微生物包括五類：病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動(dòng)物特點(diǎn)：結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡單,個(gè)體多數(shù)十分微小.通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu).且體內(nèi)一般不含有葉綠素.不能進(jìn)行光合作用.微生物包括細(xì)菌、病毒、霉菌、酵母菌等原核生物界原生生物界真菌界病毒界點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第一頁，共48頁。是由一個(gè)核酸分子（DNA或RNA）與蛋白質(zhì)構(gòu)成的非細(xì)胞形態(tài)的營寄生生活的生命體。病毒（virus)SARS病毒、禽流感病毒、第二頁，共48頁。細(xì)菌的外形與大小單細(xì)胞不分枝的原核微生物。細(xì)菌細(xì)胞微小而透明，通常用適當(dāng)染料染色后顯微鏡觀察圖1-1常見的三種細(xì)菌典型形態(tài)葡萄球菌大腸桿菌霍亂弧菌細(xì)菌（bacteria）點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三頁，共48頁。放線菌（Actinomycete）

結(jié)構(gòu)：單細(xì)胞原核分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的

應(yīng)用:點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四頁，共48頁。真菌（Fungus）是一種真核生物，通常又分為三類，即酵母菌、霉菌和蕈菌（大型真菌）點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第五頁，共48頁。是動(dòng)物界中最低等的一類真核單細(xì)胞動(dòng)物，個(gè)體由單個(gè)細(xì)胞組成。原生動(dòng)物（protozoan）

草履蟲大變形蟲點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第六頁，共48頁。想一想在制作果酒、果醋、腐乳等時(shí)可用優(yōu)良菌種直接接種，以提高產(chǎn)品的質(zhì)量，那么，這些肉眼看不到的微生物是怎樣獲得呢？點(diǎn)此播放教學(xué)視頻第七頁，共48頁。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第八頁，共48頁。一、基礎(chǔ)知識：（一）培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。1.培養(yǎng)基的類型和用途液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基據(jù)物理性質(zhì)分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基據(jù)化學(xué)成分分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基據(jù)用途分點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第九頁，共48頁。培養(yǎng)基的種類液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基據(jù)物理性質(zhì)分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基據(jù)化學(xué)成分分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基據(jù)用途分常用于工業(yè)生產(chǎn)常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種用于微生物的分離、計(jì)數(shù)常用于工業(yè)生產(chǎn)常用于分類、鑒定在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長。例如，在培養(yǎng)基中加入青霉素，以抑制細(xì)菌、放線菌的生長，從而分離到酵母菌和霉菌。又如，在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌的生長，但不影響金黃色葡萄球菌的生長。根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成，用以鑒別不同種類的微生物。例如，在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，可以用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌：如果有大腸桿菌，其代謝產(chǎn)物就與伊紅和美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十頁，共48頁。液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長點(diǎn)此播放教學(xué)視頻第十一頁，共48頁。固體培養(yǎng)基：菌落，菌苔點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十二頁，共48頁。返回菌落：單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。不同的細(xì)菌的菌落特征不同菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十三頁，共48頁。注意

不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、碳源、和氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)例如:生長因子(即細(xì)菌生長必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)

，以及氧氣等的要求。

3、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方(參考教材附錄內(nèi)容P85)點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十四頁，共48頁。（1）碳源可作為碳源的物質(zhì)有:含碳無機(jī)物:、、含碳有機(jī)物：蛋白質(zhì)脂肪酸不同微生物所利用的碳源不同異養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為碳酸鹽碳酸氫鹽二氧化碳等糖類（主要）含碳有機(jī)物（有機(jī)碳）含碳無機(jī)物（無機(jī)碳）點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十五頁，共48頁。（2）氮源可作為氮源的物質(zhì)有:含氮無機(jī)物：、、、含氮有機(jī)物：蛋白胨牛肉膏尿素固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獍睔庀跛猁}氨鹽氮?dú)恻c(diǎn)此播放教學(xué)視頻第十六頁，共48頁。（二）、無菌技術(shù)1、什么是無菌技術(shù)無菌技術(shù)泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十七頁，共48頁。注意事項(xiàng)對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。第十八頁，共48頁。（１）消毒定義：

指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別

使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而達(dá)到完全無菌之過程。

滅菌消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普通也是最重要的技術(shù)。（2）滅菌的定義：點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十九頁，共48頁。無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十頁，共48頁。

思考題請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十一頁，共48頁。1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線消毒……(1)消毒的方法：3.常用的消毒與滅菌的方法點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十二頁，共48頁。1、灼燒滅菌接種環(huán)、接種針、試管口2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸氣滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.(2)滅菌的方法：點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十三頁，共48頁。4、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1、器具的滅菌2、培養(yǎng)基的配制3、培養(yǎng)基的滅菌4、倒平板5、微生物接種6、恒溫箱中培養(yǎng)7、菌種的保存點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十四頁，共48頁。二、實(shí)驗(yàn)操作本實(shí)驗(yàn)采用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌的純化培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)過程分為兩個(gè)階段：1、制備培養(yǎng)基2、純化大腸桿菌大腸桿菌點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十五頁，共48頁。1、制備培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000mL（1）計(jì)算根據(jù)下列培養(yǎng)基配方比例，計(jì)算配置100mL培養(yǎng)基時(shí)，各成分的用量。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十六頁，共48頁。（2）稱量注意

牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速，稱后要及時(shí)蓋上瓶蓋。（3）溶化（4）滅菌在壓力為100kPa，溫度為121℃條件下，滅菌15-30min。（5）倒平板點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十七頁，共48頁。答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十八頁，共48頁。問題討論2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。第二十九頁，共48頁。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻第三十頁，共48頁。2、純化大腸桿菌P18（1）平板劃線法平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到有一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十一頁，共48頁。不同的平板劃線法點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十二頁，共48頁。培養(yǎng)基表面的單菌落點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十三頁，共48頁。1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？議一議點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十四頁，共48頁。

答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十五頁，共48頁。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十六頁，共48頁。（2）稀釋涂布法P19稀釋涂布法是將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十七頁，共48頁。涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等。討論點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十八頁，共48頁。微生物的恒溫培養(yǎng)第三十九頁，共48頁。菌種的保存1、臨時(shí)保藏法對象：溫度：缺點(diǎn)：

2、甘油管藏法：

對象：

溫度：頻繁使用的菌種4℃（冰箱）容易被污染或產(chǎn)生變異長期保存的菌種-20℃（冷凍箱）點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四十頁，共48頁。微生物的培養(yǎng)基礎(chǔ)知識實(shí)驗(yàn)操作結(jié)果分析與評價(jià)培養(yǎng)基定義：分類：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長繁殖的營養(yǎng)物質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基無菌技術(shù)培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法定義：消毒與滅菌常用滅菌方法制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基純化大腸桿菌課堂小結(jié)點(diǎn)此播放教學(xué)視頻第四十一頁，共48頁。練習(xí)1（多項(xiàng)選擇）1、下列細(xì)菌中，能利用含碳無機(jī)物作碳源的是A光合細(xì)菌B根瘤菌C硝化細(xì)菌D乳酸菌2、培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中，必需含有的碳源和氮源是A糖、有機(jī)酸等B二氧化碳、碳酸鹽C蛋白質(zhì)D無機(jī)氮化物3、下列敘述不正確的是A培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基所含的最基本物質(zhì)不相同C微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌A.CA.CB.C.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四十二頁，共48頁。思考:1)無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？

2)消毒和滅菌有何不同？3)為什么消毒牛奶要用巴氏消毒法?4)請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿②玻棒、試管、燒瓶和吸管③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手消毒滅菌條件溫和強(qiáng)烈作用范圍物體表面或內(nèi)部一部分,不包括芽孢和孢子物體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。滅菌滅菌消毒營養(yǎng)成分不被破壞第四十三頁，共48頁。?思考1溶化時(shí)為什么要將牛肉膏連同稱量紙一起加熱?答:②加瓊脂的目的是什么?答:可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中,減少誤差作為凝固劑點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四十四頁，共48頁。思考2在滅菌前,用牛皮紙、舊報(bào)紙包緊盛有培養(yǎng)基的錐形瓶的目的是什么？答:

②培養(yǎng)皿能否用高壓蒸汽滅菌？答:?在滅菌時(shí)能避免水蒸汽凝結(jié)時(shí)浸濕棉塞,在取出培養(yǎng)基錐形瓶時(shí)也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用不能,因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保持干燥,應(yīng)該用干熱滅菌.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四十五頁，共48頁。練習(xí)2:1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是A將用于微生物培養(yǎng)的器皿.接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌B接種純種細(xì)菌C適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D防止外來雜菌的入侵2.下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是A接種前用肥皂洗雙手,再用酒精擦拭雙手B接種前用火焰燒灼接種針C培養(yǎng)在50℃左右時(shí)擱置斜面D在酒精燈的火焰旁完成3.外科手術(shù)器械和罐頭食品的處理,要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)A球菌B桿菌C螺旋菌D芽孢DCD第四十六頁，共48頁。4.某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地,以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容,首先對食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理,準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具,然后從菌種站購來各種食用菌菌種.請回答以下問題:

(1)對買回來的菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),首先制備試管培養(yǎng)基,寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料