本文格式為Word版，下載可任意編輯——2023年下期食品微生物學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)目錄食品微生物學(xué)試驗(yàn)室守則2試驗(yàn)報(bào)告的撰寫要求2試驗(yàn)一普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、性能及其使用方法3試驗(yàn)二培養(yǎng)基的準(zhǔn)備和滅菌6試驗(yàn)三酵母菌的形態(tài)觀測及微生物液體接種技術(shù)10試驗(yàn)四酵母菌的死活鑒別及固體培養(yǎng)接種技術(shù)11試驗(yàn)五利用血球計(jì)數(shù)板的微生物計(jì)數(shù)法12試驗(yàn)六微生物大小的測量15試驗(yàn)七霉菌的濕室載片培養(yǎng)及根霉\\曲霉\\毛霉\\青霉的形態(tài)觀測17試驗(yàn)八放線菌的插片培養(yǎng)及形態(tài)觀測20試驗(yàn)九細(xì)菌的簡單染色及顯微鏡油鏡的使用、保養(yǎng)、細(xì)菌的革蘭氏染色21試驗(yàn)十利用毛霉有氧發(fā)酵生產(chǎn)豆制品23試驗(yàn)十一食品衛(wèi)生檢測24試驗(yàn)十二微生物菌種的分開純化、培養(yǎng)、鑒定28試驗(yàn)十三微生物菌種保藏技術(shù)28第1頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)食品微生物學(xué)試驗(yàn)室守則食品微生物學(xué)試驗(yàn)課的目的是：訓(xùn)練學(xué)生把握微生物學(xué)最基本的操作技能；了解微生物學(xué)的基本知識；加深理和穩(wěn)定對自學(xué)和講課內(nèi)容的理解。通過試驗(yàn)不僅可以培養(yǎng)學(xué)生觀測、思考、分析問題和解決問題的能力；實(shí)事求是、嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度，以及良好的合作精神，同時(shí)也有宜于培養(yǎng)勤儉儉約、愛護(hù)公物的良好作風(fēng)。為了上好微生物學(xué)試驗(yàn)課，并保證安全，特提出如下本卷須知：1、每次試驗(yàn)前必需對試驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行充分預(yù)習(xí)，以了解試驗(yàn)的目的、原理和方法，做到心中有數(shù)，思路明白。2、認(rèn)真及時(shí)做好試驗(yàn)記錄，對于當(dāng)時(shí)不能得到結(jié)果而需要連續(xù)觀測的試驗(yàn)，則需記錄下來每次觀測的現(xiàn)象和結(jié)果，以便分析。3、試驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保持整齊、勿高聲談話和隨便走動(dòng)，保持室內(nèi)恬靜。4、試驗(yàn)時(shí)防備細(xì)心，全部操作應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，萬一遇有盛菌試管或瓶不慎打破、皮膚破傷或菌液吸入口中等意外狀況發(fā)生時(shí)，應(yīng)馬上報(bào)告指導(dǎo)教師，及時(shí)處理，切勿隱瞞。5、試驗(yàn)過程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃藥品接近火焰。如遇火險(xiǎn)，應(yīng)先關(guān)掉火源，再用濕布或沙土掩蓋滅火。必要時(shí)用滅火機(jī)。6、使用顯微鏡或其他寶貴儀器時(shí)，要求細(xì)心操作，特別愛護(hù)，使用完后做好儀器的使用登記.對消耗材料和藥品等要力求儉約，用畢后仍放回原處。7、每次試驗(yàn)需進(jìn)行培養(yǎng)的材料，應(yīng)標(biāo)明自己的組別及處理方法，放于教師指定的地點(diǎn)進(jìn)行培養(yǎng)：試驗(yàn)室中的菌種和物品等，未經(jīng)教師許可，不得攜出室外：8、每次試驗(yàn)完畢后，必需把所用儀器抹凈放妥，及將自己所用的玻璃儀器洗清白，然后將試驗(yàn)室整理整齊。擦凈桌面，如有菌液污染桌面或其他地方時(shí)，可用3%來蘇爾液或5%石炭酸液覆蓋其上半小時(shí)后擦去。如系芽孢桿菌，應(yīng)適當(dāng)延長消毒時(shí)間：凡帶菌之工具(如吸管、玻璃刮捧等)在洗滌前須浸泡在3%來蘇爾液中進(jìn)行消毒：9、每次試驗(yàn)的結(jié)果,應(yīng)以實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度填入報(bào)告表格中，力求簡明確鑿，并連同思考題及時(shí)匯交教師批閱：10、離試驗(yàn)室前一定要用肥皂將手手洗凈，注意關(guān)閉門窗、燈、火、煤氣等。

試驗(yàn)報(bào)告的撰寫要求

試驗(yàn)報(bào)告是反映學(xué)生試驗(yàn)過程和總結(jié)分析試驗(yàn)結(jié)果的主要形式，也是確定學(xué)生試驗(yàn)成績的重要依據(jù)之一，必需以實(shí)事求是、嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度，依照指導(dǎo)書的要求按時(shí)完成。試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)當(dāng)簡明扼要、表達(dá)確鑿、數(shù)據(jù)完整、繪圖明了且寫實(shí)，應(yīng)有探討、有分析，結(jié)論明確。一般應(yīng)包括以下一些內(nèi)容：1、試驗(yàn)項(xiàng)目名稱；2、試驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?、試驗(yàn)原理；4、試驗(yàn)儀器及試劑:5、試驗(yàn)方法及步驟；6、試驗(yàn)結(jié)果記錄及計(jì)算:7、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討:8、試驗(yàn)日期及時(shí)間。第2頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)試驗(yàn)一普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、性能及其使用方法一、試驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）了解顯微鏡的構(gòu)造及成像原理。2）把握顯微鏡的使用方法和保養(yǎng)方法。二、顯微鏡的構(gòu)造及原理：普通的光學(xué)顯微鏡由機(jī)械裝置和光學(xué)系統(tǒng)兩大部分組成，如下圖所示：1.鏡座2.載物臺(tái)3.鏡臂4.棱鏡套5.鏡筒6.接目鏡7.轉(zhuǎn)換器8.接物鏡9.聚光鏡10.彩虹光圈11.光圈固定器12.聚光器升降螺旋13.光源14.細(xì)調(diào)旋紐15.粗調(diào)旋紐16.標(biāo)本夾顯微鏡構(gòu)造示意圖第3頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（一）機(jī)械裝置部分：1）鏡座：是顯微鏡的支架，由底座和鏡臂組成。2）載物臺(tái)：又稱鏡臺(tái)，用于安放載玻片，其上安有玻片夾和玻片移動(dòng)器，調(diào)理移動(dòng)器上的螺旋可使載玻片前后左右移動(dòng)。鏡臺(tái)中央有一孔，稱通光孔，可使反光鏡上的光反射到物鏡中來。3）鏡筒：是空心的園筒，長度為160mm，用于調(diào)整顯微鏡的長度和總的放大倍數(shù)，其上端連接目鏡，下端連接轉(zhuǎn)換器。4）轉(zhuǎn)換器：其上安裝三個(gè)物鏡，鏡檢時(shí)旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器即可換物鏡頭。注意轉(zhuǎn)換物鏡時(shí)。必需用手按住園旋繞轉(zhuǎn)，勿用手指直接推動(dòng)物鏡，以免使物鏡與轉(zhuǎn)換器之間的螺紋松脫而損壞顯微鏡。5）調(diào)焦裝置：包括粗細(xì)調(diào)焦旋鈕，是調(diào)理鏡筒上下移動(dòng)的裝置。（二）光學(xué)系統(tǒng)部分：1）物鏡：又稱為鏡頭。有三個(gè)物鏡頭，二個(gè)枯燥系物鏡，一個(gè)油系物鏡。物鏡上標(biāo)有主要參數(shù)，其含意是：例如：上排100/1.25是放大倍數(shù)為100倍，數(shù)值口徑為1.25，下排160/0.17是指鏡筒長為160mm，蓋玻片的厚度小于0.17mm。它是顯微鏡的最重要的部分。第4頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)普通顯微鏡接物鏡的工作原理2）目鏡：供眼睛觀測物像用的，它將物鏡放大的物像再放大，配有三個(gè)目鏡，其上標(biāo)有放大倍數(shù)。顯微鏡的總放大倍數(shù)是目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積.3）聚光器：起聚集光線的作用，它可上下移動(dòng)以調(diào)理最適光度。其下方安裝有可變光圈,用以調(diào)理光的強(qiáng)度。4）反光鏡：安裝在鏡座上。它是一個(gè)有平凹兩個(gè)面的雙面鏡。其作用是采集外來光線，并且送入聚光器，一般采集自然光時(shí)用平面鏡，采集人工光源時(shí)用凹面鏡。三、試驗(yàn)儀器及試劑：雙目顯微鏡、二甲苯、擦鏡紙、固定片等四、試驗(yàn)方法及步驟：一）顯微鏡的使用方法：1、準(zhǔn)備工作：取出顯微鏡時(shí)，應(yīng)一手握鏡臂,一手托鏡座，輕拿輕放，切忌碰撞和猛震。顯微鏡應(yīng)放在離桌邊60mm左右的位置。再將登子的高低調(diào)理好，不得將顯微鏡傾斜。2、采光：將低倍鏡與鏡筒調(diào)理成一條直線，用雙眼向下看，同時(shí)調(diào)理電光源或反光鏡尋覓光源。直至全視野有均勻的敞亮度，效果最正確為至。也可同時(shí)調(diào)理聚光鏡和光圈。3、放置標(biāo)本：上升鏡筒，將標(biāo)本片放在載物臺(tái)上，用玻片夾夾住，把標(biāo)本移動(dòng)至中央孔的位置。4、調(diào)焦：眼睛看著低倍鏡頭，緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)旋鈕，使低倍物鏡頭下端接近于玻片。再用左眼看目鏡，漸漸調(diào)理粗調(diào)旋鈕使鏡筒上升（此時(shí)切勿向下調(diào)理，以防損壞物鏡頭），當(dāng)看到模糊物像時(shí)，再轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)旋鈕，直至看到明了圖像為止。5、轉(zhuǎn)高倍鏡觀測：用手按住轉(zhuǎn)換器，漸漸地旋轉(zhuǎn)，當(dāng)聽到“咔嚓〞一聲即說明物鏡已轉(zhuǎn)到正確位置上，再稍微調(diào)理第5頁共30頁

食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)一下細(xì)調(diào)旋鈕就可看到明了圖像。這是由于顯微鏡的成套物鏡設(shè)計(jì)為共焦點(diǎn)。二）顯微鏡的保養(yǎng)：1、上升鏡筒，取下玻片。2、清潔鏡筒，用擦鏡紙擦凈用過的物鏡和目鏡，如發(fā)現(xiàn)擦不凈時(shí)，用擦鏡紙沾少許二甲苯擦凈，最終用清白的擦鏡紙擦去剩余的二甲苯，放入鏡頭盒內(nèi)收好。3、清潔：擦凈顯微鏡的其它部位。4.將顯微鏡的物鏡轉(zhuǎn)成八字形，緩慢下降鏡筒，使物鏡擱在鏡臺(tái)上，反光鏡轉(zhuǎn)成垂直狀，聚光鏡降至最低位置，經(jīng)老師檢查合格，最終把顯微鏡放入箱內(nèi)收好。五、試驗(yàn)結(jié)果記錄：繪出你所看到的標(biāo)本圖，并注明菌名、菌各部位名稱及放大倍數(shù)。六、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討：試驗(yàn)二培養(yǎng)基的準(zhǔn)備和滅菌一、試驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?、學(xué)習(xí)培養(yǎng)基的配制方法。2、把握高壓蒸汽滅菌的原理和方法。二、培養(yǎng)基的配制：培養(yǎng)基是人工配制的適合于微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。其中含有碳源，氮源，無機(jī)鹽，生長因子和水等。并且要根據(jù)微生物的需求調(diào)理其酸堿度及培養(yǎng)基的狀態(tài)。所以學(xué)習(xí)培養(yǎng)基的配制是很重要的環(huán)節(jié)。三、試驗(yàn)儀器及培養(yǎng)基：高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫枯燥箱、電爐、電子天平、250mL、100mL燒杯、試管、250mL三角瓶、營養(yǎng)瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）、馬鈴薯、蔗糖、葡萄糖等四、試驗(yàn)方法及步驟：一）其主要步驟是：玻璃儀器的清洗及枯燥→制做棉塞→配制液體培養(yǎng)基（加凝固劑配制成固態(tài)培養(yǎng)基）→調(diào)理酸堿度→過濾、灌裝及包扎→滅菌→檢驗(yàn)。下面介紹重要的幾步操作。1、制做棉塞：試管和三角瓶都需要做適合的棉塞，棉塞可起過濾作用，避免空氣中的微生物進(jìn)入容器內(nèi)。所用的棉花應(yīng)是透氣性很好的新鮮衣棉。制做棉塞時(shí)，要求棉花緊貼玻璃壁，沒有鄒紋和縫隙，松緊適合。過緊易擠破管口和不易塞入，過松易掉落和污染。棉塞的長度約為管口直徑的2～3倍，棉塞應(yīng)有2/3塞進(jìn)管內(nèi)（見下圖）。第6頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)2、配制液體培養(yǎng)基：培養(yǎng)基應(yīng)先配制成液態(tài)的。按配方確鑿稱出各種原料，用總量的1/2～1/3的水將原料溶解，難溶的可稍加熱溶解。3、配制固態(tài)培養(yǎng)基：按配方稱好凝固劑，用少量水調(diào)成糊狀，待液態(tài)培養(yǎng)基煮沸后，離開電爐將糊狀的凝固劑倒入內(nèi)混勻，并且補(bǔ)足配方所需的水，再加熱煮沸。4、調(diào)理酸堿度：培養(yǎng)基的酸堿度可用縝密試紙或酸度計(jì)來測量。調(diào)理時(shí)可用10％氫氧化鈉或10％鹽酸進(jìn)行調(diào)理酸堿度，調(diào)理時(shí)要特別注意避免過頭再回調(diào)，由于這樣簡單影響培養(yǎng)基的體積和滲透壓。最終檢查總體積是否足量，少了補(bǔ)充水份，多了稍加熱蒸發(fā)水份。5、過濾分裝：若有雜質(zhì)或固形物，用兩層紗布趁熱過濾（氣溫低要保溫過濾）。分裝時(shí)參與試管的量為試管長度的1/5～1/4.錐形瓶約為容積的1/3～1/2。分裝時(shí)不得使培養(yǎng)基沾污瓶口及試管口，以免浸濕棉塞，造成污染。（見下圖）第7頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)6、加棉塞：培養(yǎng)基分裝后，將做好的棉塞塞好，再包上一層防潮紙，用綿繩系好。在防潮紙上標(biāo)明培養(yǎng)基的名稱、制備組和姓名、日期等。準(zhǔn)備滅菌。7、滅菌：采用高壓蒸汽滅菌：滅菌是指殺死一定環(huán)境中的所有微生物。高壓蒸汽滅菌是濕熱滅菌的一種。其原理是通過加熱使微生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性，達(dá)到殺菌的目的。蒸汽滅菌的優(yōu)點(diǎn)是蒸汽穿透力強(qiáng)，使蛋白質(zhì)易于凝固變性，另外滅菌過程中產(chǎn)生的蒸汽凝固在物體的表面，同時(shí)放出大量的潛熱，這種潛熱能迅速提高滅菌物體的溫度，縮短滅菌的全過程。是滅菌效果最好的一種方法。其操作過程如下：（1）在滅菌鍋內(nèi)加適量的水，再把用滅菌的物品放入鍋內(nèi)，蓋上鍋蓋，對稱地?cái)Q緊螺栓，以防漏氣。（2）滅菌鍋開始加熱，同時(shí)開啟排氣閥，待將鍋內(nèi)冷空氣完全排凈后排氣閥內(nèi)有熱氣排出3～5分鐘后將排氣閥關(guān)閉。至壓力表升至壓力為0.1MPa或溫度為121℃時(shí)開始計(jì)時(shí)。通過調(diào)理電源或調(diào)理排氣閥維持一定的壓力（溫度）。達(dá)到滅菌時(shí)間后（20分鐘）中止加熱。(在滅菌過程中應(yīng)保持恒溫恒壓)（3）待壓力表降至0位后，再開啟排氣閥，開啟鍋取出滅菌物品。如試管要制成斜面時(shí)，待試管溫度降到50℃～60℃時(shí)再擺成斜面，過早會(huì)產(chǎn)生較多的冷凝水。（4）最終將鍋內(nèi)的水倒出，以防生銹。8、檢驗(yàn)：檢驗(yàn)的目的是檢查配制的培養(yǎng)基滅菌是否完全。將滅菌后的培養(yǎng)基置于37℃恒溫箱中保養(yǎng)24～48小時(shí)，若無菌生長，證明滅菌完全，可保存?zhèn)溆?。?頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)二）試驗(yàn)步驟：1）營養(yǎng)瓊脂（用于一般細(xì)菌培養(yǎng)）：稱取Xg營養(yǎng)瓊脂。用量筒量取80％蒸餾水于燒杯中，在電爐上煮沸，將燒杯拿下。其余的20％蒸餾水，先將少量蒸餾水將營養(yǎng)瓊脂攪成糊狀后轉(zhuǎn)入煮沸的蒸餾水中，然后繼續(xù)加熱至煮沸（參與營養(yǎng)瓊脂后一定要攪拌至煮沸），然后補(bǔ)足至YmL。分裝至試管（錐形瓶）塞好棉塞包扎后于121℃20分鐘高壓滅菌。如是試管,待培養(yǎng)基溫度降至50℃～60℃后擺成斜面.冷卻后取2－3支置于37℃恒溫培養(yǎng)1－2天，確定無菌后方可使用。(具體要求見試劑標(biāo)簽)2）馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）（用于霉菌，酵母菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)）稱取Xg馬鈴薯葡萄糖瓊脂。其余操作同上。3）配制馬鈴薯液體培養(yǎng)基：馬鈴薯200g蔗糖20g水1000mL自然PH，121℃，滅菌20分鐘制法：馬鈴薯去皮，切成塊煮沸30分鐘，然后紗布過濾，再加糖，熔化后補(bǔ)充至1000mL。吸取10mL裝入帶有產(chǎn)氣管的18×180mm的試管中。121℃，滅菌20分鐘五、試驗(yàn)結(jié)果記錄:將冷卻的培養(yǎng)基于37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時(shí)后，經(jīng)檢查培養(yǎng)基上是否有雜菌生長，證明滅菌是否完全。六、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討第9頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)試驗(yàn)三酵母菌的形態(tài)觀測及微生物液體接種技術(shù)一、試驗(yàn)?zāi)康暮鸵?1、通過觀測了解酵母菌的形態(tài)結(jié)構(gòu).2、學(xué)習(xí)微生物液體接種培養(yǎng)技術(shù).二、試驗(yàn)原理:酵母菌是單細(xì)胞的真菌,細(xì)胞較大,不必染色即可用顯微鏡觀測其形態(tài).特別是出芽生殖時(shí)的芽體形態(tài).在微生物的研究工作中,為了使微生物不斷延續(xù)其生命需一次次地將接種到新的培養(yǎng)基中讓其繁殖.接種操作決不允許不需要的微生物進(jìn)入培養(yǎng)基造成污染.將污染降低到最低限度的接種技術(shù)稱為無菌操作技術(shù).這次試驗(yàn)重點(diǎn)在無菌操作條件下,用接種環(huán)或滴管等工具將菌種接到液體培養(yǎng)基中,再進(jìn)行培養(yǎng)的操作技術(shù)。三、試驗(yàn)材料及器材:1、菌種:固體斜面培養(yǎng)24小時(shí)的酵母菌2、培養(yǎng)基及試劑:馬鈴薯液體培養(yǎng)基、馬鈴薯固體培養(yǎng)基、二甲苯、95％乙醇等3、器材:雙目顯微鏡、接種環(huán)、試管、酒精燈濾紙、擦鏡紙、蓋玻片、載玻片、打火機(jī)等四、試驗(yàn)方法及步驟:1、微生物液體產(chǎn)氣培養(yǎng)試驗(yàn)前的準(zhǔn)備:做好試管棉塞,于試管內(nèi)放入小產(chǎn)氣管(發(fā)酵管),小產(chǎn)氣管管口朝下,再參與10毫升麥芽汁液體培養(yǎng)基,貼上標(biāo)簽,寫好班次和學(xué)號,于121℃下高壓蒸汽滅菌20分鐘,冷卻后備用.(每人二支)。2、由固體斜面菌種接到液體培養(yǎng)基的無菌接種技術(shù)①點(diǎn)燃酒精燈,在酒精燈的上方將試管棉塞旋松(切勿將棉塞拔出),以便接種時(shí)易入拔出。②左手握二支試管,外則為固體斜面菌種管,內(nèi)則為液體待接種試管,液體管的管口向上傾斜,以防液體培養(yǎng)基流出。③右手拿接種環(huán),在火焰中將接種環(huán)燒紅滅菌.再用右手小拇指和無名指夾住棉塞(絕對不許將棉塞放在桌上),將試管上半部在火焰上方通過兩三次后,停在火焰上方.把燒紅的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi),先與試管壁接觸一會(huì)使之冷卻,再移至斜面挑取一環(huán)酵母菌,接入液體培養(yǎng)基中,攪拌一下取出.④接種完后將試管口在火焰中通過幾次,在塞上棉塞放于試管架上。⑤將接種環(huán)在火焰上燒紅,以殺死剩余的菌。⑥培養(yǎng):檢查試管的棉塞是否塞緊,標(biāo)簽上的字是否明白。然后置于28℃恒溫箱中培養(yǎng)24～48小時(shí)。3、酵母菌形態(tài)的觀測:①制片:取清白的玻片一塊.在其中央滴一滴蒸餾水,用接種環(huán)以無菌操作的方式從固體斜面上挑取少量的酵母菌,與載玻片上的水滴混勻,涂成一薄層.取清白蓋玻片一塊,防備地將蓋玻片一端與菌液接觸,然后緩慢地將蓋玻片放下,用手輕輕地壓一下將氣泡壓去,再用濾紙吸去多余的菌液。第10頁共30頁

食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)酵母菌菌體的長和寬，應(yīng)測量5～10個(gè)菌體（先數(shù)格數(shù)，后計(jì)算）。五、試驗(yàn)結(jié)果記錄及計(jì)算：1、校正目鏡測微尺數(shù)據(jù)記錄：放大倍數(shù)：目鏡測微尺的格數(shù)：物鏡測微尺的格數(shù)：目鏡測微尺每小格代表的實(shí)際長度（微米）＝2、結(jié)果記錄：酵母菌編號酵母菌占目鏡測微尺的格數(shù)計(jì)算（微米）長1寬長2寬長3寬長4寬長5寬長6寬長7寬長8寬長9寬長10寬3、總結(jié)：酵母菌的平均長度為。平均寬度為。最大的酵母菌的長為。其寬度為。最小的酵母菌的長為。其寬度為。六、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討：第16頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)試驗(yàn)七霉菌的濕室載片培養(yǎng)及根霉\\曲霉\\毛霉\\青霉的形態(tài)觀測根霉菌一、試驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?、學(xué)習(xí)濕室載片培養(yǎng)霉菌的方法。2、把握根霉的形態(tài)結(jié)構(gòu)及制片方法。二、試驗(yàn)原理：霉菌的結(jié)構(gòu)在制片過程中易被破壞，因而影響觀測，所以采用濕室載片培養(yǎng)法進(jìn)行培養(yǎng)，此法便于將生長完好的霉菌菌落載片直接置于顯微鏡的低倍鏡下觀測。霉菌的菌絲較粗大，細(xì)胞簡單收縮變形，因此采用乳酸石炭酸美蘭溶液作為介質(zhì)進(jìn)行制片。此溶液具有不使細(xì)胞變形，可殺菌防腐，不易枯燥，能保持較長時(shí)間，又有一定的染色能力。通過觀測把握根霉的菌絲是無隔膜的，并且生有特別的匍匐菌絲和假根，氣生菌絲成簇生長，一般不分枝，頂端長有孢子囊。在高倍鏡下細(xì)心觀測孢子囊的結(jié)構(gòu)分為孢子囊梗，囊托，囊軸，囊衣，和孢子。根霉主要用于釀酒和生產(chǎn)各種有機(jī)酸。三、試驗(yàn)材料和器皿：1、菌種：根霉菌種。2、培養(yǎng)基：葡萄糖豆芽汁培養(yǎng)基。3、試劑：95％乙醇、石炭酸、甘油、棉蘭、二甲苯。4、器材：雙目顯微鏡、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)箱、臺(tái)燈、載玻片、濾紙、蓋玻片等。四、試驗(yàn)方法及步驟：1、濕式載片培養(yǎng)根霉：（1）準(zhǔn)備：在培養(yǎng)皿底部先放一張濾紙，濾紙上放二塊載玻片，蓋好蓋，用紙包扎好，經(jīng)160℃干熱滅菌3小時(shí)后。冷卻后備用。干熱滅菌法：主要是指熱空氣滅菌，即把待滅菌的物體均勻地放在恒溫枯燥箱內(nèi)，加熱至160℃-170℃維持2小時(shí)即可達(dá)到滅菌目的（有水的物質(zhì)，不可用此法）。將包扎好的待滅菌物（培養(yǎng)皿，吸管，試管）放入枯燥箱內(nèi)，（注意不能放得太擠，以免阻礙空氣流通，不得使器皿于與烘箱的內(nèi)層地板直接接觸）。關(guān)上門，接通電源，待溫度上升至160℃-170℃時(shí)（注意勿使溫度過高,超過170℃，器皿外的包扎紙、棉花會(huì)被烤焦燃燒），借調(diào)理器的自動(dòng)控制，保持此溫度2個(gè)小時(shí)，滅菌終止后，關(guān)閉電源，待溫度降至60℃以下方可開門(否則玻璃器皿會(huì)因驟冷而爆裂和包扎材料起火燃燒)，取出無菌器皿，待用。假使是為了烘干玻璃器皿，溫度為120℃持續(xù)30min即可。用此法滅菌時(shí)，絕不能用油、蠟紙包扎物品。（2）接種：在無菌操作條件下，先用滴管取加熱溶解了的培養(yǎng)基滴加在載玻片上，冷卻片刻使培養(yǎng)基凝固后，再用滴管吸取根霉菌懸液均勻地加在培養(yǎng)基上，然后用無菌水把培養(yǎng)皿內(nèi)的濾紙打濕，以保持培養(yǎng)皿內(nèi)有一定的濕度，蓋上第17頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)蓋子，在培養(yǎng)皿的底座側(cè)面貼上標(biāo)簽，寫好班次和學(xué)號。（3）培養(yǎng)：將接種的培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中于28℃恒溫培養(yǎng)2－3天。2、觀測：（1）肉眼觀測：開啟培養(yǎng)皿蓋，觀測根霉的菌落形態(tài)，氣味，質(zhì)地如何。、（2）低倍鏡觀測：取出載玻片，用濾紙將載玻片底部的水擦拭清白，直接放在載物臺(tái)上，用低倍鏡細(xì)心觀測根霉的整體形態(tài)繪圖如下（并注明放大倍數(shù)）：（3）高倍鏡觀測：另取一塊清白的載玻片，于其中央滴一滴乳酸石炭酸美蘭染液，從菌落的邊緣取少量帶有孢子的菌絲放入染液中，輕輕挑開菌絲，蓋上蓋玻片，輕壓一下除去氣泡，用濾紙吸去多余的染液，用高倍鏡觀測根霉的菌絲結(jié)構(gòu)和孢子結(jié)構(gòu)繪圖如下（并注明放大倍數(shù)）：五、試驗(yàn)結(jié)果記錄：1、肉眼觀測結(jié)果：2、繪出低倍鏡觀測根霉的整體形態(tài)圖、并注明菌名、菌各部位名稱及放大倍數(shù)。3、繪出高倍鏡觀測根霉的菌絲結(jié)構(gòu)和孢子結(jié)構(gòu)圖、并注明菌名、菌各部位名稱及放大倍數(shù)。六、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討：毛霉菌一、試驗(yàn)?zāi)康呐c要求：1、熟悉毛霉的濕室載片的培養(yǎng)方法2、觀測毛霉的細(xì)胞結(jié)構(gòu)二、試驗(yàn)原理：霉菌中的毛霉也是采用濕室載片培養(yǎng)法。其菌絲比根霉要細(xì)些，也是無隔膜的。菌絲的分枝有兩個(gè)類型：一種為單軸式，即無分枝。另一種為假軸狀分枝。菌絲頂端都生有球形的孢子囊，囊壁上常有針狀的草酸鈣結(jié)晶，囊壁很薄，孢子成熟飛出后留下的殘跡稱為囊領(lǐng)。囊內(nèi)有囊軸，形狀不一。囊軸與孢子梗之間無囊托。毛霉的營養(yǎng)菌絲生長到一定時(shí)期能形成厚垣孢子，這是一種休眠體。三、試驗(yàn)材料與器材：1、菌種：毛霉斜面菌種。2、培養(yǎng)基：馬鈴薯固體培養(yǎng)基。3、試劑：95％乙醇、石炭酸、甘油、棉蘭、二甲苯等。4、器材:濕室載片培養(yǎng)裝置、無菌操作系列裝置、顯微鏡等。四、試驗(yàn)方法及步驟：1、準(zhǔn)備濕室：每人二套，包扎好后進(jìn)行干熱滅菌。2、接種培養(yǎng)：注意無菌操作、控制濾紙的濕度。3、肉眼觀測毛霉的菌絲。4、低倍鏡觀測毛霉的整體形態(tài)。5、高倍鏡觀測毛霉的形態(tài)。五、試驗(yàn)結(jié)果記錄：1、肉眼觀測毛霉的菌絲呈色。特征是。2、繪出低倍鏡觀測毛霉的整體形態(tài)圖、并注明菌名、菌各第18頁共30頁食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)部位名稱及放大倍數(shù)。3、繪出高倍鏡觀測毛霉的形態(tài)結(jié)構(gòu)圖、并注明菌名、菌各部位名稱及放大倍數(shù)。六、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討曲霉菌一、試驗(yàn)?zāi)康呐c要求：通過培養(yǎng)和觀測進(jìn)一步熟悉曲霉的形態(tài)結(jié)構(gòu)及用途二、試驗(yàn)原理：曲霉的菌絲與根霉、毛霉不同。營養(yǎng)菌絲具有隔膜，是多核多細(xì)胞的。營養(yǎng)菌絲的足細(xì)胞向上長出成束的氣生菌絲，其頂端生有的孢子稱為分生孢子。分生孢子的結(jié)構(gòu)為：無隔膜的分生孢子梗、頂囊、初生梗、次生梗和孢子。幼年的分生孢子結(jié)構(gòu)在高倍鏡下可明白地看見。三、試驗(yàn)材料與器材：1、菌種：曲霉斜面菌種。2、培養(yǎng)基：馬鈴薯固體培養(yǎng)基。3、試劑：95％乙醇、石炭酸、甘油、棉蘭、二甲苯等。4.器材:濕室載片培養(yǎng)裝置、無菌操作系列裝置、顯微鏡等。四、試驗(yàn)方法及步驟：1、準(zhǔn)備濕室：每人二套，包扎好后進(jìn)行干熱滅菌。2、接種培養(yǎng)：注意無菌操作、控制濾紙的濕度。3、肉眼觀測曲霉的菌落：4、低倍鏡觀測曲霉的菌落形態(tài)。5、高倍鏡觀測曲霉的菌落形態(tài)。五、試驗(yàn)結(jié)果記錄：1、肉眼觀測曲霉的菌落：生長初期為。生長后期為。2、繪出低倍鏡觀測曲霉的整體形態(tài)圖、并注明菌名、菌各部位名稱及放大倍數(shù)。3、繪出高倍鏡觀測曲霉的形態(tài)結(jié)構(gòu)圖、并注明菌名、菌各部位名稱及放大倍數(shù)。六、試驗(yàn)結(jié)果分析及問題探討曲霉菌一、試驗(yàn)?zāi)康呐c要求：1、熟練把握霉菌的濕室載片培養(yǎng)。2、了解青霉的形態(tài)結(jié)構(gòu)及用途。二、試驗(yàn)原理：青霉的菌絲是有隔膜，為多細(xì)胞