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《生化工程》期末總復(fù)習(xí)課程內(nèi)容1緒論(2學(xué)時)2過濾和離心(2學(xué)時)3細(xì)胞破碎(2學(xué)時)4沉淀與結(jié)晶(4學(xué)時)5膜分離技術(shù)(6學(xué)時)6萃取技術(shù)(6學(xué)時)7色譜分離技術(shù)(16學(xué)時)8電泳與磁性生物分離(2學(xué)時)9溶劑去除與干燥(2學(xué)時)第一章緒論生化工程(生物分離工程)的流程與單元操作第一章緒論生物分離工程的特點(diǎn)蛋白三步純化策略捕獲初步純化精純第二章過濾和離心一、基本概念1、凝聚、絮凝、助濾劑2、澄清過濾與濾餅過濾3、常規(guī)過濾與錯流過濾4、差速離心法與密度梯度離心法5、速率區(qū)帶離心法與等密度離心法二、思考題差速離心法和密度梯度離心法的基本原理和特點(diǎn)是什么?比較速率區(qū)帶離心法與等密度離心法的區(qū)別與聯(lián)系?第三章細(xì)胞破碎1.常用的細(xì)胞破碎方法有哪些?簡述其基本原理、特點(diǎn)及適用性。2.溶菌酶溶解細(xì)胞壁的機(jī)理是什么?酶溶法的種類及優(yōu)缺點(diǎn)。第四章沉淀與結(jié)晶一、基本概念1、鹽析沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀2、自然起晶法、刺激起晶法3、細(xì)晶消除、產(chǎn)品粒度分布排料、清母液溢流二、思考題1.比較沉淀與結(jié)晶的異同點(diǎn)。2.簡述鹽析法沉淀的基本原理,為什么常用硫酸銨作為鹽析沉淀劑?3.制備過飽和溶液的方法有哪些?總結(jié)溶液的過飽和度過大對結(jié)晶過程有哪些不利影響?4.簡述結(jié)晶操作過程第五章膜分離技術(shù)一、基本概念1、透析2、微濾、超濾、納濾、反滲透3、濃差極化4、親和超濾、親和膜分離二、思考題1.按照膜孔徑大小,膜分離技術(shù)主要分為哪幾類?試述各種膜分離技術(shù)的原理、特點(diǎn)及其在生物工業(yè)中的應(yīng)用。2.什么叫膜污染?什么叫濃差極化?在實(shí)際應(yīng)用中如何減少濃差極化?3.在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常用到的膜分離技術(shù)有哪些?分別用在何處?4.

結(jié)合微濾、超濾及納濾的特點(diǎn),舉例說明它們在工業(yè)中的實(shí)際應(yīng)用。第六章萃取技術(shù)一、基本概念1.萃取與反萃取2.分離因數(shù)3.雙水相萃取4.臨界膠團(tuán)濃度5.超臨界流體二、思考題1.影響溶劑萃取的因素有哪些?分析溶劑萃取過程中乳化產(chǎn)生的原因、后果和破乳措施。2.反膠團(tuán)萃取的影響因素有哪些?為什么只通過調(diào)節(jié)pH值和鹽濃度就可以將細(xì)胞色素c、溶菌酶及核糖核酸酶a進(jìn)行有效分離?3.根據(jù)萃取壓力的變化范圍,可將超臨界萃取分為哪3類基本應(yīng)用?各自適用場合如何?為什么工業(yè)上常用SC-CO2作為萃取劑?4.雙水相萃取有何特點(diǎn)?其影響因素有哪些?第七章層析分離技術(shù)1.根據(jù)機(jī)理不同,色譜分離可分為那幾種?簡述各種色譜分離的基本原理。與其他分離技術(shù)相比,色譜分離技術(shù)有何特點(diǎn)?2.比較分配色譜中的分配系數(shù)、吸附色譜中分離因素及凝膠色譜中的分配常數(shù)有何異同點(diǎn)?3.色譜的分離度是如何定義的?它與哪些因素有關(guān)?4.離子交換色譜的基本原理是什么?常用的離子交換劑有哪幾類?5.離子交換色譜的洗脫方式有幾種?分別在什么情況下適合?6.親和色譜主要有哪幾部分組成?其核心部分是什么?為什么要引入“接枝手臂”?在重組蛋白的分離純化中,如何通過上游技術(shù)來簡化下游的分離純化技術(shù)?7.何為親和色譜的競爭性洗脫和非競爭性洗脫?各有何特點(diǎn)?第七章層析分離技術(shù)8.

固定金屬離子親和色譜的原理是什么?9.固定金屬離子親和樹脂有幾種?分別有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?與IDA相比,NTA有何優(yōu)勢?10.

凝膠過濾色譜的原理是什么?有何特點(diǎn)?11.凝膠過濾色譜的凝膠特性參數(shù)有那些?理解它們的具體含義。12.凝膠過濾色譜的操作過程與吸附色譜有那些主要區(qū)別?13.凝膠過濾色譜主要應(yīng)用于那些方面?14.疏水作用色譜的基本原理是什么?15.疏水作用色譜與離子交換色譜有何區(qū)別與聯(lián)系?16.反相色譜的基本原理是什么?17.分析反相色譜與疏水作用色譜的區(qū)別與聯(lián)系。第八章電泳與磁性生物分離1.什么叫電滲現(xiàn)象?2.理解幾種典型的電泳技術(shù)的基本原理——SDS、IEF、雙向電泳(2D)、毛細(xì)管電泳及自由電泳(FFE)。在SDS中,SDS的主要作用是什么?3.簡述磁性分離技術(shù)的基本原理、特點(diǎn)、操作步驟及其在生物大分子分離純化中的應(yīng)用。第九章溶劑去除與干燥1.比較蒸發(fā)與干燥的區(qū)別與聯(lián)系(異同點(diǎn))。2.簡述減壓蒸發(fā)(真空蒸發(fā))的優(yōu)缺點(diǎn)。3.生物工業(yè)中常用的干燥技術(shù)有哪幾種?它們的工作原理和特點(diǎn)是什么?4.冷凍干燥過程分哪幾個階段?簡述每個階段的主

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