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神奇的模式植物--擬南芥2023/4/231實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)?zāi)康?;?shí)驗(yàn)原理;實(shí)驗(yàn)材料和方法;實(shí)驗(yàn)步驟;實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論;實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)題。2023/4/232實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解模式植物擬南芥的形態(tài)以及種植;2、觀察模式植物擬南芥的生長發(fā)育過程;3、繪制模式植物擬南芥的生長發(fā)育曲線;4、通過直觀認(rèn)知擬南芥,加深對現(xiàn)代植物生理學(xué)理論知識(shí)理解;4、能夠回答擬南芥為什么會(huì)成為模式植物基本問題;2023/4/233實(shí)驗(yàn)原理2023/4/234擬南芥作為模式植物,在研究莖的負(fù)向重力性過程中的研究。實(shí)驗(yàn)原理中文學(xué)名擬南芥目白菜花目拉丁文學(xué)名Arabidopsisthaliana科十字花科界植物界屬鼠耳芥屬門被子植物門種擬南芥種綱雙子葉植物綱分布區(qū)域亞洲、中北美洲、非洲2023/4/235實(shí)驗(yàn)原理擬南芥的形態(tài)特征基生葉有柄呈蓮座狀,葉片倒卵形或匙形;莖生葉無柄,披針形或線形??偁罨ㄐ蝽斏ò?片,白色,匙形。長角果線形,長1~1.5厘米?;ㄆ?~5月。2023/4/236實(shí)驗(yàn)原理擬南芥的形態(tài)特征基生葉有柄呈蓮座狀,葉片倒卵形或匙形;莖生葉無柄,披針形或線形。總狀花序頂生,花瓣4片,白色,匙形。長角果線形,長1~1.5厘米?;ㄆ?~5月。2023/4/237實(shí)驗(yàn)原理擬南芥的形態(tài)特征基生葉有柄呈蓮座狀,葉片倒卵形或匙形;莖生葉無柄,披針形或線形??偁罨ㄐ蝽斏?,花瓣4片,白色,匙形。長角果線形,長1~1.5厘米?;ㄆ?~5月。2023/4/238實(shí)驗(yàn)原理擬南芥為什么會(huì)成為模式植物?擬南芥的優(yōu)點(diǎn)是植株?。?個(gè)茶杯可種植好幾棵)、每代時(shí)間短(從發(fā)芽到開花不超過6周)、結(jié)子多(每棵植物可產(chǎn)很多粒種子)、生活力強(qiáng)(用普通培養(yǎng)基就可作人工培養(yǎng))。擬南芥的基因組是目前已知植物基因組中最小的。每個(gè)單倍染色體組(n=5)的總長只有7000萬個(gè)堿基對,即只有小麥染色體組長的1/80,這就使克隆它的有關(guān)基因相對說來比較容易。其整個(gè)基因組已于2000年由國際擬南芥菜基因組合作聯(lián)盟聯(lián)合完成,也是第一個(gè)被順序分析的植物基因組。擬南芥是自花受粉植物,基因高度純合,用理化因素處理突變率很高,容易獲得各種代謝功能的缺陷型。例如用含殺草劑的培養(yǎng)基來篩選,一般獲得抗殺草劑的突變率是1/100000。由于有上述這些優(yōu)點(diǎn),所以擬南芥是進(jìn)行遺傳學(xué)研究的好材料,被科學(xué)家譽(yù)為“植物中的果蠅”。
2023/4/239實(shí)驗(yàn)材料和方法2023/4/2310實(shí)驗(yàn)材料:擬南芥種子;實(shí)驗(yàn)試劑:蛭石,黑土,珍珠巖;儀器設(shè)備:竹簽,花盆,直尺。實(shí)驗(yàn)步驟溫室和生長室中生長:1、SterilizationofArabidopsisseed:Seedisplacedinamicrofugetubeandincubatedforoneminutewith70%(v/v)ethanol.Theethanolisremovedandtheseedsthenincubatedfor15to30mininafreshly-madesolutionof30%(v/v)Cloroxbleach,and1%(w/v)TritonX-100(theTritonismostconvenientlyaddedfroma10%stocksolution).Atthispointseedsshouldbemovedtoasterilehoodandalltheremainingworkdoneundersterileconditions.TheCloroxsolutionisremovedwithapipet,andtheseedwashedatleast5timeswith1mlquantitiesofsterilewater,untilthesolutiondoesnotfoamwhenshakenvigorously.1、種子消毒:①保證所有的用具無菌;②擬南芥的種子放在70%的乙醇中1分鐘;③用新配制的30%次氯酸鈉,1%Triton
X-100漂洗15到30分鐘;④用1ml無菌水洗滌五次,直至沒有泡沫產(chǎn)生。2023/4/23112023/4/23122、播種和發(fā)芽:①將播有種子的容器移至低溫或相應(yīng)低溫條件下,在2~4℃下放置2~4d,從而于吸脹條件下破除種子休眠,這對新鮮收獲的擬南芥種子尤為必要。②擬南芥可在非無菌條件下,生長在土壤或人工配制的各種培養(yǎng)基中。作為栽植的容器,可根據(jù)各自條件置于花盆或格狀分離的多穴塑料盤中。常用的混合物有泥炭蘚、營養(yǎng)土、蛭石和珍珠巖等,例如珍珠巖∶蛭石∶泥炭蘚=1∶1∶1的混合物,表土、堆肥或腐殖質(zhì)土∶珍珠巖或蛭石=1∶1,1∶2或2∶1的混合物。如果用于營養(yǎng)研究則可以蛭石類惰性物質(zhì)作培養(yǎng)介質(zhì),施以配有營養(yǎng)物質(zhì)的水溶液。栽培擬南芥的介質(zhì)均要求有良好的排水性,因此一般混合砂子、蛭石等惰性介質(zhì),保持良好的排水,防止過濕引起真菌和昆蟲幼蟲滋生。種子發(fā)芽期間必須保持高濕度,故容器可用塑料膜復(fù)蓋,保持一周左右方可揭去。③光對擬南芥生長的影響涉及光強(qiáng)和光周期兩個(gè)方面。以光強(qiáng)度說,在生長室中一般最適光的光強(qiáng)度為120~150μmol/(㎡·s)(1μmol/(㎡·s)=5燭光=0.217W/m2=53.8lx),這可通過熒光燈,配以白熾光來達(dá)到。在夏天溫室中,60%蔭影有助于光強(qiáng)控制和溫度調(diào)節(jié),高光強(qiáng)或直接太陽光照射對較老植株可以忍受,而年幼植株避免強(qiáng)光。溫室和生長室的溫度應(yīng)予以控制,最適生長溫度為25℃左右,稍低的溫度也是允許的。在種子發(fā)芽后的頭幾周里,理想的供水是來自毛細(xì)管由下至上的滲水,只有當(dāng)土壤呈現(xiàn)干旱時(shí)適時(shí)灌溉。過量供水會(huì)引起土表藻類和真菌的生長。在擬南芥頭兩片真葉開始伸展之前必須避免干旱,當(dāng)真葉長出后,灌水頻率可相應(yīng)減少,如每周一或兩次,而至長角果充實(shí)階段必須保證水分供應(yīng),以利于種子形成。擬南芥是自交授粉的,為了保持?jǐn)M南芥品系的純化,必須防止溫室或生長室中各品系之間的雜交。實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論2023/4/23131、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:單位cm天數(shù)36912151821242730333639424548515455株高2
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