DNA重組技術(shù)的基本工具課后提能訓(xùn)練1．(2018·貴州遵義四中高二月考)以下說法中，正確的選項(xiàng)是()A．DNA連結(jié)酶最先是從人體細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的B．限制酶的切口必定是GAATTC堿基序列C．利用載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大批復(fù)制的過程可稱為“克隆”D．限制酶能辨別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并使鏈間的氫鍵斷裂答案C分析DNA連結(jié)酶最先是從原核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，A錯(cuò)誤；限制酶有多種，每種限制酶都能辨別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，而且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，所以不是全部限制酶的切口都是GAATTC的堿基序列，B、D錯(cuò)誤；利用載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大批復(fù)制的過程可稱為分子水平上的“克隆”，C正確。2．(2018·河南師大附中高二月考)以下有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的表達(dá)中正確的選項(xiàng)是()A．用限制酶切割一個(gè)DNA分子中部，獲取一個(gè)目的基因時(shí)，被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)B．限制性核酸內(nèi)切酶辨別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的黏性尾端游離堿基數(shù)不同D．只實(shí)用同樣的限制性核酸內(nèi)切酶辦理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒答案B分析用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個(gè)DNA分子中部，獲取一個(gè)目的基因時(shí)，需要切割目的基因的雙側(cè)，所以要斷裂4個(gè)磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶辨別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大，B正確；—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性尾端游離堿基數(shù)均為四個(gè)，C錯(cuò)誤；不一樣的限制性核酸內(nèi)切酶切割也可能形成同樣的尾端序列，所以不一樣限制酶辦理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，也能形成重組質(zhì)粒，D錯(cuò)誤。3．以下對(duì)于DNA連結(jié)酶作用的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是()A．不可以將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段尾端B．一種DNA連結(jié)酶只好連結(jié)某一特定序列的DNA片段C．連結(jié)兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D．只好將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性尾端之間連結(jié)起來，而不可以將雙鏈DNA片段平尾端之間進(jìn)行連結(jié)答案A分析DNA連結(jié)酶的作用是連結(jié)兩個(gè)DNA片段，形成磷酸二酯鍵，其實(shí)不是只好作用于某一特定序列，A正確，B、C錯(cuò)誤；T4DNA連結(jié)酶既能夠連結(jié)DNA片段互補(bǔ)的黏性尾端，也能夠連結(jié)平尾端，但連結(jié)平尾端的效率比較低，D錯(cuò)誤。4．如下圖DNA分子的某一片段，此中①②③分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶挨次是()A．DNA連結(jié)酶、限制性核酸內(nèi)切酶、解旋酶B．限制性核酸內(nèi)切酶、解旋酶、DNA連結(jié)酶C．解旋酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連結(jié)酶D．限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連結(jié)酶、解旋酶答案C分析使氫鍵斷裂的酶是解旋酶，限制性核酸內(nèi)切酶使相鄰兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，連結(jié)DNA片段之間的磷酸二酯鍵的酶是DNA連結(jié)酶。5．(2017·云南師大附中月考)以下有關(guān)酶的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是()A．同種限制酶既能夠切割目的基因所在片段又能夠切割質(zhì)粒，所以不具備專一性B．RNA聚合酶和DNA聚合酶都能夠催化遺化信息的轉(zhuǎn)錄C．限制酶不可以切割煙草花葉病毒的核酸D．DNA連結(jié)酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成氫鍵答案C分析一種限制酶只好辨別一種特定的核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子，所以擁有專一性，A錯(cuò)誤；DNA聚合酶不可以催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄，B錯(cuò)誤；煙草花葉病毒的核酸為RNA，不可以用限制酶切割，C正確；DNA連結(jié)酶可催化DNA片段間的磷酸二酯鍵的形成，D錯(cuò)誤。6．(2018·天津六校聯(lián)考)以下有關(guān)基因工程的表達(dá)正確的選項(xiàng)是()A．DNA連結(jié)酶的作用是使互補(bǔ)的黏性尾端之間發(fā)生堿基A與T，C與G之間的連結(jié)B．基因工程中使用的載體最常有的是大腸桿菌C．載體上的抗性基因有益于挑選含重組DNA的細(xì)胞并可促使目的基因的表達(dá)D．基因工程造成的變異，實(shí)質(zhì)上相當(dāng)于人為的基因重組，但卻產(chǎn)生了定向變異答案D分析DNA連結(jié)酶連結(jié)的是磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；基因工程中使用的載體最常有的是質(zhì)粒，B錯(cuò)誤；載體上的抗性基因有益于挑選含重組DNA的細(xì)胞，但不可以促使目的基因的表達(dá)，C錯(cuò)誤；基因工程能依據(jù)人們的意向定向改造生物的性狀，其原理是基因重組，D正確。7．以下圖表示兩種限制酶辨別DNA分子的特定序列，并在特定位點(diǎn)對(duì)DNA分子進(jìn)行切割的表示圖，請(qǐng)回答以下問題：(1)圖中甲和乙代表________________。(2)EcoRⅠ、HpaⅠ代表

________________。(3)圖中甲和乙經(jīng)過相應(yīng)操作均形成兩個(gè)片段，切口的種類分別為________、________。甲中限制酶的切點(diǎn)是________之間，乙中限制酶的切點(diǎn)是________之間。由圖解能夠看出，限制酶的作用特色是_______________________________________。假如甲中G堿基發(fā)生基因突變，可能發(fā)生的狀況是_______________________________________________。答案(1)有特定脫氧核苷酸序列的DNA片段兩種不一樣的限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)黏性尾端平尾端G、AT、A能辨別雙鏈DNA分子的特定脫氧核苷酸序列，并從特定的位點(diǎn)將DNA分子切開限制酶不可以辨別切割位點(diǎn)分析

(1)由圖示看出，甲和乙代表由脫氧核苷酸組成的有不一樣的酶切位點(diǎn)的

DNA片段。(2)EcoRⅠ和

HpaⅠ能切割

DNA分子，說明它們是限制酶

(限制性核酸內(nèi)切酶

)。(3)甲中切點(diǎn)在

G、A之間，切口在辨別序列中軸線雙側(cè)，形成黏性尾端；乙中切點(diǎn)在

T、之間，切口在辨別序列中軸線處，形成平尾端。限制酶能辨別DNA分子的特定核苷酸序列，并從特定位點(diǎn)切割DNA分子。當(dāng)特定核苷酸序列變化后，就不可以被相應(yīng)限制酶辨別。8．下表中列出了幾種限制酶辨別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示有關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，請(qǐng)回答以下問題：一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有________、________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)固性越________。(3)要用圖1中的質(zhì)粒和圖2中外源DNA建立重組質(zhì)粒，不可以使用SmaⅠ切割，原由是______________________________。(4)圖1中的質(zhì)粒實(shí)質(zhì)為____________，擁有____________能力，是基因工程中________的載體。除質(zhì)粒外，基因工程中還能夠用____________、________________等作為載體。(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混淆，并加入________酶。答案(1)02(2)高(3)SmaⅠ會(huì)損壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因環(huán)狀DNA分子自我復(fù)制最常用λ噬菌體衍生物動(dòng)植物病毒(5)DNA連結(jié)分析(1)質(zhì)粒被切割前為環(huán)狀DNA分子，全部磷酸基團(tuán)均參加形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團(tuán)。從圖1能夠看出質(zhì)粒上只含有一個(gè)SmaⅠ的切割位點(diǎn)，所以質(zhì)粒變?yōu)榫€性DNA分子，含2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。由題目可知SmaⅠ識(shí)其他DNA序列只有G和C，而G和C之間形成3個(gè)氫鍵，所以插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)固性越高。(3)質(zhì)粒中的抗生素抗性基