幾種功能因子的提取與功能性評(píng)價(jià)研究綜述摘要：隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步及功能食品研究的不斷深入，人們對(duì)功能食品中調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能的活性成分——功能因子的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步加深，并在功能因子的提取技術(shù)和其功能評(píng)價(jià)體系的構(gòu)建方面做了大量的研究工作。文章就目前功能食品中主要的幾種功能因子的提取方法及其功能評(píng)價(jià)進(jìn)行了簡(jiǎn)要的概括和介紹。關(guān)鍵詞:功能因子；提取方法；功能評(píng)價(jià)AReviewfortheExtractionandFunctionalEstimationofSeveralFunctionalCompositionsAbstract:Withtheadvancementofscientifictechnologyandtheprogressiveresearchoffunctionalfood,people'srecognitionoffunctionalcomposition,whichcanadjustphysiologicalfunctionforbody,hasgoneforafurtherstep.Andalotofresearchhasbeendoneintheextractionandbuildingasystemoffunctionalestimationforfunctionalcomposition.Thisreviewdescribesextractionmethodsandfunctionalestimationofsomemajorfunctionalcompositions.Keywords:funtionalcomposition;extractionmethod;functionalestimation前言隨著社會(huì)發(fā)展和生活水平的不斷提高，溫飽型食品已經(jīng)不能滿足人們的基本生活需要，營(yíng)養(yǎng)型飲食逐步成為現(xiàn)代人的飲食觀念。但緊張的工作、快速的生活節(jié)奏使人們很難在日常飲食中兼顧平衡碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素、脂肪、微量元素以及水六大類營(yíng)養(yǎng)素的攝入量，因此近年來(lái)功能食品日益受到消費(fèi)者青睞。隨著對(duì)功能食品中最重要的組成成分——功能因子的研究不斷深入，大量的功能因子不斷被發(fā)掘出來(lái)，并被迅速應(yīng)用到功能食品開(kāi)發(fā)中去。根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB16740-1997,能通過(guò)激活酶的活性或其他途徑，調(diào)節(jié)人體機(jī)能的物質(zhì)，稱為功能因子［1］。顯然，功能因子是在功能食品中真正起生理作用的成分，是生產(chǎn)功能食品的關(guān)鍵。功能食品必須有明確的天然功效成分即功能因子，并被科學(xué)證實(shí)具有調(diào)節(jié)人體生理功能的作用。日本于1991?2001年十年間，頒布了包括寡糖、糖醇、多不飽和脂肪酸、肽與蛋白質(zhì)、醇類、卵磷脂、乳酸菌、礦物質(zhì)、膳食纖維等12種功能因子的功效審查規(guī)范。與日本不同，美國(guó)食品與藥品監(jiān)督管理局(FDA)的功能食品(FunctionalFoods)范圍則廣泛得多，牛奶、減肥可樂(lè)等產(chǎn)品也可列入功能食品之中，只要能證明成分安全便可。歐洲各國(guó)則普遍稱之為健康食品(HealthFoods)。歐盟規(guī)定，功能食品則是以所有人為對(duì)象，用普通食品的形態(tài)來(lái)供應(yīng)，以改善人們對(duì)健康狀況的食品［2］。這些國(guó)家對(duì)功能食品中的功能因子的研究都相當(dāng)深入，提取技術(shù)和生產(chǎn)工藝都比較成熟。本文就功能食品中主要的幾種功能因子，即活性多糖、黃酮類化合物、磷脂、多肽類化合物和維生素E，總結(jié)了目前常用的提取方法與技術(shù)，并介紹其中幾種功能因子的功能性評(píng)價(jià)研究。功能因子的分類目前，已經(jīng)確認(rèn)的功效因子，按照其化學(xué)結(jié)構(gòu)分類，主要包括以下11類［3］：活性多糖：如香菇多糖、槐耳多糖、魔芋葡甘聚糖、殼聚糖等；功能性低聚、功能性單雙糖：如低聚果糖、低聚木糖、低聚纖維糖等；功能性脂類：如3-3多不飽和脂肪酸、3-6多不飽和脂肪酸、亞油酸、a亞麻酸、卵磷脂等；糖醇類：如木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、赤蘚糖醇等；多糖類：如果膠、粗纖維素、膳食纖維、褐藻膠等；氨基酸、肽與蛋白質(zhì)：如?；撬?、酪蛋白磷肽、降壓肽、免疫球蛋白、酶蛋白等；維生素和維生素類似物：包括水溶性維生素、油溶性維生素等；礦物元素：包括常量元素、微量元素，如鐵、鈣、鉻、硒、鋅等；植物活性成分：如皂苷、生物堿、萜類化合物、有機(jī)硫化物、生物類黃酮等；益生菌：主要是乳酸菌類，尤其是雙歧桿菌；低能量食品成分：包括蔗糖替代品、脂肪替代品等。功能因子的提取3.1活性多糖活性多糖的提取常用溶劑提取法。一般先將原料脫脂，然后按多糖的特性用水或稀鹽、稀堿、稀酸提取。提取液濃縮后，加甲醇、乙醇或丙酮等沉淀析出［4］。同一原料用水、酸、堿提得的多糖成分常是不同的。為防止降解，酸提時(shí)間宜短，且溫度不宜太高。堿提常通以氮?dú)饣蚣尤肱饸浠?或鈉)。用酸、堿提取多糖應(yīng)迅速中和、透析、醇析以獲得多糖沉淀。含糖醛酸、硫酸根等基團(tuán)的多糖，也可在鹽、稀酸溶液中直接醇析，使多糖以鹽的形式或游離的形式析出。初獲粗多糖需經(jīng)反復(fù)溶解與醇析，方可達(dá)到進(jìn)一步精制的目的［5］。陳玉香、張麗萍、梁忠?guī)r等人［6］在研究沙棘果水溶性多糖的分離純化研究中，采用沸水煮提5次，每次2h,合并濾液并濃縮，95%乙醇醇析，靜置24h,離心沉淀，然后用95%乙醇、無(wú)水乙醇、乙醚洗滌，常規(guī)干燥，得到的褐色粉末即為沙棘果皮水溶性粗多糖，粗多糖提取率為7.8%。葉竹秋［7］用不同溶劑對(duì)巴西蘑菇多糖進(jìn)行提取，發(fā)現(xiàn)用酸、鹽、堿等作提取劑或用酶法提取多糖均優(yōu)于常規(guī)熱水提取。用水很難將多糖抽提完全，造成多糖得率低；用草酸提取比水提高67.9%，這是因?yàn)椴菟釋?duì)子實(shí)體細(xì)胞有一定的破壞作用，使細(xì)胞壁水解而變得疏松，有利于糖分的浸出，但酸會(huì)降解多糖，故多不采用酸提法；鹽對(duì)多糖的提取率提高不大；堿提法粘度大，過(guò)濾困難，而且對(duì)多糖有降解作用，但由于其成本低且提取率高(比水提高100.2%)，故堿提仍是一種較理想的方法，但應(yīng)注意堿濃度不宜太高以免破壞多糖的活性成分。最終通過(guò)正交試驗(yàn)得出，用0.2mol/L、20倍體積的NaOH于60°C條件下提取2小時(shí)，多糖提取率可達(dá)21.95%。桑黃作為一種大型真菌，其多糖提取與常見(jiàn)食用菌多糖的提取基本相似。Gazatyan等人［8］將桑黃子實(shí)體粉碎干燥后先用丙酮、乙醚或乙醇進(jìn)行預(yù)處理，以除去原料中的脂類物質(zhì)，然后用熱水、稀酸或稀堿反復(fù)提取，中和提取液后用甲醇或乙醇沉淀，沉淀物經(jīng)離心、干燥后得粗多糖。用各種酶制劑提高多糖的浸出率是近幾年來(lái)的研究熱點(diǎn)之一。桑黃子實(shí)體結(jié)構(gòu)緊密，具有較好的維持力，存在于細(xì)胞壁內(nèi)的桑黃多糖較難滲出，利用超聲波的高頻振蕩及其產(chǎn)生的“空化效應(yīng)”，使桑黃子實(shí)體的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，破除維持力，盡快釋放子實(shí)體多糖［9］。3.2黃酮類化合物黃酮類化合物具有多種藥理作用，對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行分離是功能因子分析的一個(gè)重要領(lǐng)域。黃酮類化合物一般能溶于水、乙醇、乙酸乙酯等極性溶劑中，難溶于乙醚、氯仿和苯中。黃酮類分子中甲氧基、甲基、不飽和烴基增多時(shí)，則降低其在極性溶劑中的溶解度［10］。黃酮可以用水提法、堿提法、醇提法進(jìn)行提取。于長(zhǎng)青、王憲華、張麗萍等人［11］在麥胚黃酮類化合物提取方法的研究中，采用水提法、加堿浸提法、醇提法分別從麥胚中提取黃酮類化合物，進(jìn)行工藝方法比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，堿提法、水提法提取的黃酮類化合物得率低于醇提法，醇提法后續(xù)過(guò)濾、回收溶劑、濃縮等操作比水提法簡(jiǎn)單且不費(fèi)時(shí)。楊洋、余煉［12］在對(duì)柚皮黃酮類成分的分離工藝研究中，用乙醇分別進(jìn)行了柚皮黃酮類成分分離的正交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：乙醇濃度為90%,固液比為1:10,90°C條件下提取的工藝條件較好。目前，隨著超臨界萃取技術(shù)在保健食品功能因子的提取中得到廣泛應(yīng)用，人們開(kāi)始研究用二氧化碳萃取技術(shù)提取黃酮。國(guó)外學(xué)者用超臨界萃取技術(shù)從黃芩根中萃取黃芩甙和黃芩甙元，回收率分別達(dá)到90%和88%［13］；近年來(lái)人們對(duì)銀杏葉的研究比較深入，尤其是對(duì)銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯的研究，因?yàn)樗鼈兌际侵委熜哪X血管疾病的成分。人們直接從銀杏葉中萃取了黃酮化合物。國(guó)內(nèi)用乙醇和大孔吸附樹(shù)脂提取的銀杏葉粗品中有害成分（銀杏酸，含量為2g/100g），經(jīng)二氧化碳超臨界萃取，以乙醇作為添加劑，在壓力為35Mpa,溫度為60C條件下，提取精制后的銀杏酸的含量為0.02g/100g。用反相高效液相色譜法對(duì)銀杏葉超臨界二氧化碳提取物種黃酮類化合物進(jìn)行分析證明，用超臨界二氧化碳提取銀杏葉黃酮類成分是切實(shí)可行的［14,15］。3.3磷脂磷脂在自然界廣泛分布，所有的生物細(xì)胞都含有磷脂，磷脂是生物膜基本的組成成分，是重要的生命物質(zhì)。磷脂在大豆、棉籽、花生、玉米、向日葵等油料種子和蛋黃中大量存在。目前大量使用的商品磷脂一般是由大豆提取的，因此商品磷脂一般是指大豆磷脂［16］。磷脂為白色蠟狀固體，易吸水呈棕黑色膠狀物質(zhì)，易氧化，在空氣中放置一段時(shí)間后，其白色逐漸變成褐色，最后呈棕黑色，這是因?yàn)榉肿又写罅坎伙柡椭舅岜豢諝庋趸?。磷脂分子既含有疏水性的脂肪酸基，又含有親水性的磷酸酯基，所以它又是一種兩性表面活性劑。磷脂不易溶于水、但易吸水膨脹為膠體。磷脂可溶于某些有機(jī)溶劑。不同的磷脂在不同的有機(jī)溶劑中其溶解度不同，這是不同磷脂用溶劑法分離的理論基礎(chǔ)。磷脂均不溶或難溶于丙酮，故稱丙酮不溶物［17］。目前，磷脂的提取方法主要有：溶劑法、超聲波提取法、微波輔助萃取法、超臨界CO2法等。大豆磷脂是大豆油的脂肪伴隨物，毛油經(jīng)水化脫膠可獲得粗大豆磷脂，水化脫膠法是指大豆毛油經(jīng)過(guò)濾后，在攪拌條件下均勻加入80°C的水，大豆磷脂膠粒從油中析出沉淀，分離底部沉淀物即為粗大豆磷脂［18］。粗大豆磷脂經(jīng)乙醇提取純化或丙酮沉淀法得精制大豆磷脂產(chǎn)品。溶劑法也是磷脂提取中常用的方法，常用的溶劑有氯仿、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、己烷、異丙烷等，其中用得最多的是氯仿、甲醇。中藥材中磷脂成分的提取分離方法普遍采用Folch試劑提取、石油醚沉淀除雜的方法。Folch法是由Folch創(chuàng)建的以氯仿一甲醇混合溶劑為提取溶劑提取脂質(zhì)的方法［19］。經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn)，該方法已經(jīng)獲得滿意的萃取效果。如合子草中磷脂成分分析，即將樣品粉末用Folch試劑超聲提取過(guò)濾，即得磷脂提取液。李樹(shù)立、龐津霞等分別比較了乙醚、氯仿、石油醚、氯仿一甲醇(2:1,v/v)作溶劑時(shí)對(duì)食品中磷脂提取率的影響［20］,得到氯仿一甲醇(2:1,v/v)混合溶劑的提取率最高。3.4多肽化合物多肽化合物的提取，主要是將蛋白質(zhì)用化學(xué)或酶的方法水解成小分子的肽鏈，即蛋白質(zhì)首先被水解成大分子肽，再經(jīng)小分子肽最后水解成游離氨基酸。作為多肽產(chǎn)品主要是以小分子肽為主，盡量減少游離氨基酸。生產(chǎn)肽的關(guān)鍵是蛋白的水解。一般水解方法有化學(xué)水解和酶水解［21］，化學(xué)方法是用酸水解，酸水解雖然簡(jiǎn)單、便宜，但是其缺點(diǎn)是不能進(jìn)行有規(guī)則地控制生產(chǎn)。同時(shí)因生產(chǎn)條件較苛刻，氨基酸會(huì)受到損害而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，因此一般很少采用此方法。酶水解的方法則能很好地控制生產(chǎn)，由于是在比較溫和的條件下進(jìn)行的，能很好地保存氨基酸的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，所以一般多采用酶法生產(chǎn)多肽。在生產(chǎn)蛋白水解物中酶的選擇是關(guān)鍵，它不僅影響最后產(chǎn)品的得率和反應(yīng)速度，而且直接影響產(chǎn)品的風(fēng)味和理化特性。蛋白質(zhì)水解酶來(lái)源于植物(木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等)、動(dòng)物(胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等)和微生物。微生物蛋白酶與動(dòng)物蛋白酶和植物蛋白酶相比溶解性好，活力高，專一性不強(qiáng)，對(duì)蛋白質(zhì)作用強(qiáng)烈，非常適合于對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行較深程度的水解。另外，微生物蛋白酶已經(jīng)工業(yè)化生產(chǎn)［22'23］,如諾和諾德(NovoNordisk)公司生產(chǎn)的堿性蛋白酶和中性蛋白酶，無(wú)錫星達(dá)生物工程有限公司的酸性蛋白酶、堿性蛋白酶和中性蛋白酶等，因此，微生物蛋白酶是今后應(yīng)用的主要方向。人們對(duì)蛋白酶解制取多肽進(jìn)行了大量的研究，認(rèn)為多肽的酶法水解及其產(chǎn)品的性能與制取過(guò)程的各個(gè)環(huán)節(jié)均密切相關(guān)。如水解反應(yīng)物(底物、酶)的選擇、水解工藝參數(shù)的確定、產(chǎn)品的定性分離與純化工藝、水解產(chǎn)物的處理等。劉文輝［24］以大豆分離蛋白原料作為底物，經(jīng)加熱處理后，分別與堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶在各自適宜條件下進(jìn)行水解，比較得出大豆分離蛋白在堿性蛋白酶作用下，有較高水解度，并確定了水解大豆分離蛋白的最佳條件即：溫度60°C,pH值為9,水解液濃度為2%。W.DavidDeeslie采用連續(xù)攪拌罐式膜反應(yīng)器（CSTMR）生產(chǎn)出了氮提取率達(dá)90%的大豆蛋白水解物，并使產(chǎn)物的分子量維持在較窄的范圍內(nèi)。高林［25］等人在花生多肽的提取、分離及純化研究中,用堿溶酸沉法從冷榨花生餅中提取花生蛋白，用AS1398中性蛋白酶水解花生蛋白得到花生多肽粗品，水解條件為3mol/L氫氧化鈉，pH8.5左右，料水比1:10,溫度50C，水解時(shí)間2h。3.5維生素E維生素E又稱抗不孕維生素、生殖維生素、生育酚等，是人體必需的維生素之一，維生素E為金黃色或淡黃色的粘稠油狀物，具有一種溫和的、特殊的氣味，相對(duì)密度為0.947?0.955，是一種輕微的蠟狀分離結(jié)構(gòu)的微晶體，與丙酮、乙醚、氯仿或植物油混溶，易溶于乙醇，幾乎不溶于水［3］。目前天然維生素E的提取方法有萃取法（包括超臨界二氧化碳萃取法）、皂化法、硅膠法、醇法、酯化法、尿素絡(luò)合法以及凝膠過(guò)濾法等。依其原理可歸納為萃取工藝（有機(jī)溶劑萃取工藝和超臨界二氧化碳萃取工藝）、蒸餾工藝（真空蒸餾工藝和分子蒸餾工藝）、吸附工藝、化學(xué)處理工藝及組合工藝（前4類工藝中兩種或兩種以上的組合）五大類［25］。超臨界流體萃取技術(shù)（SupercriticalFluidExaction，簡(jiǎn)稱SFE）是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一門(mén)現(xiàn)代高新分離技術(shù)。人們已將CO2超臨界流體萃取技術(shù)應(yīng)用于天然維生素E的提取中，Lee等人報(bào)道了運(yùn)用C02超臨界流體萃取技術(shù)從油脂脫臭餾出物中提取天然維生素E的工藝條件，發(fā)現(xiàn)CO2超臨界流體萃取技術(shù)非常適合天然維生素E的初步濃縮。國(guó)內(nèi)外也已將CO2超臨界流體萃取技術(shù)應(yīng)用于小麥胚芽油的提?。?6］。葛毅強(qiáng)、孫愛(ài)東、倪元穎等人0］研究不同萃取條件的超臨界CO2流體對(duì)維生素E萃取效果的影響，比較CO2超臨界流體萃取技術(shù)提取維生素E的參數(shù)，確定了CO2超臨界流體萃取技術(shù)從麥胚中提取天然維生素E的最佳工藝和最適宜條件為：萃取壓力35MPa、萃取溫度45°C、CO2流量2mL/min、萃取時(shí)間90min。功能因子的功能性評(píng)價(jià)4.1活性多糖4.1.1增強(qiáng)免疫力猴頭菌多糖可以提高腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率，吞噬指數(shù)及胸腺指數(shù)，能有效地提高肌體免疫力。成靜等人通過(guò)炭粒廓清實(shí)驗(yàn)及溶血紊實(shí)驗(yàn)來(lái)研究大刺猴頭多糖（HEPS）對(duì)小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬異物能力和溶血素抗體生成的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)HEPS可以增強(qiáng)小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)碳粒的廊清能力，與對(duì)照組有顯著差異(PvO.Ol),且發(fā)現(xiàn)200m/kg組作用最佳［28］。4.1.2抗腫瘤活性多糖的抗腫瘤活性一般是通過(guò)增強(qiáng)免疫細(xì)胞的活性實(shí)現(xiàn)的。多糖不僅能激活T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、殺傷性T細(xì)胞、淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)等免疫細(xì)胞，還能促進(jìn)白細(xì)胞介素-l(IL-l)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子(TNF)和干擾素(IFN)等細(xì)胞因子的生成，調(diào)節(jié)抗體和補(bǔ)體，從多個(gè)方面抑制腫瘤［29］。抗病毒活性研究表明許多多糖對(duì)各種病毒有抑制作用，如艾滋病毒(HIV-1)、單純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、流感病毒、囊狀胃炎病毒、勞斯肉瘤病毒和鳥(niǎo)肉瘤病毒。多糖的抗病毒作用現(xiàn)已引起醫(yī)藥界的高度重視，尤其是硫酸多糖的強(qiáng)抗病毒活性，顯示了多糖廣闊的藥用前景。多糖在抗病毒藥的研究中也常常作為佐劑，許多研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多糖與其他藥物聯(lián)用具有協(xié)同作用。將多糖作為佐劑聯(lián)合用藥可以防止或推遲耐藥株的出現(xiàn)，提高藥物的抗病毒活性，減少用藥量。例如硫酸右旋糖酐與疊氮胸苷具有協(xié)同作用，可以減少用藥量，降低不良反應(yīng)，提高患者的耐受性［30］?？顾ダ匣钚匀缏菪宥嗵?PSP)是從螺旋藻中分離純化獲得的平均分子量為16.6kDa的酸性多糖，對(duì)D-半乳糖所導(dǎo)致的衰老小鼠模型有如下作用：抗小鼠肝、腦組織單胺氧化酶(MAO-B)的活性明顯提高，抗Na-K-ATP酶活性降低，對(duì)抗小鼠淋巴細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化降低的效應(yīng)，拮抗小鼠皮膚細(xì)胞中羥脯氨酸含量降低，從而防止膠原蛋白多肽鏈之間交聯(lián)度的增加，代謝率降低，防止皮膚組織彈性降低卩1，32］。4.2黃酮類化合物對(duì)心血管系統(tǒng)的作用山楂葉總黃酮能對(duì)抗異丙腎上腺素所致的大鼠急性心肌缺血，對(duì)結(jié)扎前降支造成的家兔和犬急性心肌梗塞模型，能使ST段異常抬高數(shù)和病理性Q波減少，ST段改變至等電位線的時(shí)間顯著提前，N-BT染色顯示梗塞心肌占左室重的百分率降低和心肌磷酸肌酸激酶釋放減少［33］，說(shuō)明山楂總黃酮對(duì)動(dòng)物心肌缺血有保護(hù)作用。對(duì)血小板聚集的影響心血管疾病與血小板聚集功能增強(qiáng)及缺血所致心肌損傷有關(guān)。ChatterjeeS等［34］試驗(yàn)表明，無(wú)論體內(nèi)或體外給藥均可顯著抑制家兔血小板聚集性，其抑制血小板聚集性具有顯著的濃度依賴性，黃酮顯著抑制血小板聚集的濃度為1g/kg,這對(duì)冠心病等心血管病的防制是有效的。對(duì)自由基的清除作用黃酮是公認(rèn)的最具抗氧化潛力的一類化合物，許多疾病的發(fā)生發(fā)展與活性氧的產(chǎn)生有關(guān)。蘭文軍等［35］研究發(fā)現(xiàn)富含黃酮的山楂葉抽提物可以抑制H2O2所致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的損傷，而起到細(xì)胞保護(hù)作用。葉希韻等［36］研究了山楂葉總黃酮對(duì)損傷后血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)山楂葉黃酮能通過(guò)抗氧化途徑對(duì)溶血磷脂酰膽堿(LPC)與黃嘌吟和黃嘌吟氧化酶所致VEC的氧化損傷起保護(hù)作用。4.2.4利尿作用ZhangShouqin等人［37］的試驗(yàn)表明：家兔靜脈注射山楂葉總黃酮浸膏后尿量明顯增加且作用溫和、緩慢、持久。同時(shí)排水大于排鈉，對(duì)血鉀水平也無(wú)明顯變化，說(shuō)明利尿時(shí)對(duì)電解質(zhì)影響較小?；钚远嚯拇龠M(jìn)脂肪代謝大鼠攝取大豆肽后，促使交感神經(jīng)的活化，誘發(fā)褐色脂肪組織功能的激活，因而促進(jìn)了能量的代謝。大豆肽既能有效地促使體脂減少，同時(shí)又能保持骨骼肌重量的不變［3］。抗氧化功能曹向宇［38］通過(guò)建立H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞氧化溶血實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃托∈驞-半乳糖氧化損傷模型，研究了麥麩多肽在體內(nèi)、體外的抗氧化性。他發(fā)現(xiàn)隨著麥麩多肽濃度的增加，清除羥基自由基(?0H)和超氧自由基(。2-?)的能力不斷增強(qiáng)，當(dāng)麥麩多肽濃度達(dá)到60ug/mL時(shí)，這種清除作用已經(jīng)表現(xiàn)得非常明顯，此時(shí)對(duì)羥基自由基(?0H)的抑制率可達(dá)62.39%,對(duì)超氧自由基(。2“)的抑制率可達(dá)53.16%。并且在該條件下制備的麥麩多肽清除?0H的能力更強(qiáng)，說(shuō)明分離純化的麥麩多肽具有較高的清除0-?和?0H的能力。2增強(qiáng)免疫力功能麥麩多肽具有增強(qiáng)免疫力的功效，其主要是通過(guò)促進(jìn)機(jī)體的細(xì)胞免疫水平，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，提高脾臟指數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)其對(duì)機(jī)體的免疫作用的。麥麩多肽能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，增加小鼠肝糖原儲(chǔ)備量，顯著降低小鼠劇烈運(yùn)動(dòng)后血尿素氮含量，具有較強(qiáng)的增強(qiáng)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)耐力、緩解動(dòng)物體力疲勞的作用［39］。4.4維生素EvE是一種對(duì)身體無(wú)害的抗氧化劑。通過(guò)在飲食中增加或適量補(bǔ)充vE,可延緩高血脂和動(dòng)脈粥硬化的發(fā)生和發(fā)展，降低心血管疾病的發(fā)生率和死亡率已成為人們的共識(shí)［40］。預(yù)防和治療高血脂VE能降低小鼠的增重幅度，降低血清總膽固醇(TC)、血清A1、小鼠的糞濕重和糞干重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示a-VE只能降低血清丙二醛(MDA)，對(duì)于別的指標(biāo)都不明顯。顯示菜籽VE和a-VE混合組能降低血清TG、血清Al、血清MDA、肝系數(shù)和肝臟TC。菜籽vE對(duì)高血脂有預(yù)防效果的作用機(jī)制之一是由于y-ve促進(jìn)了膽固醇等物質(zhì)的排泄，從而降低了血清TC和Al。VE降血脂的另一個(gè)機(jī)制是通過(guò)VE的抗氧化性對(duì)LDL起保護(hù)作用，從而對(duì)小鼠的血脂起降低作用，同時(shí)由于抗氧化性，可以清除產(chǎn)生的氧自由基，減少脂質(zhì)過(guò)氧化物的生成，降低血清MDA值。此外，VE還作為免疫因子來(lái)提高系統(tǒng)的免疫能力，如保護(hù)SOD酶活性等Hi］。在VE治療小鼠高血脂實(shí)驗(yàn)中，200mg/kg?d菜籽VE組對(duì)小鼠血清TG和肝臟TG降低有顯著性效果，而與a-VE混合組和與甾醇混合組對(duì)小鼠血清TG和肝臟TG無(wú)顯著性效果，其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)差異。從這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，菜籽VE治療高血脂的效果要好于a-VE，這說(shuō)明VE降低血脂的機(jī)理主要是通過(guò)VE的抗氧化性起作用。抑制腫瘤生長(zhǎng)對(duì)VE抗腫瘤作用的研究，周泉成從活體和離體兩方面進(jìn)行了詳細(xì)的研究，結(jié)果如下：VE能顯著得抑制腫瘤生長(zhǎng)，a-VE和與a-VE混合組也有一定得抑瘤效果，與對(duì)照組相比，沒(méi)有減少荷瘤小鼠免疫器官重量和阻礙小鼠生長(zhǎng)的現(xiàn)象發(fā)生。VE高劑量組可以顯著提高巨噬細(xì)胞吞噬能力和遲發(fā)型超敏反應(yīng)強(qiáng)度，a-VE組和與a-VE混合組除能顯著提高遲發(fā)型超敏反應(yīng)強(qiáng)度和HC,M的含量，但對(duì)HQG的含量影響不顯著。從腫瘤病理lgM lgG學(xué)分析，VE高劑量組呈現(xiàn)出明顯的周邊及中心壞死現(xiàn)象，并且病灶周圍有單核細(xì)胞遷入，并有巨噬細(xì)胞出現(xiàn)。這說(shuō)明，VE作為免疫調(diào)節(jié)因子通過(guò)刺激免疫系統(tǒng)，而消滅開(kāi)始形成病灶的腫瘤細(xì)胞，從而防治腫瘤的形成和擴(kuò)增?？傊?，菜籽ve抑制s180腫瘤的生長(zhǎng)主要機(jī)理是通過(guò)菜籽VE抗氧化性和提高小鼠的免疫能力來(lái)發(fā)揮作用［42］?？偨Y(jié)功能因子是在功能食品中真正起生理作用的成分，是生產(chǎn)功能食品的關(guān)鍵。功能因子的提取是開(kāi)發(fā)功能性食品資源的重要途徑，是保健食品加工制造過(guò)程中的關(guān)鍵。因此確定科學(xué)、成熟的提取技術(shù)和生產(chǎn)工藝，探討在提取過(guò)程中如何最大限度保留其活性，對(duì)保健食品中功效成分的定性、定量分析，以及對(duì)調(diào)節(jié)機(jī)體功能進(jìn)行科學(xué)評(píng)價(jià)具有重大意義。活性多糖、磷脂、黃酮類化合物和脂溶性維生素(如維生素E)的傳統(tǒng)提取方法是溶劑萃取法，根據(jù)物質(zhì)中各種成分在不同溶劑中的溶解性質(zhì)差異，選用合適的溶劑，將目標(biāo)物有效物提取出來(lái)。其工藝簡(jiǎn)單，設(shè)備費(fèi)用低，但濃縮比及收率較低，其中溶劑萃取法還有溶劑殘留問(wèn)題。活性多肽、功能性低聚糖和功能性單雙糖通過(guò)酸水解、酶解法獲取，再用溶劑萃取法提取。超臨界流體萃取技術(shù)和分子蒸餾技術(shù)是近些年發(fā)展起來(lái)的新的提取分離技術(shù)。特別適合那些對(duì)熱敏性強(qiáng)、易氧化分解的成分的提取和分離，人們?cè)诠δ苄杂椭?、天然維生素E、黃酮類化合物的提取中采用此技術(shù)，并對(duì)此進(jìn)行了大量的研究。隨著科技的發(fā)展，功能因子作用機(jī)理逐漸得到人們的認(rèn)可。功能因子的評(píng)價(jià)對(duì)功能食品的設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)具有重要意義。已經(jīng)研究的功能因子特殊功效，主要集中在調(diào)節(jié)血脂和血糖、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老、改善睡眠、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、耐缺氧、改善骨質(zhì)疏松、改善視力等領(lǐng)域。目前人們研究較多的功能因子有膳食纖維、功能性脂類(如多不飽和脂肪酸)、活性多肽及蛋白質(zhì)、功能性低聚糖、黃酮類化合物等。我們應(yīng)積極發(fā)展功能性食品評(píng)價(jià)體系，建立一系列反應(yīng)靈敏的延緩衰老、抗疲勞、增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、增強(qiáng)記憶等食品功能評(píng)價(jià)體系，對(duì)已有的功能因子進(jìn)行客觀的科學(xué)的評(píng)價(jià)。充分利用我國(guó)豐富的功能食品資源，研究和發(fā)現(xiàn)天然產(chǎn)物中的新功能因子，生產(chǎn)高附加值的功能食品，使我國(guó)功能食品步入快速發(fā)展的軌道。參考文獻(xiàn)李志勇，凌莉，王菊芳.功能食品中的功能因子[J].食品科學(xué)，2005,26(9)：622?624席文娣.功能食品中功能因子及作用J].甘肅科技，2008,24(3)：63?65鄭建仙.功能性食品學(xué)[M].北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，2010：6?7FranzGetal.PolysaccharidesinPharmacy:CurrentApplicationsandFutureConcepts[J].PlantMedieal,1989,55:493?497ImbertyA,BourneY,CambillauC,etal.OligosaccharideConformationinProtein/CarbohydrateComputers[J].Adv.Biophys.Chem,1993,3:71?117⑹陳玉香，張麗萍，梁忠?guī)r等沙棘果水溶性多糖Hn的分離純化與抗病毒研究J].東北師大學(xué)報(bào)，1997，(4)：74?77[7]葉竹秋.巴西蘑菇多糖的分離純化及理化性質(zhì)研究[D].中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)(碩士)，2001,(3)：37?41[8]Gazatyan,I.G,Reshetnikova,etal.IsolationandcomparativeanalysisofperoxidasesfromthefungusPhellinusigniarius[J].Biochemistry(Moscow),1995,(7)：13?18葛青.桑黃子實(shí)體多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及結(jié)構(gòu)修飾研究[D].中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)(博士)，2001，(03)：37?41EngShiOng.,SheaMeiLen.Pressurizedhotwaterextractionofberberine,baicaleinandglycyrrhizininmedicinalplants[J].AnalyticaChimicaActa.2003(482):81?89于長(zhǎng)青，王憲華，張麗萍等.麥胚黃酮物提取方法的研究[J].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，14(4)：62?64楊洋，余煉.柚皮黃酮類成分的分離工藝研究[J].食品科學(xué)，2001,(3)：41?43FralTemelli.Extractionoftriglyceridesandphosolipidsfromcanolawithsupercriticalcarbondioxideandethanol[J].JournalofFoodScience,1992,57(2):440?442廖亮.銀杏葉總黃酮提取方法研究[J].食品科學(xué)，1994,8：33?34白新鵬.功能性食品設(shè)計(jì)與評(píng)價(jià)[M].北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2009：265?279Boukhchina,Sebai,Cherif.Identificationofglycerophospholipidsinrapeseed,olive,almond,andsunfloweroilsbyLC—MSandLC—MS—MS[J].CanadianJournalofChemistry,2004,82:1210?1215安紅，宋偉明，張宏波.磷脂化學(xué)及應(yīng)用技術(shù)[M].北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2006：1?10李曉東.功能性大豆食品[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005，12：34?45SaoussemHarrabi,WahidHerchi,HabibKallel,etal.Liquidchromatographic-massspectrometricanalysisofglycerophospholipidsincornoil[J].FoodChemistry,2009,114:712?716.吳世芳?何首烏中磷脂化合物的提取、分離及分析方法[D].中國(guó)優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，2007，(6)：35?36曲永洵.大豆肽的特性及其應(yīng)用[J].中國(guó)油脂，2006，21(2)：3?5李升福.玉米蛋白水解的研究及其應(yīng)用[D].中國(guó)優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，2002，11：24?36Hoyle,Merritt.QualityoffishproteinHydro1ysatesfromHerring[J].JournalofFoodSci.,1994,59(1):76?79劉文輝.大豆分離蛋白酶法水解制備多肽及應(yīng)用的研究[D].中國(guó)優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，2003：15?23高林，何東平，陳濤等.花生肽的提取分離及純化的研究[J].中國(guó)油脂,2007,32(4)：23?26J.E.Kinsella.MilkProtein:Physicchemiealandfunctionlproperties[J].CRCCrit.Rev.FoodSci.Natr.,1984,21:187?192葛毅強(qiáng)，孫愛(ài)東.不同萃取條件對(duì)麥胚中天然維生素E的SFE-CO2提取的影響[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，26（5）：42?45蔣忠平.猴頭菌子實(shí)體寡糖的提取、分離及結(jié)構(gòu)研究[D].中國(guó)優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，2003：3?11KawagishiH,SimadaA,ShiraiR,etal.ErinacinesA,BandC,strongstimulatorsofnerveGrowthfactor（NEF）-synthesis,fromthemyceliaofHericiumerinaceum[J].TetrahedronLett,1994,35:1569?1572KawagishiH,ShimadaA,MoriH,etal.ErinacineD,astimulatorofNGF-synthesis,fromthemyceliaofhericiumerinaceum[Jl.HeterocyclCommun,1996,2:51?54HirokazuKawagishi,AyanoMasui,ShinjiTokuyam,etal.ErinacinesJandKfromthemyceliaofHericiumerinaceum[J].Tetrahedron,2006,62:8463?8466Hiromich