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實(shí)驗(yàn)果蠅的飼養(yǎng)觀察和雜交實(shí)驗(yàn)技術(shù)第1頁/共20頁實(shí)驗(yàn)6、果蠅的飼養(yǎng)和形態(tài)觀察
第2頁/共20頁一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解果蠅生活史及各階段的形態(tài)特征,2.掌握區(qū)別雌雄果蠅,了解常見的幾種突變類型的方法(主要性狀和特征)。3.掌握實(shí)驗(yàn)果蠅的飼養(yǎng)、管理及實(shí)驗(yàn)處理方法和基本技術(shù)。
第3頁/共20頁二、實(shí)驗(yàn)原理1、普通果蠅是雙翅目的昆蟲,它的生活史從受精卵開始,經(jīng)歷幼蟲、蛹、成蟲階段,因此是一個(gè)完全變態(tài)過程。2、果蠅中有許多突變體類型,許多突變體屬于形態(tài)突變,容易觀察,是研究遺傳學(xué)的好材料.第4頁/共20頁第5頁/共20頁實(shí)驗(yàn)原理溫度生活周期10℃15℃20℃25℃卵→幼蟲幼蟲→成蟲57天20天8天7天5天4天3、果蠅生活周期長短與溫度關(guān)系很密切。在20℃~25℃下生活較好。第6頁/共20頁三、實(shí)驗(yàn)材料
1.果蠅野生型品系:紅眼、灰身、長翅、直剛毛(++、++、++、++)2.突變型果蠅:白眼(w),黑檀體(e),卷剛毛(sn),黃體(y)等。3.控制這些突變性狀的基因中,w(白眼)、sn(卷剛毛)位于1號(hào)(X)染色體上,vg(殘翅)位于2號(hào)染色體上,e(黑檀體)位于3號(hào)染色體上。
第7頁/共20頁四、實(shí)驗(yàn)器具、藥品
麻醉瓶,培養(yǎng)皿,毛筆,鑷子,白紙,酒精燈,吸管,培養(yǎng)瓶,放大鏡,酒精棉球(70%),乙醚、酵母粉、瓊脂等。
第8頁/共20頁五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟(一)果蠅的生活史及形態(tài)觀察卵:白色,長橢圓形,長約0.5mm,背面前端有兩條觸絲幼蟲經(jīng)兩次蛻皮而成三齡幼蟲,長約4-5mm,肉眼觀察可見一端稍尖且有一黑點(diǎn)(口器)為頭部,稍后有一對半透明的唾腺第9頁/共20頁每條唾腺前有一唾液管向前延伸,后匯成一條導(dǎo)管通向消化道,消化道前端的上方有一神經(jīng)節(jié),通過體壁可見一對生殖腺位于身體后半部的上方兩側(cè),精巢較大,外觀為一個(gè)明顯的斑點(diǎn),卵巢較小。三齡幼蟲:從培養(yǎng)基中爬出附在瓶壁上化蛹,蛹呈梭形,起初顏色淡黃、柔軟,以后逐漸硬化變?yōu)樯詈稚?,表明將要羽化了?0頁/共20頁羽化后的雌蠅一般在12小時(shí)后才有交配能力,2天后開始產(chǎn)卵。成蟲:剛從蛹?xì)だ镉鸹龅某上x蟲體較長,翅未展開,體表也未完全幾丁質(zhì)化,呈乳白色半透明狀;蟲體體色逐漸加深、變粗短而成橢圓形,雙翅伸展。第11頁/共20頁2、果蠅的性狀觀察
(1)果蠅成蟲的性別鑒別
性梳是鑒別雌雄果蠅的最可靠指標(biāo)。性梳著生在雄果蠅的第一對前足的第一個(gè)跗節(jié)上第12頁/共20頁第13頁/共20頁性別形態(tài)特征雌蠅(♀)雄蠅(♂)體型較大較小腹部末端稍尖,無黑斑鈍圓,有黑斑背部條紋7條(可見5條)5條(可見3條,最后一條寬且延伸至腹面,呈明顯黑斑)腹片數(shù)6片4片性梳無有,位于前腿跗節(jié)上外生殖器外觀簡單,低倍鏡下明顯看到陰道板和肛上板外觀復(fù)雜,低倍鏡下明顯看到生殖弧,肛上板及陰莖(剛孵出的幼蠅更清楚)第14頁/共20頁雄雌剛毛第15頁/共20頁(2)果蠅實(shí)驗(yàn)中常用的一些突變品系
IIIII第16頁/共20頁(3)果蠅的麻醉處理
在果蠅的性狀觀察、性別鑒定以及雜交親本接種等操作中,應(yīng)先將果蠅麻醉,使其保持安靜狀態(tài)。麻醉方法如下:A、準(zhǔn)備一只與培養(yǎng)瓶口徑相同的空瓶作為麻醉瓶,并配以脫脂棉塞。B、去掉培養(yǎng)瓶棉塞,立即與麻醉瓶口相對,培養(yǎng)瓶在上,一手穩(wěn)住兩瓶,另一手輕輕震拍培養(yǎng)瓶,使果蠅落入麻醉瓶中。第17頁/共20頁C、滴數(shù)滴乙醚于麻醉瓶棉塞內(nèi),迅速將兩瓶塞住,約30s,麻醉瓶內(nèi)的果蠅即處于麻醉狀態(tài)。注意不能麻醉過度。若蠅翅與蠅體呈45o角翹起,表明麻醉過度,不能復(fù)蘇而死亡。D、將麻醉后的果蠅放在白瓷板或白紙板上,用毛筆刷移動(dòng)檢查,根據(jù)需要用肉眼、放大鏡或解剖鏡觀察。不再用的果蠅務(wù)必倒入死蠅盛留器中及時(shí)處死,防止品系間混雜。第18頁/共20頁原種置于20℃左右恒溫箱中培養(yǎng)。因培養(yǎng)基中酵母發(fā)酵產(chǎn)熱,溫度稍有上升,溫箱溫度可稍低于18℃。每2~4周換一次培養(yǎng)基,同時(shí)檢查原種是否混雜。培養(yǎng)瓶上一定要貼標(biāo)簽,標(biāo)明性狀、移入日期及操作者姓名原種培養(yǎng)應(yīng)先查親本純度,
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