藥物的鑒別的學(xué)習(xí)材料第1頁(yè)/共49頁(yè)基本要求掌握：鑒別試驗(yàn)的目的、藥物性狀和物理常數(shù)的測(cè)定及其對(duì)藥物鑒別的作用，常用鑒別方法與選擇。熟悉:鑒別試驗(yàn)的影響因素與注意事項(xiàng)。了解：鑒別試驗(yàn)方法的驗(yàn)證。第2頁(yè)/共49頁(yè)序言定義：根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用物理、化學(xué)或生物學(xué)方法來判斷藥物的真?zhèn)?。目的：不是?duì)未知物進(jìn)行定性分析，而是證實(shí)貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所收載的藥物。意義：它是藥品質(zhì)量檢驗(yàn)工作中的首項(xiàng)任務(wù)，只有在藥物鑒別無誤的情況下，進(jìn)行藥物的雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等分析才有意義。第3頁(yè)/共49頁(yè)性質(zhì)：藥物鑒別試驗(yàn)的試驗(yàn)方法雖有一定的專屬性，但不足以確證其結(jié)構(gòu)，因此不能賴以鑒別未知物。化學(xué)藥物的結(jié)構(gòu)確證不同于藥物鑒別試驗(yàn)，其主要任務(wù)是確認(rèn)所制備的原料藥的結(jié)構(gòu)是否正確，適用于未知化合物的鑒別或者目標(biāo)對(duì)象的結(jié)構(gòu)確認(rèn)。第4頁(yè)/共49頁(yè)第一節(jié)鑒別試驗(yàn)的條件溶液的濃度溶液的溫度溶液的酸堿度試驗(yàn)時(shí)間干擾成分第5頁(yè)/共49頁(yè)（一）溶液的濃度

溶液的濃度主要指被鑒別物質(zhì)的濃度，其大小影響結(jié)果的判斷。（如化學(xué)法中要觀察沉淀、顏色；UV法中λmax,A,E1%1cm)（二）溶液的溫度

溫度過高可使產(chǎn)物分解，導(dǎo)致顏色變淺，甚至觀察不到結(jié)果。第6頁(yè)/共49頁(yè)

（三）溶液的酸堿度

使反應(yīng)物處于活化狀態(tài)、反應(yīng)產(chǎn)物處于穩(wěn)定和以觀察狀態(tài)。

（四）試驗(yàn)時(shí)間

有機(jī)化合物的化學(xué)反應(yīng)較慢，需要一定的反應(yīng)時(shí)間和條件。

（五）干擾成分的存在

藥物制劑的鑒別，其它成分則會(huì)干擾檢查結(jié)果的現(xiàn)象觀察。第7頁(yè)/共49頁(yè)第二節(jié)鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目

項(xiàng)目鑒別項(xiàng)下規(guī)定的試驗(yàn)方法僅用于鑒別藥物的真?zhèn)?，?duì)于原料藥，還應(yīng)結(jié)合性狀項(xiàng)下的外觀和物理常數(shù)進(jìn)行確認(rèn)。性狀：反映了藥物特有的物理性質(zhì)，一般包括外觀、溶解度和物理常數(shù)等。(一)外觀：指藥品的外表感觀和色澤，包括藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。如二巰基丁二鈉的描述為“本品為白色至微黃色的粉末；有類似蒜的特臭”。第8頁(yè)/共49頁(yè)例子：CHP2010中鹽酸異丙嗪的性狀描述：

本品為白色或乳白色結(jié)晶性粉末；有微臭，味（色澤）（聚集狀態(tài)）（臭）極苦；有引濕性；遇光漸變色；水溶液顯酸性反應(yīng)。（味）鹽酸異丙嗪片的性狀描述：本品為糖衣片，除去包衣后顯白色。第二節(jié)鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目第9頁(yè)/共49頁(yè)(二)溶解度：一定程度上反映了藥品的純度。藥品在不同溶劑中的溶解性能用“極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶”來描述。

第二節(jié)鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目極易溶：1份溶質(zhì)在不到1份溶劑中溶解易溶：1份溶質(zhì)在1份~不到10份溶劑中溶解溶解:1份溶質(zhì)在10份~不到30份溶劑中溶解略溶:1份溶質(zhì)在30份~不到100份溶劑中溶解微溶:…..在100份~不到1000份溶劑中溶解極微溶解:在1000份~不到10000份溶劑中溶解幾乎不溶或不溶：…10000份溶劑中不完全溶第10頁(yè)/共49頁(yè)(三)物理常數(shù)：

用于藥品鑒別，反映其純雜程度。藥典收載的物理常數(shù)包括：相對(duì)密度、餾程、熔點(diǎn)、凝點(diǎn)、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。

其測(cè)定結(jié)果不僅對(duì)藥品具有鑒別意義，也可反映藥品的純度，是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的主要指標(biāo)之一。第11頁(yè)/共49頁(yè)1、熔點(diǎn)例子：雌二醇熔點(diǎn)：本品的熔點(diǎn)為175～180℃；格列本脲的熔點(diǎn)：本品的熔點(diǎn)為170～174℃。CHP2010收載有三種測(cè)定方法第二節(jié)鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目熔點(diǎn)固體熔化成液體的溫度

熔融同時(shí)分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度第12頁(yè)/共49頁(yè)第13頁(yè)/共49頁(yè)2、比旋度

在一定波長(zhǎng)與溫度下，偏振光透過長(zhǎng)1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時(shí)測(cè)得的旋光度。作用：反映手性藥物特性及其純度的主要指標(biāo)，用以區(qū)別藥品、檢查純度或測(cè)定制劑的含量。第二節(jié)鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目維生素C的比旋度測(cè)定：20.5°~21.5°例子手性第14頁(yè)/共49頁(yè)第15頁(yè)/共49頁(yè)第16頁(yè)/共49頁(yè)鹽酸氨溴索吸光系數(shù)測(cè)定其為233~247不僅可以用來考察原料藥的質(zhì)量，還是UV測(cè)定含量的依據(jù)第17頁(yè)/共49頁(yè)第二節(jié)鑒別方法化學(xué)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法沉淀生成反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法

氣體生成反應(yīng)鑒別法測(cè)定生成物的熔點(diǎn)使試劑褪色的鑒別法Vitali氯化物硫酸奎寧維C胺(銨)應(yīng)用少要求：專屬性強(qiáng)、再現(xiàn)性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便快速第18頁(yè)/共49頁(yè)

三氯化鐵呈色反應(yīng)(Ar-OH,Ar-OCOCH3)

異羥戊酸鐵反應(yīng)(Ar-COOH;-COOR)

1.顯色反應(yīng)鑒別法

茚三酮呈色反應(yīng)(脂肪氨基,α－氨基酸）

重氮化-偶合呈色反應(yīng)(Ar-NH2;-NHCOR)氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)

與重金屬離子的沉淀反應(yīng)2.沉淀生成鑒別法

與硫氰化鉻銨的沉淀反應(yīng)

其它沉淀反應(yīng)(如生物堿沉淀劑）

第19頁(yè)/共49頁(yè)

藥物本身在可見光下發(fā)射熒光藥物溶液加硫酸后在可見光下發(fā)射熒光

3.熒光反應(yīng)鑒別法

藥物與溴反應(yīng)后，在可見光下發(fā)出熒光藥物與間苯二酚溴反應(yīng)后，發(fā)射出熒光藥物其它反應(yīng)后，發(fā)射出熒光

制備衍生物：藥物＋試劑具有熒光的衍生物

維生素C的二氯靛酚反應(yīng)

5.使試劑褪色的鑒別法氧烯洛爾的高錳酸鉀反應(yīng)

司可巴比妥鈉的碘試液反應(yīng)

第20頁(yè)/共49頁(yè)

1.胺類、酰脲類、酰胺類藥物經(jīng)強(qiáng)堿處理生成氨氣(NH3；NH(C2H5)2)2.含硫藥物經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，生成4.氣體生成反應(yīng)鑒別法硫化氫氣體(H2S+Pb2+PbS+2H+)3.含碘有機(jī)藥物，加熱。生成紫色碘蒸氣4.含醋酸酯和乙酰胺類藥物酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯6.制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)法

藥物＋試劑新化合物有一定mp;藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。操作繁瑣費(fèi)時(shí)間，應(yīng)用較少。第21頁(yè)/共49頁(yè)光譜鑒別法UV鑒別法IR鑒別法NIR鑒別法AAS鑒別法NMR鑒別法MS鑒別法XRD鑒別法紫外近紅外紅外原子吸收核磁共振質(zhì)譜法X射線衍射光譜鑒別法第22頁(yè)/共49頁(yè)色譜鑒別法TLC鑒別法HPLC鑒別法GC鑒別法色譜鑒別法第23頁(yè)/共49頁(yè)顯微鑒別法第24頁(yè)/共49頁(yè)生物學(xué)鑒別法

利用藥效學(xué)和分子生物學(xué)等有關(guān)技術(shù)來鑒定藥物品質(zhì)的一種方法,主要用于抗生素、生物藥物以及中藥的鑒別,通常分為生物效應(yīng)鑒別法和基因鑒別法兩大類。

按對(duì)象目的不同可分為：免疫鑒別法、細(xì)胞生物學(xué)鑒別法、生物效價(jià)鑒別法、純指標(biāo)鑒別法、DNA遺傳標(biāo)記法，mRNA差異顯示鑒別法。第25頁(yè)/共49頁(yè)指紋圖譜與特征圖譜鑒別法第26頁(yè)/共49頁(yè)二、光譜鑒別法1.紫外光譜鑒別法(Ultravioletspectrophotometry)美法侖測(cè)定λmax，或同時(shí)測(cè)定λmin；測(cè)定一定濃度的供試液在λmax處的A規(guī)定λ和E規(guī)定λ和Aλ1/Aλ2經(jīng)化學(xué)處理后，測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性。λ1λ2第27頁(yè)/共49頁(yè)2.紅外光譜鑒別法(Infraredspectrophotometry)

用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，特別適合不易區(qū)別的同類藥物，專屬性強(qiáng)，應(yīng)用廣泛。Ch.P、JP、BP采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法USP、BP采用對(duì)照品法試樣制備方法：

壓片法、糊法、膜法、溶液法第28頁(yè)/共49頁(yè)

紅外光區(qū)的波長(zhǎng)范圍約為0.75-1000μm，又可分為近紅外光區(qū)(0.75-2.5μm)、中紅外光區(qū)(2.5-50μm)和遠(yuǎn)紅外光區(qū)(50-1000μm)，相應(yīng)的有近紅外光譜、中紅外光譜和遠(yuǎn)紅外光譜。其中以2.5-25μm

(波數(shù)4000-400cm-1)的中紅外光譜應(yīng)用最廣，通常所說的紅外光譜即指這一波段的中紅外光譜?；衔锏募t外光譜用紅外光譜圖來描述。第29頁(yè)/共49頁(yè)特征區(qū)指紋區(qū)第30頁(yè)/共49頁(yè)4.原子吸收法(AtomicAbsorption)

利用原子蒸氣可以吸收由該元素作為陰極的空心陰極燈發(fā)出的特征譜線的特性，根據(jù)供試溶液在特征譜線處的最大吸收和特征譜線的強(qiáng)度減弱程度進(jìn)行定性、定量分析。5.X射線粉末衍射法晶體對(duì)X射線會(huì)產(chǎn)生衍射現(xiàn)象,不同的物質(zhì)有其特定的衍射圖。第31頁(yè)/共49頁(yè)三、色譜鑒別法

利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（比移值或保留時(shí)間）進(jìn)行的鑒別試驗(yàn)。采用與對(duì)照品在相同條件下進(jìn)行色譜分離，并進(jìn)行比較，根據(jù)兩者保留行為和檢測(cè)結(jié)果是否一致來驗(yàn)證藥品的真?zhèn)巍?.薄層色譜鑒別法

(Thin-LayerChromatography)第32頁(yè)/共49頁(yè)第33頁(yè)/共49頁(yè)2.GC和HPLC鑒別法三、色譜鑒別法第34頁(yè)/共49頁(yè)四、質(zhì)譜鑒別法(MassSpectrometry)第35頁(yè)/共49頁(yè)一、般鑒別試驗(yàn)（GeneralIdentificationTest）第三節(jié)一般鑒別試驗(yàn)只能證實(shí)是某一類藥物，而不能證實(shí)是哪一種藥物！只適用于純品，混合藥物或有干擾時(shí)不適用！

依據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或物化性質(zhì)的特征，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)?。?6頁(yè)/共49頁(yè)第三節(jié)一般鑒別試驗(yàn)中國(guó)藥典附錄收載的一般鑒別項(xiàng)目

無機(jī)金屬鹽類、無機(jī)酸鹽、有機(jī)酸鹽、有機(jī)氟化物類、芳香第一胺類、丙二酰脲類、托烷生物堿類。第37頁(yè)/共49頁(yè)一、無機(jī)金屬鹽1.焰色反應(yīng)

焰色反應(yīng)是某些金屬或它們的揮發(fā)性化合物在無色火焰中灼燒時(shí)使火焰呈現(xiàn)特征的顏色的反應(yīng)。有些金屬或它們的化合物在灼燒時(shí)能使火焰呈特殊顏色。這是因?yàn)檫@些金屬元素的原子在接受火焰提供的能量時(shí)，其外層電子將會(huì)被激發(fā)到能量較高的激發(fā)態(tài)。處于激發(fā)態(tài)的外層電子不穩(wěn)定，又要躍遷到能量較低的基態(tài)。不同元素原子的外層電子具有著不同能量的基態(tài)和激發(fā)態(tài)。在這個(gè)過程中就會(huì)產(chǎn)生不同的波長(zhǎng)的電磁波，如果這種電磁波的波長(zhǎng)是在可見光波長(zhǎng)范圍內(nèi)，就會(huì)在火焰中觀察到這種元素的特征顏色。利用元素的這一性質(zhì)就可以檢驗(yàn)一些金屬或金屬化合物的存在。這就是物質(zhì)檢驗(yàn)中的焰色反應(yīng)。

第三節(jié)一般鑒別試驗(yàn)第38頁(yè)/共49頁(yè)常見的焰色反應(yīng)：鈉-黃、鉀-紫、鈣-磚紅、鋇-黃綠等。2.另外銨鹽的檢測(cè)第三節(jié)一般鑒別試驗(yàn)第39頁(yè)/共49頁(yè)3.無機(jī)酸根的鑒別氯化物:

硝酸銀鑒定法以及二氧化錳氧化法。硫酸鹽:

氯化鋇鑒定法、醋酸鉛鑒定法以及鹽酸排除法。硝酸鹽:

硫酸及硫酸亞鐵顯色法、與銅反應(yīng)生成紅棕色氣體法、高錳酸鉀排除法。磷酸鹽:硝酸銀鑒定法、氯化銨鎂沉淀法及鉬酸銨沉淀法。第40頁(yè)/共49頁(yè)二、有機(jī)酸鹽①FeCl