綜合訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一食用植物油脂品質(zhì)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù):標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)：GB/T5009.37-2003食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法

一、目的與要求

1、學(xué)習(xí)實(shí)際樣品的分析方法,通過對(duì)食用植物油脂主要特性的分析，包括試樣的制備分離提純、分析條件及方法的選擇、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)定、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作以及數(shù)據(jù)處理等內(nèi)容，綜合訓(xùn)練食品分析的基本技能。2、掌握鑒別食用植物油脂品質(zhì)好壞的基本檢驗(yàn)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理與相關(guān)知識(shí)油脂酸價(jià)：酸價(jià)（酸值）是指中和1.0g油脂所含游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數(shù)。酸價(jià)是反映油脂質(zhì)量的主要技術(shù)指標(biāo)之一，同一種植物油酸價(jià)越高，說明其質(zhì)量越差越不新鮮。測(cè)定酸價(jià)可以評(píng)定油脂品質(zhì)的好壞和貯藏方法是否恰當(dāng)。碘價(jià)：測(cè)定碘價(jià)可以了解油脂脂肪酸的組成是否正常有無摻雜等。最常用的是氯化碘—乙酸溶液法（韋氏法）。其原理：在溶劑中溶解試樣并加入韋氏碘液，氯化碘則與油脂中的不飽和脂肪酸起加成反應(yīng)，游離的碘可用硫代硫酸鈉溶液滴定，從而計(jì)算出被測(cè)樣品所吸收的氯化碘（以碘計(jì)）的克數(shù)，求出碘價(jià)。過氧化值：檢測(cè)油脂中是否存在過氧化值，以及含量的大小，即可判斷油脂是否新鮮和酸敗的程度。常用滴定法，其原理：油脂氧化過程中產(chǎn)生過氧化物，與碘化鉀作用，生成游離碘，以硫代硫酸鈉溶液滴定，計(jì)算含量。羰基價(jià)：常用比色法測(cè)定總羰基價(jià)，其原理：羰基化合物和2，4—二硝基苯胺的反應(yīng)產(chǎn)物，在堿性溶液中形成褐紅色或酒紅色，在440nm波長下，測(cè)定吸光度，可計(jì)算出油樣中的總羰基價(jià)。中國《食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：羰基價(jià)≤20mmol/kg。三、儀器與試劑（二）學(xué)生自配及標(biāo)定試劑1、氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05mol/L）的標(biāo)定：（按GB601標(biāo)定或用標(biāo)準(zhǔn)酸標(biāo)定）。2、中性乙醚—乙醇（2+1）混合液：按乙醚—乙醇（2+1）混合，以酚酞為指示劑，用所配的KOH溶液中和至剛呈淡紅色，且30s內(nèi)不退色為止。3、三氯甲烷—冰乙酸混合液的配制：量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混勻。4、淀粉指示劑（10g/L）配制：稱取可溶性淀粉0.50g，加少許水，調(diào)成糊狀，倒入50ml沸水中調(diào)勻，煮沸至透明，冷卻。5、硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.0020mol/L）配制：用0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋。四、實(shí)驗(yàn)步驟

（一）酸價(jià)測(cè)定分析步驟稱取3.00g—5.00g混勻的試樣，置于錐形瓶中，加入50mL中性乙醚—乙醇混合液，振搖使油溶解，必要時(shí)可置于熱水中，溫?zé)崾蛊淙芙狻＠渲潦覝?，加入酚酞指示?-3滴，以氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，至初現(xiàn)微紅色，且0.5min內(nèi)部退色為終點(diǎn)。結(jié)果計(jì)算X=V×C×56.11÷m式中：X——試樣的酸價(jià)（以氫氧化鉀計(jì)），單位為毫克每克（mg/g）；V——試樣消耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位毫升（mL）；C——?dú)溲趸洏?biāo)準(zhǔn)溶液實(shí)際濃度（mol/L）；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；56.11——與1.0mL氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液[C（KOH）=1.000mol/L]相當(dāng)?shù)臍溲趸浐量藬?shù)。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。（二）碘價(jià)測(cè)定（韋氏法）參照GB/T5532—1995分析步驟：試樣的量根據(jù)估計(jì)的碘價(jià)而異（碘價(jià)高，油樣少；碘價(jià)低，油樣多），一般在0.25g左右。將稱好的試樣放入500mL錐形瓶中，加入20mL環(huán)己烷—冰乙酸等體積混合液，溶解試樣，準(zhǔn)確加入25.00mL韋氏試劑，蓋好塞子，搖勻后放于暗處30min以上（碘價(jià)低于150的樣品，應(yīng)放1h；碘價(jià)高于150的樣品，應(yīng)放2h）。反應(yīng)時(shí)間結(jié)束后，加入20mL碘化鉀溶液(150/L)和150mL水。用0.1mol/L硫代硫酸鈉滴定至淺黃色，加幾滴淀粉指示劑繼續(xù)滴定至劇烈搖動(dòng)后藍(lán)色剛好消失。在相同條件下，同時(shí)做一空白實(shí)驗(yàn)。結(jié)果計(jì)算X=（V2－V1）×C×0.1269÷m×100式中：V2——試樣消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；V1——空白試劑消耗硫代硫酸鈉的體積，mL；C——硫代硫酸鈉的實(shí)際濃度，mol/L；m——試樣的質(zhì)量，g；0.1269——1/2的毫摩爾質(zhì)量，g/mmol。四、羰基價(jià)測(cè)定

1、分析步驟精密稱取約0.025—0.5g試樣，置于25mL容量瓶中，加苯溶解試樣并稀釋至刻度。吸取5.0mL，置于25mL具塞試管中，加3mL三氯乙酸溶液及5mlL2，4-二硝基苯肼溶液，仔細(xì)振搖混勻，在60°C水浴中加熱30min，冷卻后，沿試管壁慢慢加入10mL氫氧化鉀-乙醇溶液，使成為二液層，塞好，劇烈振搖混勻，放置10min。以1cm比色杯，用試劑空白調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長440nm處測(cè)吸光度。2、結(jié)果計(jì)算試樣的羰基價(jià)按式（5）進(jìn)行計(jì)算。X==A×1000÷(854×m×V2÷V1)式中：X——試樣的羰基價(jià)，單位為毫摩爾每千克（mmol/kg）；A——測(cè)定時(shí)樣液吸光度；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；V1——試樣稀釋后的總體積，單位為毫升（mL）；V2——測(cè)定用試樣稀釋液的體積，單位為毫升（mL）；854——各種醛的毫克當(dāng)量吸光系數(shù)的平均值。結(jié)果保留三位有效數(shù)字。3、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的5%。五、注意事項(xiàng)

1、測(cè)酸價(jià)，當(dāng)樣液顏色較深時(shí)，可減少試樣用量，或適當(dāng)增加混合溶劑的用量。2、側(cè)碘價(jià)時(shí)，光線和水分對(duì)氯化鉀起作用，影響很大，要求所用儀器必須清潔，干燥，碘液試劑必須用棕色瓶盛裝且放于暗處；3、側(cè)過氧化值時(shí)，飽和碘化鉀溶液中不可存在游離碘和碘酸鹽；4、光線會(huì)促進(jìn)空氣對(duì)試劑的氧化，應(yīng)注意避光存放試劑；5、在過氧化值的測(cè)定中，三氯甲烷，乙酸的比例以及加入碘化鉀后徑直時(shí)間的長短基價(jià)水量的多少等對(duì)測(cè)定結(jié)果均有影響，應(yīng)嚴(yán)格控制試樣與空白試驗(yàn)的測(cè)定條件一直性；6、羰基價(jià)測(cè)定時(shí)，所用儀器必須潔凈，干燥，所用試劑若含有干擾試驗(yàn)的物質(zhì)時(shí)，必須控制后才能用于試驗(yàn)，空白試驗(yàn)的吸收值（在波長440nm處，以水對(duì)照）超過0.20時(shí)，試驗(yàn)所用試劑的純度不夠理想