩＣ值的方法。

肉湯微量稀釋法：顧名思義，就是在微量稀釋盤(pán)中進(jìn)行肉湯稀釋試驗(yàn)。

本標(biāo)準(zhǔn)所描述的方法僅適用于需氧菌的純培養(yǎng)物，這些細(xì)菌在ＭｕｅｌｌｅｒＨｉｎｔｏｎ瓊脂平板和Ｍｕｅｌ

ｌｅｒＨｉｎｔｏｎ肉湯（可能需要加入添加劑）中經(jīng)過(guò)夜孵育均易于生長(zhǎng)。本標(biāo)準(zhǔn)所描述的肉湯稀釋法本質(zhì)上

與法國(guó)［１］、德國(guó)［２］、瑞典［３］、英國(guó)［４］和美國(guó)［５］等許多國(guó)家目前所用的方法是一致的，該法與歐洲抗菌劑敏

感性試驗(yàn)委員會(huì)（ＥＵＣＡＳＴ）［６］所發(fā)布的肉湯微量稀釋法是同一種方法，所有這些方法都是在

Ｅｒｉｃｓｓｏｎ和Ｓｈｅｒｒｉｓ［７］所描述方法的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的。

１）已知對(duì)某抗菌劑固有耐藥的細(xì)菌不做敏感性試驗(yàn)。

Ⅳ

犢犢／犜０６８８．１—２００８

臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和體外診斷系統(tǒng)

感染病原體敏感性試驗(yàn)與抗菌劑敏感性

試驗(yàn)設(shè)備的性能評(píng)價(jià)第１部分：抗菌劑

對(duì)感染性疾病相關(guān)的快速生長(zhǎng)需氧菌的

體外活性檢測(cè)的參考方法

１范圍

ＹＹ／Ｔ０６８８的本部分介紹了測(cè)定抗菌劑ＭＩＣ值的一種參考方法———肉湯微量稀釋法。ＭＩＣ值僅

反映抗菌劑在規(guī)定的體外試驗(yàn)條件下的抗菌活性。醫(yī)生在制定用藥方案時(shí)，不但要參考ＭＩＣ結(jié)果，還

應(yīng)考慮諸如藥物在人體內(nèi)的藥代／藥效學(xué)參數(shù)以及細(xì)菌對(duì)抗菌劑的耐藥機(jī)制等其他因素。對(duì)于某種抗

菌劑，根據(jù)體外敏感性試驗(yàn)結(jié)果（ＭＩＣ值）可將相應(yīng)受試菌劃分為“敏感（Ｓ）”、“中介（Ｉ）”和“耐藥（Ｒ）”。

另外，ＭＩＣ值可用于確定該受試菌株是野生型還是非野生型。盡