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結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)第1頁/共11頁結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)
(T-SPOT-TB)
感染二科第2頁/共11頁由來----γ干擾素釋放試驗(yàn)(IGRAs)在2001年前,美國僅批準(zhǔn)結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(TST)用于結(jié)核分支桿菌的檢測。在認(rèn)識(shí)到IFN-γ在調(diào)節(jié)對(duì)結(jié)核分支桿菌的細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中起重要作用,從而使得(interferongammareleaseassays)IGRAs用于檢測結(jié)核感染。IGRAs通過檢測代表結(jié)核分支桿菌的抗原刺激T淋巴細(xì)胞反應(yīng)后釋放IFN-γ的量來判斷是否存在結(jié)核桿菌感染。2001年—QFTQuantiFERON
-TB2005年—QFT-G2007年—QFT-GIT2008年—T-Spot-TB第3頁/共11頁T-SPOT-TB—定義以結(jié)核特異的混合抗原A和混合抗原B(分別為ESAT-6和CFP-10的部分多肽片斷)刺激結(jié)核桿菌感染者外周血單核細(xì)胞中存在結(jié)核特異的活化T淋巴細(xì)胞分泌γ干擾素,從而應(yīng)用ELISPOT方法檢測對(duì)結(jié)核桿菌反應(yīng)的效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量,對(duì)結(jié)核桿菌感染進(jìn)行輔助診斷。特異抗原ELISPOT活化的T細(xì)胞否存在感染第4頁/共11頁T-SPOT-TB—幾個(gè)概念ELISPOT(enzyme-linkedimmunospotassay,)是一種新型的免疫酶技術(shù),它是從單細(xì)胞水平檢測分泌抗體細(xì)胞或分泌細(xì)胞因子細(xì)胞。(簡單說:可以數(shù)出分泌特異因子的細(xì)胞的個(gè)數(shù))ESAT-6和CFP-10蛋白:存在結(jié)核分枝桿菌及少數(shù)致病非結(jié)核分枝桿菌中名為“RD1”的基因序列,編碼產(chǎn)生兩種蛋白。在卡介苗菌株和大部分環(huán)境中的分枝桿菌基因中則缺乏次序列。第5頁/共11頁T-SPOT-TB—示意陰性對(duì)照陽性對(duì)照A試驗(yàn)組B試驗(yàn)組第6頁/共11頁T-SPOT-TB—解釋非黃金標(biāo)準(zhǔn)定性檢測而不是定量檢測敏感性95.3%-98.8%特異性94.1%-100%薩斯分枝桿菌(Mycobacteriumkansasii)、海分枝桿菌(Mycobacteriummarinum)、斯氏分枝桿菌(Mycobacteriumszulgai)等少數(shù)分枝桿菌中也存在完整RD1區(qū),編碼ESAT6和CFP10,可造成檢測結(jié)果成假陽性。第7頁/共11頁T-SPOT-TB—應(yīng)用在活動(dòng)性結(jié)核病中的診斷意義
1.敏感性86-94%,特異性89-99%2.在肝移植術(shù)后、艾滋病、血液腫瘤等免疫抑制患者中,T-SPOT-TB陽性率略低于免疫正常組,但仍具有較高的敏感性,且優(yōu)于結(jié)核菌素試驗(yàn)。3.在肺外結(jié)核患者診斷中的,敏感性優(yōu)于結(jié)核菌素試驗(yàn)。4.對(duì)小于4歲兒童,與結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)比較敏感性無優(yōu)勢,美國CDC更推薦結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)。第8頁/共11頁T-SPOT-TB—應(yīng)用在結(jié)核性腦膜炎、結(jié)核性胸膜炎中的診斷意義1.敏感性優(yōu)于ADA、TB-DNA,約在62-75%,特異性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在結(jié)核病治療中的評(píng)價(jià)意義
1.其數(shù)值高低與嚴(yán)重程度無關(guān)。
2.效應(yīng)T細(xì)胞隨結(jié)核桿菌的清除而消失,其陰性及陽性結(jié)果可作為評(píng)估治療效果的手段之一。第9頁/共11頁T-SPOT-TB—應(yīng)用在潛伏性結(jié)核桿菌感染者的篩選中
1.敏感性優(yōu)于結(jié)核菌素試驗(yàn),且不受卡介苗接種影響。
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