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文檔簡介

第4節(jié)酶的固定化學習導航1.說出固定化酶和固定化細胞的作用和原理。[重、難點]2.嘗試制備固定大腸桿菌細胞。新知初探思維啟動一、固定化酶1.含義:通過物理或化學的方法,將____________與________________結合,使酶固定在載體上,并在一定的__________內進行催化反應。2.方法:共價鍵結合法、_______、物理吸附法。水溶性的酶不溶性的載體空間范圍包埋法4.實例:木瓜蛋白酶的固定化過程取尼龍布浸入等體積的_________________溶液中10s左右―→鹽酸溶液中室溫下水解45min―→蒸餾水沖洗至pH中性―→室溫下放入_________溶液中浸泡20min―→_____緩沖液(pH7.8)反復洗滌―→木瓜蛋白酶溶液中固定3.5h,溫度為_____。CaCl2溶液和甲醇戊二醛磷酸4

℃二、固定化細胞1.含義:用適當?shù)妮d體將_______________固定起來。2.優(yōu)點:比固定化酶更____,使用壽命_____。3.實例:大腸桿菌細胞的固定化可以用______培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,取菌液加入_________和____,攪拌均勻,待_________凝固后,切成小塊,用生理鹽水和蒸餾水洗凈,即得到固定化的大腸桿菌細胞。合成酶的細胞簡捷更長液體生理鹽水瓊脂瓊脂凝膠要點突破講練互動要點一酶固定化的方法1.包埋法:將酶包裹在多孔性載體中,如包裹在聚丙烯酰胺等高分子凝膠中,或醋酸纖維素等半透性高分子膜中。下列關于酶和細胞的固定,敘述不正確的是(

)A.酶分子很小,宜采用包埋法B.酶分子很小,宜采用共價鍵結合法或物理吸附法固定C.細胞個大,難被吸附或結合D.細胞宜采用包埋法固定例1【解析】一般來說,酶更適合采用共價鍵結合法和物理吸附法固定,而細胞多采用包埋法固定。這是由于細胞相對較大,而酶分子很小,個大的細胞難以被吸附或結合,個小的酶容易從包埋材料中漏出?!敬鸢浮?/p>

A【誤區(qū)警示】

酶和細胞的固定方法容易混淆,酶分子很小,適于用共價鍵結合法和物理吸附法固定;細胞個大,難以被吸附或結合,多采用包埋法固定。C.固定化酶技術一次只能固定一種酶D.固定化酶和固定化細胞都能反復使用,但酶的活性不會迅速下降解析:選B。固定化酶只能固定一種酶,固定化細胞可以固定一系列酶,固定化酶和固定化細胞都能反復使用,但酶的恬性不會很快下降。要點二比較直接使用酶、固定化酶、固定化細胞的特點直接使用酶固定化酶固定化細胞酶種類一種或幾種一種一系列酶催化反應單一或多種單一一系列營養(yǎng)物質不需要不需要需要反應底物大分子、小分子大分子、小分子小分子物質直接使用酶固定化酶固定化細胞優(yōu)點催化效率高,耗能少,污染輕等酶既與反應物結合,又與產物分離;可反復利用成本低,操作更容易缺點對環(huán)境條件非常敏感,易失活;不能被再利用;可能影響產品質量不利于催化一系列的酶促反應反應物不易與酶接近,特別是大分子物質,反應效果下降等

下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述中,正確的是(

)A.固定化細胞技術在多步連續(xù)催化反應方面優(yōu)勢明顯B.固定化酶的應用中,要控制好pH、溫度和溶解氧量C.利用固定化酶降解水體中的有機磷農藥,需提供適宜的營養(yǎng)條件D.利用固定化酵母細胞進行發(fā)酵,糖類的作用只是作為反應底物例2【解析】固定化酶耐受性比較好,和溶解氧沒有關系;利用固定化酶降解水體中的有機磷農藥,不需要提供營養(yǎng)條件;利用固定化酵母細胞進行發(fā)酵,糖類既可以作為反應底物,也可以作為碳源來調節(jié)酵母菌代謝方式?!敬鸢浮?/p>

A變式訓練關于固定化酶中的酶說法正確的是(

)A.酶的種類多樣,可催化一系列的酶促反應B

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